目的:探讨姜黄素预处理的外泌体对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,以期发现姜黄素治疗肝癌的新靶点及新途径。方法:采用CCK-8法检测不同浓度的姜黄素对肝癌细胞HUH-7活力的影响,并计算半数抑制浓度(IC)值。HUH-7细胞在姜黄素中暴露...目的:探讨姜黄素预处理的外泌体对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,以期发现姜黄素治疗肝癌的新靶点及新途径。方法:采用CCK-8法检测不同浓度的姜黄素对肝癌细胞HUH-7活力的影响,并计算半数抑制浓度(IC)值。HUH-7细胞在姜黄素中暴露48 h,采取改良超高速离心法提取姜黄素外泌体,应用透射电镜、纳米颗粒追踪分析仪、蛋白印迹方法分别进行外泌体形态、粒径、浓度及标志蛋白的鉴定。采用PKH-26标记姜黄素外泌体,采用长时间动态细胞成像系统观察姜黄素外泌体被HepG2细胞摄取情况。将姜黄素外泌体与HepG2细胞共培养,采用CCK-8法测定细胞活力,流式细胞仪计算细胞周期,TUNEL法观察细胞凋亡的形态特点,WB法检测B细胞淋巴瘤因子-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bcl-2-related X protein,BAX)表达,判断细胞凋亡的情况。结果:姜黄素对HUH-7细胞48 h IC值为41.46μmol/L;经证实提取物为外泌体,姜黄素预处理能增加细胞外泌体的分泌,但对外泌体形态、表面标志物及粒径大小无影响;PKH-26外泌体示踪结果显示HepG2细胞能摄取姜黄素外泌体,姜黄素外泌体能明显抑制细胞活力(P<0.05),能将HepG2细胞阻滞于G/M和S期(P<0.05),使BAX蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.01),能明显促HepG2细胞凋亡。结论:姜黄素预处理的外泌体能抑制肝癌细胞活力、阻滞细胞周期、促进细胞凋亡,表现出一定抗细胞增殖效应。展开更多
文摘目的:探讨姜黄素预处理的外泌体对肝癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,以期发现姜黄素治疗肝癌的新靶点及新途径。方法:采用CCK-8法检测不同浓度的姜黄素对肝癌细胞HUH-7活力的影响,并计算半数抑制浓度(IC)值。HUH-7细胞在姜黄素中暴露48 h,采取改良超高速离心法提取姜黄素外泌体,应用透射电镜、纳米颗粒追踪分析仪、蛋白印迹方法分别进行外泌体形态、粒径、浓度及标志蛋白的鉴定。采用PKH-26标记姜黄素外泌体,采用长时间动态细胞成像系统观察姜黄素外泌体被HepG2细胞摄取情况。将姜黄素外泌体与HepG2细胞共培养,采用CCK-8法测定细胞活力,流式细胞仪计算细胞周期,TUNEL法观察细胞凋亡的形态特点,WB法检测B细胞淋巴瘤因子-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bcl-2-related X protein,BAX)表达,判断细胞凋亡的情况。结果:姜黄素对HUH-7细胞48 h IC值为41.46μmol/L;经证实提取物为外泌体,姜黄素预处理能增加细胞外泌体的分泌,但对外泌体形态、表面标志物及粒径大小无影响;PKH-26外泌体示踪结果显示HepG2细胞能摄取姜黄素外泌体,姜黄素外泌体能明显抑制细胞活力(P<0.05),能将HepG2细胞阻滞于G/M和S期(P<0.05),使BAX蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调(P<0.01),能明显促HepG2细胞凋亡。结论:姜黄素预处理的外泌体能抑制肝癌细胞活力、阻滞细胞周期、促进细胞凋亡,表现出一定抗细胞增殖效应。
