基金supported by the Natural Science Foundation of Hunan Province(No.2018JJ2347,2021JJ30595)Hunan University Student Innovation and Entrepreneurship Project,China(No.S202010555125)。
基金Natural Science Foundation of Hunan Province(Grant No.2018JJ2347,2021JJ30595)Hunan Provincial Postgrad uate Scientific Research Innovation Project(Grant No.CX20211061)and the Jishou University School-level Scientific Research Project(Grant No.Jdzd21028)。
文摘有文献报道,SIRT1-AMPK信号通路可能在DHM改善肝脏细胞甘油三酯蓄积、胰岛素抵抗等作用中发挥作用。为此,本课题拟进一步观察DHM对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪沉积的影响,并探讨其可能机制。C57BL/6J小鼠采用普通饲料和高脂饲料喂养,同时分别用或不用低剂量(125 mg/kg)或高剂量(250 mg/kg)的DHM处理16周。实验期间,每两周检测体重一次。16周后,眼眶静脉取血并处死动物,同时取肩胛下、附睾与腹股沟的脂肪并用电子秤进行称重,并记录脂肪重量。全自动生化分析仪检测:血清甘油三酯(triglyceride,TG)、血清总胆固醇(totalcholesterol,TC)、血清高密度脂蛋白(high-densitylipoprotein,HDL)、血清低密度脂蛋白(low-densitylipoprotein,LDL)。取肝脏甲醛固定、HE和油红O染色检测肝脏脂肪沉积情况;比色法检测肝脏MDA和SOD含量;Realtime PCR检测相关指标的基因表达:IL-6、IL-8、TNF-α、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)、固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARα)、棕榈酰转移酶1(carnitinepalmitoyltransferase1,CPT1)、SIRT1和AMPK。WesternBlot检测SIRT1、AMPK、SIRT1-AMPK、ACC、SREBP-1、FAS、PPARα和CPT1的蛋白表达水平。与ND组相比,HFD组小鼠体重、体脂显著增加;TG、TC、LDL水平增加,HDL水平降低,肝细胞体积增大,脂滴数量、脂肪沉积、MDA、IL-6、IL-8、TNF-α、SREBP-1c、FAS、ACC1水平显著增加,SOD活力、PPARα、CPT1、SIRT1m RNA和AMPKm RNA、SIRT1、AMPK PPARα、CPT1蛋白水平显著下降。DHM能显著逆转HFD组小鼠上述指标的改变;但DHM对ND小鼠上述指标无显著影响。总之,DHM改善高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂肪沉积,其机制可能与抑制氧化应激、炎症和脂质合成,促进脂质分解有关。
