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昆明白小鼠胎鼠成纤维细胞不同接种密度对人胚胎干细胞的影响 被引量:6
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作者 陈红 钱坤 +1 位作者 张苏明 朱桂金 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期443-446,共4页
目的:以昆明白小鼠胎鼠成纤维细胞作为饲养细胞,观察其不同接种密度对人胚胎干细胞的克隆生长情况及分化率的影响。方法:实验于2003-07/2005-03华中科技大学同济医学院附属同济医院完成。首先进行小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养。选取2~... 目的:以昆明白小鼠胎鼠成纤维细胞作为饲养细胞,观察其不同接种密度对人胚胎干细胞的克隆生长情况及分化率的影响。方法:实验于2003-07/2005-03华中科技大学同济医学院附属同济医院完成。首先进行小鼠胚胎成纤维细胞的分离培养。选取2~5代的小鼠胚胎成纤维细胞,待其至对数生长期倒掉或吸掉培养基,加入含10mg/L丝裂霉素C的细胞全培养液5mL,置37℃,体积分数0.05的CO2饱和湿度温箱中培养二三小时,在6孔板中加入0.1%明胶包被,放置30min以上,倒掉或吸掉含丝裂霉素C的培养基,磷酸盐缓冲液(-)清洗5遍,尽量除去丝裂霉素C,加入2mL0.05%的胰蛋白酶消化细胞,镜下观察,当细胞间出现裂隙,细胞变圆时(约2~4min),立即加入等量的全培养液终止消化,并用吸管反复吹打,使之成为单细胞悬液,在细胞计数板中央放置专用的盖玻片,用玻璃虹吸管吸取细胞,让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹槽处流出悬液,至盖玻片下被液体充满为止。用细胞计数板计算活细胞数,并分别按3×108、5×108、1×109L-1密度接种,机械法平均分人胚胎干细胞克隆,5个克隆/孔接种于不同密度的小鼠胚胎成纤维细胞上。观察克隆的生长情况及分化率,分化率=(完全分化克隆数+部分分化克隆数)/(完全分化克隆数+部分分化克隆数+未分化的克隆数)。结果:胚胎干细胞克隆在3×108L-1密度的小鼠胚胎成纤维细胞上生长极易分化,贴壁48h后无生长,72~96h分化率(98.0±2.0)%;接种于5×108L-1的小鼠胚胎成纤维细胞上后,胚胎干细胞生长与分化共存,贴壁后48h部分克隆生长,下次传代前分化率分化效率为(30.0±5.0)%;在1×109L-1小鼠胚胎成纤维细胞上,胚胎干细胞克隆贴壁后48h即开始生长,分化率为(1.0±0.2)%。3组之间分化率差异有显著性意义(P<0.05)。结论:以昆明白小鼠胎鼠成纤维细胞作为饲养细胞,1×109L-1可以起到促进胚胎干细胞的增殖,并抑制其分化的作用。 展开更多
关键词 细胞 密度 干细胞
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人胚胎干细胞建系及体外诱导分化的研究进展 被引量:3
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作者 陈红 钱坤 +1 位作者 张苏明 朱桂金 《生殖医学杂志》 CAS 2004年第6期373-376,共4页
人胚胎干细胞源自囊胚内细胞团 (innercellmass,ICM ) ,能无限增殖并保持未分化状态 (保持完整的、正常的染色体核型 )的细胞。它可分化为来源于 3个胚层的多种细胞。这种特性在世界范围内掀起了对人胚胎干细胞的研究热潮 ,并取得了飞... 人胚胎干细胞源自囊胚内细胞团 (innercellmass,ICM ) ,能无限增殖并保持未分化状态 (保持完整的、正常的染色体核型 )的细胞。它可分化为来源于 3个胚层的多种细胞。这种特性在世界范围内掀起了对人胚胎干细胞的研究热潮 ,并取得了飞速发展。本文就人胚胎干细胞建系及体外培养分化的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 研究进展 体外诱导分化 正常 染色体核型 体外培养 增殖 建系 内细胞团 囊胚
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重症肌无力伴甲状腺功能减退(附24例报告) 被引量:2
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作者 李罗清 杨明山 +1 位作者 孙圣刚 徐金枝 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2004年第1期1-3,12,共4页
目的 探讨重症肌无力 (myasthenia gravis,MG)与原发性甲状腺功能减退两病并存的临床特点、发病机制和治疗方法。方法 对 1 95 6— 2 0 0 1年间同济医院确诊的 2 5 89例 MG患者中伴原发性甲状腺功能减退的 2 4例患者的临床和实验室资... 目的 探讨重症肌无力 (myasthenia gravis,MG)与原发性甲状腺功能减退两病并存的临床特点、发病机制和治疗方法。方法 对 1 95 6— 2 0 0 1年间同济医院确诊的 2 5 89例 MG患者中伴原发性甲状腺功能减退的 2 4例患者的临床和实验室资料进行回顾性分析。结果 全部 MG患者中 ,两病并存者占 0 .9% ,其中女性发病率为83 .3 % ,成年人占 75 .0 % ,全身型占 70 .8% ,危象发生率为 2 5 .0 %。两病同时治疗效果明显优于仅对一病治疗。结论 MG伴发甲状腺功能减退以成年女性较多且病情较重 ,早期诊断和两病同时治疗是取得疗效的关键。 展开更多
关键词 重症肌无力 甲状腺功能减退 发病机制 临床特点 自身免疫性疾病 抗甲状腺抗体 放射免疫法
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L-Glu促进纯化培养的海马和皮质星形胶质细胞增殖的研究
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作者 王争艳 朱长庚 +1 位作者 刘庆莹 王伟 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期663-667,共5页
目的研究L-Glu对纯化培养的皮质和海马星形胶质细胞促增殖作用的机制。方法将纯化培养的星形胶质细胞分为7组:①无血清培养基组,②含L-Glu(1mmol/L)的无血清培养基组,③含MCCG(100μmol/L)的无血清培养基组,④含MPEP(100μmol/L)的无血... 目的研究L-Glu对纯化培养的皮质和海马星形胶质细胞促增殖作用的机制。方法将纯化培养的星形胶质细胞分为7组:①无血清培养基组,②含L-Glu(1mmol/L)的无血清培养基组,③含MCCG(100μmol/L)的无血清培养基组,④含MPEP(100μmol/L)的无血清培养基组,⑤含L-Glu+MCCG(分别为1mmol/L,100μmol/L)的无血清培养基组,⑥含L-Glu+MPEP(分别为1mmol/L,100μmol/L)的无血清培养基组,⑦含L-Glu+MCCG+MPEP(分别为1mmol/L,100μmol/L及100μmol/L)的无血清培养基组。流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果L-Glu促进纯化培养的星形胶质细胞的增殖,单独加入mGluRs的竞争性拮抗剂MCCG或MPEP则L-Glu的促增殖作用减弱,同时加入两种拮抗剂则L-Glu的促增殖作用消失。结论L-Glu通过作用于mGluR3和mGluR5促进星形胶质细胞的增殖,两者可能在星形胶质细胞增殖方面具有协同作用。 展开更多
关键词 L-Glu 星形胶质细胞 细胞周期 流式细胞术
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综合外治法治疗瘫痪116例
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作者 宗良玉 汪春莲 《中医外治杂志》 2008年第5期37-37,共1页
神经科有些疾病在急性期过后,遗留下来的瘫痪是临床上常见的症状。多年来,笔者采用中医外治疗法治疗瘫痪患者116例,取得了良好疗效,现报道如下。1临床资料本组病例均来自华中科技大学同济医院神经科门诊患者,临床主要表现为单个或... 神经科有些疾病在急性期过后,遗留下来的瘫痪是临床上常见的症状。多年来,笔者采用中医外治疗法治疗瘫痪患者116例,取得了良好疗效,现报道如下。1临床资料本组病例均来自华中科技大学同济医院神经科门诊患者,临床主要表现为单个或多个肢体不能随意运动、肌力减退或消失。本组116例患者中,男性42例,女性74例;年龄1岁~75岁,平均38.2岁;病程3d~3a,平均1.4a。病种分类:脑血栓、 展开更多
关键词 瘫痪 外治法
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神经系统变性疾病与线粒体功能障碍 被引量:3
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作者 康静琼 朱遂强 阮旭中 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期40-42,共3页
关键词 肌张力障碍 线粒体功能障碍 神经系统变性疾病
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皮层性失语的神经语言学特点及发病机制研究 被引量:2
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作者 毛善平 施琪嘉 +1 位作者 陈卓铭 李承晏 《中华物理医学与康复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期107-109,共3页
目的 研究汉语皮层性失语的神经语言学特点及发病机制。方法 采用ABC法及补充语法检查对 67例脑血管病致皮层单灶性损害患者进行神经语言学检查 ,并行头颅CT图像标准化及脑电地形图检查。结果 运动性失语 (BA)病损范围大于Broca区 ,... 目的 研究汉语皮层性失语的神经语言学特点及发病机制。方法 采用ABC法及补充语法检查对 67例脑血管病致皮层单灶性损害患者进行神经语言学检查 ,并行头颅CT图像标准化及脑电地形图检查。结果 运动性失语 (BA)病损范围大于Broca区 ,经皮层运动性失语 (TCMA)少数也有Broca区部分受损。感觉性失语病灶范围差异较大。经皮层混合性失语 (TMA)病灶介于TCMA及经皮层感觉性失语 (TCSA)之间。BA及TCMA均有音位及声调障碍 ,功能词完成差 ,实质词正常 ,主动句正常 ,被动句理解障碍 ;感觉性失语 (WA)及TCSA音位声调正常 ,功能词正常 ,实质词完成极差 ,尤以同义词较多的名词提取障碍 ,主动句及被动句理解均障碍。结论 各型失语病灶有其结构及功能定位 ,可指导临床医生进行定位诊断 ;各型失语神经语言学特点不同 。 展开更多
关键词 皮层性失语 神经语言学 发病机制 语言障碍
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胚胎干细胞与再生医学:中枢神经系统疾病的展望 被引量:1
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作者 陈红 刘登华 张苏明 《卒中与神经疾病》 2004年第2期125-127,共3页
长期以来,中枢神经系统疾病如老年性痴呆、Parkinson病、脑卒中、多发性硬化等一直是人类面临的巨大挑战,目前尚无有效的治疗方法,但随着对中枢神经系统再生机制的研究,干细胞的发现及再生医学的发展使中枢神经系统结构、功能的重... 长期以来,中枢神经系统疾病如老年性痴呆、Parkinson病、脑卒中、多发性硬化等一直是人类面临的巨大挑战,目前尚无有效的治疗方法,但随着对中枢神经系统再生机制的研究,干细胞的发现及再生医学的发展使中枢神经系统结构、功能的重建成为可能。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 再生医学 中枢神经系统疾病 功能重建 细胞生物学
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电压门控钠通道、钙通道与抗(疒间)治疗 被引量:2
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作者 康静琼 张苏明 《中国临床神经科学》 2001年第4期406-409,共4页
电压门控纳通道介导再生内向电流,这些电流负责脑神经元动作电位的初始去极化。抗癎药以及许多抑制和癫癎发作有关的异常神经元兴奋的有前景的化合物,大多是通过钠通道完成电压和频率依赖的离子电流的抑制。电压激活钙通道在控制神经元... 电压门控纳通道介导再生内向电流,这些电流负责脑神经元动作电位的初始去极化。抗癎药以及许多抑制和癫癎发作有关的异常神经元兴奋的有前景的化合物,大多是通过钠通道完成电压和频率依赖的离子电流的抑制。电压激活钙通道在控制神经元兴奋性、神经保护作用、癫癎波的发放和癎性发作的维持及传播中起重要作用。 展开更多
关键词 电压门控 钠通道 钙通道 癫痫 神经保护作用
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尼莫通、高压氧对脑功能恢复治疗研究
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作者 刘如恩 赵洪洋 +2 位作者 王开颜 姜晓兵 张君臣 《中国临床神经科学》 2002年第4期384-386,共3页
目的 :探讨脑损伤后脑功能恢复的有效的治疗方法。方法 :采用常规治疗和常规治疗分别加用尼莫通、高压氧及尼莫通和高压氧 3种治疗方法 ,对 110例脑损伤病人治疗 ,通过评价病人的记忆商、脑外伤综合征的程度 ,判断其脑功能恢复情况。结... 目的 :探讨脑损伤后脑功能恢复的有效的治疗方法。方法 :采用常规治疗和常规治疗分别加用尼莫通、高压氧及尼莫通和高压氧 3种治疗方法 ,对 110例脑损伤病人治疗 ,通过评价病人的记忆商、脑外伤综合征的程度 ,判断其脑功能恢复情况。结果 :应用尼莫通或高压氧或尼莫通加高压氧治疗的效果明显优于常规治疗组。结论 :脑损伤的病人 ,应用尼莫通或高压氧或尼莫通和高压氧联合治疗 。 展开更多
关键词 脑损伤 脑功能恢复 尼莫通 高压氧 治疗
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