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富氢水对糖尿病视网膜病变大鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3通路及视网膜血管通透性的影响 被引量：3
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作者 冯梅 江霞 +1 位作者 王艳丽 王奇峰 《安徽医药》 CAS 2022年第7期1367-1373,I0003,共8页
目的 探究富氢水对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜血管通透性及硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路的影响。方法 2020年6—9月,SD大鼠采用随机数字表法选取15只为空白组,其余大鼠尾静脉注射链脲... 目的 探究富氢水对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜血管通透性及硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路的影响。方法 2020年6—9月,SD大鼠采用随机数字表法选取15只为空白组,其余大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ,60 mg/kg)和高脂饲料喂养构建DR模型,造模成功的大鼠采用随机数字表法分为模型组、富氢水低、高剂量组(5、10 mL/kg),每组15只。连续给药28 d后,记录大鼠体质量,检测空腹血糖(FBG)水平;眼底照相和荧光素血管造影(FFA)观察大鼠右眼新生血管和荧光素渗漏现象;光学相干断层扫描(OCT)检测视网膜厚度;伊文思蓝-白蛋白复合物渗漏分析视网膜血管通透性;HE染色观察视网膜病理变化;免疫荧光染色观察新生血管形成情况;TUNEL染色检测视网膜细胞凋亡;酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒测量视网膜匀浆中血管生成素-1(Ang-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)水平;WB法检测视网膜TXNIP/NLRP3通路和凋亡相关蛋白的表达。结果 与空白组相比,模型组大鼠FBG[(26.49±2.18)mmol/L比(5.76±1.09)mmol/L]、血-视网膜屏障(BRB)通透性[(32.51±2.05)μg/g比(11.24±1.76)μg/g]、视网膜细胞凋亡[(23.31±2.14)%比(0.07±0.01)%]、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、TXNIP[(0.85±0.09)比(0.40±0.05)]、NLRP3[(0.93±0.10)比(0.48±0.07)]、IL-1β[(0.74±0.05)比(0.41±0.04)]、胱天蛋白酶-1(caspase-1)[(0.78±0.07)比(0.24±0.04)]表达、Bax/Bcl-2比值、视网膜匀浆中Ang-1、VEGF、IL-1β、IL-6水平显著增加(P<0.05),体质量、视网膜厚度[(148.31±12.76)μm比(223.57±17.23)μm]显著降低(P<0.05),视网膜有较多新生血管和血管曲折,血管渗漏严重,视网膜细胞明显水肿,有大量炎性渗出,神经节细胞层(GCL)细胞数量减少;与模型组相比,富氢水低、高剂量组大鼠FBG[(20.85±3.45)mmol/L、(14.27±2.42)mmol/L比(26.49±2.18)mmol/L]、BRB通透性[(24.67±1.85)μg/g、(17.48±1.63)μg/g比(32.51±2.05)μg/g]、视网膜细胞凋亡[(14.65±1.36)%、(9.85±1.22)%比(23.31±2.14)%]、Bax、Bcl-2、TXNIP[(0.64±0.09)、(0.52±0.08)比(0.85±0.09)]、NLRP3[(0.72±0.09)、(0.61±0.08)比(0.93±0.10)]、IL-1β[(0.62±0.06)、(0.53±0.05)比(0.74±0.05)]、caspase-1[(0.57±0.06)、(0.41±0.05)比(0.78±0.07)]表达、Bax/Bcl-2比值、视网膜匀浆中Ang-1、VEGF、IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05),体质量、视网膜厚度[(173.62±14.46)μm、(196.54±15.75)μm比(148.31±12.76)μm]明显增加(P<0.05),视网膜水肿情况减轻,GCL细胞数量明显增加,损伤得到改善。结论 富氢水可抑制新生血管形成,降低DR大鼠视网膜血管通透性,减轻视网膜神经元损伤;其作用机制可能与抑制TXNIP/NLRP3通路的激活有关。 展开更多
关键词 氢 糖尿病视网膜病变 富氢水 血-视网膜屏障 硫氧还蛋白相互作用蛋白/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 大鼠 Sprague-Dawley
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玻璃体腔注射雷珠单抗联合光动力疗法治疗湿性年龄相关性黄斑变性的疗效及对房水中VEGI、IL-1β水平的影响 被引量：7
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作者 王艳丽 徐志蓉 +2 位作者 王青枝 吴小军 方廷兵 《海南医学》 CAS 2021年第16期2097-2100,共4页
目的研究玻璃体腔注射雷珠单抗(IVR)联合光动力疗法(PDT)治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)的疗效及对房水中血管内皮生长抑制因子(VEGI)、白介素1β(IL-1β)水平的影响。方法选取华中科技大学协和深圳医院眼科2018年6月至2020年6月期... 目的研究玻璃体腔注射雷珠单抗(IVR)联合光动力疗法(PDT)治疗湿性年龄相关性黄斑变性(wAMD)的疗效及对房水中血管内皮生长抑制因子(VEGI)、白介素1β(IL-1β)水平的影响。方法选取华中科技大学协和深圳医院眼科2018年6月至2020年6月期间接诊的54例(72眼)wAMD患者作为研究对象,按照随机数表法分为研究组27例(34眼)和对照组27例(38眼)。对照组患者采用单纯玻璃体腔注射雷珠单抗治疗,研究组患者采用玻璃体腔注射雷珠单抗联合PDT治疗。治疗前和治疗3个月后,比较两组患者的眼压、最佳矫正视力、中心凹视网膜厚度(CRT);比较两组患者治疗前后房水中的VEGI、房水中IL-1β水平及治疗后不良反应发生情况。结果治疗前,两组患者的眼压、最佳矫正视力、CRT比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者的最佳矫正视力均明显提升,且研究组患者最佳矫正视力为0.57±0.23,明显高于对照组的0.45±0.18,两组患者CRT指标均明显降低,且研究组患者的CRT为(266.4±17.4)μm,明显低于对照组的(304.6±18.6)μm,差异均有统计学意义(P<0.05),而两组患者治疗前后的眼压无明显变化,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗前,两组患者房水中的VEGI、IL-1β水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者房水中的VEGI水平明显提升,且研究组患者的VEGI水平为(78.6±5.4)pg/mL,明显高于对照组的(63.3±4.2)pg/mL,两组患者房水中的IL-1β水平明显下降,且研究组患者的IL-1β水平为(23.4±1.6)pg/mL,明显低于对照组的(25.7±1.8)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患者不良反应总发生率为7.41%,明显低于对照组的29.63%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃体腔注射雷珠单抗联合PDT治疗wAMD疗效显著,其可有效提高患者的最佳矫正视力和降低中心凹视网膜厚度,降低不良反应发生率,且VEGI、IL-1β参与了wAMD的发生与发展,对指导wAMD的治疗具有临床应用价值。 展开更多
关键词 湿性年龄相关性黄斑变性 玻璃体腔注射 雷珠单抗 光动力疗法 血管内皮生长抑制因子 白介素1Β
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MiR-29a靶向E2F7调控横纹肌肉瘤细胞增殖
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作者 王青枝 徐志蓉 +2 位作者 吴小军 王艳丽 张经 《国际免疫学杂志》 CAS 2023年第5期493-498,共6页
目的探讨miR-29a调控横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)细胞A-204增殖的作用及分子机制。方法人RMS细胞系A-204购自中国医学科学院细胞库。依据转染的DNA将细胞分为对照组、miR-29a组、E2F7组和miR-29a+E2F7组。采用CCK-8实验检测RMS细... 目的探讨miR-29a调控横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma,RMS)细胞A-204增殖的作用及分子机制。方法人RMS细胞系A-204购自中国医学科学院细胞库。依据转染的DNA将细胞分为对照组、miR-29a组、E2F7组和miR-29a+E2F7组。采用CCK-8实验检测RMS细胞系A-204细胞的增殖活性,生物信息学方法预测miR-29a的潜在靶点,通过荧光素酶报告基因实验验证其靶向作用,反转录实时荧光定量PCR(reverse transcription-real time quantitative PCR,RT-qPCR)实验及蛋白质免疫印迹实验检测靶点分子E2F7的表达,流式细胞术检测细胞周期,细胞体外克隆形成实验检测细胞生长活性。结果在RMS细胞系A-204细胞中,与对照组相比,miR-29a组的A-204细胞在转染后的48 h和72 h细胞增殖活性显著下降,差异具有统计学意义[(1.97±0.15)比(1.69±0.11)、(4.69±0.32)比(2.73±0.28),t=3.70、7.98,P值均<0.05)]。荧光素酶报告基因实验检测结果表明,与对照组相比,miR-29a组的E2F7荧光素酶活性显著下降,差异具有统计学意义[(44.90±5.62)比(11.67±4.55),t=7.96,P<0.05]。RT-qPCR及Western blot检测结果显示,与对照组相比,miR-29a组E2F7 mRNA及蛋白表达水平显著下调,差异具有统计学意义[(0.95±0.04)比(0.59±0.07),(1.04±0.06)比(0.28±0.02),t=7.73、16.89,P值均<0.05];流式细胞染色结果显示,与对照组相比,E2F7组细胞G1期细胞比例显著下降,G2/M期比例显著升高,差异具有统计学意义[%:(82.60±2.75)比(70.83±1.99)、(18.54±0.73)比(12.66±0.37),t=6.00、12.44,P值均<0.05];细胞克隆形成实验结果表明,与对照组相比,E2F7组细胞克隆数显著下降,差异具有统计学意义[个:(59.70±3.90)比(68.80±4.30),t=3.01,P<0.05]。与miR-29a组相比,miR-29a+E2F7组A-204克隆形成数明显增加,G1期细胞比例显著升高,G2/M期细胞比例显著下降,组间差异具有统计学意义[(32.70±4.20)比(54.70±6.20),(79.59±1.58)%比(90.12±2.34)%、(12.34±0.52)%比(5.59±0.28)%,t=5.09、6.46、19.80,P值均<0.05]。结论 mi R-29a可以通过下调E2F7的表达阻断RMS细胞有丝分裂,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 miR-29a 横纹肌肉瘤 增殖 E2F7
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