临床微生物学及检验精品课程建设的实践与思考 被引量：3

1

作者 吴利先 白丽 +3 位作者 王国富 张雷 武有聪 刘奇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第2期I0004-I0004,F0003,共2页

为做好临床微生物学及检验课程的建设工作,从师资队伍建设、教学研究、教学改革以及课程文化的建设等方面进行了实践和探讨,逐渐形成了一门特色鲜明、成效显著的精品课程。

关键词 临床微生物学及检验 精品课程 课程建设

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miR-207靶向自噬相关蛋白LAMP2调控巨噬细胞与结核分枝杆菌相互作用机制的研究

2

作者 杜文雅 代禹美 +2 位作者 乐林芝 马涛 吴利先 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期97-104,共8页

目的miR-207被发现在自然杀伤(NK)细胞外泌体中表达,参与疾病进展,但暂无与结核病(TB)有关的研究。方法生物信息学方法预测并用双荧光素酶报告实验检测溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)是否与miR-207有靶向关系。使用脂质体转染法将实验分为四... 目的miR-207被发现在自然杀伤(NK)细胞外泌体中表达,参与疾病进展,但暂无与结核病(TB)有关的研究。方法生物信息学方法预测并用双荧光素酶报告实验检测溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)是否与miR-207有靶向关系。使用脂质体转染法将实验分为四组(OP-LAMP2组:共转染miR-207 mimics和LAMP2过表达质粒;EP组:共转染mimics NC和空载质粒;siLAMP2组:转染siLAMP2;siLAMP2-NC组:转染siLAMP2-NC)。使用H37Ra感染Ana-1细胞建立结核感染模型。结核菌落形成单位计数评估LAMP2对胞内分枝杆菌负荷的影响以及对胞外残留分枝杆菌的清除作用。流式细胞术检测细胞总凋亡率。实时荧光定量PCR检测LAMP2、细胞凋亡基因、焦亡基因及自噬基因相对表达量。Western blot法检测LAMP2蛋白、细胞凋亡、焦亡、自噬蛋白的相对表达量。结果双荧光素酶报告实验检测显示miR-207与LAMP2存在靶向关系,实时荧光定量PCR、Western blot结果统计分析和显微镜下观察证明成功建立感染模型。菌落形成单位计数发现OP-LAMP2组的菌落数低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。流式细胞术检测发现OP-LAMP2组总凋亡率低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。实时荧光定量PCR及Western blot法检测发现对照组凋亡、焦亡相关蛋白和基因相对表达量趋势为OP-LAMP2低于EP组,siLAMP2组高于siLAMP2-NC组。实时荧光定量PCR检测自噬正调节基因微管相关蛋白1轻链3(LC3)和重组人自噬效应蛋白(Beclin1)在OP-LAMP2组相对表达量高于EP组,siLAMP2组低于siLAMP2-NC组,负调节自噬基因相对表达量与自噬正调节基因趋势相反。自噬相关蛋白相对表达量与自噬基因趋势一致。结论miR-207通过靶向自噬相关蛋白LAMP2促进巨噬细胞凋亡、细胞焦亡、抑制自噬,促进结核分枝杆菌(Mtb)的存活,为TB提供新的治疗方向。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌(Mtb) miR-207 LAMP2 自噬 凋亡 焦亡

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外泌体来源microRNA在微生物感染中的作用研究进展

3

作者 杜文雅 马枫茜 +3 位作者 代禹美 陈瑞枫 王国富 吴利先 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第6期729-732,共4页

外泌体包含母细胞来源的蛋白质、脂质和核酸等多种成分,其中核酸中的miRNA起到越来越重要的作用,miRNA通过靶向mRNA 3′端非翻译区结合导致mRNA降解或翻译抑制。许多疾病的发生都伴随着miRNA表达失调,这对宿主基因调控和某些分子机制产... 外泌体包含母细胞来源的蛋白质、脂质和核酸等多种成分,其中核酸中的miRNA起到越来越重要的作用,miRNA通过靶向mRNA 3′端非翻译区结合导致mRNA降解或翻译抑制。许多疾病的发生都伴随着miRNA表达失调,这对宿主基因调控和某些分子机制产生影响。越来越多研究证明miRNA可以作为疾病的潜在生物标志物、治疗靶点,参与炎症反应的过程等。本文就外泌体中的miRNA在病毒,细菌等微生物导致的感染性疾病,如流感病毒、肝炎病毒、HIV、结核分枝杆菌、梅毒螺旋体和支原体中的作用进行综述。 展开更多

关键词 外泌体 MIRNA 微生物 感染性疾病 综述

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miR-146a在黏膜免疫中的调控作用 被引量：3

4

作者 李艳丽 申元英 郭乐 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期297-304,共8页

黏膜免疫是机体整个免疫网络的重要组成部分,又是具有独特结构和功能的独特免疫体系,其在抵抗感染方面起着极其重要的作用,是机体抵抗感染的第一道免疫屏障。近年来,越来越多的研究显示,微小RNA(miRNAs)具有强大的免疫调控功能,其中miR-... 黏膜免疫是机体整个免疫网络的重要组成部分,又是具有独特结构和功能的独特免疫体系,其在抵抗感染方面起着极其重要的作用,是机体抵抗感染的第一道免疫屏障。近年来,越来越多的研究显示,微小RNA(miRNAs)具有强大的免疫调控功能,其中miR-146a作为协调免疫反应和炎症信号最重要的miRNAs之一,在包括免疫反应在内的多种生物过程和途径中发挥关键作用。本文综述了miR-146a与黏膜免疫的相关研究进展。 展开更多

关键词 MICRORNAS MIR-146A 黏膜免疫 炎症

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LncRNA在固有免疫应答中的调控作用

5

作者 宁晓县 申元英 郭乐 《医学研究杂志》 2021年第12期21-24,共4页

固有免疫是机体抵御病原微生物入侵的第一道防线,主要通过固有免疫细胞表面的模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)识别病原体/损伤/危险相关分子模式(pathogen/damage/danger associated molecular patterns,PAMPs/DAMPs)... 固有免疫是机体抵御病原微生物入侵的第一道防线,主要通过固有免疫细胞表面的模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)识别病原体/损伤/危险相关分子模式(pathogen/damage/danger associated molecular patterns,PAMPs/DAMPs),引起一系列的免疫反应,参与机体抗感染、抗肿瘤等。长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)作为非编码RNA领域中的成员之一,与固有免疫应答密切相关。现就LncRNA在固有免疫应答调控中的作用进行综述。 展开更多

关键词 固有免疫 LncRNA 免疫调控

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Toll样受体2(TLR2)与结核分枝杆菌感染的相关研究进展

6

作者 陈瑞枫 王瑄 +2 位作者 马枫茜 周鑫沛 吴利先 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期367-372,共6页

Toll样受体2(TLR2)是白细胞表面表达的一种模式识别受体,已发现多种配体可以激动或抑制TLR2的活化,进而调控免疫细胞的炎症和凋亡状态。结核分枝杆菌(MTB)通常寄生在巨噬细胞中,但MTB感染机体后,包括巨噬细胞在内的多种免疫细胞表面的T... Toll样受体2(TLR2)是白细胞表面表达的一种模式识别受体,已发现多种配体可以激动或抑制TLR2的活化,进而调控免疫细胞的炎症和凋亡状态。结核分枝杆菌(MTB)通常寄生在巨噬细胞中,但MTB感染机体后,包括巨噬细胞在内的多种免疫细胞表面的TLR2都可与其相互作用,释放细胞因子,影响MTB在体内的状态和增殖。在分子层面,TLR2的多态性有待更多探索,目前研究的大部分TLR2的多态性被认为与MTB的易感性无关。文中总结了TLR2与配体、感染后免疫调节活动、多态性与MTB易感性等方面的研究进展。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌(MTB) Toll样受体2(TLR2) 细胞因子 多态性 综述

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结核分枝杆菌细胞外囊泡的研究进展

7

作者 马枫茜 邱章华 +3 位作者 杜文雅 代禹美 吴利先 王国富 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1591-1596,共6页

结核病仍然是一个严重威胁全球公共卫生的问题,每年造成数百万人感染。结核分枝杆菌(MTB)是引起结核病的主要病原菌。近年来,MTB细胞外囊泡(MEVs)作为MTB分泌分枝杆菌抗原的重要载体已引起研究者关注。MEVs能够使MTB以集中保护的方式分... 结核病仍然是一个严重威胁全球公共卫生的问题,每年造成数百万人感染。结核分枝杆菌(MTB)是引起结核病的主要病原菌。近年来,MTB细胞外囊泡(MEVs)作为MTB分泌分枝杆菌抗原的重要载体已引起研究者关注。MEVs能够使MTB以集中保护的方式分泌磷脂、核酸、脂多糖和周质成分,并与宿主相互作用。对MEVs部分内容物的研究已取得了一些进展,但对其在宿主感染MTB过程中的生物发生机制、功能以及对机体免疫应答作用的认识仍处于初级阶段。本文综述目前MEVs生物发生机制的进展,在宿主感染MTB过程中,以及在调节免疫应答中的作用,并讨论其在疫苗开发和诊断技术方面的应用。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 细胞外囊泡 免疫调节

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miR-207调控结核分枝杆菌在巨噬细胞内存活的机制研究

8

作者 杜文雅 代禹美 +2 位作者 乐林芝 马涛 吴利先 《中国比较医学杂志》 北大核心 2024年第12期41-49,共9页

目的miR-207在许多疾病中存在差异性表达,探究miR-207过表达对调控结核分枝杆菌(H37Ra)在巨噬细胞内存活的机制研究,为结核病的靶向治疗提供理论基础。方法将实验分为4组:空白组(Ana-1细胞)、对照组(感染H37Ra的细胞)、mi组(感染H37Ra... 目的miR-207在许多疾病中存在差异性表达,探究miR-207过表达对调控结核分枝杆菌(H37Ra)在巨噬细胞内存活的机制研究,为结核病的靶向治疗提供理论基础。方法将实验分为4组:空白组(Ana-1细胞)、对照组(感染H37Ra的细胞)、mi组(感染H37Ra并转染miRNA-207 mimics)和mi-NC组(感染H37Ra并转染mimics NC)。使用H37Ra感染Ana-1细胞建立结核感染模型,使用脂质体转染法将miRNA-207 mimics和mimics NC转入Ana-1细胞。结核菌落形成单位计数评估miR-207对胞内分枝杆菌负荷的影响以及对胞外残留分枝杆菌的清除作用。采用流式细胞术检测细胞总凋亡率。实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-207、细胞凋亡基因、焦亡基因、炎症基因及自噬基因相对表达量。Western blot检测细胞凋亡蛋白、焦亡蛋白、自噬蛋白的相对表达量。采用荧光显微镜及多功能酶标仪检测细胞内ROS的荧光强度,以及检测细胞内LDH的含量。结果显微镜下观察成功建立感染模型,qPCR检测发现对照组miR-207表达量低于空白组(P<0.01),表明miR-207在空白组和对照组中差异性表达,mi组miR-207表达量显著高于mi-NC组(P<0.0001),表明成功建立转染模型。菌落形成单位计数发现mi组的菌落数高于mi-NC组和对照组(P<0.001)。流式细胞术检测发现mi组总凋亡高于mi-NC组和对照组(P<0.05)。qPCR及Western blot检测发现对照组凋亡基因和凋亡蛋白相对表达量高于空白组(P<0.05),mi组高于mi-NC组(P<0.05)。对照组炎症基因相对表达量高于空白组(P<0.001),mi组高于mi-NC组(P<0.05),对照组焦亡基因和焦亡蛋白相对表达量高于空白组(P<0.01),mi组高于mi-NC组(P<0.05)。自噬正调节基因LC3和Beclin1在对照组的相对表达量高于空白组(P<0.0001),mi组低于mi-NC组(P<0.05)。负调节自噬基因相对表达量与自噬正调节基因趋势相反。自噬相关蛋白相对表达量与自噬基因趋势一致。ROS荧光强度检测发现对照组的荧光强度高于空白组(P<0.05),mi组高于mi-NC组(P<0.001)。LDH检测发现对照组细胞内LDH含量高于空白组(P<0.01),mi组与mi-NC组含量无统计学意义(P>0.05)。结论miR-207过表达促进细胞凋亡、细胞焦亡及炎症、抑制自噬,有利于H37Ra的存活,为结核病的治疗提供新的方向。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 H37RA miR-207 自噬 巨噬细胞 凋亡 焦亡

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Nrf2/HO-1通路在氧化应激和炎性反应中的作用 被引量：7

9

作者 于馨雅 申元英 郭乐 《医学研究杂志》 2023年第7期19-22,共4页

氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化,导致中性粒细胞炎性浸润、蛋白酶分泌增加、产生高活性分子,如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)以及大量氧化中间产物,如白... 氧化应激是指体内氧化与抗氧化作用失衡,倾向于氧化,导致中性粒细胞炎性浸润、蛋白酶分泌增加、产生高活性分子,如活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和活性氮自由基(reactive nitrogen species,RNS)以及大量氧化中间产物,如白三烯、血栓素A 2等促炎介质,从而引起细胞凋亡和炎性反应。近年来研究表明,核转录因子红系2相关因子2/血红素加氧酶-1(nuclear factor erythroid-2-related factor 2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)通路可以通过抗炎、抗氧化等作用抵抗氧化应激损伤。因此,有效调控Nrf2/HO-1通路可成为治疗氧化应激性疾病和炎性疾病的重要靶点。 展开更多

关键词 核转录因子红系2相关因子2/血红素加氧酶-1 氧化应激 炎性反应

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鸟分枝杆菌MAV_2043基因编码蛋白的生物信息学分析 被引量：1

10

作者 陈瑞枫 马枫茜 +3 位作者 李祥芳 丁寿鹏 高婧华 吴利先 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第8期907-911,共5页

目的预测鸟分枝杆菌MAV_2043基因编码蛋白的结构和功能。方法利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、Protcale、TMHMM-2.0服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法和IEDB数据库等生物信息学... 目的预测鸟分枝杆菌MAV_2043基因编码蛋白的结构和功能。方法利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、Protcale、TMHMM-2.0服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法和IEDB数据库等生物信息学预测软件对MAV_2043编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性分析、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及免疫表位进行分析预测;运用UniprotKB数据库的Blast工具对氨基酸序列进行比对,采用MEGA11软件构建进化树,进行系统进化分析。结果MAV_2043基因全长618 bp,共编码205个氨基酸。MAV_2043基因编码蛋白与鸟分枝杆菌亚种起源相同,该蛋白与结核分枝杆菌的[Cu-Zn]超氧化物歧化酶同源性较高。该蛋白为稳定的亲水性蛋白,无跨膜区、有信号肽;预测该蛋白亚细胞定位在细胞膜上,二级结构以β折叠为主;三级结构模型显示该蛋白可形成同源二聚体,有两个Cu~+配体的结合空间位置。结论生物信息学预测鸟分枝杆菌MAV_2043基因编码蛋白可能为[Cu-Zn]超氧化物歧化酶,是鸟分枝杆菌中的重要毒力因子,可为鸟分枝杆菌靶向治疗提供新思路。 展开更多

关键词 鸟分枝杆菌 MAV_2043 [Cu-Zn]超氧化物歧化酶 生物信息学

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miR-155靶向JAK/STAT3通路促进LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎性反应 被引量：2

11

作者 谭仕廉 李艳丽 +2 位作者 何永勋 郭乐 申元英 《医学研究杂志》 2022年第4期41-45,98,共6页

目的探讨miR-155在THP-1巨噬细胞炎性反应中的作用及调控机制。方法使用脂多糖(LPS)处理THP-1来源的巨噬细胞构建体外巨噬细胞炎性模型,分为control组、LPS组、miR-155 mimics+LPS组和mimics NC+LPS组;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检... 目的探讨miR-155在THP-1巨噬细胞炎性反应中的作用及调控机制。方法使用脂多糖(LPS)处理THP-1来源的巨噬细胞构建体外巨噬细胞炎性模型,分为control组、LPS组、miR-155 mimics+LPS组和mimics NC+LPS组;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测上述各组中miR-155、炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β)mRNA、STAT3 mRNA表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清中炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β)含量,免疫印迹(Western blot)法检测细胞中STAT3蛋白及STAT3磷酸化(p-STAT3)蛋白水平。结果LPS诱导THP-1巨噬细胞中miR-155表达增加,同时炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β)的表达增加;转染miR-155 mimics组进一步促进LPS诱导的巨噬细胞中上述炎性细胞因子的表达;Western blot法分析显示miR-155 mimics+LPS组中p-STAT3蛋白表达水平较LPS组进一步增加。结论miR-155可上调THP-1巨噬细胞炎症中TNF-α、IL-1β的表达,其调控机制是增加转录因子STAT3的磷酸化活化,进而靶向JAK/STAT3信号通路促进LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎性反应。 展开更多

关键词 MIR-155 脂多糖 巨噬细胞 炎症 JAK/STAT3信号通路

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结核分枝杆菌Rv3529c蛋白的生信分析及原核表达

12

作者 陈瑞枫 王瑄 +3 位作者 马枫茜 李祥芳 丁寿鹏 吴利先 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期621-628,共8页

目的 通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。方法 利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和... 目的 通过生物信息学软件预测结核分枝杆菌Rv3529c基因编码蛋白的结构和功能,并对其进行原核表达。方法 利用UniproKB数据库、PredictProtein服务、AlphaFold系统、SWISS-MODEL服务、ProtParam蛋白分析工具、ProtScale、DeepTMHMM服务和SignalP-5.0服务、ProtCompB方法、IEDB数据库和STRING数据库等生物信息学预测软件对Rv3529c编码蛋白的二级和三级结构、理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及免疫表位进行分析预测。利用分子克隆技术构建表达质粒载体pET-32a-Rv3529c并进行原核表达,运用UniprotKB数据库的Blast工具对氨基酸序列进行比对,采用MEGA 11软件构建进化树,进行系统进化分析,运用STRING数据库分析蛋白间相互作用。结果 Rv3529c基因全长1 155 bp,共编码384个氨基酸。Rv3529c基因编码蛋白分子量为43.35 kDa,等电点为6.04,二级结构以α-螺旋为主,该蛋白为稳定的亲水性蛋白,无跨膜区、无信号肽,预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中或细胞膜上,存在多个抗原抗体表位,与多个蛋白质有相互作用。经克隆、表达、鉴定、纯化后获得浓度和纯度较高的Rv3529c蛋白。结论 成功克隆、表达、纯化结核分枝杆菌Rv3529c蛋白,并初步预测其结构及功能。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 Rv3529c蛋白 原核表达 生物信息学 表位

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结核分枝杆菌PE22/PPE36融合蛋白对耻垢分枝杆菌表型及巨噬细胞功能影响的研究

13

作者 杨雨婷 李玉洁 +1 位作者 余海燕 杨国平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期523-532,共10页

目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达... 目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达获取融合蛋白PE22/PPE36,纯化后免疫6~8周龄小鼠制备多克隆抗体;电击法构建重组菌Ms_PE22/PPE36及Ms_vec,并用所制备的多克隆抗体验证重组融合蛋白在Ms中的表达。将重组菌接种于2×YT培养基中观察其菌落形态及生长曲线;点板法及菌落计数法检测重组菌在H_(2)O_(2)、SDS、溶菌酶、NaNO_(2)、低pH、饥饿等压力条件下的存活情况,以分析PE22/PPE36融合蛋白对Ms表型的影响;重组菌侵染巨噬细胞ANA-1及RAW 264.7后,流式细胞术检测ANA-1细胞凋亡率,ELISA法检测ANA-1细胞TNF-α及IL-6分泌量,Griess法检测ANA-1及RAW 264.7细胞NO分泌量并用通道抑制剂检测所涉及的通路,菌落计数法检测重组菌在ANA-1及RAW 264.7细胞内的存活情况。结果与Ms_vec组相比,Ms_PE22/PPE36的菌落形态、生物膜形成及在溶菌酶、NaNO_(2)、低pH等压力条件下的存活率差异无统计学意义(溶菌酶:t 3 h=0.082,t 6 h=0.174,t 9 h=0.355;NaNO_(2):t 3 h=0.950,t 6 h=1.274;低pH:t 3 h=1.869,t 6 h=1.119,t 9 h=0.091;均P>0.05);在H_(2)O_(2)、SDS压力条件下存活率明显降低(H_(2)O_(2):t 6 h=4.35,t 8 h=4.80;SDS:t 4 h=10.43,t 6 h=2.793;均P<0.05);而稳定期生长速率及在饥饿压力条件下的存活率明显增高(生长速率:t 30 h=5.39,t 36 h=2.55,t 42 h=3.48;饥饿:t=3.323;均P<0.05);与Ms_vec感染组相比,Ms_PE22/PPE36组ANA-1细胞的早期凋亡率及TNF-α分泌量明显增加(早期凋亡:F=4.765;TNF-α:t 24 h=26.642,t_(48)h=7.634;均P<0.05),IL-6分泌量明显减少(t 24 h=5.888,t_(48)h=3.001;均P<0.05),ANA-1及RAW264.7细胞NO分泌量明显增加(ANA-1:F_(12)h=163.267,F_(24)h=111.530,F 48 h=500.328;RAW 264.7:F_(12)h=133.202,F_(24)h=718.436,F 48 h=1434.9;均P<0.05),且可被通道抑制剂Bay 11-7082、U0126及SB203580明显抑制(ANA-1:t NF-κB=32.074;t ERK=11.679;t p38=16.840;RAW 264.7:t NF-κB=119.112;均P<0.001);与Ms_vec相比,Ms_PE22/PPE36在ANA-1细胞内的存活率无明显变化(t_(48)h=0.327,t_(72)h=1.933,均P>0.05),在RAW 264.7细胞内的存活率明显降低(t_(48)h=5.509,t_(72)h=5.417;均P<0.05)。结论重组融合蛋白PE22/PPE36可改变Ms的表型并调控巨噬细胞的免疫应答。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 耻垢分枝杆菌 PE22/PPE36融合蛋白 巨噬细胞

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MicroRNAs在黏膜屏障及炎症反应中的作用

14

作者 谭仕廉 郭乐 申元英 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期2405-2410,共6页

黏膜屏障是机体直接接触外源性异物的主要界面,同时也是病原体入侵机体的重要位点。因此,黏膜表面需要严格的调节以维持黏膜屏障功能或平衡黏膜炎症反应。近年来研究表明,MicroRNAs(miRNAs)在调节黏膜屏障功能和黏膜炎症反应过程中起到... 黏膜屏障是机体直接接触外源性异物的主要界面,同时也是病原体入侵机体的重要位点。因此,黏膜表面需要严格的调节以维持黏膜屏障功能或平衡黏膜炎症反应。近年来研究表明,MicroRNAs(miRNAs)在调节黏膜屏障功能和黏膜炎症反应过程中起到重要的作用。本文综述了相关miRNAs与黏膜炎症的研究,进一步理解miRNAs参与黏膜生理和炎症过程中的作用,找到具有防治黏膜炎症的新作用靶点。 展开更多

关键词 MICRORNAS 黏膜 炎症 屏障功能

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鸟分枝杆菌MAV-2052蛋白的生物信息学分析

15

作者 高婧华 陈晓文 +1 位作者 陈越 吴利先 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第2期150-154,共5页

目的应用生物信息学分析软件预测鸟分枝杆菌MAV-2052蛋白的结构和功能。方法利用在线uniprot蛋白数据库、ProtParam蛋白分析网站、在线Protcale、TMHMM(TMHMM Server V 2.0)和SignalP 5.0、Softberry和PSORTⅡ Server,以及SOPMA和SWISS-... 目的应用生物信息学分析软件预测鸟分枝杆菌MAV-2052蛋白的结构和功能。方法利用在线uniprot蛋白数据库、ProtParam蛋白分析网站、在线Protcale、TMHMM(TMHMM Server V 2.0)和SignalP 5.0、Softberry和PSORTⅡ Server,以及SOPMA和SWISS-MODEL等生物信息学预测软件对MAV-2052蛋白的理化性质、疏水性分析、信号肽、跨膜区、亚细胞定位及二级结构进行分析预测并对其三级结构进行模型构建;登录网站http://www.cbs.dtu.dk/services/netrhos/对蛋白磷酸化位点进行预测,运用uniprot蛋白数据库的Blast工具对氨基酸进行比对,采用MEGA-X软件构建进化树。结果MAV-2052基因全长933 bp,编码310个氨基酸的蛋白质。该蛋白与鸟分枝杆菌亚型起源于同一物种,与结核分枝杆菌的半胱氨酸合酶k1同源性较高。MAV-2052为稳定的疏水性蛋白,无跨膜区、无信号肽;预测该蛋白亚细胞定位在细胞质中,蛋白序列中存在13个丝氨酸磷酸化位点,二级结构以α-螺旋为主且有两个结构域;三级结构模型显示该蛋白可形成同源二聚体,但无其他配体结合空间位置。MAV-2052蛋白为半胱氨酸合酶,属于半胱氨酸合酶/半胱氨酸β合成酶家族,是调控鸟分枝杆菌生长中的重要蛋白之一。结论生物信息学预测鸟分枝杆菌MAV-2052为半胱氨酸合成酶,是调控细菌生长的重要蛋白,可为鸟分枝杆菌的靶向治疗提供新思路。 展开更多

关键词 鸟分枝杆菌 结构 功能 生物信息学分析

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外泌体的抗感染作用研究进展

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作者 马枫茜 陈瑞枫 +2 位作者 丁寿鹏 李祥芳 吴利先 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期115-119,共5页

外泌体是由多种细胞分泌的纳米囊泡,能够传递蛋白质、脂质和核酸等生物活性大分子,在细胞间信息传递中起着重要作用。越来越多的研究表明,某些类型细胞如间充质干细胞、NK细胞和中性粒细胞等细胞来源的外泌体具有治疗潜力,参与调节免疫... 外泌体是由多种细胞分泌的纳米囊泡,能够传递蛋白质、脂质和核酸等生物活性大分子,在细胞间信息传递中起着重要作用。越来越多的研究表明,某些类型细胞如间充质干细胞、NK细胞和中性粒细胞等细胞来源的外泌体具有治疗潜力,参与调节免疫系统,能够增强免疫细胞的杀伤能力;另外从感染细胞释放的外泌体也能促进抗原提呈和免疫细胞活化,激活多种细胞免疫因子,介导细胞免疫反应。本文就外泌体在抗病毒感染、细菌感染和真菌感染中的直接或间接作用进行了综述,为临床应用提供依据。 展开更多

关键词 外泌体 病毒 细菌 真菌

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OBE教学理念在临床免疫学检验技术教学中的应用

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作者 潘云华 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2022年第3期111-113,共3页

临床免疫学检验技术对相关免疫疾病的发病机制等方面提供理论支持,这对临床对免疫疾病的防治有着积极性作用。但,由于临床免疫学检验技术教学内容过于复杂、抽象,语言较为深奥,进而导致学生无法对相关内容完全理解与掌握,而临床免疫学... 临床免疫学检验技术对相关免疫疾病的发病机制等方面提供理论支持,这对临床对免疫疾病的防治有着积极性作用。但,由于临床免疫学检验技术教学内容过于复杂、抽象,语言较为深奥,进而导致学生无法对相关内容完全理解与掌握,而临床免疫学检验技术知识前后交织,若基础知识掌握不全面对整体教学效果有着不利影响,学生知识结构掌握不牢固对其日后参加检验工作也有所不利,而OBE(outome-based education)以结果为基础的教学手段,是一种新型的教学理念,对学生的综合能力与学习成果均有着积极性提升作用,可进一步优化教学模式。 展开更多

关键词 临床免疫学检验技术 OBE教学理念 教学效果 考核成绩 教学满意度

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炎症小体在结核分枝杆菌感染中的作用研究进展 被引量：4

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作者 刘丽婷 吴利先 王国富 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第7期857-859,863,共4页

炎症小体(inflammasome)是由应激,组织损伤和细胞内感染等途径激活的多蛋白复合物,它通过激活半胱天冬酶-1(caspase-1)从而促进IL-1β,IL-18等有效促炎细胞因子的释放,引起炎症反应和细胞焦亡。它是先天免疫中的一部分,和多种疾病相关,... 炎症小体(inflammasome)是由应激,组织损伤和细胞内感染等途径激活的多蛋白复合物,它通过激活半胱天冬酶-1(caspase-1)从而促进IL-1β,IL-18等有效促炎细胞因子的释放,引起炎症反应和细胞焦亡。它是先天免疫中的一部分,和多种疾病相关,研究表示结核分枝杆菌感染巨噬细胞亦可激活NLRP3和AIM2炎症小体并引起炎症反应,本文就NLRP3炎症小体和AIM2炎症小体在结核分枝杆菌感染中的作用进展做一综述。 展开更多

关键词 NLRP3炎症小体 AIM2炎症小体 结核分枝杆菌

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结核分枝杆菌与树突状细胞相互作用的研究进展 被引量：2

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作者 杨雨婷(综述) 杨国平 +1 位作者 李光华 孟余(审校) 《微生物学免疫学进展》 CAS 2021年第2期78-84,共7页

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)感染引起的结核病是严重威胁人类健康的慢性传染病。树突状细胞(dendritic cell, DC)是重要的抗原提呈细胞及连接机体固有免疫和适应性免疫应答的桥梁细胞。DC通过表面表达受体识别并吞... 结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)感染引起的结核病是严重威胁人类健康的慢性传染病。树突状细胞(dendritic cell, DC)是重要的抗原提呈细胞及连接机体固有免疫和适应性免疫应答的桥梁细胞。DC通过表面表达受体识别并吞噬病原体,参与抗原提呈,并发育成熟,同时分泌不同类型的细胞因子,决定T细胞分化方向,最终影响细胞免疫应答效应。在MTB感染过程中各成分与DC相互作用的特性研究,是分析MTB毒力基因及致病机理的基础,并可为结核疫苗研究提供候选优势抗原。现对目前MTB与DC的相互作用机制的研究进展作一概述。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 树突状细胞 细胞因子 受体

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活化NK细胞抗结核分枝杆菌感染的实验研究 被引量：1

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作者 刘丽婷 翟凯新 +1 位作者 王国富 吴利先 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第2期174-176,182,共4页

目的探讨活化的NK细胞的抗结核分枝杆菌作用,为建立一种新型安全的以NK细胞源性外泌体(exosome)为基础的抗结核免疫疗法提供基础。方法将从外周血分离纯化的NK细胞活化后直接作用于结核分枝杆菌(Mtb)感染的巨噬细胞,通过观察细胞形态变... 目的探讨活化的NK细胞的抗结核分枝杆菌作用,为建立一种新型安全的以NK细胞源性外泌体(exosome)为基础的抗结核免疫疗法提供基础。方法将从外周血分离纯化的NK细胞活化后直接作用于结核分枝杆菌(Mtb)感染的巨噬细胞,通过观察细胞形态变化,细菌抑菌率,乳酸脱氢酶(LDH)活性等评价NK细胞的抗Mtb作用。结果流式细胞术检测活化NK细胞纯度为95%;Mtb感染后的Ana-1巨噬细胞形态成多形性;Mtb感染的巨噬细胞受活化NK细胞作用6、12、24h的抑菌率分别为(39.1±4.2)%、(73.9±6.4)%和(91.3±5.7)%,其中以作用24h的抑制率最好;LDH释放率与活化NK细胞作用时间成正比。结论 NK细胞在体外有抗Mtb的作用,为研究更为安全的NK源性exosome的抗Mtb作用奠定了基础。 展开更多

关键词 活化NK细胞 免疫治疗 结核分枝杆菌

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