乳鼠心成纤维细胞波形蛋白和线粒体表达的激光扫描共聚焦显微镜观察

1

作者 王春梅 郭海涛 +3 位作者 杨家冀 黄晓峰 陈丹 朱妙章 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第11期983-985,共3页

目的　用激光扫描共聚焦显微镜 (L SCM)观察培养的乳鼠心成纤维细胞中细胞骨架波形蛋白 (vimentun,Vim)、线粒体 (mitochondrial,Mi)以及相互关系 .方法　分离纯化乳鼠心成纤维细胞 ,免疫荧光双标记技术进行了 Vim和 Mi的标记 ,激光扫... 目的　用激光扫描共聚焦显微镜 (L SCM)观察培养的乳鼠心成纤维细胞中细胞骨架波形蛋白 (vimentun,Vim)、线粒体 (mitochondrial,Mi)以及相互关系 .方法　分离纯化乳鼠心成纤维细胞 ,免疫荧光双标记技术进行了 Vim和 Mi的标记 ,激光扫描共聚焦显微镜观察 .结果　培养的乳鼠心成纤维细胞中 Vim位于细胞的胞质中 ,呈粗细不等的绿色线条状或丝状分布 ,标记明显 ,许多细丝交织形成网状结构 .Mi标记为红色颗粒状 ,遍布于细胞质中 ,Mi的颗粒大小不等 ,形态不一 ,可聚集成团 ,并有明显的沿着 Vim分布的趋势 .结论　 L SCM观察培养的心成纤维细胞中 Vim呈细丝交织形成立体的网状结构 ,Mi有沿着细胞骨架 展开更多

关键词 乳鼠 心成纤维细胞 波形蛋白 线粒体 激光扫描共聚焦显微镜

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HAb18G/CD147拮抗肽对肝癌细胞表面抗原HAb18G的亲和性 被引量：6

2

作者 骞爱荣 商澎 +5 位作者 李郁 樊春梅 陈丹 王春梅 朱平 陈志南 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期127-129,共3页

目的 :研究HAb18G/CD14 7拮抗肽对肝癌细胞上HAb18G/CD14 7抗原的亲和性。方法 :利用流式细胞仪测定人肝癌细胞 (HHCC ,SMMC772 1)上HAb18G抗原的表达。分别在HAb18G/CD14 7拮抗肽AP 1、AP 2和AP 6的N端标记生物素 ,用流式细胞仪和激光... 目的 :研究HAb18G/CD14 7拮抗肽对肝癌细胞上HAb18G/CD14 7抗原的亲和性。方法 :利用流式细胞仪测定人肝癌细胞 (HHCC ,SMMC772 1)上HAb18G抗原的表达。分别在HAb18G/CD14 7拮抗肽AP 1、AP 2和AP 6的N端标记生物素 ,用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜测定AP 1、AP 2和AP 6与HHCC或SMMC772 1的结合能力。结果 :HAb18G抗原在HHCC和SMMC772 1细胞上均呈高表达。AP 6对HHCC的亲和力最强 ,AP 2次之 ,AP 1最弱。AP 6对与SMMC772 1的亲和力也最强 ,AP 1次之 ,AP 2未检测到。结论 :HAb18G/CD14 7拮抗肽对肝癌细胞表面抗原HAb18G/CD14 展开更多

关键词 肝癌 拮抗肽 HAb18G/CDl47 抗原 流式细胞仪 激光共聚焦显微镜

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热盐水致大鼠萎缩性胃炎胃粘膜扫描电镜观察 被引量：4

3

作者 张玲霞 张沥 +5 位作者 陶梅 王春梅 杨骥远 宋瑛 江梅 曹广周 《电子显微学报》 CAS CSCD 2005年第2期137-141,共5页

目的:研究热盐水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎(CAG)胃粘膜组织细胞超微结构的变化,探讨长期热咸饮食与慢性萎缩性胃炎间的关系。方法:用热盐水灌胃(55℃,150g mL,2 5mL d)建立大鼠萎缩性胃炎动物模型。选取大鼠腺胃胃窦组织进行病理组织学检... 目的:研究热盐水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎(CAG)胃粘膜组织细胞超微结构的变化,探讨长期热咸饮食与慢性萎缩性胃炎间的关系。方法:用热盐水灌胃(55℃,150g mL,2 5mL d)建立大鼠萎缩性胃炎动物模型。选取大鼠腺胃胃窦组织进行病理组织学检查,以扫描电镜观察胃粘膜上皮细胞超微结构的变化。结果:光镜下热盐水灌胃后第12周,大鼠胃粘膜出现腺体明显缩小,粘膜肌层的平滑肌呈束状增生插入粘膜固有层中。腺体上1 3至2 3腺上皮萎缩,腺管腔增宽,胃小凹颈部粘膜宽度变窄。扫描电镜见正常组大鼠胃粘膜被纵横交错的小沟分隔成许多胃小区,呈网状,胃小凹(胃腺开口)壁衬有圆形或椭圆形上皮细胞,体积基本一致,有短而稀的微绒毛。上皮细胞排列规则,被覆一薄层连续的粘液。热盐水组大鼠在12周时见胃粘膜细胞表面粗糙,粘膜表面糜烂、扁平;在32周时见胃粘膜细胞萎缩、腺腔直径增大、细胞表面破溃,并见纤维性渗出。结论:热盐水灌胃可引起胃粘膜上皮细胞损害,长期过咸及过热刺激可能会诱发萎缩性胃炎。 展开更多

关键词 扫描电镜观察 萎缩性 胃粘膜 大鼠 盐水 胃炎 细胞超微结构 病理组织学检查 上皮细胞 动物模型 粘膜上皮 表面粗糙 粘膜表面 细胞表面 膜细胞 灌胃 膜组织 腺上皮 固有层 平滑肌 椭圆形 微绒毛 纤维性 热刺激 腺体 光镜

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人滋养层细胞内丙型肝炎病毒样颗粒的免疫电镜形态学研究 被引量：6

4

作者 张亚飞 聂青和 +3 位作者 罗新栋 黄晓峰 邵彬 苟艳子 《医学研究生学报》 CAS 2005年第8期674-676,681,共4页

目的:应用免疫电镜技术观察体外培养的人胎盘滋养层细胞感染丙型肝炎病毒(HCV)情况。方法:采用胰蛋白酶消化法及Percoll密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞,以HCVRNA阳性血清对滋养层细胞进行体外感染实验,胶体金免疫电镜检... 目的:应用免疫电镜技术观察体外培养的人胎盘滋养层细胞感染丙型肝炎病毒(HCV)情况。方法:采用胰蛋白酶消化法及Percoll密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞,以HCVRNA阳性血清对滋养层细胞进行体外感染实验,胶体金免疫电镜检测滋养层细胞内的HCV病毒颗粒,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定性检测滋养层细胞内HCVRNA。结果:体外培养的人胎盘滋养层细胞内可观察到胶体金颗粒吸附的病毒样颗粒,形态及直径符合HCV特点。RT-PCR定性检测结果阳性,进一步证实所观察到的病毒样颗粒为HCV。结论:HCV可感染体外培养的人胎盘滋养层细胞。 展开更多

关键词 滋养层细胞 丙型肝炎病毒 宫内感染 免疫电镜

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热水致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜超微结构变化 被引量：6

5

作者 陶梅 张沥 +4 位作者 张玲霞 王春梅 江梅 杨家骥 宋瑛 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第14期1264-1267,共4页

目的:研究热水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎(chronicatrophicgastritis,CAG)胃黏膜组织细胞超微结构的变化,探讨CAG发病机制及长期过热饮食与萎缩性胃炎发生的关系.方法:热水灌胃(55℃蒸馏水,2.5mL/d)建立大鼠萎缩性胃炎动物模型,选取鼠腺胃... 目的:研究热水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎(chronicatrophicgastritis,CAG)胃黏膜组织细胞超微结构的变化,探讨CAG发病机制及长期过热饮食与萎缩性胃炎发生的关系.方法:热水灌胃(55℃蒸馏水,2.5mL/d)建立大鼠萎缩性胃炎动物模型,选取鼠腺胃胃窦组织进行病理组织学检查及扫描电镜和透射电镜观察胃黏膜组织细胞超微结构的变化.结果:热水组于灌胃后24wk,光镜见大鼠胃黏膜出现萎缩表现.扫描电镜见胃黏膜细胞萎缩、腺腔增大并见出血现象;32wk时细胞萎缩加重,大量上皮细胞脱落、细胞破损、局灶性糜烂.透射电镜见腺体和腺细胞萎缩,胞质内细胞器减少,分泌颗粒减少并空泡化,粗面内质网明显扩张,并出现早期凋亡现象.32wk时胞质内细胞器锐减,早期凋亡现象较前普遍.结论:长期过热饮食可造成胃黏膜的损伤,并有超微结构的损害,可导致胃黏膜萎缩. 展开更多

关键词 热水 胃炎 萎缩性 显微镜检查 电子 扫描 显微镜检查 电子 扫描透射

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胡杨种子形态结构初步观察 被引量：4

6

作者 刘亚萍 王春梅 +4 位作者 计巧灵 王爽 于华 亢君君 张富春 《种子》 CSCD 北大核心 2007年第12期53-55,共3页

运用光学显微镜和电子显微镜对胡杨种子的形态结构进行了观察。结果表明:胡杨种子由种皮、子叶和胚组成。胡杨种子的种皮结构比较特殊,只有一层薄壁细胞构成,且细胞与细胞之间有明显的胞间连接;成熟的胡杨种子由两片子叶组成,相对贴合,... 运用光学显微镜和电子显微镜对胡杨种子的形态结构进行了观察。结果表明:胡杨种子由种皮、子叶和胚组成。胡杨种子的种皮结构比较特殊,只有一层薄壁细胞构成,且细胞与细胞之间有明显的胞间连接;成熟的胡杨种子由两片子叶组成,相对贴合,着生在胚轴上。子叶主要由维管束组织和薄壁细胞组成,薄壁细胞近似圆形,为多个细胞群体。子叶表面细胞排列紧密且整齐,横切面近方形,细胞内容物丰富,染色很深。成熟未萌发的种子亚显微结构中,主要的内含物是贮藏蛋白和脂质小体,大量的脂肪体环绕在蛋白体的周围,充满整个细胞。蛋白体由拟晶体和蛋白质基质组成。除这些内含物质外,细胞内几乎观察不到其它细胞器的存在。 展开更多

关键词 胡杨种子 显微结构 超微结构 薄壁细胞

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反义寡核苷酸在肝癌细胞中的分布及作用 被引量：4

7

作者 王宏光 李开宗 +2 位作者 窦科峰 陈丹 王春梅 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第21期1944-1947,共4页

目的　研究人肝癌细胞系 SMMC772 1细胞对血管内皮生长因子 (VEGF)反义寡核苷酸 (ASODN)的摄取及其分布、作用特点 ,为 ASODN的进一步应用提供相关的理论依据 .方法　采用人工合成荧光标记的 VEGF ASODN作用于SMMC772 1细胞 ,通过激光... 目的　研究人肝癌细胞系 SMMC772 1细胞对血管内皮生长因子 (VEGF)反义寡核苷酸 (ASODN)的摄取及其分布、作用特点 ,为 ASODN的进一步应用提供相关的理论依据 .方法　采用人工合成荧光标记的 VEGF ASODN作用于SMMC772 1细胞 ,通过激光共聚焦显微镜观察 ASODN在肝癌细胞中的分布情况 ,定量分析 ASODN作用的浓度及时间特点 ,确定 ASODN作用的最佳浓度及时间 .结果　 ASODN在肝癌细胞中的浓度随作用时间的延长而逐渐升高 ,12 h内即可达到作用浓度 ,4 8h达到最高峰 ,以后则逐渐降低 ,可持续 72 h以上 . ASODN在细胞内的分布密度随作用浓度的升高而升高 ,但当达到一定的作用浓度后 ,细胞内 ASODN的含量随作用浓度增加升高的并不明显 ,其中 5 μmol· L- 1是ASODN较为理想的作用浓度 .在非分裂期肝癌细胞内 ,ASODN的分布部位主要位于胞质 ,胞核也有少量分布 ,而在分裂期肝癌细胞则主要分布在胞核 ,且其对 ASODN的摄入能力远大于非分裂期细胞 .结论　对 VEGF ASODN的深入研究可使其有望成为抗肝癌的新一代基因治疗药物 . 展开更多

关键词 反义寡核苷酸 肝癌 肝癌细胞 血管内皮生长因子 VEGF 荧光标记

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肝豆状核变性肝组织的电镜检查 被引量：4

8

作者 黄晓峰 李向党 +3 位作者 王春梅 王爽 杨家骥 陈丹 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第16期1517-1519,共3页

目的 :研究早期肝豆状核变性肝细胞超微结构改变及其诊断价值 .方法 :经皮穿刺活检肝组织进行常规透射电镜标本制备 ,用JEM 2 0 0 0EX透射电镜观察 .结果 :肝豆状核变性肝细胞中线粒体可见明显异常 ,除常见的非特异性改变 (线粒体肿胀... 目的 :研究早期肝豆状核变性肝细胞超微结构改变及其诊断价值 .方法 :经皮穿刺活检肝组织进行常规透射电镜标本制备 ,用JEM 2 0 0 0EX透射电镜观察 .结果 :肝豆状核变性肝细胞中线粒体可见明显异常 ,除常见的非特异性改变 (线粒体肿胀、多形性、空泡化、基质颗粒数量增加或缺失 )外 ,显著而有特征性的改变包括线粒体的形态大小不一 ,线粒体体积增大形成巨大线粒体 ,并可见奇异线粒体 .基质电子密度增高 .由于膜间腔的不规则扩大造成外膜冗余 ,线粒体的嵴不规则 ,也可扩张 ,偶尔可见线粒体基质致密颗粒的空泡化 .基质内可见结晶样包涵物 ,呈平行排列的纤维样杆状物 .局灶性的肝细胞脂滴增多 ,溶酶体和颗粒状包涵物数目增多 ,可见特征性的多泡状包涵体 .并可出现灶性肝细胞坏死和炎细胞浸润 .结论 :在早期溶酶体改变不明显时 ,多表现为线粒体的改变 .因此 ,重视线粒体的改变对肝豆状核变性有着特殊的诊断意义 . 展开更多

关键词 肝豆状核变性/诊断 线粒体 显微镜检查 电子

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体外培养的人滋养层细胞的鉴定 被引量：5

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作者 李珍 黄晓峰 +8 位作者 王春梅 徐德忠 门可 王安辉 杨家骥 于华 陈丹 黄小军 王爽 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第14期1249-1252,共4页

目的:对来源于人绒毛组织,体外分离、培养的细胞进行鉴定.方法:复苏已经过纯化和传代培养的人胎盘滋养层细胞继续培养,采用倒置显微镜观察细胞的大体形态、HE染色观察细胞的核浆情况、扫描电镜观察细胞的表面结构、透射电镜观察细胞特... 目的:对来源于人绒毛组织,体外分离、培养的细胞进行鉴定.方法:复苏已经过纯化和传代培养的人胎盘滋养层细胞继续培养,采用倒置显微镜观察细胞的大体形态、HE染色观察细胞的核浆情况、扫描电镜观察细胞的表面结构、透射电镜观察细胞特有的超微结构、免疫荧光组织化学结合激光扫描共聚焦观察该细胞的细胞角蛋白18(CK18)和波形蛋白(vimentin,Vim)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)和人胎盘催乳素(hPL)的表达.结果:该细胞呈不规则多角形片状、单层铺展生长,表面有丰富的微绒毛,细胞之间形成桥粒连接,细胞质内有丰富的线粒体、糖原颗粒和发达的高尔基体、以及脂滴等上皮来源细胞的形态特征;所有培养细胞都表达细胞角蛋白18、而波形蛋白细胞只在部分细胞表达,人绒毛膜促性腺激素和人胎盘催乳素免疫反应阳性物质在细胞质表达.结论:该细胞具有上皮来源细胞的一般形态特征和细胞骨架,以及滋养层细胞特有的激素分泌功能.初步认为该细胞为人胎盘滋养层细胞. 展开更多

关键词 滋养层/细胞学 滋养层/超微结构 显微镜检查 电子 扫描透射 显微镜检查 共焦

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环氧树脂半薄切片的多色性染色方法 被引量：3

10

作者 王爽 王春梅 +1 位作者 陈丹 黄晓峰 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第9期775-775,共1页

关键词 环氧树脂 半薄切片 多色性染色方法

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脂质沉积性肌病的电镜诊断 被引量：3

11

作者 吴中亮 黄晓峰 +3 位作者 王文勇 王爽 李勇强 于华 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2008年第1期64-67,共4页

目的脂质沉积性肌病是神经内科一种少见肌病,观察脂质沉积性肌病的超微结构特点,探讨电镜检查对脂质沉积性肌病的诊断价值及其与线粒体病的关系。方法对7例临床上出现肌无力的患者进行肌肉活检,取股四头肌或腓肠肌进行常规电镜标本制备... 目的脂质沉积性肌病是神经内科一种少见肌病,观察脂质沉积性肌病的超微结构特点,探讨电镜检查对脂质沉积性肌病的诊断价值及其与线粒体病的关系。方法对7例临床上出现肌无力的患者进行肌肉活检,取股四头肌或腓肠肌进行常规电镜标本制备,半薄切片甲苯胺蓝染色选取部位后进行超薄切片,铅、铀染色后透射电镜观察、分析。结果所有患者的肌肉活检均显示肌纤维内出现大量的脂滴,脂滴排列密集,呈串珠状分布在残存的肌丝间,存在明显脂滴融合现象。1例线粒体明显异常,出现明显的结晶样包涵体。毛细血管内皮细胞内和成纤维细胞的胞质内也能发现脂滴。1例有明显神经痛,电镜检查发现外周神经髓鞘板层分离,雪旺氏(Schwann)细胞内出现脂滴沉积。1例间质有胶原纤维增生,并可见再生肌纤维。结论脂质沉积性肌病是一组有独特超微结构特点的肌病,与线粒体异常有一定关系,电镜检查有助于该病的确诊。 展开更多

关键词 脂质沉积性肌病 肌病 线粒体肌病 超微结构 显微镜/电子

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雌激素对C6神经胶质瘤细胞的作用 被引量：2

12

作者 周华 朱运龙 +5 位作者 王高峰 钟延清 王春梅 王薇 胡玉珍 刘亚莉 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第24期2221-2224,共4页

目的　从细胞与分子水平观察雌激素受体 (ER)α,β2种亚型在C6神经胶质瘤细胞的表达 ,初步研究雌激素对大鼠C6星形神经胶质瘤细胞的细胞活性、增殖活动和细胞[Ca2 + ]i 水平的影响 .方法　应用细胞培养、免疫细胞化学、RT PCR技术、MTT... 目的　从细胞与分子水平观察雌激素受体 (ER)α,β2种亚型在C6神经胶质瘤细胞的表达 ,初步研究雌激素对大鼠C6星形神经胶质瘤细胞的细胞活性、增殖活动和细胞[Ca2 + ]i 水平的影响 .方法　应用细胞培养、免疫细胞化学、RT PCR技术、MTT法、3 H TdR掺入法和激光扫描共聚焦技术 .结果　①C6细胞中检测到ERβ免疫反应阳性物质 ,未发现ERα免疫反应阳性物质 ;②ERβmRNA在C6细胞中有表达 ,未检测到ERαmRNA ;③ 17β estradiol (10 -7～ 10 -5mol·L-1)可显著提高C6细胞活力 ,但对细胞增殖程度无明显的影响 ;④ 17β estradiol (10 -6mol·L-1)作用后数 10s后C6细胞 [Ca2 + ]i荧光强度显著增强 .结论　C6细胞表达ERβ的mRNA与蛋白 ,在神经胶质瘤细胞中ERβ可能是介导雌激素信号传递的关键环节 ;雌激素可发挥细胞保护作用 ;雌激素使细胞 [Ca2 + ]i增加 . 展开更多

关键词 雌激素 C6神经胶质瘤细胞 雌激素受体 细胞分裂 神经胶质瘤

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热盐水致大鼠萎缩性胃炎胃黏膜超微结构的变化 被引量：1

13

作者 张沥 王春梅 +3 位作者 陶梅 张玲霞 江梅 曹广周 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第19期1729-1731,共3页

目的 :研究热盐水灌胃导致的大鼠萎缩性胃炎(CAG)胃黏膜组织细胞超微结构的改变 .方法 :用热盐水灌胃 (5 5℃ ,15 0g/L ,2 .5mL/d× 32wk)建立大鼠萎缩性胃炎动物模型 ,选取大鼠腺胃胃窦组织行透射电镜标本制备并对组织细胞超微结... 目的 :研究热盐水灌胃导致的大鼠萎缩性胃炎(CAG)胃黏膜组织细胞超微结构的改变 .方法 :用热盐水灌胃 (5 5℃ ,15 0g/L ,2 .5mL/d× 32wk)建立大鼠萎缩性胃炎动物模型 ,选取大鼠腺胃胃窦组织行透射电镜标本制备并对组织细胞超微结构的变化进行动态观察 .结果 :电镜观察到热盐水灌胃较早就出现了线粒体肿胀 ,粗面内质网扩张 ,微绒毛变短或丢失 ,随灌胃时间的延长 ,线粒体肿胀明显 ,局部空泡化 ,部分线粒体溶解坏死 .内质网扩张明显 ,部分脱颗粒 ,微绒毛大量丢失 .结论 :热盐水灌胃可引起胃黏膜组织细胞超微结构的损害 . 展开更多

关键词 热盐水 大鼠 萎缩性胃炎 灌胃 胃黏膜组织 超微结构 线粒体 内质网 脱颗粒 微绒毛

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胰岛素抵抗大鼠血糖正常阶段肾脏超微结构改变 被引量：3

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作者 孟瑞 王春梅 +5 位作者 黄晓峰 陈军 侯军峰 杨家骥 王爽 亢君君 《科学技术与工程》 2008年第1期26-29,共4页

为观察胰岛素抵抗(IR)大鼠血糖正常阶段的肾脏超微结构改变。以高糖高脂饲料(2H)和高糖高脂高盐(3H)饲料喂养2月龄SD大鼠4个月,复制IR模型,普通饲料喂养的SD大鼠为正常对照,透射和扫描电镜观察肾脏结构。对2H组用透射电镜下观察,肾小球... 为观察胰岛素抵抗(IR)大鼠血糖正常阶段的肾脏超微结构改变。以高糖高脂饲料(2H)和高糖高脂高盐(3H)饲料喂养2月龄SD大鼠4个月,复制IR模型,普通饲料喂养的SD大鼠为正常对照,透射和扫描电镜观察肾脏结构。对2H组用透射电镜下观察,肾小球和肾小管基底膜明显增厚,分别为(2.23±0.88)μm,(0.86±0.25)μm,P(0.01,系膜区增宽,足突明显肿胀,部分融合,部分内皮窗孔消失,滤过屏障结构破坏。肾脏间质水肿,有炎细胞浸润;扫描电镜下观察,足突融合成片、变宽。3H组在透射电镜下观察,肾小球和肾小管基底膜明显增厚,分别为(1.88±0.41)μm,(0.96±0.22)μm,P(0.01,足突明显肿胀,大部分融合,部分内皮窗孔消失,滤过屏障结构破坏严重。间质有炎细胞浸润,肾小管上皮细胞有大量脂滴沉积,肾间质可见浆细胞,部分区域髓样变性;扫描电镜下观察,肾小管刷状缘不整齐,微绒毛倒伏,管腔皱缩,局部细胞变性脱落,管壁空洞,足突大部分融合成片。结果表明高糖高脂和高糖高脂高盐膳食诱发的IR大鼠在血糖正常阶段已存在超微结构的病理改变。 展开更多

关键词 胰岛素抵抗 肾脏 电子显微镜检查/扫描 电子显微镜检查/透射

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盐水灌胃大鼠胃黏膜组织细胞的超微结构观察 被引量：1

15

作者 张玲霞 张沥 +5 位作者 陶梅 王春梅 杨骥远 宋瑛 江梅 曹广周 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期703-706,I0003,共5页

目的:观察盐水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎后胃黏膜组织病理变化及细胞超微结构变化,探讨长期咸饮食与慢性萎缩性胃炎发生的关系。方法:实验于2004-09/2005-07在西安市中心医院动物中心及解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心完成。选择... 目的:观察盐水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎后胃黏膜组织病理变化及细胞超微结构变化,探讨长期咸饮食与慢性萎缩性胃炎发生的关系。方法:实验于2004-09/2005-07在西安市中心医院动物中心及解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心完成。选择7周龄健康、性成熟的雄性SD大鼠64只,随机数字表法分为3组,即正常喂养组24只、灌胃对照组20只和盐水组20只。用盐水灌胃建立大鼠萎缩性胃炎动物模型。正常喂养组为正常喂养,饮凉白开水;灌胃对照组在正常喂养的基础上以25℃白开水灌胃,2.5mL/次,1次/d;盐水组在正常喂养的基础上以25℃150g/L盐水灌胃,2.5mL/次,1次/d。实验开始,先处死4只正常喂养组大鼠,并留取胃大体标本作为对照。以后各组分别于4,8,12,24,32周各抽取4只处死,光镜观察胃黏膜病理组织学改变,扫描电镜和透射电镜观察胃黏膜上皮细胞超微结构的变化。结果:纳入动物64只,均进入结果分析。①光镜见正常喂养组和灌胃对照组大鼠胃黏膜表面光滑,无糜烂,固有层无炎细胞浸润,黏膜下层无水肿,肌层无炎细胞浸润。盐水灌胃后第24周,大鼠胃黏膜出现腺体明显缩小,黏膜肌层的平滑肌呈束状增生插入黏膜固有层中。腺体上1/3至2/3腺上皮萎缩,腺管腔增宽,胃小凹颈部黏膜宽度变窄。②扫描电镜见正常喂养组和灌胃对照组大鼠胃黏膜被纵横交错的小沟分隔成许多胃小区,呈网状,胃小凹(胃腺开口)壁衬有圆形或椭圆形上皮细胞,体积基本一致,有短而稀的微绒毛。上皮细胞排列规则,被覆一薄层连续的黏液。盐水组大鼠在24周时胃黏膜表面扁平,腺细胞表面粗糙,腺腔间黏膜变宽,腺腔增大;并见局限性黏膜剥脱;到32周时,见胃黏膜上皮细胞萎缩、腺腔直径增大、细胞表面破溃,出现大小不等、形状不规则的糜烂面并见纤维性渗出。③透射电镜透见正常喂养组和灌胃对照组胃黏膜腺体饱满,腺腔完整,与周围连接紧密,腺细胞形态饱满,分泌颗粒丰富。盐水组24周,腺体萎缩,纤维结缔组织增生包绕腺体。腺细胞萎缩,胞质内细胞器减少,滑面内质网扩张,部分腺细胞代偿性增生,胞质内可见大量的线粒体,但细胞间距明显增大。盐水组32周,腺体萎缩更加明显,并可见少量细胞的核膜扩张,胞核常染色质减少,异染色质增多,靠近核膜,出现早期凋亡现象。结论:盐水灌胃可引起胃黏膜组织细胞损害,长期过咸刺激可损伤胃黏膜诱发黏膜萎缩。 展开更多

关键词 胃炎 萎缩性 氧化钠 显微镜检查 电子 扫描 显微镜检查 电子 透射

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大鼠小肠移植早期应用趋化因子受体拮抗剂抑制移植物急性排斥反应(英文) 被引量：1

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作者 杨建军 王为忠 +2 位作者 付京 徐宏勇 王春梅 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第38期7697-7700,共4页

背景:排斥反应的发生是导致小肠移植失败的主要原因,趋化因子RANTES及其受体介导的细胞免疫在急性排斥反应中具有重要作用。目的:观察小肠移植术后早期应用趋化因子受体拮抗剂Met-RANTES对排斥反应的免疫抑制作用及其与他克莫司的协同... 背景:排斥反应的发生是导致小肠移植失败的主要原因,趋化因子RANTES及其受体介导的细胞免疫在急性排斥反应中具有重要作用。目的:观察小肠移植术后早期应用趋化因子受体拮抗剂Met-RANTES对排斥反应的免疫抑制作用及其与他克莫司的协同效应。设计:随机化完全区组设计,观察对照动物实验。单位:解放军第四五一医院普通外科、解放军第四军医大学西京医院胃肠外科实验室及解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心。材料:实验于2003-09/2005-03在解放军第四军医大学西京医院胃肠外科实验室完成。以96只SD大鼠为供者,96只Wistar大鼠为受者,施行异基因节段性异位小肠移植。方法:移植后的大鼠以随机化完全区组设计分为4组(n=24):对照组、Met-RANTES组(200μg/d)、他克莫司组(0.5mg/(kg·d))及Met-RANTES+他克莫司组(Met-RANTES200μg/d+他克莫司0.5mg/(kg·d))。后3组均于移植术后腹腔注射给药,共7d;对照组移植前后不作任何处理。术后观察移植大鼠的一般状况、存活时间以及免疫细胞浸润情况,并于移植术后3,5,7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=6)进行组织病理学检查,采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜技术对移植肠RANTES和CD4+,CD8+,CD25+T淋巴细胞的表达进行连续定量测定。每组剩余6只大鼠作存活时间观察,观察期限为5周。主要观察指标:①各组大鼠移植术后存活时间。②各组大鼠移植肠的病理改变。③各组大鼠移植肠RANTES及T淋巴细胞亚群的表达。结果:移植术后96只Wistar受体大鼠全部进入结果分析。①Met-RANTES组、他克莫司组和Met-RANTES+他克莫司组大鼠平均存活时间显著长于对照组(P<0.01);Met-RANTES+他克莫司组大鼠存活时间最长,与Met-RANTES组、他克莫司组差异均有显著性意义(P<0.01)。②对照组全部死于急性排斥反应及感染,组织病理学检查显示移植后第3,5,7天分别符合轻、中、重度排斥反应。Met-RANTES组、他克莫司组和Met-RANTES+他克莫司组病理学检查无明显排斥反应征象。③对照组大鼠的移植肠RANTES表达在术后各时段均显著高于其他3组(P<0.01),其动态变化与急性排斥反应的进程成正相关;Met-RANTES组和Met-RANTES+他克莫司组大鼠移植肠RANTES、CD4+、CD8+和CD25+T细胞的表达均低于对照组(P<0.01)。结论:Met-RANTES能明显抑制小肠移植急性排斥反应,有效保护移植肠功能,显著延长移植物的存活时间,并可增强小剂量(0.5mg/(kg·d))他克莫司的免疫抑制作用。 展开更多

关键词 小肠移植 趋化因子 移植物排斥 免疫抑制 组织移植

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嫌色细胞型肾细胞癌3例的临床病理特点及文献复习 被引量：1

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作者 黄晓峰 张远强 +5 位作者 戴晓汶 李向党 黄梅 方丽 杨家骥 王春梅 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第12期1120-1123,共4页

目的 :研究嫌色细胞型肾细胞癌 (CRCC)的临床病理特点 .方法 :采用常规HE染色光镜观察、胶体铁染色、免疫组织化学染色和透射电镜观察 .结果 :患者年龄分别为6 2、6 3和 6 7(平均 6 4 )岁 ,均为男性 .主诉为腰部酸胀 ,无明显血尿和腰部... 目的 :研究嫌色细胞型肾细胞癌 (CRCC)的临床病理特点 .方法 :采用常规HE染色光镜观察、胶体铁染色、免疫组织化学染色和透射电镜观察 .结果 :患者年龄分别为6 2、6 3和 6 7(平均 6 4 )岁 ,均为男性 .主诉为腰部酸胀 ,无明显血尿和腰部包块 .所有肿瘤分期均为T0 N0 M0 .组织学上 ,肿瘤细胞为多变的网状透明胞质的大细胞构成 .根据网状化胞质的程度和分布 ,肿瘤细胞可分为 3种类型 .细胞的超微结构特征是在网状化的区域存在大量小泡 ,似乎是CRCC的特征性结构 .小泡可能起源于线粒体外膜的外突 .胶体铁染色阳性也是CRCC的特征之一 .免疫组织化学研究显示肿瘤对CKpan、CK19、上皮膜抗原和波形蛋白有不同程度的阳性 ,S 10 0蛋白阴性 .15～ 2 6mo的随访表明生存良好 .结论 :这些发现进一步确证CRCC是肾细胞癌的一种特殊亚型 。 展开更多

关键词 癌 肾细胞 超微结构 微泡免疫组织化学 显微镜检查 电子

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大鼠硒性白内障晶状体的超微结构 被引量：1

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作者 严宏 惠延年 +1 位作者 黄晓峰 黄梅 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第21期1947-1949,共3页

目的 :观察大鼠硒性白内障晶状体的超微结构 .方法 :出生 8～ 1 0d的SD大鼠连续 5次皮下注射亚硒酸钠生理盐水 (每日 2mmol·L-1 ) ,2只正常和 2只白内障的晶状体按透射电镜标本制备成超薄切片 ,在电镜下观察细胞的超微结构 .结果 ... 目的 :观察大鼠硒性白内障晶状体的超微结构 .方法 :出生 8～ 1 0d的SD大鼠连续 5次皮下注射亚硒酸钠生理盐水 (每日 2mmol·L-1 ) ,2只正常和 2只白内障的晶状体按透射电镜标本制备成超薄切片 ,在电镜下观察细胞的超微结构 .结果 :硒性白内障大鼠的晶状体在电镜下细胞间连接破坏 ,胞质密度降低 ,胞质轻度液化 ,线粒体囊状变性 ,胞质内出现大量数目不等、分布不均匀的高密度球形结构 .结论 展开更多

关键词 硒性白内障 晶状体 透射电子显微术 大鼠 超微结构 高密度球形结构

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免疫荧光及激光共聚焦检测萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织细胞Bcl-2及cox-2蛋白表达 被引量：2

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作者 张沥 张玲霞 +5 位作者 陶梅 王春梅 陈丹 宋瑛 江梅 曹广周 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第46期112-113,I0003,共3页

目的:采用免疫荧光及激光扫描共聚焦显微镜技术,检测热水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎后胃黏膜组织细胞Bcl-2及cox-2蛋白的表达。方法:实验于2004-09/2005-07在西安市中心医院动物中心及解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心完成。①选取... 目的:采用免疫荧光及激光扫描共聚焦显微镜技术,检测热水灌胃导致大鼠萎缩性胃炎后胃黏膜组织细胞Bcl-2及cox-2蛋白的表达。方法:实验于2004-09/2005-07在西安市中心医院动物中心及解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心完成。①选取7周龄健康、性成熟的雄性SD大鼠48只,随机数字表法分为正常对照组、萎缩性胃炎组,24只/组。②萎缩性胃炎组大鼠采用55℃热水灌胃建立萎缩性胃炎模型,2.5mL/次,1次/d,共90d。正常对照组不造模,给予等量25℃白开水灌胃。③两组分别于造模4,8,12,24,32,65周各取4只大鼠,按身体质量与给药容积比值为0.5%腹腔注射戊巴比妥麻醉,取大鼠胃窦组织制备切片。采用激光共聚焦免疫荧光双标方法检测胃黏膜组织Bcl-2和cox-2蛋白表达的情况。结果:48只SD大鼠全部进入结果分析。造模后两组大鼠胃黏膜组织cox-2和Bcl-2蛋白表达的检测结果:①正常对照组:在造模后各时相点胃黏膜组织细胞均未见cox-2和Bcl-2阳性表达。②萎缩性胃炎组:激光共聚焦显微镜观察显示,造模第24周细胞浆中可见cox-2和Bcl-2表达,呈均质颗粒状,到第32,65周时表达更加明显;免疫荧光双标记中造模第24,65周均可见cox-2和Bcl-2共同表达。结论:胃黏膜出现萎缩后Bcl-2及cox-2表达增加,免疫荧光与激光扫描共聚焦显微检测技术具有分辨率高、灵敏度高等特点,为细胞和组织内部超微结构的分析提供了良好的技术平台。 展开更多

关键词 胃粘膜:前列腺素内过氧化物合酶 原癌基因蛋白质类

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大鼠小肠移植排斥反应期移植肠RANTES的表达(英文) 被引量：1

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作者 杨建军 李孟彬 +3 位作者 王为忠 付京 王春梅 陈丹 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第18期3593-3596,共4页

背景：同种异体移植排斥反应是影响移植物功能和存活的最大障碍，小肠移植排斥反应的诊断与治疗尤为困难。目的：探讨移植肠RANTES的表达在小肠移植急性排斥反应中的意义，以及他克莫司对它的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验... 背景：同种异体移植排斥反应是影响移植物功能和存活的最大障碍，小肠移植排斥反应的诊断与治疗尤为困难。目的：探讨移植肠RANTES的表达在小肠移植急性排斥反应中的意义，以及他克莫司对它的影响。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2003-09／2005—03在解放军第四五一医院普通外科、解放军第四军医大学附属西京医院胃肠外科实验室、解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心为大专院校的实验室完成。材料：选用健康成年雄性SD和Wistar大鼠各72只。以SD大鼠为供者，Wistar大鼠为受者，施行异位小肠移植。方法：实施大鼠异位小肠移植，按照不同品系的组合将移植大鼠分为4组（n=18）：非手术对照组，Wistar大鼠作为正常对照，不实施小肠移植；同基因移植组，将Wistar大鼠的小肠移植给同品系的Wistar大鼠；异基因移植未治疗组，将SD大鼠的小肠移植给Wistar大鼠，移植后不给予免疫抑制剂治疗；异基因移植他克英司治疗组，将SD大鼠的小肠移植给Wistar大鼠，移植后0～7d肌肉注射他克莫司，1mg／（kg·d）。移柏后3，5，7d每组各处死6只大鼠，切取移植肠标本进行组织病理学检查，并采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦湿微镜技术对移植肠RANTES的表达进行连续定量测定。主要观察指标：①各组大鼠移植肠的组织病理学改变。②不同时间点移植物内RANTES阳性细胞的表达变化。③他克莫司对异基因移植大鼠移植肠RANTES表达的抑制作用。结果：72只受体大鼠均进入结果分析。异基因移植未治疗组大鼠后3，5，7d移植肠符合轻、中、重度急性排斥反应的病理学诊断标准；他克莫司治疗组大鼠和同基因移植对照组大鼠在观察期内未发现明显排斥反应征象。异基因移植未治疗组大鼠的移植肠RANTES表达在术后均显著高于其他3组（P〈0．01），其动态变化与急性排斥反应的进程呈正相关；他克莫司治疗组大鼠移植肠RANTES的表达明显低于未治疗组（P〈0．01）。结论：RANTES阳性细胞在小肠移植急性排斥反应中发挥了重要作用，动态检测移植肠RANTES的表达变化，可能成为小肠移植急性排斥反应有效的诊断指标之一。 展开更多

关键词 趋化因子 小肠移植 排斥反应

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