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NEAT1、miR-27a-3p在阿尔茨海默病患者血清和脑脊液中的表达关系
1
作者 何丽杰 张春艳 王静 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期207-212,共6页
目的:探究长链非编码RNA核富含丰富的转录本1(long chain non-coding RNA nuclear-enriched abundant transcript 1, LncRNA NEAT1)、miR-27a-3p在阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)患者血清和脑脊液中的表达关系及意义。方法:选择2... 目的:探究长链非编码RNA核富含丰富的转录本1(long chain non-coding RNA nuclear-enriched abundant transcript 1, LncRNA NEAT1)、miR-27a-3p在阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)患者血清和脑脊液中的表达关系及意义。方法:选择2019年10月至2021年9月天津市第五中心医院神经内科收治的AD患者66例作为病例组,根据临床痴呆评定量表(clinical dementia rating, CDR)评分分为轻度组(≤1分,n=41)与中重度组(>1分,n=25);另取同期门诊其他就诊患者血清和脑脊液标本66例志愿者作为对照组。收集所有受试者的一般资料并评估认知程度,采用实时荧光定量PCR检测血清和脑脊液miR-27a-3p、NEAT1表达水平,酶联免疫吸附试验检测脑脊液β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1,BACE1)、β淀粉样蛋白(amyloid β,Aβ)40和Aβ42水平,采用Spearman法分析血清miR-27a-3p、NEAT1水平与简易精神状态检测量表的相关性,采用Pearson法分析血清miR-27a-3p、NEAT1水平与Aβ沉积平均标准摄取值比率(standardized uptake value ratio, SUVR)及脑脊液miR-27a-3p、NEAT1、BACE1、Aβ42、Aβ40水平的相关性。结果:MMSE评分[21 (17,25),9(7,11)vs. 27 (21,34)]、MoCA评分[17 (12,21),10 (7,13)vs. 27 (21,31)]、血清miR-27a-3p水平(0.55±0.13,0.46±0.06 vs. 0.97±0.22)、脑脊液miR-27a-3p(0.48±0.10,0.35±0.10 vs. 1.03±0.31)、Aβ42水平[(303.55±36.77) ng/L,(231.45±34.14) ng/L vs.(499.99±53.63) ng/L]及Aβ42/Aβ40比值(0.030±0.008, 0.022±0.007 vs. 0.048±0.010)轻度组、中重度组AD患者均低于对照组(P均<0.05),且中重度组AD患者较轻度组低(P均<0.05);血清NEAT1水平(2.31±0.64,3.13±0.76 vs. 1.05±0.20)、SUVR(1.50±0.29,1.76±0.52 vs. 0.74±0.15)及脑脊液NEAT1(3.51±1.24,4.30±1.65 vs. 1.01±0.23)、BACE1水平[(55.78±5.98)μg/L,(72.32±16.08)μg/L vs.(21.39±3.73)μg/L]轻度组、中重度组AD患者均高于对照组(P均<0.05),且中重度组AD患者较轻度组高(P均<0.05)。AD患者血清NEAT1水平与SUVR及脑脊液NEAT1、BACE1呈正相关(r=0.350,0.606,0.341,P<0.05),与MMSE评分、MoCA评分呈负相关(r=-0.473,-0.482,P均<0.05);血清miR-27a-3p水平与脑脊液miR-27a-3p水平、MMSE评分、MoCA评分呈正相关(r=0.695,0.424,0.412,P<0.05),与SUVR及脑脊液BACE1水平呈负相关(r=-0.521、-0.447,P均<0.05)。结论:NEAT1、miR-27a-3p在AD患者血清及脑脊液中表达趋势具有一致性,NEAT1水平均升高,miR-27a-3p水平均降低,二者水平呈负相关,与AD患者脑中Aβ沉积程度有关,并参与AD的病情进展。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 长链非编码RNA核富含丰富的转录本1 miR-27a-3p Β淀粉样蛋白 相关性
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黄芪多糖通过调节Drp1介导的线粒体分裂改善感染性心肌病 被引量：1
2
作者 陈旭红 纪桢 +3 位作者 苑雅茹 边希云 刘晓智 袁俐 《中国中西医结合急救杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期455-460,共6页
目的从线粒体动力相关蛋白1(Dp1)介导线粒体分裂平衡角度,解读黄芪多糖(APS)对感染性心肌病小鼠的心功能保护作用及机制。方法按随机数字表法将18只成年雄性C57BL/6J小鼠分为对照组、脂多糖(LPS)组和LPS+APS组,每组6只。采用LPS诱导制... 目的从线粒体动力相关蛋白1(Dp1)介导线粒体分裂平衡角度,解读黄芪多糖(APS)对感染性心肌病小鼠的心功能保护作用及机制。方法按随机数字表法将18只成年雄性C57BL/6J小鼠分为对照组、脂多糖(LPS)组和LPS+APS组,每组6只。采用LPS诱导制备感染性:心肌病模型。各组均于术后6h经尾静脉取外周血,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清炎性因子水平;LPS处理后24 h行超声心动图检查心室功能,包括左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张期末内径(LVEDD)和左室收缩期末内径(LVESD);检查后即刻处死小鼠取心肌组织,采用蛋白质印迹试验(Western bloting)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、C3a、Drp1、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、视神经菱缩蛋白1(Opa1)蛋白表达。将购买的小鼠心房肌细胞株HL-1分为对照组、LPS组、LPS+APS组和LPS+APS+线粒体氧化磷酸化解偶联剂(FCCP)组。采用活性氧(ROS)检测试剂盒检测分离线粒体及HL-1细胞内的ROS含量:采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测线粒体膜电位(MMP);采用三磷酸腺背(ATP)检测试剂盒检测HL-1细胞内ATP含量。结果与对照组比较.LPS组小鼠心脏的LVEF、LNFS、LVEDD和LVESD均明显降低.线粒体内ROS含量明显升高,MMP和ATP含量均明显下降;而APS可改善感染性心肌病小鼠的心功能指标[LVEF:0.571±0.026比0.287±0.045.LVFS(%):33.13±2.11比21.22±0.99.LVEDD(mm):3.74±0.10比2.77±0.05.LVESD(mm):2.74±0.09比1.99±0.04.均P<0.05].明显降低心肌内ROS含量[ROS(%):138.39±9.28比260.97±19.22.P<0.05].明显抑制MMP和ATP含量下降[MMP(红色1绿色荧光强度比值):0.91±0.05比0.55±0.01,ATP(%):94.22±10.11比58.74±5.39.均P<0.05),且APS可明显抑制LPS处理后的Drp1和Fis1蛋白过表达以及MIn2和Opal蛋白低表达[Drp1/GAPDH(%):126.33±11.70比218.75±19.44,Fis1/CAPDH(%):105.71±15.77比194.39±5.27,Mfn2/CAPDH(%):92.75±10.44比41.88±3.95,0pa1/CAPDH(%):98.14±3.71比55.94±7.30.均P<0.05]。故进一步采用HL-1细胞构建感染性心肌病模型,HL-1细胞经FCCP处理后可明显抑制APS的保护效应。结论APS通过抑制Drp1过表达,抑制线粒体的过度分裂,减轻感染性心肌细胞的氧化应激和线粒体损伤,最终改善心脏功能,该机制的发现可为感染性心肌病的治疗提供新的理论依据和临床参考。 展开更多
关键词 黄芪多糖 感染性心肌病 线粒体动力相关蛋白1 氧化应激 线粒体分裂
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壮观霉素B1抑制SUMO化修饰遏制子宫内膜癌侵袭和转移
3
作者 袁梦岚 李承尧 +3 位作者 白洁 陈旭红 刘晓智 李圃 《广东医学》 CAS 2022年第2期169-173,共5页
目的观察壮观霉素B1能否通过抑制蛋白质类泛素化修饰途径抑制子宫内膜癌的侵袭和转移,为子宫内膜癌的靶向治疗提供依据。方法以子宫内膜癌KLE细胞株为研究对象,分对照组及壮观霉素B1组;细胞增殖检测试剂盒检测5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU... 目的观察壮观霉素B1能否通过抑制蛋白质类泛素化修饰途径抑制子宫内膜癌的侵袭和转移,为子宫内膜癌的靶向治疗提供依据。方法以子宫内膜癌KLE细胞株为研究对象,分对照组及壮观霉素B1组;细胞增殖检测试剂盒检测5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)的阳性表达率;细胞划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blotting方法检测泛素连接酶-9(Ubc9)、小泛素样修饰蛋白-1(SUMO1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和MMP-13的蛋白表达情况。结果对照组及壮观霉素B1组KLE细胞中EdU的阳性表达率分别为(94.46±4.27)%和(51.33±5.08)%(t=12.654,P<0.01);细胞迁移距离分别为(44.15±4.07)μm和(22.74±3.95)μm(t=14.359,P<0.01);高倍视野下自Transwell上室向下室迁移的细胞数分别为(67.05±6.54)个和(36.44±4.05)个(t=11.997,P<0.01);壮观霉素B1组KLE细胞中Ubc9、SUMO1、MMP-9和MMP-13的蛋白表达均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论壮观霉素B1能够明显抑制蛋白质SUMO化修饰反应,进而影响子宫内膜癌迁移和侵袭相关责任蛋白的表达,有望成为一种靶向治疗子宫内膜癌的新方法。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 壮观霉素B1 小泛素样修饰蛋白 侵袭 转移
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蛋白质类泛素修饰角度解读亚低温对新生儿缺氧缺血性脑病的保护机制
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作者 刘晓智 徐盼盼 +6 位作者 张春艳 高瑕 刘光碧 楚冬梅 刘扬 田秀英 郑军 《中华新生儿科杂志（中英文）》 CAS CSCD 2023年第5期294-300,共7页
目的从蛋白质类泛素化修饰角度解析亚低温对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的保护机制,为新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy,HIE)的亚低温治疗提供科学依据。方法原代分离培养小鼠NSCs,分为对照组、缺氧组、... 目的从蛋白质类泛素化修饰角度解析亚低温对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)的保护机制,为新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy,HIE)的亚低温治疗提供科学依据。方法原代分离培养小鼠NSCs,分为对照组、缺氧组、亚低温组、缺氧+亚低温组并予相应处理,Western Blot法检测小泛素相关修饰蛋白2/3(small ubiquitin-related modifier 2/3,SUMO2/3)、低氧诱导因子1 α(hypoxia inducible factor 1 α,HIF-1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1 α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1 α,PGC-1α)和八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,Oct4)的蛋白水平;比较NSCs克隆球直径变化,酶联免疫吸附法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光法检测NSCs向神经元细胞分化情况。结果与对照组相比,缺氧组NSCs中SUMO2/3、HIF-1α和PGC-1α的蛋白水平分别升高至1.33、2.26和2.40倍,亚低温组NSCs中SUMO2/3和PGC-1α的蛋白表达水平分别升高至1.52倍和6.36倍,差异均有统计学意义(P<0.05);与缺氧组相比,缺氧+亚低温组NSCs中SUMO2/3、HIF-1α、PGC-1α和Oct4的蛋白表达水平分别升高至1.44、1.40、3.30和1.59倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。缺氧组、亚低温组、缺氧+亚低温组细胞克隆球直径明显小于对照组,缺氧+亚低温组细胞克隆球直径明显小于缺氧组,差异均有统计学意义(P<0.05)。亚低温组与对照组LDH水平比较差异无统计学意义(P>0.05),缺氧+亚低温组LDH水平明显低于缺氧组(P<0.05)。亚低温组细胞死亡率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),缺氧+亚低温组细胞死亡率明显低于缺氧组(P<0.05)。与对照组相比,缺氧组和亚低温组巢蛋白表达水平均有所升高,但神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)水平明显下降(P<0.05);与缺氧组和亚低温组相比,缺氧+亚低温组巢蛋白表达水平进一步增强,同时NSE表达水平进一步下降(P<0.05)。结论亚低温可能通过强化蛋白质的SUMO化修饰方式增加NSCs对缺氧的耐受,进一步为亚低温治疗HIE提供了理论依据。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑病 小泛素相关修饰蛋白 亚低温疗法 神经干细胞
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白藜芦醇降低缺氧诱导因子1α蛋白SUMO化抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成
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作者 盛凤 国书雅 +3 位作者 鲍京京 张春艳 刘晓智 邢卫斌 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1035-1042,共8页
目的从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象,分别给予培养基中加入50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组,... 目的从蛋白质泛素/类泛素化修饰平衡角度探讨白藜芦醇抑制皮肤鳞状细胞癌新生血管形成的内在机制。方法以人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株为研究对象,分别给予培养基中加入50μmol/L和100μmol/L白藜芦醇处理对数生长期A431细胞作为实验组,以不加白藜芦醇培养基处理为对照组。按照上述实验分组,培养48 h采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)实验检测各组细胞增殖活性;采用血管模拟形成实验检测白藜芦醇处理12 h对A431细胞血管拟态形成能力的影响;采用Western印迹检测白藜芦醇处理48 h各组细胞泛素(ubiquitin)、小泛素相关修饰蛋白1(SUMO1)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)相对表达水平。将24只8周龄BALB/c雄性去胸腺小鼠随机均分3组,于腹股沟皮下接种A431细胞,治疗组予1 mg/kg或2 mg/kg白藜芦醇腹腔注射给药,对照组注射相同体积的生理NaCl溶液,每3天注射1次,第21天处死小鼠,解剖肿瘤称重;采用免疫组化检测各组肿瘤组织中CD31的表达。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果对照组、50μmol/L组、100μmol/L组A431细胞增殖率差异有统计学意义(F=17.75,P=0.017),50μmol/L组、100μmol/L组低于对照组(66.53%±5.09%、35.88%±4.28%比100%,LSD-t=21.17、29.04,P=0.011、0.004);3组A431细胞血管管壁样细胞嵴的总长度差异有统计学意义(F=21.37,P=0.004),50μmol/L组、100μmol/L组低于对照组[(102.73±11.36)μm、(37.83±4.19)μm比(185.26±8.02)μm,均P<0.05];3组细胞泛素、SUMO1、HIF-1α、VEGFR相对表达差异均有统计学意义,50μmol/L组、100μmol/L组泛素相对表达均高于对照组(2.09±0.13、3.53±0.16比0.68±0.11,均P<0.05),SUMO1、HIF-1α、VEGFR的相对表达均低于对照组(SUMO1:1.87±0.13、1.02±0.11比3.10±0.11,HIF-1α:0.81±0.06、0.45±0.06比0.97±0.08,VEGFR:0.73±0.09、0.39±0.05比0.98±0.07,均P<0.05)。动物试验中,对照组、1 mg/kg组、2 mg/kg组小鼠皮下肿瘤质量[(3.29±0.57)g、(2.91±0.49)g、(2.55±0.52)g]、肿瘤组织CD31细胞阳性率(76.24%±5.51%、39.45%±5.48%、12.07%±3.54%)差异均有统计学意义(F=14.33、15.34,P=0.019、0.021),1 mg/kg组、2 mg/kg组均低于对照组(均P<0.05)。结论白藜芦醇能够抑制肿瘤生长与肿瘤组织新生血管形成,可能与通过降低HIF-1α蛋白泛素/类泛素化修饰途径抑制皮肤鳞癌新生血管形成有关。 展开更多
关键词 肿瘤 鳞状细胞 细胞增殖 泛素 SUMO1蛋白 缺氧诱导因子1 Α亚基 小鼠 近交BALB C 白藜芦醇 A431细胞系 血管生成抑制
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