目的探讨糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)/线粒体分裂蛋白1(fission protein 1,Fis1)信号通路在甲基乙二醛(methylglyoxal,MG)诱导成骨细胞凋亡中的作用及机制。方法采用LiCl作为GSK3β抑制剂,将细胞随机分为4...目的探讨糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)/线粒体分裂蛋白1(fission protein 1,Fis1)信号通路在甲基乙二醛(methylglyoxal,MG)诱导成骨细胞凋亡中的作用及机制。方法采用LiCl作为GSK3β抑制剂,将细胞随机分为4组,即对照组、MG组、LiCl组和LiCl+MG组。采用MTT法检测细胞增殖活性,Tunel染色法分析细胞凋亡情况,Western blot法检测GSK3β、Fis1蛋白表达水平,MitoTracker Deep Red染色法分析线粒体形态。结果MTT法检测结果表明,MG抑制了成骨细胞增殖活性。Tunel染色法检测结果显示,MG诱导成骨细胞凋亡。Western blot法检测结果表明,MG处理后GSK3β蛋白磷酸化水平降低,Fis1蛋白表达水平增加。MitoTracker Deep Red染色法分析结果显示,MG处理后线粒体呈碎片化。在加入GSK3β抑制剂LiCl干预后,与MG组比较,其显著恢复了MG抑制的细胞增殖活性、减少细胞凋亡,同时GSK3β蛋白磷酸化水平升高,Fis1蛋白表达水平降低,并且恢复了线粒体形态。结论MG可能通过调控GSK3β/Fis1信号通路促进线粒体分裂增加,诱导成骨细胞凋亡。展开更多
文摘目的探讨糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK3β)/线粒体分裂蛋白1(fission protein 1,Fis1)信号通路在甲基乙二醛(methylglyoxal,MG)诱导成骨细胞凋亡中的作用及机制。方法采用LiCl作为GSK3β抑制剂,将细胞随机分为4组,即对照组、MG组、LiCl组和LiCl+MG组。采用MTT法检测细胞增殖活性,Tunel染色法分析细胞凋亡情况,Western blot法检测GSK3β、Fis1蛋白表达水平,MitoTracker Deep Red染色法分析线粒体形态。结果MTT法检测结果表明,MG抑制了成骨细胞增殖活性。Tunel染色法检测结果显示,MG诱导成骨细胞凋亡。Western blot法检测结果表明,MG处理后GSK3β蛋白磷酸化水平降低,Fis1蛋白表达水平增加。MitoTracker Deep Red染色法分析结果显示,MG处理后线粒体呈碎片化。在加入GSK3β抑制剂LiCl干预后,与MG组比较,其显著恢复了MG抑制的细胞增殖活性、减少细胞凋亡,同时GSK3β蛋白磷酸化水平升高,Fis1蛋白表达水平降低,并且恢复了线粒体形态。结论MG可能通过调控GSK3β/Fis1信号通路促进线粒体分裂增加,诱导成骨细胞凋亡。
