目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对人肝正常细胞L-02(human normal liver cell line-02)的作用及转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta typeⅠ,TβRⅠ)基因表达的影响.方法:体外培养L-02细胞、H.py...目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对人肝正常细胞L-02(human normal liver cell line-02)的作用及转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta typeⅠ,TβRⅠ)基因表达的影响.方法:体外培养L-02细胞、H.pylori;PCR法鉴定CagA+H.pylori和CagA-H.pylori,采用不同浓度的CagA+H.pylori和CagA-H.pylori作用于L-02细胞24 h,并设不加H.pylori的L-02细胞为阴性对照组;MTT法检测L-02细胞抑制率,通过Real-time PCR法检测各组TβRⅠ基因的表达.结果:MTT法结果显示,随着CagA+H.pylori、CagA-H.pylori浓度升高,对L-02细胞的抑制作用增强,与阴性对照组相比,差别均有统计学意义(P<0.05);在同一浓度,CagA+H.pylori对细胞的抑制作用较CagA-H.pylori明显,两组抑制率(%)分别为101 CFU/mL组10.960±0.231 vs 4.470±0.289;102 CFU/mL组25.310±0.398 vs 5.510±0.168;103 CFU/mL组33.130±0.312 vs 10.330±0.213;104 CFU/mL组54.570±0.245 vs 17.120±0.309;105 CFU/mL组79.450±0.402 vs 25.830±0.337;106 CFU/mL组90.210±0.271 vs 32.350±0.178,各组比较均t<0.05;Real-time PCR法检测中,随着CagA+H.pylori、CagA-H.pylori浓度升高,TβRⅠ表达逐渐升高,在同一浓度,CagA+H.pylori促TβRⅠ表达作用较CagA-H.pylori明显,两组TβRⅠ相对表达量分别为101 CFU/mL组1.65±0.101 vs 1.110±0.110;102 CFU/mL组2.770±0.198 vs 1.200±0.203;103 CFU/mL组4.590±0.112 vs 1.590±0.134;104 CFU/mL组5.470±0.145 vs 1.990±0.331;105 CFU/mL组7.450±0.102 vs 2.650±0.268;106 CFU/mL组8.570±0.221 vs 4.570±0.161,各组比较均t<0.05.结论:H.pylori对人肝正常细胞L-02细胞具有抑制作用并与浓度相关,菌液浓度越高,抑制细胞增殖作用明显,CagA+H.pylori的抑制作用比CagA-H.pylori强.H.pylori对L-02细胞作用后TβRⅠ基因表达增高并与浓度相关,CagA+H.pylori的影响比CagA-H.pylori大.H.pylori对L-02细胞抑制作用的可能机制是通过TβRⅠ基因表达改变干扰转化生长因子-β1/Smads信号通路传导而影响其生长.展开更多
目的:建立人肝癌细胞裸鼠移植瘤模型,并应用于苦参碱(matrine,Ma)的抑瘤作用观察.方法:将人肝癌细胞株Hep G2接种于BALB/c裸鼠腋部皮下,建立人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤动物模型.予Ma 100 mg/kg给药,随机分为给药3、2、1和0 wk(空白对照)...目的:建立人肝癌细胞裸鼠移植瘤模型,并应用于苦参碱(matrine,Ma)的抑瘤作用观察.方法:将人肝癌细胞株Hep G2接种于BALB/c裸鼠腋部皮下,建立人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤动物模型.予Ma 100 mg/kg给药,随机分为给药3、2、1和0 wk(空白对照)组,均采用腹腔注射给药,每周连续给药5 d,期间观察裸鼠的全身状况、接种部位成瘤时间,测量动物体质量、瘤体体积和质量、计算抑瘤率以及采用HE染色法进行瘤组织的病理学观察,进而初步评价Ma的抗肿瘤作用.结果:将人肝癌细胞Hep G2种植于裸鼠腋部皮下造移植瘤模型成功,成瘤率达100%;观察发现M a对肝癌皮下移植瘤有抑制作用,给药1、2、3 wk组的抑瘤率分别为8.3%、37.5%、54%,给药3、2 w k组与0、1 w k组比较差异具有统计学意义(均P<0.01),给药3w k组与2 w k组比较、给药1 w k组与0 w k组比较差异也具统计学意义(P<0.05);HE染色给药组癌组织基本结构和癌细胞形态与对照组无明显变化,给药期间各组裸鼠的体质量等全身状况未出现明显降低且组间差异不明显.结论:人肝癌细胞裸鼠移植瘤模型建立成功,在肝癌模型中,Ma具有一定的抑瘤作用且无明显不良反应,早期给药比晚期给药抑瘤作用明显.展开更多
文摘目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对人肝正常细胞L-02(human normal liver cell line-02)的作用及转化生长因子β受体Ⅰ(transforming growth factor-beta typeⅠ,TβRⅠ)基因表达的影响.方法:体外培养L-02细胞、H.pylori;PCR法鉴定CagA+H.pylori和CagA-H.pylori,采用不同浓度的CagA+H.pylori和CagA-H.pylori作用于L-02细胞24 h,并设不加H.pylori的L-02细胞为阴性对照组;MTT法检测L-02细胞抑制率,通过Real-time PCR法检测各组TβRⅠ基因的表达.结果:MTT法结果显示,随着CagA+H.pylori、CagA-H.pylori浓度升高,对L-02细胞的抑制作用增强,与阴性对照组相比,差别均有统计学意义(P<0.05);在同一浓度,CagA+H.pylori对细胞的抑制作用较CagA-H.pylori明显,两组抑制率(%)分别为101 CFU/mL组10.960±0.231 vs 4.470±0.289;102 CFU/mL组25.310±0.398 vs 5.510±0.168;103 CFU/mL组33.130±0.312 vs 10.330±0.213;104 CFU/mL组54.570±0.245 vs 17.120±0.309;105 CFU/mL组79.450±0.402 vs 25.830±0.337;106 CFU/mL组90.210±0.271 vs 32.350±0.178,各组比较均t<0.05;Real-time PCR法检测中,随着CagA+H.pylori、CagA-H.pylori浓度升高,TβRⅠ表达逐渐升高,在同一浓度,CagA+H.pylori促TβRⅠ表达作用较CagA-H.pylori明显,两组TβRⅠ相对表达量分别为101 CFU/mL组1.65±0.101 vs 1.110±0.110;102 CFU/mL组2.770±0.198 vs 1.200±0.203;103 CFU/mL组4.590±0.112 vs 1.590±0.134;104 CFU/mL组5.470±0.145 vs 1.990±0.331;105 CFU/mL组7.450±0.102 vs 2.650±0.268;106 CFU/mL组8.570±0.221 vs 4.570±0.161,各组比较均t<0.05.结论:H.pylori对人肝正常细胞L-02细胞具有抑制作用并与浓度相关,菌液浓度越高,抑制细胞增殖作用明显,CagA+H.pylori的抑制作用比CagA-H.pylori强.H.pylori对L-02细胞作用后TβRⅠ基因表达增高并与浓度相关,CagA+H.pylori的影响比CagA-H.pylori大.H.pylori对L-02细胞抑制作用的可能机制是通过TβRⅠ基因表达改变干扰转化生长因子-β1/Smads信号通路传导而影响其生长.
文摘目的:建立人肝癌细胞裸鼠移植瘤模型,并应用于苦参碱(matrine,Ma)的抑瘤作用观察.方法:将人肝癌细胞株Hep G2接种于BALB/c裸鼠腋部皮下,建立人肝癌细胞裸鼠皮下移植瘤动物模型.予Ma 100 mg/kg给药,随机分为给药3、2、1和0 wk(空白对照)组,均采用腹腔注射给药,每周连续给药5 d,期间观察裸鼠的全身状况、接种部位成瘤时间,测量动物体质量、瘤体体积和质量、计算抑瘤率以及采用HE染色法进行瘤组织的病理学观察,进而初步评价Ma的抗肿瘤作用.结果:将人肝癌细胞Hep G2种植于裸鼠腋部皮下造移植瘤模型成功,成瘤率达100%;观察发现M a对肝癌皮下移植瘤有抑制作用,给药1、2、3 wk组的抑瘤率分别为8.3%、37.5%、54%,给药3、2 w k组与0、1 w k组比较差异具有统计学意义(均P<0.01),给药3w k组与2 w k组比较、给药1 w k组与0 w k组比较差异也具统计学意义(P<0.05);HE染色给药组癌组织基本结构和癌细胞形态与对照组无明显变化,给药期间各组裸鼠的体质量等全身状况未出现明显降低且组间差异不明显.结论:人肝癌细胞裸鼠移植瘤模型建立成功,在肝癌模型中,Ma具有一定的抑瘤作用且无明显不良反应,早期给药比晚期给药抑瘤作用明显.
