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基于λ核酸外切酶辅助的级联型铜离子荧光检测体系的构建
1
作者 刘陈 刘金权 +2 位作者 郦瑜杰 廖力夫 肖锡林 《南华大学学报（自然科学版）》 2022年第3期69-76,共8页
通过将一种有效的级联信号放大策略引入铜离子荧光生物传感器中,构建了一种用于超灵敏检测铜离子的荧光检测体系。这种级联型荧光检测体系结合了λ核酸外切酶辅助的靶标回收和催化发夹自组装的循环信号扩增。在铜离子的存在下,用于识别... 通过将一种有效的级联信号放大策略引入铜离子荧光生物传感器中,构建了一种用于超灵敏检测铜离子的荧光检测体系。这种级联型荧光检测体系结合了λ核酸外切酶辅助的靶标回收和催化发夹自组装的循环信号扩增。在铜离子的存在下,用于识别铜离子的功能核酸的底物链被特异性切割和释放。释放出的单链DNA片段(tDNA)与5′端被磷酸标记的双链DNA(TQ-DNA)杂交形成具有平末端的双链DNA。随后,该DNA分子被λ核酸外切酶识别并切割,释放出游离的tDNA和TDNA。随着λ核酸外切酶的水解,越来越多的tDNA被回收,同时放出越来越多的TDNA。此时,TDNA作为催化发夹自组装反应的触发链,启动了新一轮的靶标循环。在TDNA的辅助下,作为分子信标的发夹DNA会与另外一个发夹DNA杂交形成新的双链DNA,同时,释放出高荧光强度。利用荧光光谱法对该体系不同反应阶段进行了表征。结果表明,该级联型铜离子荧光检测体系对痕量铜离子具有很好的响应。 展开更多
关键词 荧光核酸传感器 级联反应 λ核酸外切酶 催化发夹自组装 铜离子
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钙蛋白酶在TOCP诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬中的调节作用
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作者 石晟源 肖双 +1 位作者 胡泽慧 龙鼎新 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第3期313-318,共6页
目的探究钙蛋白酶对三邻甲苯基磷酸酯(TOCP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬的调节作用。方法不同浓度TOCP处理未分化和分化的SH-SY5Y细胞,用荧光分光光度法检测钙蛋白酶活性。抑制钙蛋白酶活性后,通过Western blotting检测TOCP对... 目的探究钙蛋白酶对三邻甲苯基磷酸酯(TOCP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞自噬的调节作用。方法不同浓度TOCP处理未分化和分化的SH-SY5Y细胞,用荧光分光光度法检测钙蛋白酶活性。抑制钙蛋白酶活性后,通过Western blotting检测TOCP对自噬相关蛋白的影响;抑制钙通道后,用荧光分光光度法检测胞质钙离子浓度对钙蛋白酶活性的影响。结果TOCP诱导未分化和分化的SH-SY5Y细胞钙蛋白酶活性上升;钙蛋白酶抑制剂可降低TOCP诱导的自噬相关蛋白LC3-II和Beclin1表达。维拉帕米和2-APB阻断钙通道后钙蛋白酶活性降低,维拉帕米而非2-APB可以抑制TOCP诱导的自噬相关蛋白LC3-II表达。结论TOCP在未分化和分化的SH-SY5Y细胞中诱导的自噬受钙蛋白酶活性的调节。 展开更多
关键词 自噬 钙蛋白酶 SH-SY5Y细胞系 TOCP
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中国中老年人血清维生素D与甲状旁腺素浓度的关系 被引量：1
3
作者 厉玉婷 胡贻椿 +3 位作者 单晓云 杨晶鑫 曹杨 杨丽琛 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期877-884,共8页
目的探讨中国50岁及以上中老年人血清25-羟基维生素D[25(OH)D]浓度与甲状旁腺素浓度的关系,初步探索中老年人维生素D适宜营养状况的界值并应用于该人群代谢综合征的风险预测。方法从2015年中国成人慢性病与营养监测生物样本库中按年龄... 目的探讨中国50岁及以上中老年人血清25-羟基维生素D[25(OH)D]浓度与甲状旁腺素浓度的关系,初步探索中老年人维生素D适宜营养状况的界值并应用于该人群代谢综合征的风险预测。方法从2015年中国成人慢性病与营养监测生物样本库中按年龄、性别分层随机抽取50岁及以上的成年人样本750例,采用问卷调查收集基本信息(年龄、性别、季节等)并进行体格测量。血清中25(OH)D浓度检测采用液相色谱-质谱联用法,白细胞介素-6、甲状旁腺素含量测定采用电化学发光法,磷、白蛋白、肌酐等指标的测定采用全自动生化分析仪。采用多重线性回归筛选影响25(OH)D浓度、甲状旁腺素含量的相关因素,并通过广义加性模型进行校正,采用局部加权散点平滑法预测甲状旁腺素的拐点值,以非线性最小二乘和分段线性回归确定甲状旁腺素达到平台期的25(OH)D界值。以上述界值为切点,采用多因素Logistic回归分析中老年人不同25(OH)D切点与代谢综合征的关系。结果中国50岁及以上中老年人血清25(OH)D缺乏的界值为19.62 ng/mL,充足的界值为28.44 ng/mL。校正性别、年龄、地区、季节等混杂因素后,25(OH)D充足(≥28.44 ng/mL)能够显著降低本研究中老年人代谢综合征风险[OR=0.617(0.439~0.869)]。按性别分层分析,经局部加权散点平滑法初步获得甲状旁腺素处于平台期时25(OH)D的浓度范围,男性、女性分别为20.03~28.43、13.12~26.33 ng/mL;但未能获得有统计学意义的切点。结论本研究观察到中国50岁以上中老年人血清25(OH)D浓度为19.62~28.44 ng/mL时可使甲状旁腺素达到最大抑制,该界值可能因性别而异。更充足的维生素D界值水平(28.44 ng/mL)对该人群的代谢综合征风险具有保护作用。 展开更多
关键词 中老年人 维生素D 界值 甲状旁腺素 代谢综合征
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