日本血吸虫脂肪酸结合蛋白DNA疫苗诱导小鼠保护性免疫力的研究 被引量：13

1

作者 朱晓华 石佑恩 +2 位作者 胡萍 宁长修 朱红刚 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2005年第1期4-8,共5页

目的构建日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14FABP)重组质粒,并观察其在小鼠体内诱导的抗日本血吸虫感染保护作用。方法RT-PCR特异性扩增Sj14FABP基因,将其克隆入真核表达载体pVIVO2,通过PCR、双酶切及测序鉴定。获得的重组质粒pVIVO2-Sj14F... 目的构建日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14FABP)重组质粒,并观察其在小鼠体内诱导的抗日本血吸虫感染保护作用。方法RT-PCR特异性扩增Sj14FABP基因,将其克隆入真核表达载体pVIVO2,通过PCR、双酶切及测序鉴定。获得的重组质粒pVIVO2-Sj14FABP转染HepG2细胞,间接免疫荧光(IFA)检测蛋白表达;并免疫BALB/c小鼠,30d后攻击感染,感染后45天剖杀,计数检获成虫数和肝脏虫卵数。结果RT-PCR扩增出大小为440bp的Sj14FABP片段,重组质粒经PCR和双酶切后均获得目的片段,转染细胞IFA结果显示有较强荧光。重组质粒免疫小鼠后分别获得24.1%减虫率和27.2%减卵率。结论成功构建和表达重组质粒pVIVO2-Sj14FABP,该核酸疫苗能够诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力。 展开更多

关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 核酸疫苗 真核表达 免疫保护性

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癌细胞裂解物修饰的DC疫苗体外诱导T细胞特异性抗胰癌免疫 被引量：4

2

作者 唐朝晖 邹声泉 +2 位作者 邱文洪 杨想平 裘法祖 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2003年第4期283-286,共4页

目的　观察经胰癌细胞裂解物修饰的树突状细胞 (DC )疫苗 ,在体外诱导抗胰癌的特异性T细胞免疫应答的效果。方法　从胰腺癌患者外周血中分化、增殖出DC ,经胰癌细胞裂解物修饰 ,并与T细胞体外共培养 (分为致敏DC组、未致敏DC组、肿瘤裂... 目的　观察经胰癌细胞裂解物修饰的树突状细胞 (DC )疫苗 ,在体外诱导抗胰癌的特异性T细胞免疫应答的效果。方法　从胰腺癌患者外周血中分化、增殖出DC ,经胰癌细胞裂解物修饰 ,并与T细胞体外共培养 (分为致敏DC组、未致敏DC组、肿瘤裂解物组、对照组 ) ,检测了各组上清液中细胞因子IL 12与IFN γ的浓度和T细胞的反应性增殖 ,并评估激活的T细胞对胰腺癌肿瘤细胞的特异性细胞毒作用。结果　致敏DC组中IL 12与IFN γ的浓度 [(1161± 2 39) pg/ml和 (10 44± 312pg/ml) ]与未致敏DC组及肿瘤裂解物组相比差异有极显著性 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;在致敏DC组中T细胞有明显的增殖 ;激活的T细胞对胰腺癌细胞有高效、特异的细胞毒作用。结论　癌细胞裂解物致敏的DC可高效的诱发机体T细胞 (Th1和CTL ) 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 免疫学 树突细胞疫苗 T淋巴细胞免疫应答 癌细胞裂解物 细胞因子 IL-12 IFN-Γ 肿瘤细胞

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甲胎蛋白DNA疫苗的构建及诱导小鼠抗肿瘤免疫的实验研究 被引量：2

3

作者 田耕 易继林 熊平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第15期1591-1594,共4页

目的克隆小鼠甲胎蛋白(murineα-fetoprote in,mAFP)基因,构建mAFP DNA疫苗并检测其诱导mAFP特异性CTL反应及抗肿瘤免疫的能力。方法利用RT-PCR从Hepa 1-6细胞总RNA中克隆出mAFP基因,亚克隆于pcD-NA3.1中构建DNA疫苗pmAFP,酶切、测序和... 目的克隆小鼠甲胎蛋白(murineα-fetoprote in,mAFP)基因,构建mAFP DNA疫苗并检测其诱导mAFP特异性CTL反应及抗肿瘤免疫的能力。方法利用RT-PCR从Hepa 1-6细胞总RNA中克隆出mAFP基因,亚克隆于pcD-NA3.1中构建DNA疫苗pmAFP,酶切、测序和表达鉴定;pmAFP稳定转染EL-4细胞建立EL-4(mAFP)细胞系;pmAFP免疫小鼠,接种EL-4(mAFP)细胞,观察肿瘤生长情况;E lispot法检测免疫后小鼠脾脏细胞中产生IFN-γ的细胞频数;另外,对免疫的小鼠采血进行肝、肾功能检测。结果RT-PCR成功克隆出小鼠AFP基因;酶切、测序和表达鉴定证实DNA疫苗pmAFP构建成功;RT-PCR证实EL-4(mAFP)细胞中有mAFP mRNA的表达;pmAFP免疫组小鼠的肿瘤体积(1 042.42±123.71)mm3明显小于pcDNA3.1组(P<0.01)和PBS组(P<0.01);pmAFP免疫小鼠的脾脏细胞产生IFN-γ的细胞频数显著高于pcDNA3.1组(P<0.01)和PBS组(P<0.01)。各组肝、肾功能无显著差异。结论mAFP DNA疫苗构建成功,此疫苗能诱导AFP特异性的CTL增殖并诱导小鼠产生明显的抗肿瘤免疫力,对小鼠肝、肾功能不产生影响。 展开更多

关键词 疫苗 脱氧核糖核酸 甲胎蛋白 小鼠 免疫治疗

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严重创伤脾移植患者细胞免疫功能的初步研究 被引量：2

4

作者 刘开俊 沈关心 邵静芳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期321-322,共2页

关键词 脾移植 细胞免疫功能 手术后

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日本血吸虫混合DNA疫苗pBK-CMV-Sj26/Sj32诱导小鼠的免疫应答 被引量：1

5

作者 李柳哲 石佑恩 +1 位作者 江侃 宁长修 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第1期36-38,共3页

目的　观察含日本血吸虫候选疫苗分子谷胱甘肽S -转移酶 (Sj2 6 )和天冬酰胺肽链酶 (Sj32 )的真核载体 pBK-CMV -Sj2 6 /Sj32诱导小鼠的免疫应答情况。 方法　将质粒按 5 0 μg/只在 0w ,3w ,5w免疫小鼠股四头肌 ,第一次免疫后取小鼠脾... 目的　观察含日本血吸虫候选疫苗分子谷胱甘肽S -转移酶 (Sj2 6 )和天冬酰胺肽链酶 (Sj32 )的真核载体 pBK-CMV -Sj2 6 /Sj32诱导小鼠的免疫应答情况。 方法　将质粒按 5 0 μg/只在 0w ,3w ,5w免疫小鼠股四头肌 ,第一次免疫后取小鼠脾细胞作T淋巴细胞转化实验 ;在 0w、3w和 6w经小鼠尾静脉取血 ,ELISA检测血清中抗体效价及阳性反应率。结果　淋巴细胞转化实验示血吸虫成虫抗原能特异性刺激免疫鼠脾细胞 ;第一次免疫后特异性抗体效价开始升高。抗体最高效价为 1∶2 0 ,3次免疫后有 91.7%小鼠血清呈阳性反应。结论　真核载体 pBK -CMV -Sj2 6 展开更多

关键词 日本血吸虫 Sj26/Sj32 混合DNA疫苗 免疫应答

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跨膜型SCF与分泌型SCF对肥大细胞生物学功能影响的研究 被引量：3

6

作者 郑浩 李卓娅 +4 位作者 龚非力 姜晓丹 冯玮 徐勇 熊平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期404-407,共4页

目的 :比较两型SCF对肥大细胞增殖 ,分泌组胺及产生细胞因子等功能的影响 ,探讨二型SCF在对肥大细胞生物学功能影响的异同。方法 :用MTT法 ,荧光法和原位杂交法分别检测二型SCF对肥大细胞的增殖作用 ,组胺分泌及TNF αmR NA的表达。结... 目的 :比较两型SCF对肥大细胞增殖 ,分泌组胺及产生细胞因子等功能的影响 ,探讨二型SCF在对肥大细胞生物学功能影响的异同。方法 :用MTT法 ,荧光法和原位杂交法分别检测二型SCF对肥大细胞的增殖作用 ,组胺分泌及TNF αmR NA的表达。结果 :分泌型SCF可明显促进肥大细胞增殖 ,组胺分泌及TNF αmRNA的表达 ;而跨膜型SCF则仅对组胺分泌有较弱的促进作用 ,对肥大细胞的其他两项功能无影响。结论 展开更多

关键词 肥大细胞 干细胞因子 增殖 组胺 TNF-Α MRNA

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凋亡相关蛋白的表达及Caspase-3活性改变与人卵巢癌细胞顺铂耐药的关系 被引量：10

7

作者 杨晓葵 郑芳 +5 位作者 陈建华 高庆蕾 卢运萍 王世宣 王常玉 马丁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1288-1291,共4页

背景与目的:以顺铂为基础的化疗是卵巢癌治疗的重要组成部分,对顺铂的耐药是卵巢癌治疗失败的原因之一。本研究探讨人卵巢癌顺铂耐药细胞株中凋亡相关蛋白表达及caspase-3活性与人卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法:采用Westernblot法分... 背景与目的:以顺铂为基础的化疗是卵巢癌治疗的重要组成部分,对顺铂的耐药是卵巢癌治疗失败的原因之一。本研究探讨人卵巢癌顺铂耐药细胞株中凋亡相关蛋白表达及caspase-3活性与人卵巢癌细胞顺铂耐药的关系。方法:采用Westernblot法分析人卵巢癌顺铂敏感细胞株COC1和顺铂耐药株COC1/DDP中凋亡相关蛋白bcl-2、bcl-xL、bax、bcl-xS的表达,caspase-3活性和其底物多聚ADP核糖聚合酶(PARP)的变化,并应用流式细胞仪检查不同浓度顺铂作用COC1和COC1/DDP细胞后的细胞凋亡率。结果:在COC1/DDP细胞中,bcl-2和bcl-xL的表达明显高于COC1细胞,bax的表达无明显改变,bcl-xS在COC1和COC1/DDP细胞中均无表达。用顺铂处理后,COC1/DDP细胞中caspase-3活性、PARP裂解片段和凋亡率较COC1细胞均明显降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论:人卵巢癌细胞对顺铂产生耐药可能与肿瘤细胞内凋亡抑制蛋白过度表达、caspase-3活性下降有关,而与凋亡诱导蛋白的表达无关。 展开更多

关键词 卵巢癌 凋亡相关蛋白 半胱天冬氨酸蛋白酶-3 顺铂 耐药性 化疗

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鸡冠花黄酮类对成骨细胞增殖和TGFβ_1的作用 被引量：8

8

作者 李万里 田玉慧 +2 位作者 沈关心 杨瑞 杨献军 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1059-1060,共2页

目的　探讨鸡冠花黄酮类化合物对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和转化生长因子 - β(TGFβ1)表达的影响作用 ,为临床骨质疏松症的预防和治疗提供参考。方法　提取新生大鼠颅骨成骨细胞制作体外培养模型 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测... 目的　探讨鸡冠花黄酮类化合物对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和转化生长因子 - β(TGFβ1)表达的影响作用 ,为临床骨质疏松症的预防和治疗提供参考。方法　提取新生大鼠颅骨成骨细胞制作体外培养模型 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定鸡冠花黄酮类化合物对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替吡啉测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,SP免疫组化法研究鸡冠花黄酮类化合物对成骨细胞TGFβ1表达的影响。结果　鸡冠花黄酮类化合物可以促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖 ,并显著性促进成骨细胞分化。对第 3代成骨细胞TGFβ1表达进行图像分析 ,培养 3d ,鸡冠花黄酮类化合物剂量在 0 5以上组TGFβ1表达阳性 ,培养 5d ,所有实验TGFβ1均表达阳性促使成骨细跑合成TGFβ1的免疫组化阳性表达。结论　鸡冠花黄酮类化合物可以提高成骨细胞的增殖和分化 ,并有促进分泌TGFβ1的功能 ,对于预防骨质疏松症的发生有重要的参考价值。 展开更多

关键词 鸡冠花黄酮类化合物 成骨细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶 TGFβ1的免疫组化

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鸡冠花黄酮类对成骨细胞矿化和IGF-1的作用 被引量：7

9

作者 李万里 田玉慧 沈关心 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1392-1393,共2页

目的　通过研究鸡冠花黄酮类化合物对成骨细跑体外培养矿化作用和IGF -1表达的影响 ,探讨鸡冠花黄酮类化合物对大鼠成骨细胞的作用机理。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响 ,SP免疫组... 目的　通过研究鸡冠花黄酮类化合物对成骨细跑体外培养矿化作用和IGF -1表达的影响 ,探讨鸡冠花黄酮类化合物对大鼠成骨细胞的作用机理。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响 ,SP免疫组化方法测定成骨细胞中IGF -1的表达情况 ,用HPIAS -10 0 0图象分析仪对各组表达进行定量分析。结果　鸡冠花黄酮类化合物促进大鼠成骨细胞矿化结节形成及IGF -1阳性表达 ,鸡冠花黄酮类化合物组的IGF -1平均光密度都显著高于阴性对照组 (P <0 0 5)。结论　鸡冠花黄酮类化合物可增强新生大鼠成骨细胞矿化和IGF 展开更多

关键词 鸡冠花黄酮类化合物 成骨细胞 矿化 IGF-1 免疫组化 胰岛素生长因子-1

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特异性CTL胞毒作用与HLA型别关系探讨 被引量：3

10

作者 郝友华 杨东亮 +3 位作者 吴雄文 熊仕秋 熊 平 龚非力 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期201-203,共3页

目的 探讨特异性CTL胞毒作用与靶细胞的HLA型别关系。方法 本实验以特定HLA型别、EB病毒转化的B淋巴母细胞（EBV-LCL）与同种异体单个核细胞（PBMC）混合培养,激活同种抗原特异性细胞性T细胞（CTL）;观察其对携带不同HIA型别的EBV-LCL... 目的 探讨特异性CTL胞毒作用与靶细胞的HLA型别关系。方法 本实验以特定HLA型别、EB病毒转化的B淋巴母细胞（EBV-LCL）与同种异体单个核细胞（PBMC）混合培养,激活同种抗原特异性细胞性T细胞（CTL）;观察其对携带不同HIA型别的EBV-LCL靶细胞的杀伤活性。结果 用EBV-LCL1致敏的效应细胞1对EBV-LCL2的杀伤效应比对EBV-LCL3强;用EBV-LCL2致敏的效应细胞2对EBV-LCL1的杀伤效应比对EBV-LCL3强;用EBV-LCL3致敏的效应细胞3对EBV-LCL1、2几乎无杀伤效应。结论 特异性CTL对不同HLA型别的靶细胞的胞毒作用存在差异,这不仅仅与HLA型别关联,而可能取决于抗原肽与MHC所组成的抗原综合信息。 展开更多

关键词 特异性CTL HLA型别 胞毒作用 B淋巴细胞 抗原

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可溶性人类白细胞抗原-G1 cDNA的克隆及序列分析 被引量：5

11

作者 房崇芸 吴雄文 龚非力 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期81-84,共4页

目的建立表达可溶性 HL A- G1蛋白的真核表达载体 pc DNA3- s HL A- G1。方法从绒癌细胞系 Jeg- 3细胞中提取总 RNA,借助 RT- PCR技术扩增可溶性 HL A - G1的 c DNA并把其插入真核表达载体 pc DNA 3,然后经酶切和测序法鉴定。结果经酶... 目的建立表达可溶性 HL A- G1蛋白的真核表达载体 pc DNA3- s HL A- G1。方法从绒癌细胞系 Jeg- 3细胞中提取总 RNA,借助 RT- PCR技术扩增可溶性 HL A - G1的 c DNA并把其插入真核表达载体 pc DNA 3,然后经酶切和测序法鉴定。结果经酶切鉴定及测序分析 ,证实已成功构建 pc DNA3- s HL A- G1。结论本研究成功构建可溶性 HL A - 展开更多

关键词 可溶性HLA-G1 克隆 序列分析 CDNA 可溶性人白细胞抗原

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稳定高效表达TNF-α基因及其突变体的H22肿瘤细胞株的建立 被引量：2

12

作者 李清芬 李卓娅 +4 位作者 龚非力 姜晓丹 徐勇 冯玮 熊平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期210-213,共4页

目的建立转染3种TNF-α基因(分泌型TNF-α突变体、跨膜型TNF-α突变体和野生型TNF-α的H22细胞株,以比较不同类型TNF-α的杀瘤效应。方法采用逆转录病毒载体,将3种TNF-α基因导入小鼠H22肿瘤细胞中,用Southern印迹、RT-PCR、流式细胞术... 目的建立转染3种TNF-α基因(分泌型TNF-α突变体、跨膜型TNF-α突变体和野生型TNF-α的H22细胞株,以比较不同类型TNF-α的杀瘤效应。方法采用逆转录病毒载体,将3种TNF-α基因导入小鼠H22肿瘤细胞中,用Southern印迹、RT-PCR、流式细胞术和生物学活性检测等方法,从基因的整合、RNA转录、蛋白的表达及其生物学活性4个方面,对转染细胞进行检测鉴定。结果3种TNF-α基因均在H22细胞中得到有效表达,并具有生物学活性。结论获得3种稳定高效表达TNF-α的H22肿瘤细胞株,为进一步研究跨膜型和分泌型TNF-α体内的抑瘤效应建立了良好的实验模型。 展开更多

关键词 跨膜型TNF-Α 分泌型TNF-Α 逆转录病毒载体 肿瘤 H22细胞 细胞毒效应

原文传递

CTL对同种异体靶细胞杀伤作用的实验研究 被引量：2

13

作者 房崇芸 吴雄文 +4 位作者 韩军艳 刘敏 杨志章 梁智辉 龚非力 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期119-122,共4页

目的 :研究特异性CTL杀伤的效应与HLA型别之间的关系。方法 :用已知型别的EB病毒转化的B淋巴母样细胞 (Epstein Barr transformedBlymphoblastoidcellline ,EBV LCL)与同种异体外周血单个核细胞 (PBMC)共培养 ,激活同种异体抗原特异性... 目的 :研究特异性CTL杀伤的效应与HLA型别之间的关系。方法 :用已知型别的EB病毒转化的B淋巴母样细胞 (Epstein Barr transformedBlymphoblastoidcellline ,EBV LCL)与同种异体外周血单个核细胞 (PBMC)共培养 ,激活同种异体抗原特异性细胞毒性T细胞 (cytotoxicityTcell,CTL) ,然后利用同位素释放法观察CTL对HLA I类表型不同的EBV LCL的杀伤活性。结果 :用EBV LCL 1刺激自身PBMC 1所诱导的CTL 1a,只能杀伤EBV LCL 1,而不能杀伤HLA I类表型不同的EBV LCL 2 ;但用EBV LCL 2刺激PBMC 1所诱导的CTL 1b ,却能有效杀伤HLA I类表型不同的EBV LCL 2。结论 :①MHC表型不同的免疫细胞之间可以发生相互作用 ;②TCR既不单独识别靶细胞表面的抗原肽 ,也不直接识别靶细胞表面的MHC分子 (MHC特异性抗原决定簇 ) ,而是识别MHC 抗原肽复合物的表面综合信息 ,后者可能是由MHC 抗原肽复合物表面的空间构象、电荷性质及其分布等信息所构成 ;③所谓CTL的特异性杀伤作用 ,是MHC 抗原肽复合物表面信息激活该信息特异性T细胞克隆的结果。 展开更多

关键词 CTL限制性杀伤 HLA型别 TCR MHC-抗原肽复合物 表面信息

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膜表达的HLA-G1对同种反应性PBMC分泌Th1/Th2型细胞因子的影响 被引量：2

14

作者 杨惠军 吴雄文 +4 位作者 张彩娥 梁智辉 韩军艳 黄亚非 龚非力 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期300-302,共3页

目的研究人脐静脉内皮细胞系(ECV304)表达的HLA-G1对同种异体外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2型细胞因子分泌的影响。方法采用脂质体介导的基因转染技术将pcDNA3-HLA-G1转入ECV304,以间接免疫荧光技术在蛋白质水平上检测HLA-G1分子在ECV... 目的研究人脐静脉内皮细胞系(ECV304)表达的HLA-G1对同种异体外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2型细胞因子分泌的影响。方法采用脂质体介导的基因转染技术将pcDNA3-HLA-G1转入ECV304,以间接免疫荧光技术在蛋白质水平上检测HLA-G1分子在ECV304上的表达;以表达HLA-G1的ECV304作为刺激细胞,灭活后,与健康人PBMC共同培养,用ELISA检测上清液中Th1/Th2型细胞因子的浓度,观察HLA-G1对同种异体抗原激活的PBMC分泌Th1/Th2型细胞因子的影响。结果与转染pcDNA3空质粒的对照组相比,HLA-G1能使PBMC的IL-10分泌增加(P<0.05),而IL-2,IFN-γI、L-4分泌无明显影响。结论HLA-G1能引起由同种异体抗原激活的PBMC分泌IL-10增加,提示HLA-G1有可能使Th1/Th2型细胞因子向Th2型偏移。 展开更多

关键词 HLA-G1 ECV304 TH1/TH2型细胞因子 同种移植 免疫耐受

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大豆异黄酮对去卵巢大鼠骨形成蛋白的影响 被引量：4

15

作者 田玉慧 李万里 +2 位作者 任金平 赵玉芝 韩金利 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1079-1080,共2页

目的　探讨大豆异黄酮和钙对去卵巢大鼠无机盐、骨形成蛋白 2 (BMP2 )和转移生长因子 - β1(TGF - β1)的影响。方法　取 2 8只雌性SD大鼠随机分为 4组 :假手术组、去卵巢组、去卵巢补钙组〔5 0mg/ (kg·d)〕和去卵巢加大豆异黄酮... 目的　探讨大豆异黄酮和钙对去卵巢大鼠无机盐、骨形成蛋白 2 (BMP2 )和转移生长因子 - β1(TGF - β1)的影响。方法　取 2 8只雌性SD大鼠随机分为 4组 :假手术组、去卵巢组、去卵巢补钙组〔5 0mg/ (kg·d)〕和去卵巢加大豆异黄酮组〔大豆异黄酮 10 0mg/ (kg·d)〕 ,10周后测骨密度、血清和尿液钙、钠、钾含量。用免疫组化法测骨骼中BMP2 和TGF - β1的表达。结果　去卵巢组大鼠血清和尿钙、钠含量显著增高 ,而骨密度、血清和尿钾及骨BMP2 和TGF - β1表达降低 ;去卵巢加大豆异黄酮后大鼠血清钙和尿钙、钠显著降低 ,骨密度和骨BMP2 、TGF - β1显著性升高(P <0 0 5或P <0 0 1)。单纯补钙组与去卵巢组相比只有TGF - β1有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　大豆异黄酮可调节去卵巢大鼠无机盐代谢 ,促进BMP2 和TGF - β1表达 。 展开更多

关键词 大豆异黄酮 钙 无机盐 骨形成蛋白2(BMP2) 转移生长因子-β1(TGF-β1)

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抗CD4抗体对SEB诱导的PBMC增殖反应的抑制作用机理 被引量：1

16

作者 张智红 沈关心 +2 位作者 杨敬 朱慧芬 张悦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期176-179,共4页

目的 :探讨抗CD4抗体在SEB诱导的外周血单个核细胞 (PBMC)增殖反应中的作用机理。方法 :采用MTT法 ,以SEB为刺激原 ,观测在不同条件诱导的PBMC增殖反应中抗CD4抗体的作用。采用形态学、生物化学、流式细胞仪等方法 ,检测抗CD4抗体诱导的... 目的 :探讨抗CD4抗体在SEB诱导的外周血单个核细胞 (PBMC)增殖反应中的作用机理。方法 :采用MTT法 ,以SEB为刺激原 ,观测在不同条件诱导的PBMC增殖反应中抗CD4抗体的作用。采用形态学、生物化学、流式细胞仪等方法 ,检测抗CD4抗体诱导的CD4+ T细胞凋亡。结果 :抗CD4人 鼠嵌合抗体和鼠源性单抗对由SEB诱导的PBMC增殖均有抑制作用。嵌合抗体能特异性诱导CD4+ T细胞发生凋亡。结论 :抗CD4抗体的增殖抑制作用能直接作用于TCR诱导的早期活化信号 ,嵌合抗体的抑制作用强度与单核细胞的存在密切相关 ,抗CD4嵌合抗体的进一步广泛交联是诱导凋亡的关键。 展开更多

关键词 嵌合抗体 鼠源性单抗 细胞增殖抑制效应 CD4^+T细胞 细胞凋亡 SEB 抗CD4抗体

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HLA-DRB1等位基因多态性与食管癌遗传易感性研究 被引量：2

17

作者 林军 孙洁 +4 位作者 周燕 黄星 熊平 汪亚平 邓长生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期1112-1114,共3页

目的 :从基因水平探讨湖北地区汉族人食管癌HLA -DRB1等位基因的遗传易感性。方法 :运用序列特异性引物聚合酶链反应结合基因序列分析等技术 ,检测无亲缘关系湖北汉族健康人 136例、食管癌组 4 2例患者的HLA -DRB1等位基因。SAS统计软... 目的 :从基因水平探讨湖北地区汉族人食管癌HLA -DRB1等位基因的遗传易感性。方法 :运用序列特异性引物聚合酶链反应结合基因序列分析等技术 ,检测无亲缘关系湖北汉族健康人 136例、食管癌组 4 2例患者的HLA -DRB1等位基因。SAS统计软件数据处理。结果 :湖北地区汉族人食管癌患者与正常人比较 ,HLA -DRB1 0 90 1基因频率显著增高 (0 2 5 0 0vs 0 1397,P =0 0 2 8,OR =2 0 5 3,病因分数 =0 12 82 ) ;两者间其余HLA -DRB1等位基因分布频率差别均无显著。结论 :HLA -DRB1 0 90 1等位基因与湖北地区汉族人食管癌正相关 ,为其易感基因 ,该等位基因测序结果与其基因库第 2外显子序列吻合。 展开更多

关键词 HLA-DRB1等位基因多态性 食管癌 遗传易感性

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卵巢癌细胞对CD8^+ T细胞活化分子CD69表达的影响 被引量：2

18

作者 汪辉 黄亚非 +3 位作者 李天 李晓 程琪 谢幸 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2007年第36期5183-5185,共3页

目的:探讨卵巢癌细胞对CD8+T细胞活化分子CD69表达的影响。方法:采用流式细胞术检测3株卵巢癌细胞(OVCAR3、CAOV3和SKOV3)培养上清液对CD8+T细胞表达早期活化分子CD69表达的百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD8+T细胞分泌的细胞因子IFN... 目的:探讨卵巢癌细胞对CD8+T细胞活化分子CD69表达的影响。方法:采用流式细胞术检测3株卵巢癌细胞(OVCAR3、CAOV3和SKOV3)培养上清液对CD8+T细胞表达早期活化分子CD69表达的百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)测定CD8+T细胞分泌的细胞因子IFN-γ的水平。结果:与对照组比较,3株卵巢癌细胞培养上清液可对CD8+T细胞CD69的表达产生明显的抑制作用(F=29.90,P<0.01),CD8+T细胞分泌的细胞因子IFN-γ水平显著降低(F=16.31,P<0.01)。结论:卵巢癌细胞早期就能抑制CD8+T细胞的活化,CD69可作为评价免疫效应细胞功能的指标。 展开更多

关键词 卵巢癌 CD69 活化

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纳米蜂胶对肿瘤细胞K562，L929，MNK28的杀伤效应及机理研究 被引量：2

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作者 杨道锋 朱慧芬 +3 位作者 邵静芳 张悦 沈关心 龚非力 《中国药师》 CAS 2008年第3期269-272,共4页

目的:了解纳米蜂胶对常见肿瘤细胞的体外杀伤效应,并探讨其机理。方法:乳酸脱氢酶法测定纳米蜂胶体外对小鼠成纤维瘤细胞、人胃癌细胞、人红白血病细胞和非肿瘤源性的脐静脉内皮细胞的杀伤作用。流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率。结果:... 目的:了解纳米蜂胶对常见肿瘤细胞的体外杀伤效应,并探讨其机理。方法:乳酸脱氢酶法测定纳米蜂胶体外对小鼠成纤维瘤细胞、人胃癌细胞、人红白血病细胞和非肿瘤源性的脐静脉内皮细胞的杀伤作用。流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率。结果:纳米蜂胶在浓度16～400μg·ml^(-1)范围内对3种肿瘤细胞都有一定的杀伤作用,且随着浓度的升高杀伤率增加,其对肿瘤细胞的杀伤作用明显强于普通蜂胶,但低于氟尿嘧啶。纳米蜂胶对K562,L929,MNK28半数致死浓度(IC_(50))分别为(357.8±8.3)μg·ml^(-1),(472.3±27.5)μg·m^(-1),(461.7±18.7)μg·ml^(-1)。而普通蜂胶对K562,L929和MNK28的IC50分别为(737.6±74.3)μg·ml^(-1),(753.6±82.1)μg·ml^(-1),(939.3±75.5)μg·ml^(-1)。而两种蜂胶对人脐静脉内皮细胞的毒性均较低。细胞凋亡率与杀伤率有一定的线形关系,纳米蜂胶作用后处于G_0/G_1期的肿瘤细胞的比例明显增高。结论:纳米蜂胶体外对小鼠成纤维瘤细胞、人胃癌细胞、人红白血病细胞具有明显的杀伤作用,诱导肿瘤细胞凋亡是其抗肿瘤的机制之一。 展开更多

关键词 纳米蜂胶 蜂胶 肿瘤细胞 杀伤率

原文传递

人可溶性TNF受体(sTNFRI)在大肠杆菌中的表达及其活性鉴定 被引量：1

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作者 叶飞 李卓娅 +5 位作者 尹丙姣 龚非力 姜晓丹 冯玮 徐勇 熊平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期743-746,共4页

目的 :构建人可溶性TNF受体I(sTNFRI)基因表达载体 ,并在大肠杆菌中高效表达。方法 :用RT PCR扩增编码人TNFRI胞外段基因片段 ,将其插入到表达载体pET 2 8a ,并转入大肠杆菌进行表达。结果 :在IPTG诱导下 ,转入外源基因的大肠杆菌BL 2 ... 目的 :构建人可溶性TNF受体I(sTNFRI)基因表达载体 ,并在大肠杆菌中高效表达。方法 :用RT PCR扩增编码人TNFRI胞外段基因片段 ,将其插入到表达载体pET 2 8a ,并转入大肠杆菌进行表达。结果 :在IPTG诱导下 ,转入外源基因的大肠杆菌BL 2 1可高效表达sTNFRI蛋白 ,SDS PAGE显示在 2 7kD处有一特异表达条带 ,其表达量占菌体蛋白总量的 31%。纯化的sTNFRI可有效封闭TNF对L92 9细胞的胞毒效应 ;间接免疫荧光显示它可特异性抑制TNF与靶细胞TNFR的结合。结论 :通过基因工程技术获得了人sTNFRI重组蛋白。 展开更多

关键词 人可溶性TNF受体 大肠杆菌 表达 活性鉴定 胞毒效应

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