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精子冻存技术及上游法精子处理技术对精子DNA完整性的影响 被引量：7
1
作者 许观照 张丽红 +6 位作者 王时灿 张伟 王琳琳 张琦 徐志才 李丽 房玉英 《生殖医学杂志》 CAS 2013年第12期945-950,共6页
目的通过对冷冻前后及精子处理前后精子DNA完整性的比较,探讨冷冻技术、冷冻时间及上游法精子处理技术对精子DNA完整性的影响。方法(1)精液常规检测正常的患者30例,手淫法取精,精液液化混匀后分4份,分别用于精子染色质扩散(SCD)实验检... 目的通过对冷冻前后及精子处理前后精子DNA完整性的比较,探讨冷冻技术、冷冻时间及上游法精子处理技术对精子DNA完整性的影响。方法(1)精液常规检测正常的患者30例,手淫法取精,精液液化混匀后分4份,分别用于精子染色质扩散(SCD)实验检测精子DNA完整性、上游法处理精液、以及两组冻存实验(不加保护剂直接冻存的为冻存1组;添加蛋黄葡萄糖保护剂冻存的为冻存2组);(2)上游法处理后的精液一部分用于检测精子动力和形态,一部分用于精子DNA完整性检测;(3)冻存1组分别于冻存第7天和第90天解冻,SCD实验检测精子DNA完整性;(4)冻存2组分别于第7天和第90天解冻,0.1 ml用于精子DNA完整性检测,剩余精液应用上游法处理,检测上游处理前后精子DNA的完整性。结果(1)冻存1组中,冻存90d后解冻的精子DNA损伤率[(25.6±7.3)%]显著高于冻存7d者[(22.4±7.4)%](P<0.05),且均显著高于新鲜精液的精子DNA损伤率[(20.6±7.3)%](P<0.05);冻存2组中,冻存90d后精子DNA损伤率显著高于冻存7d者[(25.9±7.2)%vs.(23.6±7.8)%](P<0.05),且均显著高于新鲜精液(P<0.05);而冻存7d和90d后,两个冻存组间比较,精子DNA损伤率均无显著差异(P>0.05)。(2)新鲜精液经上游法处理后,精子DNA损伤率由处理前的(20.6±7.3)%降为(6.4±2.5)%(P<0.05);冻存2组中精液冻存7d和90d后复苏上游法处理后,精子DNA损伤率较未经上游法处理者均显著降低[分别为(9.38±2.8)%vs.(23.6±7.8)%和(9.7±2.6)%vs.(25.9±7.2)%](P<0.05)。结论冻存对精子DNA有损伤,冻存时间对于精子DNA完整性有影响。不添加保护剂直接冻存和添加保护剂对精子DNA完整性的影响无显著差异。不论是新鲜精液还是冻存复苏精液,上游法处理并不会增加精子DNA的损伤,且有利于筛选出具有更好DNA完整性的精子。 展开更多
关键词 人类精子 DNA碎片 冷冻保存 上游法处理技术 精子染色质扩散实验
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精子染色质扩散实验及吖啶橙染色检测精子DNA完整性研究 被引量：1
2
作者 房振亚 张美华 +1 位作者 李安娜 邱毅 《医学诊断》 2017年第3期43-49,共7页
目的:采用精子染色质扩散(sperm chromatin dispersion, SCD)实验检测精子DNA碎片,分析比较SCD实验及吖啶橙染色实验(AOT)检测精子DNA完整性的应用价值。方法:对32例正常成年已生育的男性和27例特发性少精子症(idiopathic oligozoosperm... 目的:采用精子染色质扩散(sperm chromatin dispersion, SCD)实验检测精子DNA碎片,分析比较SCD实验及吖啶橙染色实验(AOT)检测精子DNA完整性的应用价值。方法:对32例正常成年已生育的男性和27例特发性少精子症(idiopathic oligozoospermia, IO)患者同时进行SCD实验和AOT,对检测结果进行分析。在SCD实验中,DNA完整性正常无损伤精子的DNA扩散产生大晕环或中晕环,而DNA损伤产生DNA碎片的精子不产生或产生很小的晕环。AOT染色实验中,正常精子DNA为双链,染成绿色,不成熟或损伤精子DNA为单链,染成红色、橙色或黄色。结果:SCD实验检测结果为:IO患者精子大晕环、中晕环、小晕环和无晕环精子百分率分别平均为(51.8 &#177;17.1)%、(9.4 &#177;8.6)%、(11.9 &#177;5.8)%和(26.7 &#177;10.6)%,健康对照组平均为(73.2 &#177;6.2)%、(14.8 &#177;5.7)%、(6.8 &#177;2.9)%及(5.3 &#177;2.2)%,二组比较,差异有统计学意义(t = 4.256, P 0.05)。结论:精子DNA完整性异常可导致男性不育。SCD实验是一种有效的精子DNA完整性检测方法。 展开更多
关键词 精子染色质扩散(SCD)实验 精子吖啶橙染色实验 精子DNA完整性 特发性少精子症 男性不育
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随机盲样检测在临床血液学室间质量评价中的应用 被引量：2
3
作者 张丽红 王秋菊 +6 位作者 张伟 樊云井 张艳萍 赵俭 蒋宝宏 张燕 许观照 《国际检验医学杂志》 CAS 2015年第15期2137-2138,2141,共3页
目的：通过对承担国家免费孕前健康检查项目单位临检实验室进行临床血液学检验随机盲样考核，有效促进项目单位临床血液学检验水平和质量。方法制备高、中、低三个等级的5个不同浓度的盲样样本，采用统一编号（2013～2014年每年2次常规... 目的：通过对承担国家免费孕前健康检查项目单位临检实验室进行临床血液学检验随机盲样考核，有效促进项目单位临床血液学检验水平和质量。方法制备高、中、低三个等级的5个不同浓度的盲样样本，采用统一编号（2013～2014年每年2次常规室间质评）和随机编号（2014年第1次常规室间质评同时进行1次随机盲样检测考核）相结合的方法进行质控品样本发放。项目单位临检实验室收到盲样样本后按要求进行检测。室间质评组织者对回报结果进行评分。结果134家参评单位在4次临床血液学常规室间质评中合格率分别为72．4％、97．8％、97．0％和98．5％，后3次均较第1次有较大增长，差异有统计学意义（ P＜0．05）。而随机盲样检测考核的合格率（84．3％）较同时进行的质评批次的合格率（97．0％）低，差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论随机盲样检测考核可以帮助室间质评组织者及时发现实验室存在问题，有效促进参评实验室检验水平和质量。 展开更多
关键词 随机 盲样 临床血液学 室间质评
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超声联合无创产前基因检测在早孕期胎儿染色体异常筛查中的价值 被引量：23
4
作者 尹虹 李扬 +3 位作者 罗颖 汝艳辉 邹玉芬 潘铭智 《山东医药》 CAS 2018年第30期83-86,共4页
目的探讨超声联合无创产前基因检测(NIPT)在早孕期胎儿染色体异常筛查中的价值。方法筛选早孕期需行羊水细胞染色体核型检测的高危孕妇312例,均进行产科超声、NIPT及羊水细胞染色体核型检测,判断胎儿染色体异常风险。以羊水细胞染色体... 目的探讨超声联合无创产前基因检测(NIPT)在早孕期胎儿染色体异常筛查中的价值。方法筛选早孕期需行羊水细胞染色体核型检测的高危孕妇312例,均进行产科超声、NIPT及羊水细胞染色体核型检测,判断胎儿染色体异常风险。以羊水细胞染色体核型检测结果为金标准,使用χ2检验分析超声、NIPT、超声联合NIPT三种筛查方案的准确性。使用受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(AUC),分析超声、NIPT及超声联合NIPT三种筛查方法的诊断效能。结果羊水细胞染色体核型检测共发现胎儿染色体异常27例,其中21-三体综合征15例、18-三体综合征9例、13-三体综合征2例、Turner综合征1例。超声、NIPT、超声联合NIPT三种筛查方法的准确性分别为34.6%(27/78)、87.1%(26/31)、93.1%(27/29)。超声、NIPT及超声联合NIPT的AUC分别为0.911、9.993、0.996,超声联合NIPT具有最高的AUC(95%CI为0.992~1.000,P<0.01)。结论早孕期超声联合NIPT检测对于胎儿染色体异常具有较高的检出率,其检测准确率仅次于羊水细胞染色体核型检测,能够及时准确地检测出胎儿的结构畸形及染色体异常。 展开更多
关键词 早孕期 超声检查 无创产前基因检测 羊水细胞染色体核型检测 胎儿染色体异常 胎儿结构异常
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成年男性阴囊局部“热压”后精液参数、精子顶体酶活性及表皮生长因子含量的改变 被引量：1
5
作者 张爱东 张美华 +4 位作者 陈峰 仕治达 于建春 邱毅 刘以训 《中国生育健康杂志》 2017年第1期78-81,共4页
目的观察成年男性阴囊局部热压后精液参数、精子顶体酶活性及精液表皮生长因子(EGF)的改变。方法 30例已育成年健康男性志愿者阴囊外部放置恒温加热带(睾丸热压,THT),热压温度40~43℃,每周2次,每次50 min,连续3个月。分别在试验开始前... 目的观察成年男性阴囊局部热压后精液参数、精子顶体酶活性及精液表皮生长因子(EGF)的改变。方法 30例已育成年健康男性志愿者阴囊外部放置恒温加热带(睾丸热压,THT),热压温度40~43℃,每周2次,每次50 min,连续3个月。分别在试验开始前和试验1、2、3个月后采用化学发光免疫分析法测定血清生殖激素T、FSH、LH,精液常规分析、精子低渗肿胀实验(HOS)、精子染色质扩散(SCD)实验及精子顶体酶活性和EGF的含量。对THT试验前后进行自身对照。结果试验1、2、3个月和停止THT试验1个月后的精子浓度、活动率、正常形态精子及正常HOS与THT试验前比较,差异均有统计学意义;停止THT试验2、3个月后的精子浓度、活动率与THT试验前比较,差异均有统计学意义。停止THT试验2个月后正常形态精子及SCD均恢复到试验前水平,差异均无统计学意义。THT试验1个月后血清LH及FSH较实验前无变化;血清睾酮(T)水平比试验前明显升高,差异有统计学意义。THT试验3个月后精液量、T水平明显低于试验前,LH和FSH高于试验前。停止THT试验3个月后,精液量、T、FSH、LH均恢复到试验前水平。试验1个月、2个月和3个月后,精子DNA完整比率较试验前下降明显,停止试验1个月后精子DNA完整比率下降仍然非常明显;停止试验2、3个月后精子DNA完整比率与试验前无差异。THT试验1、2、3个月及停试验1、2个月后精子顶体酶活性比试验前下降;停止试验2个月后上述各项指标又恢复到试验前水平。试验前后EGF含量无差异。结论短期恒温睾丸热压可以使精子密度、活动率、精子顶体酶活性和精子DNA完整性比率较快下降,精子畸形率升高,抗生育效果明显,THT停止后可较快恢复,THT可能作为男性的一种避孕方法而应用。 展开更多
关键词 睾丸热压 男性 抗生育 顶体酶 表皮生长因子
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普通光学显微镜下检测精子DNA损伤的方法
6
作者 翟丽萍 张丽红 +2 位作者 张艳萍 王洪岩 江平 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第A02期128-132,共5页
目的探讨简单、稳定的普通光学显微镜下检测精子DNA损伤的方法。方法采用精子染色质扩散(SCD)试验和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)分析2种方法检测60例不育男性和30例正常生育男性的精子DNA损伤以评价精子DNA完整... 目的探讨简单、稳定的普通光学显微镜下检测精子DNA损伤的方法。方法采用精子染色质扩散(SCD)试验和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)分析2种方法检测60例不育男性和30例正常生育男性的精子DNA损伤以评价精子DNA完整性,用普通光学显微镜观察结果,并应用TUNEL-SCD结合试验检测同一玻片上的精子的DNA损伤,比较两种方法的相关性,分析SCD试验检测精子DNA损伤的临床意义。结果SCD试验检测精子DNA损伤百分率,不育组和生育组分别为(23.7±9.3)%和(14.6±3.6)%,差异有统计学意义;TUNEL试验检测精子DNA损伤率,不育组和生育组分别为(21.4±7.5)%和(14.0±3.7)%,差异有统计学意义。SCD试验与TUNEL分析检测精子DNA完整性结果在不育组(r=0.906,P<0.001)和生育组(r=0.811,P<0.001)均具有明显的线性相关关系。TUNEL-SCD结合实验显示,TUNEL阳性和弱阳性精子在SCD实验中为DNA损伤精子TUNEL阴性精子为SCD实验中DNA完整精子。SCD和TUNEL法检测精子DNA损伤、精子密度、前向运动精子、正常精子形态等各单项指标预测男性不育发生的ROC曲线下面积分别为0.833、0.828、0.777、0.810和0.758,SCD检测精子DNA损伤联合精液常规参数指标(Pre1)和TUNEL检测精子DNA损伤联合精液常规参数指标(Pre2)预测男性不育发生的ROC曲线下面积分别为0.943和0.932。结论SCD试验与TUNEL试验均可在光学显微镜下检测精子DNA损伤,精子DNA完整性的检测可以作为一项男性不育检测指标。而SCD试验较TUNEL试验简单、省时,是一种值得临床推广的运用普通光学显微镜检测精子DNA完整性的方法。 展开更多
关键词 男性不育 精子 DNA损伤 精子染色质扩散试验 脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记
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连续硬膜外麻醉联合丙泊酚在剖宫产手术中的应用及对产妇产后躁动发生的影响 被引量：3
7
作者 褚瑞超 《国际医药卫生导报》 2019年第16期2685-2687,共3页
目的 探究连续硬膜外麻醉联合丙泊酚在剖宫产手术中的应用及对产妇产后躁动发生的影响。方法 选取2016年1月至2019年1月在本院治疗的80例剖宫产手术患者,按照随机数字表法将其分为两组,各40例。对照组采用单纯连续硬膜外麻醉的方法行剖... 目的 探究连续硬膜外麻醉联合丙泊酚在剖宫产手术中的应用及对产妇产后躁动发生的影响。方法 选取2016年1月至2019年1月在本院治疗的80例剖宫产手术患者,按照随机数字表法将其分为两组,各40例。对照组采用单纯连续硬膜外麻醉的方法行剖宫产手术,研究组采用连续硬膜外麻醉联合丙泊酚行剖宫产手术,观察并记录两组患者术中及术后的情况。结果 研究组术中心率、血压、平均动脉压分别为(80.5±10.3)次/min、(110.5±15.4)mmHg、(90.1±12.4)mmHg,均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),而动脉血氧饱和度为(96.1±1.5)%,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组患者手术中和手术后疼痛程度比较,差异无统计学意义(P>0.05);研究组剖宫产后躁动、焦虑、亢奋、精神不振发生率明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 在临床上,连续硬膜外麻醉联合丙泊酚在剖宫产手术中具有较好的镇静作用,有利于剖宫产手术的顺利进行,在产妇术后恢复过程中能有效降低躁动、焦虑等情况的发生,能够减少产妇恢复时间,值得在临床中进一步推广和应用。 展开更多
关键词 连续硬膜外麻醉 丙泊酚 产后躁动
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基因芯片技术在早期自然流产遗传学诊断中的应用研究 被引量：2
8
作者 王菊 刘娜 周玉侠 《中国优生与遗传杂志》 2019年第3期312-313,共2页
目的探讨基因芯片技术在早期自然流产病因诊断中的应用研究。方法选择120例早期自然流产患者,取绒毛,提取DNA,进行基因芯片检测。结果 120例流产组织基因芯片检测均成功,其结果分为染色体数目异常和结构异常,结果正常53例,异常64例,检... 目的探讨基因芯片技术在早期自然流产病因诊断中的应用研究。方法选择120例早期自然流产患者,取绒毛,提取DNA,进行基因芯片检测。结果 120例流产组织基因芯片检测均成功,其结果分为染色体数目异常和结构异常,结果正常53例,异常64例,检出异常率53.3%,临床意义不明2.5%。在64例染色体异常中,染色体数目异常59例,占92.2%,其中三倍体4例。染色体结构异常共5例,明确致病,临床意义不明3例。结论基因芯片技术可作为一项快速、准确的早期自然流产病因诊断方法。 展开更多
关键词 基因芯片 早期自然流产 病因诊断
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