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PCR技术检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B基因 被引量：19
1
作者 邱阳 王刚 卢行安 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期115-116,共2页
目的 :金黄色葡萄球菌B型肠毒素是污染食品引起食物中毒的主要原因之一 ,针对进出口食品卫生监测的需要 ,研究一种简便、快速、准确的实验方法。方法 :利用聚合酶链反应技术 (PCR)采用特异的模板探针引物进行杂交 ,最后通过电泳技术与... 目的 :金黄色葡萄球菌B型肠毒素是污染食品引起食物中毒的主要原因之一 ,针对进出口食品卫生监测的需要 ,研究一种简便、快速、准确的实验方法。方法 :利用聚合酶链反应技术 (PCR)采用特异的模板探针引物进行杂交 ,最后通过电泳技术与阳性对照进行比对 ,来判断阴阳性结果。结果 :本方法检出率高 ,每克样品中有 4个金黄色葡萄球菌即可检出 ,2 4小时即可报告结果。结论 :PCR方法检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B基因快速、准确 ,检测周期短 ,既可提高检出率 ,又可节省检测时间。 展开更多
关键词 PCR技术 食品 金黄色葡萄球菌 肠毒素B 基因 食物中毒
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晚期氧化蛋白产物通过p38丝裂原活化蛋白激酶通路促进ECV304细胞基质细胞衍生因子1α的表达 被引量：2
2
作者 史春虹 姜一农 +2 位作者 单路娟 魏明丽 路岩 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期761-764,共4页
目的观察晚期氧化蛋白产物对ECV304细胞基质细胞衍生因子1α表达的影响,并探讨其作用机制。方法牛血清白蛋白与次氯酸钠等量混合体外制备晚期氧化蛋白产物,RT-PCR法检测ECV304细胞基质细胞衍生因子1αmRNA的表达,Western Blotting法测... 目的观察晚期氧化蛋白产物对ECV304细胞基质细胞衍生因子1α表达的影响,并探讨其作用机制。方法牛血清白蛋白与次氯酸钠等量混合体外制备晚期氧化蛋白产物,RT-PCR法检测ECV304细胞基质细胞衍生因子1αmRNA的表达,Western Blotting法测定基质细胞衍生因子1α以及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)蛋白水平,以p38MAPK特异性阻断剂SB203580进行阻断实验,酶联免疫吸附法测定上清液中基质细胞衍生因子1α浓度。结果与对照组比较,200μmol/L晚期氧化蛋白产物处理ECV304细胞2h后基质细胞衍生因子1αmRNA及蛋白表达量显著升高(P均<0.05);基质细胞衍生因子1αmRNA表达量6h达高峰(P<0.01),之后逐渐下降,24h时与对照组比较差异无显著性;随时间的推移基质细胞衍生因子1α蛋白表达量逐渐升高,24h表达量最高(P<0.01)。晚期氧化蛋白产物作用15min后p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化水平明显增强(P<0.05),不同浓度(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)SB203580降低了晚期氧化蛋白产物刺激下基质细胞衍生因子1α蛋白的表达(分别为618.85±60.12、500.98±69.47和359.97±59.81,P<0.05或0.01)。结论晚期氧化蛋白产物可诱导ECV304细胞基质细胞衍生因子1α表达,p38MAPK通路是介导这一作用的重要途径之一。 展开更多
关键词 晚期氧化蛋白产物 基质细胞衍生因子1Α ECV304 P38丝裂原活化蛋白激酶
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血清学检测在1型糖尿病诊断中的临床意义 被引量：2
3
作者 郭慧淑 蔡春玉 吴泰华 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期2524-2526,共3页
目的探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)、胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛素自身抗体(IAA)的联合检测在糖尿病分型中的临床意义。方法用ELISA法测定68例1型糖尿病(IDDM)、128例2型糖尿病(NIDDM)患者和50例正常人血清中GAD-Ab、ICA和... 目的探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体(GAD-Ab)、胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛素自身抗体(IAA)的联合检测在糖尿病分型中的临床意义。方法用ELISA法测定68例1型糖尿病(IDDM)、128例2型糖尿病(NIDDM)患者和50例正常人血清中GAD-Ab、ICA和IAA。结果1型糖尿病组中GAD-Ab、ICA和IAA的阳性率分别为86.7%、35.2%和23.6%;2型糖尿病组中3种抗体的阳性率分别为9.3%、9.9%和10.8%;正常组中3种抗体均为阴性。1型糖尿病患者的GAD-Ab、ICA和IAA的阳性率都高于2型糖尿病患者(P<0.05)。结论测定GAD-Ab在糖尿病分型中优于ICA和IAA.;3种抗体的联合检测可提高1型糖尿病的检测率,具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 糖尿病 血清学检查 谷氨酸脱羧酶抗体
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肺诺卡菌感染1例报告并文献复习 被引量：2
4
作者 邱阳 王刚 王晶 《中国误诊学杂志》 CAS 2007年第19期4456-4458,共3页
目的:探讨肺诺卡菌感染的临床表现、影像学特点及相关实验室诊断方法,提高对诺卡菌的认识,减少误诊。方法:报告1例肺诺卡菌感染患者的临床资料、影像学特点、实验室检验和治疗情况,并复习相关国内外文献。结果:该病临床无特异性,影像学... 目的:探讨肺诺卡菌感染的临床表现、影像学特点及相关实验室诊断方法,提高对诺卡菌的认识,减少误诊。方法:报告1例肺诺卡菌感染患者的临床资料、影像学特点、实验室检验和治疗情况,并复习相关国内外文献。结果:该病临床无特异性,影像学检查显示双肺多发空洞,结节状及片状高密度阴影,容易误诊,诊断主要依据细菌学检验。结论:诺卡菌病是由诺卡菌引起的一种少见但严重的感染,细菌学检验能提供准确的诊断依据。治疗主要采用复方磺胺甲恶唑,疗效显著。 展开更多
关键词 肺炎 细菌性/诊断/治疗 诺卡尔菌感染/诊断/治疗 误诊 人类 病例报告(文献类型)
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晚期氧化蛋白产物通过ERK通路促进ECV304细胞基质细胞衍生因子-1α的表达
5
作者 史春虹 姜一农 +3 位作者 单路娟 路岩 张英 高彦国 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2013年第2期142-146,共5页
目的:观察晚期氧化蛋白产物(AOPP)对ECV304细胞基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)表达的影响,并探讨其作用机制。方法:牛血清白蛋白(BSA)与次氯酸钠等量混合体外制备AOPP-BSA,不同浓度AOPP-BSA作用后以RT-PCR法检测ECV304细胞SDF-1αmRNA的... 目的:观察晚期氧化蛋白产物(AOPP)对ECV304细胞基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)表达的影响,并探讨其作用机制。方法:牛血清白蛋白(BSA)与次氯酸钠等量混合体外制备AOPP-BSA,不同浓度AOPP-BSA作用后以RT-PCR法检测ECV304细胞SDF-1αmRNA的表达,Western-blot法测定SDF-1α以及磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白水平,阻断实验中先以不同浓度的ERK特异性阻断剂U0126与ECV304孵育1 h,然后与AOPP-BSA共同孵育24 h,酶联免疫吸附法测定上清液中SDF-1α蛋白浓度。结果:AOPP呈浓度依赖性的促进ECV304细胞SDF-1αmRNA表达及蛋白合成增加(P均<0.01),200μmol/LAOPP-BSA作用15 min后ERK1/2磷酸化水平明显增强(P<0.01),阻断ERK1/2通路显著抑制AOPP对ECV304细胞SDF-1α蛋白合成的促进作用(P<0.05)。结论:AOPP可诱导ECV304细胞SDF-1α的表达,ERK1/2通路是介导这一作用的重要途径之一。 展开更多
关键词 晚期氧化蛋白产物 基质细胞衍生因子let ECV304
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反义Bmi-1对Jurkat细胞的抑制作用 被引量：19
6
作者 刘卫红 孟秀香 +2 位作者 刘丹丹 单路娟 赵心宇 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期554-556,共3页
目的观察反义Bmi-1表达质粒在体外对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的生长抑制作用。方法选择Bmi-1基因起始密码子及与锌指结构对应的171bp核苷酸片段,反向连接于pLNCX2质粒上,得到反义Bmi-1表达质粒;通过脂质体转染将质粒导入Jurkat细胞中,... 目的观察反义Bmi-1表达质粒在体外对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的生长抑制作用。方法选择Bmi-1基因起始密码子及与锌指结构对应的171bp核苷酸片段,反向连接于pLNCX2质粒上,得到反义Bmi-1表达质粒;通过脂质体转染将质粒导入Jurkat细胞中,以G418进行筛选得到阳性克隆;以MTT法和体外集落形成实验检测反义Bmi-1表达质粒对Jurkat细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术分析细胞周期;采用免疫荧光组化法检测反义Bmi-1对Jurkat细胞P16蛋白的上调作用。结果转染反义Bmi-1表达质粒组与对照组(空白对照及空质粒组)相比较,生长速度明显变慢,克隆形成能力明显下降,空白对照组Jurkat细胞集落数为(90.70±9.07)/103细胞,空质粒组Jurkat细胞集落数为(83.30±6.11)/103细胞,转染反义质粒组Jurkat细胞集落数为(56.00±5.56)/103细胞(P<0.01);P16蛋白表达也明显增强。结论反义Bmi-1对Jurkat细胞的体外生长具有明显的抑制作用,并上调了P16蛋白的表达。 展开更多
关键词 细胞系 Jurkat 寡核苷酸 反义 基因 Bmi-1 JURKAT细胞 生长抑制作用 转染反义 P16蛋白表达 T淋巴细胞白血病 体外集落形成 t细胞集落
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不同年龄组阴道炎患者阴道分泌物检查结果分析 被引量：6
7
作者 张婵 刘越坚 杨丽红 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2011年第9期846-847,共2页
目的对比分析不同年龄组女性阴道炎患者阴道清洁度和霉菌、滴虫、纤毛菌、线索细胞检出情况。方法对2 295例女性阴道炎患者按照年龄分组进行阴道分泌物涂片染色检查。结果 2 295例中阴道清洁度为Ⅲ～Ⅳ度占66.19%,霉菌、线索细胞、滴虫... 目的对比分析不同年龄组女性阴道炎患者阴道清洁度和霉菌、滴虫、纤毛菌、线索细胞检出情况。方法对2 295例女性阴道炎患者按照年龄分组进行阴道分泌物涂片染色检查。结果 2 295例中阴道清洁度为Ⅲ～Ⅳ度占66.19%,霉菌、线索细胞、滴虫和纤毛菌的检出率分别为25.22%、15.69%、0.74%和0.48%;50岁以上年龄组阴道清洁度Ⅲ度检出率较高;20岁以下年龄组Ⅳ度检出率较高;21～30年龄组霉菌检出率较高,41～50年龄组线索细胞和滴虫检出率较高,纤毛菌检出率在各组之间差异无统计学意义。结论大连地区女性阴道炎患者防治形势不容乐观;与年龄相关的生理原因及个人行为因素导致不同年龄组患者阴道感染病因的差异性。 展开更多
关键词 阴道清洁度 霉菌 线索细胞 滴虫
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氟康唑体外诱导白假丝酵母菌耐药基因表达的研究 被引量：2
8
作者 张婵 庄肃军 +1 位作者 杨丽红 刘越坚 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2013年第8期911-913,共3页
目的对白假丝酵母菌耐药机制进行研究。方法将临床分离对氟康唑敏感的白假丝酵母菌种,经体外诱导产生耐药。半定量PCR检测敏感株、耐药株、回复敏感株多药耐药基因CDR1、CDR2、MDR1和转录调控因子TAC1编码基因表达水平的变化,并对TAC1... 目的对白假丝酵母菌耐药机制进行研究。方法将临床分离对氟康唑敏感的白假丝酵母菌种,经体外诱导产生耐药。半定量PCR检测敏感株、耐药株、回复敏感株多药耐药基因CDR1、CDR2、MDR1和转录调控因子TAC1编码基因表达水平的变化,并对TAC1编码基因进行测序。结果与敏感株和回复敏感株比较,耐药株CDR1、CDR2相对表达量增高,发现1株TAC1N977D氨基酸置换。结论氟康唑体外诱导白假丝酵母菌产生耐药的机制与CDR1、CDR2表达相关。TAC1基因突变在诱导耐药中的机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 白假丝酵母菌 CDR1 CDR2 TAC1
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