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穿膜肽介导的NY-ESO-1_(155-163)诱导CTL对黑素瘤A-375细胞的杀伤活性
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作者 李文丽 贾原 +3 位作者 赵晴 李芳 靳保利 张俊萍 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期710-715,共6页
目的:探讨穿膜肽(cell penetrating peptide,CPP)Tat_(49-57)携带NY-ESO-1_(155-163)抗原肽致敏DC后诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL),并体外检测其对黑素瘤细胞株A-375的杀伤效果。方法:采集健康志愿者... 目的:探讨穿膜肽(cell penetrating peptide,CPP)Tat_(49-57)携带NY-ESO-1_(155-163)抗原肽致敏DC后诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL),并体外检测其对黑素瘤细胞株A-375的杀伤效果。方法:采集健康志愿者外周血50 ml,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,经细胞因子诱导,获得DC和T淋巴细胞。实验组用Tat_(49-57)-NYESO-1155-163致敏DC,待DC成熟后与T淋巴细胞混合诱导产生CTL,并设PBS组和NY-ESO-1_(155-163)组作为对照。流式细胞术检测致敏前后DC的表型,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测抗原肽疫苗致敏DC后诱导的CTL对黑素瘤细胞株A-375的体外杀伤活性,同时与对人肺癌A549细胞株、人白血病K562细胞的杀伤作用进行比较。结果:Tat显著提升NY-ESO-1_(155-163)进入DC的穿膜能力。与NY-ESO-1_(155-163)致敏的DC相比,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)致敏后DC的CD80/CD86[(54.9±3.3)%vs(43.8±5.7)%,P<0.05]和CD40[(42.1±1.9)%vs(23.7±2.8)%,P<0.05]的表达率显著升高。Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)刺激DC后诱导培养的T细胞亚群主要以MHC-Ⅰ类分子介导的CD3+CD8+细胞为主。Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)组CTL对A-375细胞的杀伤能力显著高于NY-ESO-1_(155-163)组,且随着效靶比的增加,杀伤活性逐渐增强(P<0.05)。A-375细胞高表达NY-ESO-1,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)组CTL对A-375细胞具有特异性杀伤作用,杀伤作用显著强于A549和K562细胞(均P<0.05)。结论:Tat_(49-57)可以增强NY-ESO-1_(155-163)抗原多肽的免疫原性,Tat_(49-57)-NY-ESO-1_(155-163)多肽致敏DC能有效诱导CTL抗黑素瘤细胞A-375的特异性免疫应答。 展开更多
关键词 黑素瘤 树突状细胞 细胞穿膜肽 肿瘤免疫治疗
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