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人层黏连蛋白α4链LG2组件单克隆抗体的制备
被引量：
2
1
作者
张艳宇
张玉静
+3 位作者
朱世成
金华
许金波
陆一鸣
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第8期958-959,共2页
关键词
层黏连蛋白α4链
LG2组件
抗体
单克隆
下载PDF
职称材料
小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的表达及纯化
2
作者
展德文
张玉静
+3 位作者
王艳春
孙兆增
刘纯杰
张兆山
《生物技术通讯》
CAS
2007年第1期38-40,共3页
目的:用原核表达的方法获得带有6×His标记的小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的重组蛋白。方法与结果:从小鼠心肌组织中提取总RNA,利用RT-PCR扩增出小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的cDNA片段,并与pET-28a载体连接,构建重组表达质粒pET-LG3...
目的:用原核表达的方法获得带有6×His标记的小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的重组蛋白。方法与结果:从小鼠心肌组织中提取总RNA,利用RT-PCR扩增出小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的cDNA片段,并与pET-28a载体连接,构建重组表达质粒pET-LG3,限制性酶切分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件基因的成熟肽编码序列。用IPTG诱导,LG3蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了表达,并经Ni-NTA层析柱获得纯化。结论:层粘连蛋白α_5 LG3组件的重组蛋白得到表达和纯化,为后续相关研究奠定了基础。
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关键词
小鼠
层粘连蛋白α_5
LG3组件
表达
纯化
下载PDF
职称材料
tTS/rtTA系统下调目的基因基础表达的细胞模型研究
被引量：
2
3
作者
张若霜
帅丽芳
+1 位作者
赵勇
陈系古
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期361-364,共4页
【目的】构建带有肝脏特异性启动子和tTS沉默子的四环素调控系统,观察其在人HepG2细胞内的表达,建立严密型四环素调控系统的HepG2细胞模型。【方法】通过二次分子克隆构建重组真核表达质粒载体pliv7-rtTA-tTS-Neo,用脂质体法将质粒pliv7...
【目的】构建带有肝脏特异性启动子和tTS沉默子的四环素调控系统,观察其在人HepG2细胞内的表达,建立严密型四环素调控系统的HepG2细胞模型。【方法】通过二次分子克隆构建重组真核表达质粒载体pliv7-rtTA-tTS-Neo,用脂质体法将质粒pliv7-rtTA-tTS-Neo及pliv7-rtTA-Neo转染人HepG2细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化,克隆扩增后瞬时转染pTRE-Luc质粒,强力霉素(1mg/L)诱导表达后检测荧光素酶活性,挑选出低背景和高诱导表达的HepG2细胞克隆。【结果】带有tTS的细胞株其诱导倍数明显高于不带有tTS的细胞株(192︰21),其中克隆9的诱导倍数最高(256),获得1株高表达、低背景的HepG2/pLiv7-rtTA-tTS-Neo细胞株。【结论】荧光素酶活性检测结果验证了tTS对四环素调控系统的内在泄露问题有一定的抑制作用,使四环素调控系统的开关具有真正意义上的严密性。
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关键词
四环素调控系统
tTS沉默子
诱导表达
HEPG2细胞
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职称材料
题名
人层黏连蛋白α4链LG2组件单克隆抗体的制备
被引量：
2
1
作者
张艳宇
张玉静
朱世成
金华
许金波
陆一鸣
机构
军事医学科学院输血研究所
吉林大学生物化学教研室
军事医学科学院放射医学研究所
第二军医
大学
基础医学部医学遗传学
教研室
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第8期958-959,共2页
关键词
层黏连蛋白α4链
LG2组件
抗体
单克隆
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的表达及纯化
2
作者
展德文
张玉静
王艳春
孙兆增
刘纯杰
张兆山
机构
军事医学科学院
生物
工程研究所
吉林大学生物化学教研室
出处
《生物技术通讯》
CAS
2007年第1期38-40,共3页
文摘
目的:用原核表达的方法获得带有6×His标记的小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的重组蛋白。方法与结果:从小鼠心肌组织中提取总RNA,利用RT-PCR扩增出小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的cDNA片段,并与pET-28a载体连接,构建重组表达质粒pET-LG3,限制性酶切分析和DNA序列测定均证实该克隆插入片段为小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件基因的成熟肽编码序列。用IPTG诱导,LG3蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了表达,并经Ni-NTA层析柱获得纯化。结论:层粘连蛋白α_5 LG3组件的重组蛋白得到表达和纯化,为后续相关研究奠定了基础。
关键词
小鼠
层粘连蛋白α_5
LG3组件
表达
纯化
Keywords
mouse
laminin αs
LG3
expression
purification
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
tTS/rtTA系统下调目的基因基础表达的细胞模型研究
被引量：
2
3
作者
张若霜
帅丽芳
赵勇
陈系古
机构
中山
大学
实验动物中心
吉林大学生物化学教研室
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期361-364,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(103055)
文摘
【目的】构建带有肝脏特异性启动子和tTS沉默子的四环素调控系统,观察其在人HepG2细胞内的表达,建立严密型四环素调控系统的HepG2细胞模型。【方法】通过二次分子克隆构建重组真核表达质粒载体pliv7-rtTA-tTS-Neo,用脂质体法将质粒pliv7-rtTA-tTS-Neo及pliv7-rtTA-Neo转染人HepG2细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化,克隆扩增后瞬时转染pTRE-Luc质粒,强力霉素(1mg/L)诱导表达后检测荧光素酶活性,挑选出低背景和高诱导表达的HepG2细胞克隆。【结果】带有tTS的细胞株其诱导倍数明显高于不带有tTS的细胞株(192︰21),其中克隆9的诱导倍数最高(256),获得1株高表达、低背景的HepG2/pLiv7-rtTA-tTS-Neo细胞株。【结论】荧光素酶活性检测结果验证了tTS对四环素调控系统的内在泄露问题有一定的抑制作用,使四环素调控系统的开关具有真正意义上的严密性。
关键词
四环素调控系统
tTS沉默子
诱导表达
HEPG2细胞
Keywords
tetracycline-controlled expression system
tetracycline-controlled transcriptional silencer （tTS）
inducible expression
HepG2 cells
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人层黏连蛋白α4链LG2组件单克隆抗体的制备
张艳宇
张玉静
朱世成
金华
许金波
陆一鸣
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
2
下载PDF
职称材料
2
小鼠层粘连蛋白α_5 LG3组件的表达及纯化
展德文
张玉静
王艳春
孙兆增
刘纯杰
张兆山
《生物技术通讯》
CAS
2007
0
下载PDF
职称材料
3
tTS/rtTA系统下调目的基因基础表达的细胞模型研究
张若霜
帅丽芳
赵勇
陈系古
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
下载PDF
职称材料
已选择
0
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