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胎鼠脊髓神经干细胞分离方法的比较 被引量：4
1
作者 马红梅 郭筠秋 +1 位作者 张洪艳 汪美琪 《现代生物医学进展》 CAS 2006年第2期29-31,共3页
目的:比较机械法和胰酶消化法对胎鼠脊髓源神经干细胞增殖分化的影响。方法:分别用机械法和胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞,应用台盼蓝检测细胞成活率,用无血清培养技术培养神经干细胞,应用MTT法检测细胞分裂增殖能力,采用... 目的:比较机械法和胰酶消化法对胎鼠脊髓源神经干细胞增殖分化的影响。方法:分别用机械法和胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞,应用台盼蓝检测细胞成活率,用无血清培养技术培养神经干细胞,应用MTT法检测细胞分裂增殖能力,采用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞和分化细胞。结果:机械法获得的细胞数量多于胰酶消化法。细胞经过培养其增殖能力机械法略强于胰酶消化法,但无统计学意义。培养形成的细胞球Nestin阳性,诱导分化后可见NSE和GFAP阳性细胞。结论:运用机械法比胰酶消化法分离胎鼠脊髓组织获得神经干细胞方法简单,容易操作,经过培养细胞增殖能力较强。并可提供健康的细胞来源。 展开更多
关键词 神经干细胞 脊髓 分离 培养 机械法 胰酶消化法
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几丁质多孔体联合培养大鼠胎脑神经细胞脑内移植的实验研究 被引量：2
2
作者 田波 刘慧雯 +3 位作者 于宏伟 吴树亮 方冬云 魏国兴 《解剖科学进展》 CAS 2004年第3期215-218,220,共5页
目的　评价几丁质 (Chitin ,C)的生物相容性 ,研究几丁质与大鼠胎脑神经细胞 (FBN)复合体 (C FBN)脑内移植对脑损伤的修复作用。方法　将体外联合培养 3～ 5天的C FBN移植到大鼠大脑皮质损伤部位 ,术后 3、6、1 0、1 5及 30天光镜、免... 目的　评价几丁质 (Chitin ,C)的生物相容性 ,研究几丁质与大鼠胎脑神经细胞 (FBN)复合体 (C FBN)脑内移植对脑损伤的修复作用。方法　将体外联合培养 3～ 5天的C FBN移植到大鼠大脑皮质损伤部位 ,术后 3、6、1 0、1 5及 30天光镜、免疫细胞化学、透射电镜观察。结果　几丁质对FBN生长无不良影响 ,脑组织对移植物无明显的免疫排斥反应 ,载体内有大量存活神经细胞 ,术后各时段都检出BrdU阳性细胞 ,移植区可见突触形成。结论　几丁质具有良好的组织相容性 ,移植的FBN在脑内可以继续生长、成熟并建立突触联系。 展开更多
关键词 几丁质 多孔体 联合培养 大鼠 胎脑 神经细胞 脑内移植 实验 脑损伤 组织工程 生物材料
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小神经球体外和脊髓内移植促进神经干细胞向神经元分化
3
作者 梁鹏 孟巧稚 +3 位作者 徐薇 梁桃 刘恩重 金连弘 《立体定向和功能性神经外科杂志》 2005年第4期193-196,共4页
目的研究神经干细胞小神经球体外和脊髓内移植后的分化。方法从20周人胚胎分离神经干细胞进行鉴定,经培养成小神经球体外诱导分化;成年雌性Wistar大鼠于T11水平行椎板切开术并横切腰段脊髓,立体定向注射细胞50000个进入两侧脊髓断端中线... 目的研究神经干细胞小神经球体外和脊髓内移植后的分化。方法从20周人胚胎分离神经干细胞进行鉴定,经培养成小神经球体外诱导分化;成年雌性Wistar大鼠于T11水平行椎板切开术并横切腰段脊髓,立体定向注射细胞50000个进入两侧脊髓断端中线的3个部位(薄束、楔束及皮质脊髓束)。移植3个月后利用双标免疫荧光观察神经干细胞的分化情况。结果小神经球实验组在体外和受伤大鼠脊髓内诱导分化的神经元高于单细胞悬液对照组,前者有显著差异,后者有极显著差异。小神经球脊髓移植后细胞的存活率明显增加,与对照组相比有显著差异(P<0.05)。结论小神经球移植增加细胞的存活率,分化的神经元数量增加,应当成为较好的脊髓神经干细胞移植方式。 展开更多
关键词 脊髓损伤 干细胞 移植
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地塞米松对不同月龄雌性大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响
4
作者 聂雷生 陶树清 +2 位作者 张国峰 刘慧雯 陶天遵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2007年第6期385-389,共5页
目的观察体外培养的不同月龄雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体水平的差异及地塞米松(1×10-8mol/L)对不同月龄雌性大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响。方法采用酶消化法分别提取、纯化和培养新生(24h以内)、2、4、8、12月龄雌性Wistar... 目的观察体外培养的不同月龄雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体水平的差异及地塞米松(1×10-8mol/L)对不同月龄雌性大鼠成骨细胞雌激素受体表达的影响。方法采用酶消化法分别提取、纯化和培养新生(24h以内)、2、4、8、12月龄雌性Wistar大鼠成骨细胞,并且用Western-blot、ECL法检测体外培养成骨细胞雌激素受体的水平。结果提取的大鼠成骨细胞生长情况良好,碱性磷酸酶染色阳性,具有成骨细胞特性。Western-blot结果显示:雌性大鼠成骨细胞内雌激素受体水平在新生鼠和8月龄鼠较高,在2、4、12月龄鼠较低;地塞米松组成骨细胞雌激素受体表达水平在新生和2月龄低于对照组,在4、8、12月龄高于对照组。结论不同月龄雌性大鼠体外培养的成骨细胞雌激素受体的表达水平不同;1×10-8mol/L地塞米松对体外培养的雌性大鼠成骨细胞雌激素受体水平有影响且与大鼠的月龄有关。 展开更多
关键词 成骨细胞 地塞米松 雌激素受体 大鼠
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改良透射电镜方法观察小鼠ICSI胚胎核仁超微结构
5
作者 郑重 胡丽丽 +2 位作者 文刚 张宝东 雷蕾 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第2期154-158,共5页
小鼠植入前胚胎的发育过程中,核仁经历从简单到复杂、从致密结构到网状结构的变化。对核仁超微结构的观察有助于揭示早期胚胎发育过程中核仁结构的动态变化及其特定阶段的功能。但由于核仁结构微小,数目较少,并且在胚胎中只处于卵裂球... 小鼠植入前胚胎的发育过程中,核仁经历从简单到复杂、从致密结构到网状结构的变化。对核仁超微结构的观察有助于揭示早期胚胎发育过程中核仁结构的动态变化及其特定阶段的功能。但由于核仁结构微小,数目较少,并且在胚胎中只处于卵裂球细胞核的内部,难以定位,因而给核仁的超微结构观察带来很大的困难。本实验探索了透射电镜观察小鼠植入前胚胎核仁的方法:先用琼脂对小鼠胚胎进行预包埋,在经过常规的透射电镜样品制备流程后,将整个胚胎先切成半薄切片;经过甲苯胺蓝染色后,选取含核仁结构的切片进行重包埋;最后再对回收来的半薄切片进行超薄切片,醋酸铀染色后上电镜观察;最终成功获得小鼠胚胎植入前发育不同时期核仁清晰的透射电镜图像。 展开更多
关键词 小鼠胚胎 核仁 透射电镜 超微结构 重包埋
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