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不同胎龄小鼠脑组织中神经干细胞所占比例的研究 被引量:3
1
作者 张凤兰 杨璐军 +4 位作者 朱红梅 张南炀 沙学芳 朱柯颖 肖志成 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第7期48-52,共5页
目的详细了解并比较不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞(neural stem cells,NSCs)所占比例,为后期优化分离培养NSCs提供直接量化数据。方法分离不同胎龄小鼠全脑(胎龄12.5、14、16和18d)和大脑皮层(胎龄14、16和18 d)组织,消... 目的详细了解并比较不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞(neural stem cells,NSCs)所占比例,为后期优化分离培养NSCs提供直接量化数据。方法分离不同胎龄小鼠全脑(胎龄12.5、14、16和18d)和大脑皮层(胎龄14、16和18 d)组织,消化成单细胞悬液,贴壁培养3~4 h,细胞免疫荧光标记NSCs特异性标记物Nestin,统计分析各组中NSCs所占比例。另外,通过实时荧光定量PCR技术检测Nestin mRNA在不同胎龄(12.5、14、16和18 d)小鼠大脑皮层中的表达水平。结果细胞免疫荧光结果显示,分离培养的不同胎龄小鼠全脑和大脑皮层组织中均有Nestin阳性细胞。在分离培养的小鼠全脑组织中胎龄12.5 d组NSCs所占比例最高,为53.42%±1.57%;胎龄18 d组NSCs所占比例最低,为25.96%±1.31%,而胎龄14 d组和16 d组位于二者之间。在分离培养的不同胎龄小鼠大脑皮层组织中,胎龄14 d组NSCs所占比例最高,为33.65%±0.29%;胎龄18d组比例最低,为25.29%±0.28%,胎龄16 d组位于二者之间(26.82%±0.30%)。实时荧光定量PCR结果显示,当把胎龄12.5 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA表达水平设定为1,胎龄14 d组的小鼠大脑皮层组织中Nestin mRNA的相对表达量为0.83±0.04,胎龄16 d组为0.77±0.05,胎龄18 d组为0.44±0.05。因此,随着小鼠胎龄增加,小鼠大脑皮层中的Nestin mRNA的表达水平逐渐下降。结论在小鼠大脑发育过程中,随着胎龄增加,分离培养的小鼠全脑和大脑皮层组织中神经干细胞比例逐渐降低。 展开更多
关键词 小鼠 不同胎龄 神经干细胞 全脑 大脑皮层
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重视癫痫的外科治疗 被引量:4
2
作者 柯以铨 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第12期2067-2069,共3页
据世界卫生组织估计,全球大约有5千万癫痫患者。国内流行病学资料显示,我国癫痫"终生患病率"在0.4%~0.7%之间,而活动性癫痫约有600万左右,同时每年有40万左右的新发癫痫患者。癫痫发作常给患者造成巨大的生理和心理障碍,严重影响患... 据世界卫生组织估计,全球大约有5千万癫痫患者。国内流行病学资料显示,我国癫痫"终生患病率"在0.4%~0.7%之间,而活动性癫痫约有600万左右,同时每年有40万左右的新发癫痫患者。癫痫发作常给患者造成巨大的生理和心理障碍,严重影响患者的生存质量,给家庭和社会带来沉重的压力。 展开更多
关键词 癫痫患者 外科治疗 世界卫生组织 流行病学资料 终生患病率 心理障碍 癫痫发作 生存质量
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底蜕膜间充质干细胞分化为多巴胺能样神经元 被引量:1
3
作者 卢国辉 蒋春梅 +1 位作者 洪涛 张世忠 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2013年第4期322-326,共5页
目的探讨人胎盘底蜕膜间充质干细胞体外向多巴胺能样神经元分化的潜能,并优化诱导方案。方法体外分离培养底蜕膜间充质干细胞,用表皮生长因子(EGF)+人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)+B27添加剂和人音猬因子(SHH)+成纤维细胞生长因子8(FGF... 目的探讨人胎盘底蜕膜间充质干细胞体外向多巴胺能样神经元分化的潜能,并优化诱导方案。方法体外分离培养底蜕膜间充质干细胞,用表皮生长因子(EGF)+人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)+B27添加剂和人音猬因子(SHH)+成纤维细胞生长因子8(FGF8)+forskolin+脑源性神经营养因子(BDNF)分两个阶段对其进行诱导;免疫细胞化学先后检测干细胞标记nestin和CD133、成熟神经元标记神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质细胞标记胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、多巴胺能神经元标记酪氨酸羟化酶(TH)的表达;Western blot验证诱导后TH蛋白的表达;高效液相色谱-电化学检测诱导前后多巴胺的分泌。结果经第一阶段诱导后,细胞形成漂浮生长的神经球,nestin和CD133均呈阳性表达;第二阶段诱导后,出现明显的神经元样形态,NSE、GFAP和TH均阳性表达,Western blot也显示TH蛋白的表达,多巴胺分泌量相比诱导前明显增加(P<0.001)。结论底蜕膜间充质干细胞体外可分化为多巴胺能样神经元,可能成为帕金森病干细胞移植治疗新的种子细胞来源。 展开更多
关键词 胎盘 底蜕膜 间充质干细胞 多巴胺能样神经元 分化
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神经干细胞治疗帕金森病 被引量:2
4
作者 张世忠 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第16期2875-2877,共3页
在人体疾病的干细胞治疗中,许多疾病都取得了显著临床疗效,如白血病、糖尿病等疾病的治疗。但国际公认的体现一个国家或实验机构干细胞水平的还是神经干细胞的临床治疗结果,而在神经系统疾病中由于帕金森病发病机制相对明了,临床症... 在人体疾病的干细胞治疗中,许多疾病都取得了显著临床疗效,如白血病、糖尿病等疾病的治疗。但国际公认的体现一个国家或实验机构干细胞水平的还是神经干细胞的临床治疗结果,而在神经系统疾病中由于帕金森病发病机制相对明了,临床症状典型,且目前尚无有效的治疗方法而被关注,常常被认为是干细胞的试金石。 展开更多
关键词 干细胞治疗 神经干细胞 帕金森病 人体疾病 神经系统疾病 临床疗效 临床治疗 细胞水平
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延迟性颞叶放射性脑病外科手术治疗分析 被引量:1
5
作者 谢东伟 赵信德 +1 位作者 周忠保 黄柒金 《岭南现代临床外科》 2015年第6期714-718,共5页
目的探讨外科手术在延迟性颞叶放射性脑病治疗中的应用价值。方法回顾分析我科2010年8月至2014年12月采用手术治疗的14例延迟性颞叶放射性脑病患者临床资料,总结分析其临床表现、影像学检查、术中所见、术中CT应用、病理检查、术后护理... 目的探讨外科手术在延迟性颞叶放射性脑病治疗中的应用价值。方法回顾分析我科2010年8月至2014年12月采用手术治疗的14例延迟性颞叶放射性脑病患者临床资料,总结分析其临床表现、影像学检查、术中所见、术中CT应用、病理检查、术后护理及手术疗效。结果术后患者恢复良好,9例病人头晕、头痛等症状完全缓解;4例部分缓解;1例无明显改善。手术前后MRI检查对比可见病灶坏死组织大部切除;病理检查示脑组织变性、坏死,水肿明显,未见肿瘤组织。8例患者使用术中CT,均准确切除坏死脑组织,且未见术野内外发生出血;6例未使用术中CT监测,1例出现对侧硬膜外血肿,行二次手术清除血肿。结论对于延迟性颞叶放射性脑病患者,适时采取积极手术治疗,辅以术中CT监测,加强围手术期护理,可改善此类患者的症状;早期诊断,提高患者生存质量。 展开更多
关键词 放射性脑病 外科手术治疗 术中CT
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神经外科三维可视化工作站的研制及临床初步应用 被引量:5
6
作者 陈祎招 黄大勇 +4 位作者 徐如祥 聂永庚 王向宇 张世忠 柯以铨 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期891-894,共4页
目的探索一款适用于神经外科的直观且精确可靠的三维可视化定位系统及影像学信息存储、管理工具。方法通过自行研制的神经外科影像与手术工作平台系统f简称神经外科工作站,又称神经外科三维可视化工作站1对7例重型颅脑外伤硬膜外血肿... 目的探索一款适用于神经外科的直观且精确可靠的三维可视化定位系统及影像学信息存储、管理工具。方法通过自行研制的神经外科影像与手术工作平台系统f简称神经外科工作站,又称神经外科三维可视化工作站1对7例重型颅脑外伤硬膜外血肿、凹陷性骨折,8例垂体瘤,5例脑胶质瘤,3例脑膜瘤患者的影像学资料进行三维重建,根据外科手术要求在工作站上进行手术计划,辅助行手术治疗。结果神经外科三维可视化工作站可以直观显示颅内各种病变与各解剖结构、体表标志的三维空间量化关系,迅速辅助定位并设计最佳个体化手术人路,提高手术精确性与手术效率。同时,神经外科三维可视化工作站可便捷管理患者影像学资料及手术录像等各种信息,提高科研与临床工作效率。结论神经外科三维可视化工作站是一种直观快捷、功能强大的神经外科手术辅助工具及影像学信息管理工具。 展开更多
关键词 神经外科 信息技术 三维重建 计算机工作站
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γ-氨基丁酸治疗帕金森病的研究展望 被引量:3
7
作者 郭燕舞 李明 张世忠 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第18期2991-2993,共3页
帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是威胁老年人健康的一类重大疾病,国外的统计资料表明,PD的自然发病率为0.1%~0.2%,其中在55岁以上人群发病率上升为1.4%,75岁以上人群为3.4%。随着社会老龄化日益加重,PD患者发病率... 帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是威胁老年人健康的一类重大疾病,国外的统计资料表明,PD的自然发病率为0.1%~0.2%,其中在55岁以上人群发病率上升为1.4%,75岁以上人群为3.4%。随着社会老龄化日益加重,PD患者发病率及致残率在世界范围内显著增加。美国目前约有50万PD患者,且以每年5万例的速度递增。 展开更多
关键词 帕金森病 Γ-氨基丁酸 治疗 老年人健康 社会老龄化 发病率 重大疾病 统计资料
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“立体定向神经外科技术治疗精神疾病专家共识”解读 被引量:5
8
作者 张陈诚 李殿友 +6 位作者 占世坤 王伟 张建国 高国栋 王学廉 张世忠 孙伯民 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期109-111,共3页
2014年1月journal of Neurology,Neurosurgery & Psychiatry发表了由世界立体定向与功能神经外科学会精神疾病外科治疗委员会,脑深部电刺激术(DBS)在精神疾病中的研究与应用工作组,及美国、欧洲、亚洲、南美洲功能神经外科学会和世... 2014年1月journal of Neurology,Neurosurgery & Psychiatry发表了由世界立体定向与功能神经外科学会精神疾病外科治疗委员会,脑深部电刺激术(DBS)在精神疾病中的研究与应用工作组,及美国、欧洲、亚洲、南美洲功能神经外科学会和世界精神病学会的20多个国家和地区专家,历时近3年时间共同制定的精神疾病外科治疗专家共识[1],以规范神经外科手术治疗精神类疾病的适应证及临床试验标准。中国医师协会神经调控专业委员会结合中国国情就该共识解读如下。 展开更多
关键词 立体定向 精神疾病 专家共识
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神经外科疾病并发SIADH和CSWS的治疗 被引量:2
9
作者 周振军 黄元媛 +1 位作者 郭燕舞 王清华 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2008年第8期850-851,共2页
低钠血症是神经外科临床常见疾病,多因利尿、尿崩症、抗利尿激素分泌不当综合征(syndrome of inappropriate antidiuretic hormone secretion,SIADH)、脑性盐耗综合征(cerebfal salt wasting syndrome,CSWS)引起.其中SIADH和CSW... 低钠血症是神经外科临床常见疾病,多因利尿、尿崩症、抗利尿激素分泌不当综合征(syndrome of inappropriate antidiuretic hormone secretion,SIADH)、脑性盐耗综合征(cerebfal salt wasting syndrome,CSWS)引起.其中SIADH和CSWS引起的低钠血症比较顽固.如不及时正确诊断和有效治疗,其会加重原发病的程度,增加治疗难度.后果非常严重,甚至危及生命。自1994年7月至2007年12月珠江医院神经外科住院患者中有736例出现低钠血症.其中SIADH23例。CSWS13例,我们针对不同的疾病采取相对应的治疗措施。取得满意的治疗效果.现总结如下。 展开更多
关键词 抗利尿激素分泌不当综合征 脑性盐耗综合征
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标准大骨瓣减压术治疗大面积脑梗死随机对照临床研究 被引量:1
10
作者 黎华清 黎志洲 张旺明 《吉林医学》 CAS 2015年第15期3218-3220,共3页
目的:探讨标准大骨瓣减压-硬膜扩大减张缝合术(治疗组)和标准大骨瓣减压-颞肌贴敷术(对照组)两种不同方法治疗大面积脑梗死的疗效、术后并发症及对Ⅱ期颅骨缺损修补的影响。方法:对32例治疗组的大面积脑梗死患者和30名对照组的大面积脑... 目的:探讨标准大骨瓣减压-硬膜扩大减张缝合术(治疗组)和标准大骨瓣减压-颞肌贴敷术(对照组)两种不同方法治疗大面积脑梗死的疗效、术后并发症及对Ⅱ期颅骨缺损修补的影响。方法:对32例治疗组的大面积脑梗死患者和30名对照组的大面积脑梗死患者进行比较,分析两组患者的减压后情况、6个月后疗效、术后并发症及Ⅱ期颅骨缺损修补的差异。结果:治疗组与对照组比较,减压后情况和6个月后疗效无显著性差异(P>0.05);硬膜下积液、术后脑膨出、癫痫等术后并发症及Ⅱ期颅骨缺损修补在手术时间及出血量方面治疗组明显低于对照组(P<0.05),有统计学意义。结论:大面积脑梗死患者,采用标准大骨瓣减压-硬膜扩大减张缝合术能保障减压效果,减少术后并发症,提高存活患者的生存质量,缩短颅骨缺损修补术手术时间,减少出血量。 展开更多
关键词 标准大骨瓣减压 硬膜扩大减张缝合术 颞肌贴敷术 大面积脑梗死
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重型颅脑损伤患者颅内压与神经元特异性烯醇化酶、D-二聚体及C反应蛋白的相关性研究 被引量:30
11
作者 赵鹏洲 柯以铨 +3 位作者 吴敬伦 李雪贞 杨本生 方胜 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期506-510,共5页
目的 探讨重型颅脑损伤患者颅内压(ICP)的改变与神经元特异性烯醇化酶(NSE)、D-二聚体(D-D)及C反应蛋白(CRP)变化之间的关系.方法 选取自2012年1月至2014年1月南方医科大学附属江门医院神经外科收治的35例重型颅脑损伤患者作为... 目的 探讨重型颅脑损伤患者颅内压(ICP)的改变与神经元特异性烯醇化酶(NSE)、D-二聚体(D-D)及C反应蛋白(CRP)变化之间的关系.方法 选取自2012年1月至2014年1月南方医科大学附属江门医院神经外科收治的35例重型颅脑损伤患者作为重型颅脑损伤组,体检中心接收的20例健康体检者作为对照组.(1)采用ICP监护传感器置入术监测重型颅脑损伤组患者的ICP,并根据ICP大小将患者分为ICP重度增高组(>40 mmHg)11例、ICP中度增高组(20~40mmHg)24例.(2)采用电化学发光免疫分析法及免疫比浊法检测重型颅脑损伤组患者外周血NSE、D-D、CRP水平,并与对照组进行比较.(3)采用直线相关分析和多元逐步回归分析探讨重型颅脑损伤组患者ICP和NSE、D-D、CRP的关系.结果 与对照组[(12.11±2.35) μg/L、(0.39±0.61) mg/L、(3.72±0.69) mg/L]比较,ICP重度增高组、ICP中度增高组患者NSE、D-D、CRP水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);ICP重度增高组NSE、D-D、CRP水平[(104.08±7.90) μg/L、(1.55±0.26) mg/L、(47.66±8.60) mg/L]亦明显高于ICP中度增高组[(61.89±30.35) μg/L、(0.93±0.32) mg/L、(30.87±9.84)mg/L],差异亦有统计学意义(P<0.05).重型颅脑损伤患者ICP与NSE、D-D、CRP存在直线相关关系,NSE、D-D、CRP和ICP的回归方程分别是ICP=1 8.598+0.256NSE (t=7.200,P=0.000),ICP=10.779+23.955D-D(t=10.292,P=0.000),ICP=9.932+0.771CRP(t=8.423,P=0.000).多元逐步回归分析发现ICP与D-D的关系最为密切(复相关系数R=0.873,确定系数R2=0.762;F=105.917,P=0.000).结论 重型颅脑损伤患者ICP与血中NSE、D-D、CRP具有正相关性,其中与D-D的关系最为密切;联合应用ICP和NSE、D-D、CRP等实验室指标分析有利于重型颅脑损伤患者的诊治. 展开更多
关键词 颅脑损伤 颅内压 神经元特异性烯化酶 D-二聚体 C反应蛋白
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骨髓源及脂肪源干细胞向神经元样细胞诱导分化潜力的比较研究 被引量:12
12
作者 马旭 姜晓丹 +3 位作者 张洪钿 林建浩 闫中杰 秦玲莎 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期441-445,共5页
目的比较骨髓源基质干细胞(BMSCs)和脂肪源间充质干细胞(ADSCs)向神经元样细胞诱导分化的潜力。方法体外分离培养来自成年SD大鼠的BMSCs和ADSCs.传至第5代时加入表皮生长因子(EGF,10ng/mL)和碱性成纤维细胞生长因子fbFGF,20ng... 目的比较骨髓源基质干细胞(BMSCs)和脂肪源间充质干细胞(ADSCs)向神经元样细胞诱导分化的潜力。方法体外分离培养来自成年SD大鼠的BMSCs和ADSCs.传至第5代时加入表皮生长因子(EGF,10ng/mL)和碱性成纤维细胞生长因子fbFGF,20ng/mL),诱导6h、12h、24h、72h、1周、2周后,用免疫荧光染色和Western blot检测两种细胞的神经细胞特异性标志(巢蛋白和B.微管蛋白Ⅲ)的表达,并做统计学分析。结果BMSCs和ADSCs经诱导后,细胞形态发生变化,均表达神经细胞特异性标志。免疫荧光染色结果显示诱导后各时间点BMSCs和ADSCsnstin^J性率或B.tubulinllI阳性率比较差异均有统计学意义(P〈O.05),且诱导后ADSCs表达nestin阳性细胞或B—mbulinIII的能力在各个时间点都EE诱导后BMSCs强,说明诱导后的ADSCs向神经元样细胞方向分化的能力更强。Westernblot结果也与免疫荧光染色结果类似。结论两种不同来源的干细胞在分化成神经元样细胞方面的能力不同,ADSCs比BMSCs具有相对更强的神经元样细胞分化能力。 展开更多
关键词 骨髓源基质干细胞 脂肪源间充质干细胞 神经元样细胞 细胞分化
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乙状窦后入路显微手术切除大型听神经瘤的临床研究 被引量:6
13
作者 张良 徐如祥 +2 位作者 张洪钿 王金伟 成友军 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期592-594,共3页
目的探讨经乙状窦后入路显微镜下切除大型听神经瘤的手术技巧,减少神经损伤和并发症。方法采用经乙状窦后入路显微手术切除大型听神经瘤21例,对肿瘤暴露、显微手术技巧、手术中特殊情况及并发症进行分析。结果肿瘤全切除18例,次全切... 目的探讨经乙状窦后入路显微镜下切除大型听神经瘤的手术技巧,减少神经损伤和并发症。方法采用经乙状窦后入路显微手术切除大型听神经瘤21例,对肿瘤暴露、显微手术技巧、手术中特殊情况及并发症进行分析。结果肿瘤全切除18例,次全切除3例,面神经功能保留17例,听力保留5例。术中出现心跳短暂停止1例,术后短期并发症4例,无死亡病例。结论经乙状窦后入路显微镜下的切除大型听神经瘤是安全的手术方法,良好的手术技巧、对解剖的熟悉是全切肿瘤、减少神经损伤和并发症的关键。 展开更多
关键词 经乙状窦后入路 听神经瘤 显微外科手术
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中枢神经系统轴突再生抑制因子Nogo-A的研究进展 被引量:5
14
作者 谭峰 霍绮雯 陈强 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期319-321,共3页
急性脑梗死遗留的神经功能障碍一直是困扰世界医学的难题。各种抑制因素的作用是导致脑梗死患者中枢神经不能修复和再生,从而引起偏瘫、失语等后遗症的主要症结。新近发现.Nogo-A是最为强烈的神经纤维再生抑制因子,其通过与受体NgR... 急性脑梗死遗留的神经功能障碍一直是困扰世界医学的难题。各种抑制因素的作用是导致脑梗死患者中枢神经不能修复和再生,从而引起偏瘫、失语等后遗症的主要症结。新近发现.Nogo-A是最为强烈的神经纤维再生抑制因子,其通过与受体NgR等结合转导抑制信号,阻碍神经再生,是造成脑梗死后遗症的重要原因。本文就Nogo-A的研究概况、结构及功能等情况作一综述。 展开更多
关键词 NOGO-A NOGO受体 轴突再生
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不同来源成体神经干细胞促进大鼠脊髓损伤功能修复的比较研究 被引量:3
15
作者 蔡颖谦 张洪钿 +2 位作者 姜晓丹 徐如祥 郭琳琅 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期246-249,共4页
目的评价大脑、骨髓和脂肪组织3种不同来源的神经干细胞对大鼠脊髓挫伤的治疗效果。方法选取来源于同一大鼠成体中大脑、骨髓和脂肪的3个部位的组织,分离、诱导分化为不同来源的神经干细胞;应用自由落体损伤模型装置造成大鼠脊髓挫伤... 目的评价大脑、骨髓和脂肪组织3种不同来源的神经干细胞对大鼠脊髓挫伤的治疗效果。方法选取来源于同一大鼠成体中大脑、骨髓和脂肪的3个部位的组织,分离、诱导分化为不同来源的神经干细胞;应用自由落体损伤模型装置造成大鼠脊髓挫伤。将不同来源的神经干细胞分别移植入大鼠脊髓损伤部位,通过BBB评分比较修复脊髓损伤功能的效果,应用免疫荧光染色检测不同移植细胞在损伤脊髓中的存活、分布、迁移的情况。另设假手术对照组和生理盐水对照组。结果与假手术对照组和生理盐水对照组比较,3个细胞处理组BBB评分在2~8周开始增加,9周以后更加明显,差异开始有统计学意义(P〈0.05)。在移植后1周和4周,细胞移植组中脑源性神经干细胞(SVZ-NSs)组Brdu/nestin^+神经元存活的数目明显高于其他2组,但差异没有统计学意义(P〉0.05);到了第8周,3组均仅有少量Brdu/nestin^+细胞存活,相互之间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论植入来源于大脑、骨髓和脂肪组织的神经干细胞都可以在一定程度上提高脊髓损伤后运动功能恢复,但SVZ-NSs组的脊髓损伤大鼠运动功能恢复要比脂肪来源的神经干细胞(AD-NSs)组及骨髓来源的神经干细胞(BM-NSs)组更好。AD-NSs由于来源广泛和强有力的增殖能力,相比其他来源的神经干细胞,能是更好的选择。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经干细胞 细胞移植
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碱性成纤维细胞生长因子缓释微球促进神经干细胞生长的体外实验研究 被引量:2
16
作者 薛杉 吴钢 +6 位作者 祝爱萍 郭燕舞 汪求精 周振军 姜晓丹 柯以铨 全大萍 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期769-773,共5页
目的 制备一种能够负载足量碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)并且能够以理想的速度缓慢释放的载体. 方法 构建负载bFGF的缓释微球,并检测其体外释放过程.将bFGF缓释微球与神经干细胞共培养,以常规多次添加bFGF的神经干细胞培养组作为对照... 目的 制备一种能够负载足量碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)并且能够以理想的速度缓慢释放的载体. 方法 构建负载bFGF的缓释微球,并检测其体外释放过程.将bFGF缓释微球与神经干细胞共培养,以常规多次添加bFGF的神经干细胞培养组作为对照,用AlamarBlue法检测培养细胞的存活情况,ELISA法检测培养上清bFGF含量,定期观察细胞形态学变化,并进行巢蛋白荧光免疫细胞化学染色,检测神经干细胞标记物. 结果 AlamarBlue法检测结果显示,培养3d、5d时bFGF缓释微球组和常规培养组之间细胞增殖率差异有统计学意义(P<0.05).ELISA法检测结果显示,仅负载bFGF缓释微球组能测量到培养上清中bFGF含量,大致维持在200 pg/mL水平.细胞形态学观察发现bFGF缓释微球组能够在培养第3天即形成神经干细胞球,并且在培养第7天仍保持较好透光度,保持较好的细胞活性.荧光免疫细胞化学染色发现bFGF缓释微球组培养的神经干细胞球巢蛋白染色阳性. 结论 本课题组制作的bFGF缓释微球材料具有较好的生物相容性.缓慢释放的bFGF能够满足神经干细胞生长需要,并且保持神经干细胞自身的细胞特性.该bFGF缓释微球安全有效,可应用于中枢神经系统损伤的在体实验研究. 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 缓释 神经干细胞
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脑皮层创伤灶注射法移植神经干细胞实验研究 被引量:1
17
作者 李钢 徐如祥 +1 位作者 柯以铨 姜晓丹 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期125-130,共6页
目的观察食蟹猴自体骨髓源神经干细胞移植到大脑皮层创伤灶内的存活、生长情况。方法取骨髓分离、纯化骨髓基质细胞,培养诱导成神经干细胞,nestin染色表达阳性后再加入细胞标记物BrdU进行共培养7d待移植用。移植前将BrdU标记的神经干... 目的观察食蟹猴自体骨髓源神经干细胞移植到大脑皮层创伤灶内的存活、生长情况。方法取骨髓分离、纯化骨髓基质细胞,培养诱导成神经干细胞,nestin染色表达阳性后再加入细胞标记物BrdU进行共培养7d待移植用。移植前将BrdU标记的神经干细胞收集、离心,制成干细胞悬液,要求活细胞〉80%。食蟹猴在采用Allen’s打击法制作皮层创伤灶后,分即时移植(术后即在创伤灶注入,n=3)和延迟移植组(术后30d在创伤灶注入,n=3),用微量注射针将干细胞悬液注入到猴脑皮质损伤灶。同时设置对照组(n=1),在动物的左侧皮层制作创伤灶并按上述方法注射含同样浓度BrdU的神经干细胞培养液0.5mL,右侧皮层注入干细胞悬液。移植后1、3、6个月即时移植组、延迟移植组各灌杀1只食蟹猴,移植后6月灌杀对照组食蟹猴,做移植区组织切片染色检查。结果即时移植组和延迟移植组都可观察到脑皮层创伤灶内有棕褐色的B耐U标记阳性细胞,而对照组组织切片中则未见BrdU阳性表达细胞。移植后BrdU阳性表达细胞早期呈簇状分布,随后散在分布,6个月后细胞形态多样。移植后6个月在移植区邻近的脑白质内也可观察到有BrdU阳性表达的细胞。结论移植的骨髓源性神经干细胞在脑皮层创伤灶内有存活并可向邻近区域迁移。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 神经干细胞 颅脑损伤 细胞移植
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不同来源成体神经干细胞神经生物学特性比较的实验研究 被引量:1
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作者 蔡颖谦 唐艳平 +2 位作者 张洪钿 姜晓丹 徐如祥 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期446-450,455,共6页
目的 比较和评价来源于同一SD大鼠成体骨髓、脂肪和大脑的神经干细胞在体外自我更新、向神经元或神经胶质细胞分化的能力,对比三者体外分泌神经营养因子的能力,进一步评估和对比它们在移植修复中枢神经系统损伤的潜能.方法 选取来源于同... 目的 比较和评价来源于同一SD大鼠成体骨髓、脂肪和大脑的神经干细胞在体外自我更新、向神经元或神经胶质细胞分化的能力,对比三者体外分泌神经营养因子的能力,进一步评估和对比它们在移植修复中枢神经系统损伤的潜能.方法 选取来源于同一SD大鼠成体脑室下区、骨髓和脂肪3个部位的组织,体外分别诱导分化为脑室下区源性神经干细胞(SVZ-NSCs)、骨髓源性神经干细胞(BM-NSCs)和脂肪源性神经干细胞(AD-NSCs),比较三者的自我更新和分化情况;免疫细胞化学方法 、Western blot检测巢蛋白(nestin)、β-微管蛋白(β-tubulin)、GFAP和半乳糖脑苷脂(GalC)4种细胞表面标记物的表达:ELISA法定量检测体外培养3种组织来源的神经干细胞的BDNF和NGF的分泌水平.结果 3种组织来源基质细胞形成的神经球从外形观察无明显差异;体外扩增率由高到低依次为SVZ-NSCs、BM-NSCs和AD-NSCs.ELISA检测结果 表明3组细胞都能检测出BDNF和NGF分泌,但BM-NSCs组和AD-NSCs组明显低于SVZ-NSCs组,差异均有统计学意义(P〈0.05);AD-NSCs组BDNF和NGF的水平均稍高于BM-NSCs组. 结论 在增殖能力、向神经细胞终极分化的能力和分泌神经营养因子的能力等方面,BM-NSCs和AD-NSCs均稍逊于中枢神经组织来源的SVZ-NSCs,但由于其具有可来源于自体、无免疫排斥和伦理道德问题等优点,可超越SVZ-NSCs成为目前最有临床应用前景的移植用种子细胞.AD-NSCs来源更为丰富,取材更为简便,也更容易被患者接受,可能是更好的选择. 展开更多
关键词 神经干细胞 细胞分化 神经再生
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Rac1在人神经胶质瘤组织中的表达及其与病理分级的相关性研究 被引量:3
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作者 马燕侠 柯以铨 +3 位作者 杨志林 周申桃 李西锋 赵信德 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期373-376,共4页
目的观察Rac1mRNA及蛋白在神经胶质瘤组织中的表达情况,探讨Rac1与病理分级的相关性。方法应用免疫荧光组织化学、RT。PCR和Western blotting方法检测45例神经胶质瘤组织和10例正常晒组织标本中Rac1 mRNA及蛋白水平。结果3种检测结果... 目的观察Rac1mRNA及蛋白在神经胶质瘤组织中的表达情况,探讨Rac1与病理分级的相关性。方法应用免疫荧光组织化学、RT。PCR和Western blotting方法检测45例神经胶质瘤组织和10例正常晒组织标本中Rac1 mRNA及蛋白水平。结果3种检测结果均表明,Rac1在正常脑组织中无表达,45例脑胶质瘤中最多42例有Rac1表达,表达率与病理分级呈正相关,即脑胶质瘤病理级别越高,Rac1阳性表达率越高。结论Rac1在脑胶质瘤中的高表达与神经胶质瘤的侵袭、转移密切相关,可做为一个反映脑胶质瘤增殖能力和恶性程度的指标。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 RAC1 荧光免疫测定 聚合酶链反应 蛋白免疫印迹
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血小板活化特异性标志物PAC-1和CD62p与急性脑梗死病情严重程度的相关性 被引量:13
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作者 张炘 段传志 +5 位作者 李铁林 龙霄翱 何旭英 谭峰 方美凤 黄彪 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期698-701,共4页
目的探讨急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者血小板膜糖蛋白(glycoproteinⅡb/Ⅲa,GPⅡb/Ⅲa)纤维蛋白原受体PAC-1和P选择素(P-Selectin,CD62p)与ACI患者病情严重程度的相关性。方法采用流式细胞仪技术分别检测58例ACI患者... 目的探讨急性脑梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者血小板膜糖蛋白(glycoproteinⅡb/Ⅲa,GPⅡb/Ⅲa)纤维蛋白原受体PAC-1和P选择素(P-Selectin,CD62p)与ACI患者病情严重程度的相关性。方法采用流式细胞仪技术分别检测58例ACI患者急性期(<7 d)外周血PAC-1和CD62p含量,同时采用Barthel指数和NIHSS量表评分法对ACI患者进行神经功能学评分,并选取20名健康人作为对照组进行参考值测定。结果与对照组(0.22±0.13;4.21±1.11)相比,ACI患者PAC-1含量(0.92±0.40)和CD62p含量(7.07±3.07)在急性期(<7 d)显著升高(P<0.05;P<0.05),且与ACI患者病情严重程度成正相关(P<0.05;P<0.01)。结论 PAC-1和CD62p与ACI患者病情严重程度呈正相关。早期检测PAC-1和CD62p水平对于预防ACI发生、评估病情轻重以及判断预后有着重要的意义。 展开更多
关键词 PAC-1 CD62P ACI 病情 相关性
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