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负载干细胞抗原的DC联合CIK细胞对乳腺癌荷瘤鼠肿瘤杀伤研究 被引量：11
1
作者 庞春淼 吕艳 +2 位作者 孙雯雯 司玉玲 庞华 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第6期554-557,I0004,共5页
目的研究不同乳腺癌细胞抗原负载的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合培养后对乳腺癌荷瘤鼠体内肿瘤的杀伤效果。方法分离乳腺癌细胞系MCF-7/ADR中的乳腺癌干细胞并制备冻融抗原,以此冲击由正常人外周血提取的单个核细... 目的研究不同乳腺癌细胞抗原负载的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合培养后对乳腺癌荷瘤鼠体内肿瘤的杀伤效果。方法分离乳腺癌细胞系MCF-7/ADR中的乳腺癌干细胞并制备冻融抗原,以此冲击由正常人外周血提取的单个核细胞诱导培养的DC和CIK,注入乳腺癌荷瘤鼠模型中,以此为实验组(BCSC-AP-DC+CIK组),并与普通抗原冲击的DC联合CIK组(AP-DC+CIK组)、DC+CIK组、CIK组及生理盐水组(NS组)建立对照实验。观察各组中小鼠肿瘤生长情况,采用免疫组化法检测bcl-2、bax表达,原位末端标记法(TUNEL)检测各组肿瘤组织凋亡。结果各组小鼠肿瘤体积在治疗前后及各组小鼠肿瘤体积在治疗后差异均有统计学意义(P<0.05),NS组小鼠治疗后肿瘤体积最大(3.625±0.093)cm3,BCSC-AP-DC+CIK组肿瘤体积最小(1.234±0.131)cm3。BCSC-AP-DC+CIK组bax强阳性表达,较其他组强;bcl-2弱阳性或不表达,较其他组弱。凋亡指数BCSC-AP-DC+CIK组>AP-DC+CIK组>DC+CIK组>CIK组>NS组。结论经乳腺癌干细胞抗原冲击的DC与CIK作用后诱导同种乳腺癌细胞凋亡强于经普通乳腺癌细胞抗原冲击的DC联合CIK、单纯DC与CIK共同作用后及单独CIK的治疗效果。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 干细胞 树突细胞 杀伤细胞 基因 BCL-2 bcl-2相关X蛋白 细胞凋亡 gene bcl-2
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负载抗原DC与CIK共培养对富集培养乳腺癌CTCs杀伤作用研究 被引量：6
2
作者 吕艳 庞华 +2 位作者 庞春淼 司玉玲 孙雯雯 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第12期1173-1176,I0003,共5页
目的观察负载抗原的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对富集培养乳腺癌循环肿瘤细胞(CTCs)的细胞毒作用。方法将有CTCs的乳腺癌患者外周血单个核细胞,磁珠分选富集表皮细胞黏附分子(EpCAM)+乳腺癌CTCs体外培养,并用巢式PCR... 目的观察负载抗原的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对富集培养乳腺癌循环肿瘤细胞(CTCs)的细胞毒作用。方法将有CTCs的乳腺癌患者外周血单个核细胞,磁珠分选富集表皮细胞黏附分子(EpCAM)+乳腺癌CTCs体外培养,并用巢式PCR、细胞免疫荧光成像(CK8/18)、细胞免疫组化(CK8/18、CK19)方法进行鉴定,分选后EpCAM-细胞常规诱导DC及CIK;制备乳腺癌CTCs全冻融抗原(Ag)冲击DC,分Ag-DC-CIK组、DC-CIK组、DC组、CIK组。台盼蓝拒染法动态监测CIK细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞免疫表型,MTT法检测对乳腺癌CTCs的杀伤活性,流式细胞术检测诱导乳腺癌CTCs的早期凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态及超微结构。结果磁珠分选富集后EpCAM+细胞巢式PCR可见CK19 mRNA条带表达,经体外培养后胞浆染色CK8/18+、CK19+,CK-FITC/DAPI免疫荧光染色见胞浆蓝荧光/核绿荧光的CK8/18阳性细胞。DC与CIK共培养细胞增殖活性明显大于单独培养的CIK(P<0.001),DC免疫表型CD1α、CD83+CD86+、CD83+CD11C+、CD86+CD11C+及CIK免疫表型CD3+CD8+、CD3+CD56+的表达率Ag-DC-CIK组高于DC-CIK组、DC组及CIK组(P<0.05)。Ag-DC-CIK、DC-CIK、CIK3组均可诱导乳腺癌CTCs凋亡,凋亡率为(56.83±3.07)%、(31.43±1.77)%、(24.70±1.51)%,两两比较差异有统计学意义,透射电镜可见诱导凋亡乳腺癌CTCs的典型微结构。结论磁珠分选联合细胞免疫学方法可以提高乳腺癌CTCs的检测灵敏度;经抗原冲击DC明显增加CIK细胞的增殖能力和细胞毒活性,有可能作为一种临床有效的抗乳腺癌复发与转移的免疫治疗手段。 展开更多
关键词 树突细胞 乳腺肿瘤 细胞骨架 角蛋白质类 细胞凋亡 循环肿瘤细胞 表皮细胞黏附分子 细胞因子诱导的杀伤细胞
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