JWA基因在HL-60细胞定向分化中的表达及意义 被引量：3

1

作者 沈群 周建伟 +3 位作者 盛瑞兰 朱光荣 曹海霞 陆化 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期804-808,共5页

为了研究JWA基因在HL60细胞定向分化中的表达规律,探讨其在白血病细胞分化和凋亡中的意义及可能的作用机制,应用FCM检测HL60细胞经ATRA(10-6mol/L)、AraC(10ng/ml)、TPA(10-8mol/L)作用后2、4、6、8天CD13、CD14、CD15、CD11b改变及细... 为了研究JWA基因在HL60细胞定向分化中的表达规律,探讨其在白血病细胞分化和凋亡中的意义及可能的作用机制,应用FCM检测HL60细胞经ATRA(10-6mol/L)、AraC(10ng/ml)、TPA(10-8mol/L)作用后2、4、6、8天CD13、CD14、CD15、CD11b改变及细胞周期变化;应用半定量RT-PCR及蛋白印迹技术检测JWA基因在HL60细胞定向分化中的表达趋势以及相关凋亡因子Bcl2、HSP27和HSP70的表达。结果表明:经上述药物分别处理HL60细胞后,不同时段FCM相关指标检测结果证明其分别向粒、单核、巨噬细胞样分化。JWA基因表达呈时间依赖性升高;Bcl2则呈时间依赖性下降;HSP70在ATRA及TPA组与JWA表达呈正相关,与Bcl2呈负相关,而各组HSP27并无表达。ATRA处理HL60细胞后JWA基因表达趋势与原代细胞相反,且不需要ATRA诱导分化作为前提。分别以AraC10ng/ml和AraC20ng/ml处理HL60细胞后,JWA基因的表达呈反向变化,即前者呈时间依赖性增加,而后者则下降。结论:JWA基因在实现ATRA及TPA诱导白血病细胞分化和凋亡中可能具有双重调节作用;JWA基因表达的高低与AraC诱导分化作用及细胞毒作用有关;HL60细胞与原代白血病细胞在诱导分化机制方面可能不尽相同。 展开更多

关键词 JWA基因 HL-60细胞 ATRA ARA-C TPA 定向分化 细胞凋亡

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4-HPR联合DDP对HeLa细胞的增殖和凋亡作用 被引量：6

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作者 尹凤玲 陆静 +3 位作者 李爱萍 顾灯安 韩素萍 周建伟 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2006年第3期214-217,共4页

背景与目的：4-羟苯基维胺脂（N-4-hydroxyphenyl retinode，4-HPR）是一种全反式维甲酸的衍生物，它对多种肿瘤细胞有化学预防和治疗的双重作用且毒副作用小；还对放疗和化疗方法有不同程度的增敏作用。顺铂（cis-platinμm，DDP）是... 背景与目的：4-羟苯基维胺脂（N-4-hydroxyphenyl retinode，4-HPR）是一种全反式维甲酸的衍生物，它对多种肿瘤细胞有化学预防和治疗的双重作用且毒副作用小；还对放疗和化疗方法有不同程度的增敏作用。顺铂（cis-platinμm，DDP）是宫颈癌常用的化疗药物，但因其毒副作用及耐药等问题，临床应用受到限制。本研究旨在探讨4-HPR联合DDP对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的机制，最终为临床上应用4-HPR治疗宫颈癌提供实验依据。材料与方法：采用MTF法检测单用4-HPR、DDP及两药联合时对HeLa细胞增殖的影响，分析4-HPR与DDP在抑制HeLa细胞增殖中的相互作用。用流式细胞仪测定细胞周期变化和细胞凋亡；用Hoeehst染色法检测细胞核的改变。结果：4-HPR对HeLa细胞的增殖抑制的浓度在（2-40）μmol／L范围内，并呈现较好的浓度和时间依赖性，在两药合用时上述作用更加明显；4-HPR可诱导细胞凋亡并将细胞阻滞于G2-M期和S期，当4-HPR浓度为10、20、40μmol／L时细胞的凋亡率分别为2．55％，16．55％，22．91％，而G2-M期和S期的细胞比率也随4-HPR的浓度升高而增加。当以上3种浓度的4-HPR与1μmol／L DDP联合作用时，两药呈现协同作用。结论：4-HPR（浓度在2-40μmol／L范围内）对HeLa细胞有显著的增殖抑制作用，且随4-HPR的浓度升高而增加，与DDP联合使用能增强HeLa细胞的敏感性，当以上3种浓度的4-HPR与1 μmol／L DDP联合作用时，两药呈现协同作用。4-HPR（浓度在2-40 μmol／L范围内）对HeLa细胞有显著的增殖抑制作用，与DDP联合使用能增强HeLa细胞的敏感性，这一作用可能与DDP和4-HPR协同诱导细胞凋亡及G2-M期和S期阻滞有关。 展开更多

关键词 4-羟苯基维胺脂 顺铂 宫颈癌 增殖凋亡

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慢性髓系白血病首发血小板显著增多 被引量：3

3

作者 沈群 周建伟 +5 位作者 朱光荣 杨月艳 仇海荣 朱广荣 夏雯 姜鹏君 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期247-251,共5页

本研究探讨以血小板显著增多首发的慢性髓系白血病(CML)临床、细胞遗传学及分子生物学特征。应用骨髓细胞涂片、骨髓活检观察细胞形态学改变;RT-PCR检测bcr/abl融合基因;常规染色体核型分析及FISH检测细胞遗传学变化。结果发现:以血小... 本研究探讨以血小板显著增多首发的慢性髓系白血病(CML)临床、细胞遗传学及分子生物学特征。应用骨髓细胞涂片、骨髓活检观察细胞形态学改变;RT-PCR检测bcr/abl融合基因;常规染色体核型分析及FISH检测细胞遗传学变化。结果发现:以血小板显著增多为首发表现的CML是一组具有独特临床和生物学特点的疾病,骨髓细胞涂片和骨髓活检表明,骨髓增生活跃,以巨核系异常增生为主,血小板大片成堆,可见圆形核小巨核细胞,中等度白细胞增多,经细胞遗传学和分子生物学检测均证实存在有Ph染色体和(或)表达bcr/abl融合基因,对此类患者应该早期进行积极治疗,甚至进行分子生物学水平的干预;而原发性血小板增多症(ET)患者则不宜过多地使用化疗药物,否则反而诱致白血病的发生。结论:对血小板明显增多的患者应及时进行Ph染色体及bcr/abl融合基因表达水平的检测,这对于ET及CML的诊断和鉴别诊断极为重要,以避免误诊、误治。 展开更多

关键词 原发性血小板增多症 慢性髓细胞白血病 PH染色体 BCR/ABL融合基因

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JWA抑制人肝癌细胞的黏附和迁移侵袭潜能

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作者 吴晓峰 陈海蓉 +2 位作者 白津 王学浩 周建伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1722-1725,共4页

目的:探讨JWA蛋白在人肝癌细胞黏附和迁移侵袭过程中的作用。方法:应用小干扰RNA下调低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97L中JWA蛋白表达水平,MTT法检测MHCC97L增殖;应用细胞小室检测MHCC97L在JWA不同蛋白水平时的迁移及侵袭潜能变化;黏附试... 目的:探讨JWA蛋白在人肝癌细胞黏附和迁移侵袭过程中的作用。方法:应用小干扰RNA下调低转移潜能人肝癌细胞株MHCC97L中JWA蛋白表达水平,MTT法检测MHCC97L增殖;应用细胞小室检测MHCC97L在JWA不同蛋白水平时的迁移及侵袭潜能变化;黏附试验检测MHCC97L细胞黏附能力变化。结果:研究发现人肝癌细胞株MHCC97L中的JWA表达水平下降后,肝癌细胞迁移及侵袭能力明显增强,细胞对细胞外基质纤维连接蛋白的黏附力增加。结论:RNA干扰JWA引起肝癌细胞的JWA蛋白表达水平下降,导致肝癌细胞的黏附、迁移及侵袭能力增强,结果提示JWA可能抑制人肝癌细胞侵袭和转移。 展开更多

关键词 肝细胞肝癌 JWA 迁移 侵袭

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天然产物3，3’-二吲哚甲烷的抗肿瘤作用及其机制研究概况 被引量：2

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作者 叶洋 周建伟 陆荣柱 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1043-1047,共5页

吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol,I3C)是一种广泛存在于十字花科芸苔属蔬菜中的植物化学物,3,3’-二吲哚甲烷(3,3’-diindolylmethane,DIM)为其主要代谢物。近年来,DIM的生物学作用,尤其是抗肿瘤作用得到了学术界的广泛关注,多项研究显... 吲哚-3-甲醇(indole-3-carbinol,I3C)是一种广泛存在于十字花科芸苔属蔬菜中的植物化学物,3,3’-二吲哚甲烷(3,3’-diindolylmethane,DIM)为其主要代谢物。近年来,DIM的生物学作用,尤其是抗肿瘤作用得到了学术界的广泛关注,多项研究显示其可通过影响细胞周期、细胞生长、炎症等信号转导通路抑制恶性肿瘤生长、诱导肿瘤细胞凋亡,表现出了较强的肿瘤化学预防效应和抗肿瘤效应及在肿瘤防治方面的潜在应用价值。本文对DIM的抗肿瘤作用及其机制研究概况进行综述。 展开更多

关键词 植物化学物 3 3’-二吲哚甲烷 抗肿瘤

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N-甲基亚硝基脲诱导大鼠膀胱肿瘤作用的动态观察 被引量：19

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作者 钱立新 刘训良 +4 位作者 丁鸿 周建伟 吴宏飞 张炜 虞梅宁 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期563-564,共2页

目的　观察N 甲基亚硝基脲 (MNU)诱发Wistar大鼠膀胱癌的作用及动态过程。方法　MNU大鼠膀胱灌注 2mg/次 ,1次 /2周 ,共 4次。分别观察实验第 3、6、9、12和 14周时膀胱黏膜的改变、并作尿吖啶橙 (AO)荧光染色。结果　膀胱灌注 3周出现... 目的　观察N 甲基亚硝基脲 (MNU)诱发Wistar大鼠膀胱癌的作用及动态过程。方法　MNU大鼠膀胱灌注 2mg/次 ,1次 /2周 ,共 4次。分别观察实验第 3、6、9、12和 14周时膀胱黏膜的改变、并作尿吖啶橙 (AO)荧光染色。结果　膀胱灌注 3周出现不典型增生或腺性膀胱炎 ,6周时有原位癌改变 ,9周时膀胱内有明显癌性肿块 ,12～ 14周为膀胱乳头状癌或浸润性癌 ,9周时的致癌率 10 0 .0 % ,组织学改变及病理学特征与人膀胱癌十分相似。AO染色诊断大鼠膀胱癌的阳性率为 77.0 %。结论　MNU灌注诱导大鼠膀胱癌方法简便、可靠 ,致癌过程经历上皮增生、乳头状瘤形成和癌变动态变化。 展开更多

关键词 N-甲基亚硝基脲 诱导 大鼠 膀胱肿瘤 动态观察

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过氧化氢处理K562细胞中JWA基因的表达及其与DNA损伤和凋亡的关系 被引量：6

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作者 朱婷 李爱萍 +2 位作者 刘起展 王心如 周建伟 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期182-186,共5页

目的研究过氧化氢(H2O2)诱导K562细胞氧化应激过程中,JWA蛋白、热休克蛋白(hsp70和hsp27)和p53蛋白的表达特点,探讨JWA参与细胞应答氧化应激的作用和可能机制。方法用0.01、0.1、1mmol/L的H2O2处理K562细胞10、30、60、180min建立氧化... 目的研究过氧化氢(H2O2)诱导K562细胞氧化应激过程中,JWA蛋白、热休克蛋白(hsp70和hsp27)和p53蛋白的表达特点,探讨JWA参与细胞应答氧化应激的作用和可能机制。方法用0.01、0.1、1mmol/L的H2O2处理K562细胞10、30、60、180min建立氧化损伤模型;用0.1mmol/LH2O2处理不同时间(6～48h)和不同浓度(0.5～1000μmol/L)的H2O2处理48h分别诱导K562细胞凋亡,然后用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA损伤和凋亡,用免疫印迹方法检测热休克蛋白(hsp70和hsp27)、p53以及JWA的蛋白表达水平。结果在DNA损伤模型中,H2O2活跃地调节JWA的表达,JWA对氧化应激的应答比热休克蛋白更快速,JWA和hsp70的表达规律相似;在低剂量H2O2(0.01mmol/L)处理时,JWA和热休克蛋白的表达均显著增高;在细胞凋亡模型中,JWA、hsp70、hsp27和p53的表达均显著增高,其中,JWA、hsp70和p53三者的表达规律相似。结论JWA是一个有效的环境应答基因并活跃地参与细胞应答氧化应激所致的DNA损伤和细胞凋亡的信号通路,其介导的信号通路可能与hsp70和p53有关。 展开更多

关键词 过氧化氢 K562细胞 JWA基因 基因表达 DNA损伤 细胞凋亡

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苯并(a)芘作用下人胚肺细胞JWA基因的表达及其与DNA损伤修复的关系 被引量：4

8

作者 顾灯安 李爱萍 +2 位作者 朱婷 叶健 周建伟 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期187-190,共4页

目的研究苯并(a)芘诱导人胚肺(ccc HPF1)细胞DNA损伤修复中基因JWA和热休克蛋白(hsp70)的表达规律,探讨JWA基因参与细胞DNA损伤修复的作用和可能机制。方法建立ccc HPF1细胞DNA损伤模型,在S9活化状态下分别以10～100μmol/L苯并(a)芘处... 目的研究苯并(a)芘诱导人胚肺(ccc HPF1)细胞DNA损伤修复中基因JWA和热休克蛋白(hsp70)的表达规律,探讨JWA基因参与细胞DNA损伤修复的作用和可能机制。方法建立ccc HPF1细胞DNA损伤模型,在S9活化状态下分别以10～100μmol/L苯并(a)芘处理细胞3h收获细胞或再恢复24h,用碱性单细胞凝胶电泳鉴定DNA损伤和修复情况,免疫印迹方法检测JWA和hsp70的表达水平。结果在DNA损伤模型中,苯并(a)芘活跃地调节JWA的表达,50μmol/L和100μmol/L处理组JWA和hsp70明显上调,在恢复期内10～100μmol/L处理组两者都处于较高的表达水平并且JWA和hsp70的表达规律几乎完全一致。结论JWA是一个有效的环境应答基因,活跃地参与细胞应答与DNA切除修复有关的信号通路。 展开更多

关键词 苯并(A)芘 人胚肺细胞 JWA基因 基因表达 DNA损伤 DNA修复

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诱导分化联合热休克处理对K562细胞JWA和热休克蛋白70表达的影响 被引量：4

9

作者 茆文革 李爱萍 +3 位作者 叶健 黄曙 李爱群 周建伟 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期60-63,共4页

目的　研究不同诱导分化剂单独或与热休克联合作用下 ,K562细胞JWA蛋白表达的特点和规律 ,探讨JWA与热休克蛋白 70 (Hsp70 )表达的关系以及可能涉及的信号调节机制。方法　建立诱导K562细胞定向分化以及和热休克联合作用的实验模型 ,用W... 目的　研究不同诱导分化剂单独或与热休克联合作用下 ,K562细胞JWA蛋白表达的特点和规律 ,探讨JWA与热休克蛋白 70 (Hsp70 )表达的关系以及可能涉及的信号调节机制。方法　建立诱导K562细胞定向分化以及和热休克联合作用的实验模型 ,用Westernblot方法检测JWA、Hsp70、热休克转录因子 1(HSF1)、HSF2等蛋白表达。结果　 (1)佛波酯 (TPA ,10 0、2 0 0ng/ml)或阿霉素 (adri amycin ,4× 10 - 8mol/L)处理细胞 48h后 ,再热休克 (42℃ )处理 2h ,JWA和Hsp70蛋白表达均增加 ;而氯化高铁血红素 (hemin ,3× 10 - 5 mol/L ,48h)、阿糖胞苷 (Ara C ,80ng/ml,48h)和三氧化二砷 (As2 O3,1× 10 - 6 mol/L ,48h)处理后再热休克处理细胞 2h ,则JWA和Hsp70蛋白表达均下调 ;全反式维A酸(ATRA ,1× 10 - 6 mol/L ,48h)处理细胞后 ,再热休克处理 ,则JWA和Hsp70蛋白表达无明显变化。 (2 )不同诱导分化剂处理K562细胞后再热休克处理 ,HSF1和HSF2表达变化均不明显。结论　JWA不但参与K562细胞的诱导分化调节 ,也参与细胞对热应激的调节 ,JWA可能是多种化学诱导分化剂和热休克的共同靶基因。诱导K562细胞分化过程中 ,Hsp70的表达不需要热休克转录因子介导 ,JWA可能是一种与Hsp70信号通路平行的新的信号分子。 展开更多

关键词 热休克 K562细胞 JWA 热休克蛋白70 基因表达 血红蛋白

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JWA基因的蛋白缺陷对苯并(a)芘所致HeLa细胞DNA损伤的影响 被引量：2

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作者 刘祖龙 顾灯安 +2 位作者 李爱萍 刘起展 周建伟 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期84-87,F0003,共5页

目的研究JWA基因表达缺陷对苯并(a)芘诱导细胞DNA损伤与修复的影响及可能机制。方法构建JWA基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-asJWA),用该载体稳定转染人宫颈癌细胞(HeLa)获得JWA蛋白缺陷细胞株(asJWA-HeLa),在含有S9的培... 目的研究JWA基因表达缺陷对苯并(a)芘诱导细胞DNA损伤与修复的影响及可能机制。方法构建JWA基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-asJWA),用该载体稳定转染人宫颈癌细胞(HeLa)获得JWA蛋白缺陷细胞株(asJWA-HeLa),在含有S9的培养条件下以50μmol/L苯并(a)芘处理细胞3 h,再恢复不同时间,用碱性单细胞凝胶电泳方法鉴定DNA损伤程度。结果asJWA-HeLa细胞JWA蛋白表达水平比对照下降了69%。在苯并(a)芘致DNA损伤模型中,asJWA-HeLa细胞的DNA损伤程度重于对照细胞,并且出现明显的DNA修复延迟现象。结论JWA作为一种新的环境应答基因,活跃地参与了苯并(a)芘诱导的HeLa细胞DNA损伤与修复过程,并在其中起着积极的保护作用。 展开更多

关键词 RNA 反义 转染 苯并芘 活性氧组分 DNA损伤

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氯化高铁血红素和热应激对JWA基因表达的影响 被引量：2

11

作者 赵明 陈瑞 +1 位作者 李爱萍 周建伟 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期209-213,共5页

目的探讨JWA基因在氯化高铁血红素(hemin)和热应激单独或联合作用下的表达规律。方法用Western blot方法检测JWA蛋白表达；用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测JWA mRNA表达变化；用氯霉素乙酰转移酶-酶联免疫吸附试验(CAT-ELISA)方... 目的探讨JWA基因在氯化高铁血红素(hemin)和热应激单独或联合作用下的表达规律。方法用Western blot方法检测JWA蛋白表达；用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测JWA mRNA表达变化；用氯霉素乙酰转移酶-酶联免疫吸附试验(CAT-ELISA)方法检测hemin和热应激对JWA基因近端启动子转录活性的影响。结果50μmol/L hemin处理K 562细胞1周可使JWA蛋白表达增高(3,23±0．57)倍；而30μmol/L hemin处理K 562细胞48 h可使JWA mRNA表达增加(1．37±0．06)倍。42℃处理K 562细胞2 h可使JWA蛋白表达增高(8．00±1．73)倍；42℃处理K 562细胞30 min可使JWA mRNA表达明显升高(1．87±0．13)倍。hemin和热应激联合作用于K 562细胞后,JWA蛋白和mRNA的表达均低于单独处理。CAT-ELISA结果显示hemin及热应激单独处理可上调各自反应元件的应答,但二者联合作用后反应元件的应答似乎呈现一种部分拮抗的作用。结论hemin和热应激可能分别通过JWA近端启动子上各自的反应元件而调节JWA基因的表达。 展开更多

关键词 基因 JWA 氯化血红素 热应激 基因表达

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