目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对人肝正常细胞L-02(human normal liver cell line-02)的作用及转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta typeⅠ,TβRⅠ)基因表达的影响.方法:体外培养L-02细胞、H.py...目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对人肝正常细胞L-02(human normal liver cell line-02)的作用及转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta typeⅠ,TβRⅠ)基因表达的影响.方法:体外培养L-02细胞、H.pylori;PCR法鉴定CagA+H.pylori和CagA-H.pylori,采用不同浓度的CagA+H.pylori和CagA-H.pylori作用于L-02细胞24 h,并设不加H.pylori的L-02细胞为阴性对照组;MTT法检测L-02细胞抑制率,通过Real-time PCR法检测各组TβRⅠ基因的表达.结果:MTT法结果显示,随着CagA+H.pylori、CagA-H.pylori浓度升高,对L-02细胞的抑制作用增强,与阴性对照组相比,差别均有统计学意义(P<0.05);在同一浓度,CagA+H.pylori对细胞的抑制作用较CagA-H.pylori明显,两组抑制率(%)分别为101 CFU/mL组10.960±0.231 vs 4.470±0.289;102 CFU/mL组25.310±0.398 vs 5.510±0.168;103 CFU/mL组33.130±0.312 vs 10.330±0.213;104 CFU/mL组54.570±0.245 vs 17.120±0.309;105 CFU/mL组79.450±0.402 vs 25.830±0.337;106 CFU/mL组90.210±0.271 vs 32.350±0.178,各组比较均t<0.05;Real-time PCR法检测中,随着CagA+H.pylori、CagA-H.pylori浓度升高,TβRⅠ表达逐渐升高,在同一浓度,CagA+H.pylori促TβRⅠ表达作用较CagA-H.pylori明显,两组TβRⅠ相对表达量分别为101 CFU/mL组1.65±0.101 vs 1.110±0.110;102 CFU/mL组2.770±0.198 vs 1.200±0.203;103 CFU/mL组4.590±0.112 vs 1.590±0.134;104 CFU/mL组5.470±0.145 vs 1.990±0.331;105 CFU/mL组7.450±0.102 vs 2.650±0.268;106 CFU/mL组8.570±0.221 vs 4.570±0.161,各组比较均t<0.05.结论:H.pylori对人肝正常细胞L-02细胞具有抑制作用并与浓度相关,菌液浓度越高,抑制细胞增殖作用明显,CagA+H.pylori的抑制作用比CagA-H.pylori强.H.pylori对L-02细胞作用后TβRⅠ基因表达增高并与浓度相关,CagA+H.pylori的影响比CagA-H.pylori大.H.pylori对L-02细胞抑制作用的可能机制是通过TβRⅠ基因表达改变干扰转化生长因子-β1/Smads信号通路传导而影响其生长.展开更多
文摘目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对人肝正常细胞L-02(human normal liver cell line-02)的作用及转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta typeⅠ,TβRⅠ)基因表达的影响.方法:体外培养L-02细胞、H.pylori;PCR法鉴定CagA+H.pylori和CagA-H.pylori,采用不同浓度的CagA+H.pylori和CagA-H.pylori作用于L-02细胞24 h,并设不加H.pylori的L-02细胞为阴性对照组;MTT法检测L-02细胞抑制率,通过Real-time PCR法检测各组TβRⅠ基因的表达.结果:MTT法结果显示,随着CagA+H.pylori、CagA-H.pylori浓度升高,对L-02细胞的抑制作用增强,与阴性对照组相比,差别均有统计学意义(P<0.05);在同一浓度,CagA+H.pylori对细胞的抑制作用较CagA-H.pylori明显,两组抑制率(%)分别为101 CFU/mL组10.960±0.231 vs 4.470±0.289;102 CFU/mL组25.310±0.398 vs 5.510±0.168;103 CFU/mL组33.130±0.312 vs 10.330±0.213;104 CFU/mL组54.570±0.245 vs 17.120±0.309;105 CFU/mL组79.450±0.402 vs 25.830±0.337;106 CFU/mL组90.210±0.271 vs 32.350±0.178,各组比较均t<0.05;Real-time PCR法检测中,随着CagA+H.pylori、CagA-H.pylori浓度升高,TβRⅠ表达逐渐升高,在同一浓度,CagA+H.pylori促TβRⅠ表达作用较CagA-H.pylori明显,两组TβRⅠ相对表达量分别为101 CFU/mL组1.65±0.101 vs 1.110±0.110;102 CFU/mL组2.770±0.198 vs 1.200±0.203;103 CFU/mL组4.590±0.112 vs 1.590±0.134;104 CFU/mL组5.470±0.145 vs 1.990±0.331;105 CFU/mL组7.450±0.102 vs 2.650±0.268;106 CFU/mL组8.570±0.221 vs 4.570±0.161,各组比较均t<0.05.结论:H.pylori对人肝正常细胞L-02细胞具有抑制作用并与浓度相关,菌液浓度越高,抑制细胞增殖作用明显,CagA+H.pylori的抑制作用比CagA-H.pylori强.H.pylori对L-02细胞作用后TβRⅠ基因表达增高并与浓度相关,CagA+H.pylori的影响比CagA-H.pylori大.H.pylori对L-02细胞抑制作用的可能机制是通过TβRⅠ基因表达改变干扰转化生长因子-β1/Smads信号通路传导而影响其生长.
