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如何培养新世纪高素质畜牧兽医人才——山东农业大学畜牧兽医专业教育的改革与发展 被引量：4
1
作者 林海 王树迎 +2 位作者 嵇景涛 宋伟 崔言顺 《兽医导刊》 2007年第6期4-6,共3页
山东农业大学动物医学专业有悠久的办学历史，专业设立于1949年，迄今已有58年的办学历史。改革开放、特别是进入新世纪以来，我们始终把如何实现人才培养的良性循环作为兽医专业教学管理的首要目标和亟待解决的中心问题。在重视理论教... 山东农业大学动物医学专业有悠久的办学历史，专业设立于1949年，迄今已有58年的办学历史。改革开放、特别是进入新世纪以来，我们始终把如何实现人才培养的良性循环作为兽医专业教学管理的首要目标和亟待解决的中心问题。在重视理论教学的同时，高度重视实践教学， 展开更多
关键词 山东农业大学 人才培养 改革开放 畜牧兽医 专业教育 素质 动物医学专业 办学历史
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转基因玉米中膦丝菌素乙酰转移酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量：8
2
作者 刘志浩 高丽丽 +3 位作者 王新桐 孙佳芝 杨正友 柴同杰 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第11期45-50,共6页
【目的】以单克隆抗体（monoclonal antibody,mAbs）为基础，建立检测膦丝菌素乙酰转移酶（the phosphinothricin acetyltransferase,PAT）的双抗体夹心ELISA方法,为转基因玉米PAT蛋白的检测提供参考。【方法】由P3301质粒扩增出膦丝菌... 【目的】以单克隆抗体（monoclonal antibody,mAbs）为基础，建立检测膦丝菌素乙酰转移酶（the phosphinothricin acetyltransferase,PAT）的双抗体夹心ELISA方法,为转基因玉米PAT蛋白的检测提供参考。【方法】由P3301质粒扩增出膦丝菌素乙酰转移酶基因（blalaphos resistance gene）bar，并与表达载体pET28a构建重组质粒，诱导表达产生外源性PAT蛋白；以纯化后的PAT蛋白为免疫原，制备mAbs，建立双抗体夹心ELISA方法，并与PCR检测方法进行比较，确定该方法的准确性和可靠性。【结果】应用mAbs 4D5和3E8成功建立了检测PAT蛋白的双抗体夹心ELISA方法，其有效检测范围为3.125～50 ng/mL。采用该夹心ELISA方法对36份已知转基因背景的玉米样品进行了检测，根据阴阳性判定值OD450〉0.210，检测出含PAT蛋白的Bt176阳性样品4份，以bar基因为检测目标利用传统PCR方法也检测出相同的Bt176样品4份，2种检测方法的符合率为100%。【结论】利用建立的双抗体夹心ELISA免疫学检测方法，可以对转基因玉米中的PAT蛋白进行准确、特异、有效的检测。 展开更多
关键词 PAT蛋白 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA Bt176
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猪圈及其周边社区环境大肠埃希菌气溶胶产生及其传播 被引量：3
3
作者 袁文 柴同杰 +3 位作者 周玉法 苗增民 张红双 秦梅 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期27-31,共5页
目的是以大肠埃希菌为指示菌研究猪舍环境中微生物气溶胶产生及向其舍外环境的传播。采用Andersen-6级空气微生物样品收集器和RCS-离心式采样器分别在4个猪场舍内、舍外不同距离收集大肠埃希菌气溶胶,计算每个采样点大肠埃希菌的浓度;同... 目的是以大肠埃希菌为指示菌研究猪舍环境中微生物气溶胶产生及向其舍外环境的传播。采用Andersen-6级空气微生物样品收集器和RCS-离心式采样器分别在4个猪场舍内、舍外不同距离收集大肠埃希菌气溶胶,计算每个采样点大肠埃希菌的浓度;同时,采集猪的粪便,分离大肠埃希菌。利用ERIC-PCR技术,扩增其DNA条带,形成聚类图谱。通过每一个采样点大肠埃希菌遗传相似性分析及其浓度变化的比较,确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播模式。结果表明,4个猪场舍内空气中大肠埃希菌的浓度远远高于舍外大肠埃希菌浓度(P<0.05)。52.4%粪便大肠埃希菌与舍内空气中的大肠埃希菌相似性可达90%以上;从猪场舍外下风方向分离到的多数大肠埃希菌(55%)与舍内空气或粪便中分离的大肠埃希菌相似性可达90%以上。说明源于猪舍的微生物气溶胶能够传播到舍外环境或居民社区,具有流行病学及公共卫生意义。 展开更多
关键词 猪舍环境 大肠埃希菌气溶胶 ERIC-PCR 遗传相似性 流行病学及公共卫生意义
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养殖环境生物应激因素对鸡免疫功能和生产性能的影响 被引量：4
4
作者 张红双 秦梅 柴同杰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期23-26,共4页
为了认识不同养殖环境对肉鸡免疫功能和生产性能的影响,本实验选用1日龄健康AA(Arbor Acres)肉鸡320只,随机分为试验组和对照组,每组设4个重复。在不同的鸡舍环境卫生管理条件下,定期测定环境参数气载需氧菌、气载真菌和气载内毒素的浓... 为了认识不同养殖环境对肉鸡免疫功能和生产性能的影响,本实验选用1日龄健康AA(Arbor Acres)肉鸡320只,随机分为试验组和对照组,每组设4个重复。在不同的鸡舍环境卫生管理条件下,定期测定环境参数气载需氧菌、气载真菌和气载内毒素的浓度,与此同时再对鸡只的新城疫抗体水平、免疫器官指数、生产性能、胴体性状和外观步态进行测定。结果表明,鸡舍环境质量差,使微生物气溶胶含量增高,对鸡的免疫功能和生产性能均有一定程度的负面影响。所以,保持良好的饲养环境清洁卫生条件,是健康养殖的重要措施之一。 展开更多
关键词 养殖环境 气载微生物 免疫功能 生产性能
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黄曲霉毒素生物降解的研究进展 被引量：11
5
作者 孙玲玉 柴同杰 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第4期645-647,共3页
黄曲霉毒素B1具有强毒性、强致畸性和强致突变性,是危害最大的真菌毒素之一。黄曲霉毒素污染食品、饲料等严重危害消费者和动物的健康,给相关行业和畜牧业生产带来巨大的经济损失。由于物理和化学方法去除食物中的黄曲霉毒素存在种种应... 黄曲霉毒素B1具有强毒性、强致畸性和强致突变性,是危害最大的真菌毒素之一。黄曲霉毒素污染食品、饲料等严重危害消费者和动物的健康,给相关行业和畜牧业生产带来巨大的经济损失。由于物理和化学方法去除食物中的黄曲霉毒素存在种种应用缺陷,目前生物降解黄曲霉毒素成为安全、高效且环保的方法而备受关注。本文就国内外黄曲霉毒素生物降解的研究作一综述,同时对生物降解应用前景予以展望。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 食品与饲料 生物降解 微生物
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产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体的研制 被引量：2
6
作者 刘萌萌 樊金 +3 位作者 刘雪慧 秦贵平 张慧蓉 柴同杰 《动物医学进展》 北大核心 2015年第12期116-120,共5页
为了得到产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体,以重组产气荚膜梭菌β毒素为抗原免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合并筛选出阳性单克隆杂交瘤细胞株,接种至小鼠腹腔,培养后抽取腹水并用正辛酸-硫酸铵纯化法进行纯化,从而获得抗产气荚... 为了得到产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体,以重组产气荚膜梭菌β毒素为抗原免疫小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合并筛选出阳性单克隆杂交瘤细胞株,接种至小鼠腹腔,培养后抽取腹水并用正辛酸-硫酸铵纯化法进行纯化,从而获得抗产气荚膜梭菌β毒素单克隆抗体。该单克隆抗体经特异性试验,能与天然β毒素及重组β毒素发生特异性反应,且效价较高,为进一步建立快速有效的临床检测技术奠定了基础。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 Β毒素 单克隆抗体 研制
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猪繁殖与呼吸综合征病毒糖基化囊膜蛋白5原核表达载体的构建及免疫原性分析 被引量：1
7
作者 李欣贤 张晓丹 +3 位作者 刘晶晶 苗增民 张涛涛 柴同杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期89-94,共6页
为分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白5(GP5)的免疫原性,本研究通过提取PRRSV分离株(GenBank登录号:HQ701732.1)RNA和RT-PCR扩增得到开放阅读框5(ORF5)基因。根据ORF5的基因序列,设计2对引物,经PCR扩增分别获得不含信号... 为分析猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)糖基化囊膜蛋白5(GP5)的免疫原性,本研究通过提取PRRSV分离株(GenBank登录号:HQ701732.1)RNA和RT-PCR扩增得到开放阅读框5(ORF5)基因。根据ORF5的基因序列,设计2对引物,经PCR扩增分别获得不含信号肽和跨膜功能区的2段基因片段。利用酶切位点,将2段基因连接到原核表达载体pET-28a(+)上,获得重组表达质粒pET28a-GP5。将重组质粒导入BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导获得表达。经Western blotting鉴定,重组蛋白可被PRRSV阳性血清识别。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA方法检测,小鼠能产生针对蛋白的血清抗体。因此,该重组PRRSV GP5蛋白具有良好的生物学活性,为进一步研究GP5蛋白的结构和功能奠定基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 糖基化囊膜蛋白5 重组蛋白 ELISA WESTERN BLOTTING
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ERIC-PCR和PFGE对大肠埃希菌由舍内向舍外传播的鉴定及两种方法的比较 被引量：7
8
作者 李庆雷 柴同杰 刘巍 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第S1期112-117,共6页
为了深入认识鸡舍环境微生物气溶胶的产生及其向舍外环境的传播,同时比较ERIC-PCR和PFGE对细菌的基因分型结果,本研究以大肠埃希菌为指示菌,采用Andersen-6级空气微生物样品收集器,分别在两个鸡舍的舍内、舍外上风向10 m和50 m和下风向1... 为了深入认识鸡舍环境微生物气溶胶的产生及其向舍外环境的传播,同时比较ERIC-PCR和PFGE对细菌的基因分型结果,本研究以大肠埃希菌为指示菌,采用Andersen-6级空气微生物样品收集器,分别在两个鸡舍的舍内、舍外上风向10 m和50 m和下风向10、50、100、200、400 m的距离处收集空气样品,同时采集鸡的粪便,分离、鉴定大肠埃希菌。采用ERIC-PCR和PFGE两种方法对不同来源的大肠埃希菌分离株进行基因分型,根据每个采样点大肠埃希菌的相似性指数,确认动物舍内微生物气溶胶向舍外环境传播的模式,并比较这两种方法对大肠埃希菌的基因分型结果,分析这两种分子生物学分型方法各自的优缺点和适应性。本试验共采集到28株大肠埃希菌,ERIC-PCR和PFGE两种方法分别进行同源性鉴定显示,从鸡的粪便中分离到的大肠埃希菌与从舍内空气中分离到的部分大肠埃希菌(62.5%)具有相同来源;从鸡场舍外下风方向分离到的多数大肠埃希菌(20%)与舍内空气或粪便中分离的大肠埃希菌来源相同。而从鸡舍上风没有分离到大肠埃希菌,排除了下风向采得的大肠埃希菌来自上风向的可能。而很多从舍内空气和舍外下风方向分离到的大肠埃希菌与粪便中的具有相同来源,说明粪便中的细菌能够形成气溶胶,并且通过舍内外气体交换传播到舍外,依气象条件传播到舍外不同的距离。造成周边环境的生物污染以及病原微生物的扩散。本研究同时对ERIC-PCR和PFGE两种方法所得的分型结果进行了比较。PFGE的分辨率高于ERIC-PCR,而且PFGE的重复性也很高,不同试验室得出的结果可以相互比较,是细菌基因分型的"金标准"。但是PFGE试验费用高,需要时间长,对试剂、仪器和操作都具有很高的要求;ERIC-PCR虽然分辨率不及PFGE,但是ERIC-PCR简单、快速,成本低,对操作和试剂以及仪器要求都不高,所以ERIC-PCR也可以对肠杆菌进行同源性鉴定,应用于流行病学调查和对气源性微生物传播的鉴定。由于ERIC-PCR和PF-GE是根据DNA中不同的遗传特征进行分类的,所以这两种分型技术结合起来分析菌株的遗传进化关系,意义更大。 展开更多
关键词 鸡舍 气载大肠埃希菌 发生 传播 ERIC-PCR PFGE 比较
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猪Mx1基因的克隆表达及抗病毒活性研究 被引量：2
9
作者 刘玉洁 赵协 +2 位作者 张廷虹 曹广明 扬志昆 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第4期35-39,共5页
本文应用(RT-PCR)技术,从猪瘟弱毒疫苗和Poly:IC共刺激7 h的PK15细胞的cDNA中扩增出编码Mx1蛋白的全长基因,并通过引物设计填补了PK(15)细胞系Mx1 cDNA序列中3'端11bp的缺失,成功获得Mx1完整基因的克隆。构建了重组表达质粒pRetroQ-... 本文应用(RT-PCR)技术,从猪瘟弱毒疫苗和Poly:IC共刺激7 h的PK15细胞的cDNA中扩增出编码Mx1蛋白的全长基因,并通过引物设计填补了PK(15)细胞系Mx1 cDNA序列中3'端11bp的缺失,成功获得Mx1完整基因的克隆。构建了重组表达质粒pRetroQ-sMx1,转染HEK293T细胞并表达Mx1蛋白,利用微量细胞病变抑制法测定其抗病毒活性。双酶切鉴定和核酸序列测定证实pRetroQ-sMx1真核表达质粒构建成功,转染HEK 293T细胞后,能够检测到绿色荧光,Western blot证实为目的蛋白。微量细胞病变抑制法测定重组蛋白具有一定的抗水疱性口炎病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒的活性。重组Mx1具有一定抗病毒生物功能,为进一步研究重组Mx1蛋白的活性以及Mx1抗病毒药物奠定了基础。 展开更多
关键词 Mx1基因 克隆 真核表达 抗病毒活性
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锌的营养生理作用及在畜牧业生产中的应用 被引量：3
10
作者 卢军锋 张甜 柴同杰 《山东畜牧兽医》 2015年第9期82-83,共2页
锌是动物机体必需的微量元素,是目前发现的动物营养必需微量元素中功能最多的一种。本文主要从锌的营养与生理作用、有机锌和无机锌的生物有效性、锌的缺乏与过量以及高锌在畜牧生产中的应用等方面进行综述,对进一步研究锌在动物体的作... 锌是动物机体必需的微量元素,是目前发现的动物营养必需微量元素中功能最多的一种。本文主要从锌的营养与生理作用、有机锌和无机锌的生物有效性、锌的缺乏与过量以及高锌在畜牧生产中的应用等方面进行综述,对进一步研究锌在动物体的作用机理,将锌应用于畜牧业生产具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 畜牧业生产 无机锌 生物有效性 营养生理 畜牧生产 锌缺乏 有机锌 生物学效价 生化代谢 引起代谢
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