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广东地区SARS-COV细胞培养模型的建立和初步应用
1
作者 赵卫 方丹云 +5 位作者 周经姣 张文炳 晏辉钧 胡族琼 龙北国 江丽芳 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第1期13-15,共3页
目的 :建立中国广东地区SARS-CoV细胞培养模型。方法 :通过将SARS -CoV广东地区分离株GD32 2在VeroE6细胞中连续传代 ,检测TCID5 0 ,获得稳定的细胞模型。利用此细胞培养模型 ,对不同温度、紫外线等条件下SARS -CoV的存活时间进行了比... 目的 :建立中国广东地区SARS-CoV细胞培养模型。方法 :通过将SARS -CoV广东地区分离株GD32 2在VeroE6细胞中连续传代 ,检测TCID5 0 ,获得稳定的细胞模型。利用此细胞培养模型 ,对不同温度、紫外线等条件下SARS -CoV的存活时间进行了比较。对重组人复合干扰素α抗病毒效果进行了筛查。结果与结论 :SARS -CoV对外界环境抵抗力比普通冠状病毒强 ,对重组人复合干扰素α有较高的敏感性 ,抑制指数达 4 .9。 展开更多
关键词 SARS冠状病毒 细胞模型 温度 干扰素
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SARS冠状病毒M基因的克隆及其表达
2
作者 晏辉钧 赵卫 +5 位作者 方丹云 周经姣 龙北国 张文炳 郭辉玉 江丽芳 《中国病毒学》 CSCD 2005年第1期1-4,共4页
从SARS冠状病毒(GD322株)组织培养上清中提取 RNA,进行 RT PCR扩增其 M基因并克隆到巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB,电穿孔法将重组体整合入酵母菌 P. pastoris,经抗生素 Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定,取Mut+菌用甲醇诱导表达,SD... 从SARS冠状病毒(GD322株)组织培养上清中提取 RNA,进行 RT PCR扩增其 M基因并克隆到巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB,电穿孔法将重组体整合入酵母菌 P. pastoris,经抗生素 Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定,取Mut+菌用甲醇诱导表达,SDS PAGE检测其表达产物。Mut+ 酵母转化菌经甲醇诱导可分泌表达约 65kDa和42 kDa的蛋白质,与SARS恢复期病人血清的免疫印迹证实它们为特异的重组M蛋白质,且获得的重组M蛋白质具有免疫反应性。 展开更多
关键词 SARS冠状病毒 M基因 克隆 巴氏毕赤酵母 表达
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