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槐定碱对大鼠急性心肌梗死范围的影响 被引量:8
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作者 丁娟 赵薇 +3 位作者 聂黎虹 彭涛 周永忠 周旭 《宁夏医科大学学报》 2009年第1期22-23,共2页
目的研究槐定碱对大鼠急性心肌梗死范围的影响。方法结扎左冠状动脉前降支(LAD)制备大鼠急性心肌缺血模型,以丹参和硝酸甘油为对照,观察槐定碱2.5、5和10mg/kg对心肌缺血模型的影响。缺血3h后进行心肌大体标本(TTC)染色以确定心肌梗死... 目的研究槐定碱对大鼠急性心肌梗死范围的影响。方法结扎左冠状动脉前降支(LAD)制备大鼠急性心肌缺血模型,以丹参和硝酸甘油为对照,观察槐定碱2.5、5和10mg/kg对心肌缺血模型的影响。缺血3h后进行心肌大体标本(TTC)染色以确定心肌梗死范围。结果槐定碱2.5、51、0 mg/kg组均能够缩小缺血心肌梗死范围(P<0.05)。结论槐定碱能够缩小急性心肌缺血损伤引起的心肌梗死范围。 展开更多
关键词 槐定碱 急性心肌缺血 心肌梗死范围
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噬菌体随机肽库中乳腺癌肿瘤标志物的筛选 被引量:3
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作者 赵薇 孟麟 +1 位作者 高玉婧 姜北海 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期951-954,共4页
目的:利用噬菌体随机12肽库对乳腺癌患者血清进行差异性筛选,以获得乳腺癌特异性的肿瘤标志物。方法:以混合乳腺癌患者血清IgG作为筛选分子,对噬菌体随机12肽库进行亲和筛选;3轮淘选后,应用常规ELISA鉴定噬菌体单克隆;阳性克隆经测序后... 目的:利用噬菌体随机12肽库对乳腺癌患者血清进行差异性筛选,以获得乳腺癌特异性的肿瘤标志物。方法:以混合乳腺癌患者血清IgG作为筛选分子,对噬菌体随机12肽库进行亲和筛选;3轮淘选后,应用常规ELISA鉴定噬菌体单克隆;阳性克隆经测序后,选择与乳腺癌血清结合活性最高的多个噬菌体的共有小肽序列来人工合成其相应的寡核苷酸序列,并将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,经诱导表达及纯化GST-小肽融合蛋白后,应用常规ELISA检测20例乳腺癌患者和20例正常人与GST-小肽的结合反应。结果:3轮筛选没有明显的富集现象,但获得38个可与乳腺癌患者血清反应,而不与正常人血清反应的阳性克隆。经扩大乳腺癌患者血清样本例数进一步检测后对8个结合活性始终较高的阳性克隆进行测序发现部分克隆序列相同;将其中结合活性最高的小肽序列P15与GST蛋白进行融合表达,并分别检测其与20例乳腺癌患者和正常人血清的结合反应,结果提示患者血清与GST-P15的反应明显高于正常人,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:筛选到的小肽P15可以特异结合乳腺癌患者血清中的抗体。该小肽为进一步寻找乳腺癌患者体内相应的肿瘤抗原奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 噬菌体肽库 肿瘤标志物
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应用小肽融合蛋白免疫诱导抗HER-2体液免疫反应
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作者 孟麟 姜北海 +2 位作者 赵薇 赵丽丽 寿成超 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期93-97,共5页
目的应用HER-2 B细胞表位模拟小肽Mut与Hsc70的融合蛋白诱导抗小肽和抗HER-2的体液免疫反应。方法将Hsc70和Mut小肽序列定向插入pQE40载体中,构建pQE40-Hsc70-Mut原核表达质粒,并诱导表达、纯化融合蛋白Hsc70-Mut。常规免疫Balb/c小鼠,... 目的应用HER-2 B细胞表位模拟小肽Mut与Hsc70的融合蛋白诱导抗小肽和抗HER-2的体液免疫反应。方法将Hsc70和Mut小肽序列定向插入pQE40载体中,构建pQE40-Hsc70-Mut原核表达质粒,并诱导表达、纯化融合蛋白Hsc70-Mut。常规免疫Balb/c小鼠,应用ELISA、Western blot检测小鼠血清中抗小肽Mut和抗HER-2的体液免疫反应。结果成功构建了pQE40-Hsc70-Mut原核表达质粒,Hsc70-Mut融合蛋白在大肠杆菌SG13009能够实现可溶性表达,应用Ni-NTA纯化可得到纯度>90%的融合蛋白;Hsc70-Mut免疫小鼠可产生抗Mut小肽的免疫反应,部分小鼠同时可产生抗HER-2的体液免疫反应。结论 Hsc70-Mut融合蛋白免疫小鼠可产生抗小肽和抗HER-2的体液免疫反应,为HER-2疫苗的研制奠定了一定基础,同时应用小肽融合蛋白免疫也为小肽免疫提供了一种新的免疫策略。 展开更多
关键词 Hse70 HER-2
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SNCG真核表达质粒的构建、分泌表达与免疫活性初步鉴定 被引量:1
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作者 孟麟 姜北海 +4 位作者 赵薇 赵丽丽 刘彩云 吴健 寿成超 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期626-630,共5页
分别将带有Igκ、MMP9、P37信号肽序列的Hsc70-SNCG融合蛋白序列定向插入真核表达载体pVAX1中,经酶切,及插入片段序列测定对重组质粒进行鉴定,证明成功构建了带有三种信号肽的Hsc70-SNCG真核表达质粒pVAX-Igκ-Hsc70-SNCG、pVAX-MMP9-Hs... 分别将带有Igκ、MMP9、P37信号肽序列的Hsc70-SNCG融合蛋白序列定向插入真核表达载体pVAX1中,经酶切,及插入片段序列测定对重组质粒进行鉴定,证明成功构建了带有三种信号肽的Hsc70-SNCG真核表达质粒pVAX-Igκ-Hsc70-SNCG、pVAX-MMP9-Hsc70-SNCG、pVAX-P37-Hsc70-SNCG。真核表达质粒常规转染QM-7细胞,ELISA、Western-blot检测结果提示三种信号肽均可诱导融合蛋白Hsc70-SNCG的分泌表达。基因枪质粒免疫BALB/c小鼠,ELISA检测结果提示三种真核分泌表达质粒均可引发小鼠抗SNCG体液免疫反应,且激发体液免疫反应的强弱依赖于质粒含有信号肽诱导分泌表达的水平。 展开更多
关键词 SNCG 信号肽 分泌表达
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