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基于问卷分析对基础医学线上教学的思考 被引量：10
1
作者 李颖 王晓晖 《基础医学教育》 2020年第7期514-517,共4页
为积极探索有效的线上教学方式,山西医科大学基础医学院教师通过线上直播、线上交互讨论等形式,为自主学习的学生提供良好的学习体验和学习效果。文章以基础医学线上教学效果与评价的问卷调查为例,对比以往的传统教学模式,对调研数据进... 为积极探索有效的线上教学方式,山西医科大学基础医学院教师通过线上直播、线上交互讨论等形式,为自主学习的学生提供良好的学习体验和学习效果。文章以基础医学线上教学效果与评价的问卷调查为例,对比以往的传统教学模式,对调研数据进行分析和总结,提出主要问题和建议,希望对基础医学类专业相关课程的线上教育教学改革起到积极的促进作用。 展开更多
关键词 基础医学 线上教学 教学改革 教学效果
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木犀草素改善脊髓损伤大鼠血清诱导的心肌细胞死亡 被引量：1
2
作者 张稳稳 徐梦如 +6 位作者 田园 张立飞 师姝 王宁 原媛 王丽 郝海虎 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第1期38-43,共6页
背景:脊髓损伤导致的心功能不全是脊髓损伤患者死亡的重要原因,但具体机制并不清楚。因此,揭示脊髓损伤患者出现心功能不全的机制对于提高患者的生存质量和生存率有重要意义。目的:探讨木犀草素改善脊髓损伤大鼠血清诱导心肌细胞死亡的... 背景:脊髓损伤导致的心功能不全是脊髓损伤患者死亡的重要原因,但具体机制并不清楚。因此,揭示脊髓损伤患者出现心功能不全的机制对于提高患者的生存质量和生存率有重要意义。目的:探讨木犀草素改善脊髓损伤大鼠血清诱导心肌细胞死亡的作用机制。方法:使用Allen’s冲击仪损伤雄性SD大鼠脊椎T9-T11,进行脊髓损伤造模,设置假手术组作为对照,取各组大鼠血清。将H9c2细胞分为空白对照组、假手术大鼠血清组、脊髓损伤大鼠血清组以及木犀草素预处理组,空白对照组为普通培养基培养,假手术大鼠血清组使用含体积分数10%假手术大鼠血清的培养基培养,脊髓损伤大鼠血清组使用含体积分数10%脊髓损伤大鼠血清的培养基培养,木犀草素预处理组预先使用含有终浓度为20μmol/L木犀草素的培养基培养心肌细胞4 h,之后更换含体积分数10%脊髓损伤大鼠血清的培养基培养,培养24 h后使用CCK-8法检测各组H9c2心肌细胞的存活率,采用Western blot检测各组H9c2心肌细胞自噬相关蛋白LC3及p62的蛋白表达。结果与结论:与空白对照组相比,假手术大鼠血清组细胞存活率无明显改变(P>0.05);与假手术大鼠血清组相比,脊髓损伤大鼠血清组细胞存活率显著降低(P<0.01),LC3蛋白表达显著降低(P<0.05),p62蛋白表达显著升高(P<0.05);与脊髓损伤大鼠血清组相比,木犀草素预处理组细胞存活率明显回升(P<0.0001),LC3蛋白表达显著升高(P<0.05),p62蛋白表达显著降低(P<0.05)。结果表明:木犀草素可能通过促进自噬进而改善脊髓损伤大鼠血清诱导的心肌细胞死亡。 展开更多
关键词 脊髓损伤 血清 H9C2细胞 自噬 木犀草素 心功能不全
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内吞作用相关基因FCHO2在乳腺癌中的表达及功能分析
3
作者 冯雪飞 郝艳龙 +4 位作者 孟小燕 郭艳琳 翟元芳 邹斌斌 张玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期598-606,共9页
目的:探讨内吞作用相关基因FCHO2在各亚型乳腺癌中的表达及其与乳腺癌患者的预后和免疫细胞浸润的相关性。方法:应用免疫组化法和bc-GenExMinerv5.0数据库数据分析FCHO2在各亚型乳腺癌组织中的表达,通过GEO和TIMER数据库数据分析FCHO2... 目的:探讨内吞作用相关基因FCHO2在各亚型乳腺癌中的表达及其与乳腺癌患者的预后和免疫细胞浸润的相关性。方法:应用免疫组化法和bc-GenExMinerv5.0数据库数据分析FCHO2在各亚型乳腺癌组织中的表达,通过GEO和TIMER数据库数据分析FCHO2与各亚型乳腺癌患者预后和免疫细胞浸润的关系,利用STRING和GEPIA数据库数据分析与FCHO2的互作蛋白网络和其与互作蛋白的相关性,通过UALCAN和DAVID数据库数据对乳腺癌组织中FCHO2表达相关基因进行KEGG和GO分析。结果:免疫组化法结果显示,FCHO2在管腔型和HER2+乳腺癌组织中均呈高表达(均P<0.05),且与HER2和Ki67表达有关联(P=0.03和P=0.007)。FCHO2高表达的管腔型乳腺癌患者总生存期(OS)和无复发生存期(RFS)均明显缩短(均P<0.05)。FCHO2蛋白与EPS15等多种蛋白表达相关且构成蛋白-蛋白互作网络。KEGG和GO分析显示,乳腺癌组织中FCHO2相关表达基因主要与昼夜节律、自噬等生物学过程有关,涉及叉头框蛋白O(FoxO)和TGF-β等信号通路。FCHO2表达与各亚型乳腺癌组织中的免疫细胞浸润相关(均P<0.05)。结论:FCHO2在管腔型、HER2+乳腺癌组织中呈高表达,且与管腔型乳腺癌患者预后及免疫细胞浸润相关,其可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 FCHO2 内吞作用 乳腺癌 预后 免疫细胞浸润 生物信息学分析
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Humanin蛋白在Alzheimer’s病模型中神经保护作用的研究进展
4
作者 李蓉 樊帅帅 +2 位作者 黄义方 王晓晖 王丽 《临床神经病学杂志》 CAS 2024年第4期297-300,共4页
研究表明,Humanin蛋白通过多种方式在抗Alzheimer’s病的过程中发挥神经保护作用。本综述从Humanin的发现、结构特征、神经保护的机制及其新型同源分泌肽Rattin的结构与功能方面介绍Humanin蛋白在Alzheimer’s病中神经保护作用的最新研... 研究表明,Humanin蛋白通过多种方式在抗Alzheimer’s病的过程中发挥神经保护作用。本综述从Humanin的发现、结构特征、神经保护的机制及其新型同源分泌肽Rattin的结构与功能方面介绍Humanin蛋白在Alzheimer’s病中神经保护作用的最新研究进展。 展开更多
关键词 Alzheimer’s病 Β-淀粉样蛋白 HUMANIN Rattin
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基于微课的病理学教学模式创新应用研究 被引量：9
5
作者 刘青华 王晓晖 +2 位作者 杨丽红 乔爱秀 李灵敏 《基础医学教育》 2017年第7期540-542,共3页
随着信息技术及现代化教学手段的不断发展,微课作为一种新的信息化教学手段必将成为高校一种新型的教学模式。文章试图通过对微课在高等医学院校病理学教学中的应用进行分析探讨,充分发掘微课在病理教学中的优势作用,从而提高教学质量。
关键词 病理学 微课 教学改革
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专业英语学习和医学双语教学课程的关联性探讨 被引量：8
6
作者 李夏青 刘福 +1 位作者 张杨 郭建红 《基础医学教育》 2017年第5期376-378,共3页
文章主要对目前国内医学院校双语教学及专业英语教学设置、教学人员的专业英语水平及实施现状进行了分析;结合专业英语及双语教学的特点提出了专业英语课与专业课双语教学两者在教与学之间的关联性:前者通过专业知识学习英语,后者用英... 文章主要对目前国内医学院校双语教学及专业英语教学设置、教学人员的专业英语水平及实施现状进行了分析;结合专业英语及双语教学的特点提出了专业英语课与专业课双语教学两者在教与学之间的关联性:前者通过专业知识学习英语,后者用英语阐述医学知识,二者密切相关;文章还就如何在今后的医学教学实践中将二者融为一体提出了方法和建议。 展开更多
关键词 教学改革 双语教学 医学专业 专业英语教学
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混合式教学模式在病理学理论课中的应用 被引量：5
7
作者 乔爱秀 徐菁 +3 位作者 李灵敏 殷文娟 张玲 王志华 《基础医学教育》 2022年第5期359-364,共6页
病理学是医学生必修的一门重要医学课程。线上线下混合式教学是将传统教学和线上教学有机结合,扬长避短,达到优势互补的一种新型教学模式。借鉴加拿大英属哥伦比亚大学研修高等教育教学法课程所获经验,围绕以学生发展为中心的教学理念,... 病理学是医学生必修的一门重要医学课程。线上线下混合式教学是将传统教学和线上教学有机结合,扬长避短,达到优势互补的一种新型教学模式。借鉴加拿大英属哥伦比亚大学研修高等教育教学法课程所获经验,围绕以学生发展为中心的教学理念,在病理学理论课教学中应用线上线下混合式教学。文章分析了在病理学理论课教学中应用线上线下混合式教学的必要性和可行性,以授课内容结核病总论为例,详述实施线上线下混合式教学的具体流程,并探讨心得体会。 展开更多
关键词 病理学 教学方法 混合式教学
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数字化形态学教学平台在病理实习教学中的应用 被引量：5
8
作者 薛津 王丽 +1 位作者 徐菁 王晓晖 《基础医学教育》 2021年第10期727-728,共2页
随着社会和科技的飞速发展,数字化教学方式逐渐融入现代教学之中。文章结合调查问卷取得的学生反馈和引入山东数字人数字化形态学教学平台之后的工作体会,进一步思考数字化教学平台对病理实习教学的影响,从而摸索更好的病理实习教学方法... 随着社会和科技的飞速发展,数字化教学方式逐渐融入现代教学之中。文章结合调查问卷取得的学生反馈和引入山东数字人数字化形态学教学平台之后的工作体会,进一步思考数字化教学平台对病理实习教学的影响,从而摸索更好的病理实习教学方法,也为其他相关学科的数字化教学提供借鉴。 展开更多
关键词 病理学 教学改革 数字化形态学教学平台
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突触融合蛋白17通过调节自噬减少阿尔茨海默病细胞模型中淀粉样物质沉积 被引量：1
9
作者 周秀雅 马明霞 +4 位作者 王宁 刘婷 李杨 王丽 王晓晖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期385-392,共8页
目的:探究突触融合蛋白17(STX17)对小鼠海马神经元HT22细胞中自噬和淀粉样物质沉积的影响及可能机制。方法:用慢病毒介导HT22细胞内淀粉样前体蛋白(APP)和STX17过表达,RT-qPCR检测慢病毒感染后各组细胞中APP和微管相关蛋白1轻链3-II(LC3... 目的:探究突触融合蛋白17(STX17)对小鼠海马神经元HT22细胞中自噬和淀粉样物质沉积的影响及可能机制。方法:用慢病毒介导HT22细胞内淀粉样前体蛋白(APP)和STX17过表达,RT-qPCR检测慢病毒感染后各组细胞中APP和微管相关蛋白1轻链3-II(LC3-II)及STX17的mRNA表达情况。刚果红染色观察HT22细胞中淀粉样物质沉积情况。Western blot检测自噬相关蛋白LC3-II和P62的表达。免疫荧光观察细胞中STX17定位,以及LC3-II定位和斑点数量。结果:HT22细胞成功过表达APP后,淀粉样物质沉积增多,STX17表达下降,STX17主要定位在细胞质内,LC3-II和P62表达明显增多。过表达STX17后,LC3-II和P62表达下降,淀粉样物质沉积减少。结论:STX17通过调节自噬减少阿尔茨海默病淀粉样物质沉积。 展开更多
关键词 突触融合蛋白17 自噬 阿尔茨海默病 淀粉样前体蛋白
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槲皮素抑制p53表达改善过氧化氢诱导的神经细胞死亡 被引量：1
10
作者 徐梦如 张稳稳 +7 位作者 牛晓辰 马明霞 周秀雅 龙瑶琳 李晨 赵亚平 王丽 郝海虎 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第7期952-962,共11页
目的 研究槲皮素对过氧化氢(H_(2)O_(2))引起的神经细胞损伤的潜在保护作用及机制。方法 为模拟脊髓损伤后神经细胞出现的缺氧损伤,使用不同浓度的H_(2)O_(2)(0,100,200,300,400,500,600,700μmol/L)对SH-SY5Y细胞进行干预8 h,采用CCK-... 目的 研究槲皮素对过氧化氢(H_(2)O_(2))引起的神经细胞损伤的潜在保护作用及机制。方法 为模拟脊髓损伤后神经细胞出现的缺氧损伤,使用不同浓度的H_(2)O_(2)(0,100,200,300,400,500,600,700μmol/L)对SH-SY5Y细胞进行干预8 h,采用CCK-8试剂检测细胞存活率,并结合显微镜下观察,摸索H_(2)O_(2)造模的最佳浓度。使用不同浓度(10,25,50,100,200μmol/L)的槲皮素(quercetin,QUE)对SH-SY5Y细胞进行预处理4 h,再予以H_(2)O_(2)造模处理,通过CCK-8法检测细胞存活率。使用生物信息技术预测槲皮素改善脊髓损伤后神经细胞缺氧损伤的可能作用靶点,首先在TCMSP数据库中筛选槲皮素的作用靶点,同时在5个疾病相关数据库检索与脊髓损伤相关靶点基因,筛选获得槲皮素和脊髓损伤的共同靶点,对靶点蛋白进行PPI蛋白互作分析,并利用Cytoscape中的cytoNCA进行关键靶点的筛选。为进一步验证预测的靶点是否参与槲皮素对神经细胞缺氧损伤的改善作用,将SH-SY5Y细胞分为control组、H_(2)O_(2)组(400μmol/L H_(2)O_(2)作用8 h)以及QUE组(100μmol/L QUE预处理4 h后再予以H_(2)O_(2)干预),使用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同分组p53蛋白的表达水平。为验证p53蛋白在槲皮素干预H_(2)O_(2)诱导的神经细胞损伤中的作用,使用慢病毒感染SH-SY5Y细胞以构建p53蛋白敲低的细胞稳转株以及病毒空白载体对照(shRNA-NC),将携带慢病毒的SH-SY5Y细胞分为shRNA-NC组、shRNA+H_(2)O_(2)组和shTP53+H_(2)O_(2)组,shRNA+H_(2)O_(2)组在感染病毒空载的基础上予以H_(2)O_(2)干预,shTP53+H_(2)O_(2)组在成功感染p53敲低慢病毒的基础上再给予H_(2)O_(2)处理8 h,利用CCK-8检测不同分组细胞的存活率变化。结果 300,400,500,600,700μmol/L H_(2)O_(2)对SH-SY5Y细胞造成不同程度的损伤,细胞存活率随着H_(2)O_(2)浓度的升高而降低(P<0.05),浓度为400μmol/L的H_(2)O_(2)持续作用8 h能够造成SH-SY5Y细胞近半数死亡(P<0.001),此时镜下观察显示:部分细胞形态严重损伤并有少量细胞碎片。使用50,100,200μmol/L槲皮素对细胞进行预处理可减少H_(2)O_(2)诱导的神经细胞死亡,提高细胞存活率(P<0.05)。通过生物信息技术分析获取槲皮素治疗脊髓损伤的作用靶点有91个,使用Cytoscape软件中的cytoNCA筛选槲皮素作用的关键靶点为p53。Western blot检测结果显示:与control组相比,H_(2)O_(2)组p53蛋白表达显著升高(P<0.05),而与H_(2)O_(2)组相比,QUE组p53蛋白表达则明显下降(P<0.001)。CCK-8结果显示,与shRNA-NC组相比,shRNA+H_(2)O_(2)组细胞存活率明显降低(P<0.001);而与shRNA+H_(2)O_(2)组相比,shTP53+H_(2)O_(2)组的细胞存活率则明显升高(P<0.001)。结论 槲皮素通过抑制p53蛋白的表达减少H_(2)O_(2)诱导的神经细胞死亡。 展开更多
关键词 槲皮素 脊髓损伤 神经细胞 P53 生信分析
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ITGA3表达与结直肠癌免疫细胞浸润的关系
11
作者 刘笑 郗彦凤 +5 位作者 步鹏 赵国海 靳佩玉 冯玉婷 崔巍 徐菁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2023年第23期1196-1202,共7页
目的:探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中整合素亚蛋白ɑ3(integrin subunitɑ3,ITGA3)的表达与免疫细胞浸润之间的关系。方法:利用生物信息学方法分析ITGA3 mRNA在泛癌及CRC组织中的表达及对预后的影响,同时全面研究ITGA3与肿瘤浸... 目的:探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中整合素亚蛋白ɑ3(integrin subunitɑ3,ITGA3)的表达与免疫细胞浸润之间的关系。方法:利用生物信息学方法分析ITGA3 mRNA在泛癌及CRC组织中的表达及对预后的影响,同时全面研究ITGA3与肿瘤浸润免疫细胞的相关性。收集2021年1月至2021年12月山西省肿瘤医院确诊为CRC的病例233例,进一步采用免疫组织化学染色(IHC)检测ITGA3、CD8、CD163、FOXP3、PD-L1、CTLA-4、PD-1在CRC组织中的表达,分析ITGA3与免疫浸润细胞、免疫检查点之间的关系。结果:生信分析结果显示ITGA3 mRNA在CRC中表达升高;ITGA3高表达与无进展生存期(progression-free survival,PFS)相关(P<0.05);单因素、多因素分析显示年龄、分期与患者的预后显著相关(P<0.05)。此外,上调的ITGA3表达与CRC中多种免疫细胞浸润水平密切相关。IHC结果表明ITGA3在CRC组织中的高表达率明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。ITGA3的表达与淋巴结转移相关(P<0.05),与CD8^(+)T细胞、PD-L1、CTLA-4(均P<0.05)等免疫标志物表达相关。结论:ITGA3在CRC中高表达,与免疫细胞浸润等密切相关,其可能调节肿瘤免疫微环境,为临床治疗及预后判断提供了新的思路。 展开更多
关键词 结直肠癌 免疫浸润 CD8^(+)T细胞 细胞免疫检查点
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剪接因子SF3B1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义
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作者 杜宇 申柳依 +5 位作者 高绿叶 郝艳龙 王晓慧 张玲 冯雪飞 郭艳琳 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2023年第3期253-260,274,共9页
目的本研究旨在探讨剪接因子3B亚基1(splicing factor 3B subunit 1,SF3B1)在非小细胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)中的表达情况及临床意义。方法通过对226例NSCLC组织和98例正常肺组织进行免疫组织化学染色,检测SF3B1表... 目的本研究旨在探讨剪接因子3B亚基1(splicing factor 3B subunit 1,SF3B1)在非小细胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)中的表达情况及临床意义。方法通过对226例NSCLC组织和98例正常肺组织进行免疫组织化学染色,检测SF3B1表达;采用TCGA数据库的数据分析,明确在NSCLC组织中SF3B1 mRNA表达水平;使用卡方检验分析SF3B1水平与NSCLC患者临床病理特征之间的关系;通过Kaplan-Meier法分析SF3B1基因表达水平与NSCLC患者生存情况之间的关系,使用COX回归研究其预后价值;通过KEGG富集分析SF3B1共表达基因相关的信号通路;在TIMER数据库分析SF3B1的表达量与免疫浸润细胞之间的关系。结果免疫组织化学染色显示,在肺腺癌(LUAD)和肺鳞癌(LUSC)患者中,SF3B1水平均显著高于正常肺组织。TCGA数据库分析显示,与正常肺组织相比,LUAD和LUSC组织中SF3B1mRNA表达水平升高。Kaplan-Meier生存分析显示,SF3B1水平高的肺腺癌患者总生存期较短。COX单因素及多因素分析显示,SF3B1高表达是肺腺癌患者预后不良的独立危险因素。基因富集分析结果显示,SF3B1参与调控赖氨酸降解、核糖核酸转运等信号通路。TIMER数据库分析发现,在肺腺癌中,SF3B1的表达与免疫浸润水平成正相关。结论SF3B1在非小细胞肺癌中高表达,且其高表达与肺腺癌患者的不良预后相关,可能是肺腺癌患者的一个独立预后因素。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 SF3B1 免疫组化 生物信息学 预后
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外泌体在阿尔茨海默病发病和诊疗中的研究进展
13
作者 王艺洁 孙千惠 +4 位作者 任一诺 李艺璇 白磊 王丽 王晓晖 《山西医药杂志》 2023年第16期1237-1241,共5页
阿尔茨海默病(AD)是一种常见的神经退行性疾病,β淀粉样蛋白聚积和Tau蛋白过度磷酸化是其显著的病理特征,神经炎症也参与了该疾病的发生发展,目前AD缺乏有效的治疗方法。外泌体是一种广泛存在于体液中的细胞外囊泡,介导了细胞间通信和... 阿尔茨海默病(AD)是一种常见的神经退行性疾病,β淀粉样蛋白聚积和Tau蛋白过度磷酸化是其显著的病理特征,神经炎症也参与了该疾病的发生发展,目前AD缺乏有效的治疗方法。外泌体是一种广泛存在于体液中的细胞外囊泡,介导了细胞间通信和物质运输。大量研究表明,外泌体参与了毒性蛋白和炎症因子的扩散,在AD中发挥了重要的作用。外泌体的内容物受细胞的状态与大脑微环境的影响,因此,外泌体可以作为生物标志物来诊断和监测AD。此外,外泌体还可以作为治疗靶点和药物运输载体,为AD的治疗提供更多可能的方案。本文回顾了外泌体的生物学功能、与AD发病机制的关系及对AD诊断和治疗的潜在作用。 展开更多
关键词 外泌体 阿尔茨海默病 生物标记
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自体角膜缘干细胞与生物羊膜移植治疗翼状胬肉的疗效比较 被引量：9
14
作者 武劲圆 王晓晖 +2 位作者 孙丰源 唐东润 张蕊 《山东医药》 CAS 2013年第13期62-64,共3页
目的探讨自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉的临床疗效。方法 74例(80只眼)翼状胬肉患者随机分为自体角膜缘干细胞移植组(A组)和生物羊膜移植组(B组),每组40只眼,分别进行自体角膜缘干细胞移植和生物羊膜移植治疗。术后1 d、1周、1个月... 目的探讨自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉的临床疗效。方法 74例(80只眼)翼状胬肉患者随机分为自体角膜缘干细胞移植组(A组)和生物羊膜移植组(B组),每组40只眼,分别进行自体角膜缘干细胞移植和生物羊膜移植治疗。术后1 d、1周、1个月、3个月随访,观察并比较两组视力改善、植片成活、并发症发生情况。结果两组术后视力较术前均有明显提高(P<0.05);A组角膜上皮(3.21±0.65)d愈合,B组术后角膜上皮(6.19±0.63)d愈合,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组术后2眼复发、复发率为4.65%;B组术后3眼复发、复发率为6.98%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论自体角膜缘干细胞移植与生物羊膜移植均可治疗翼状胬肉,自体角膜缘干细胞移植更易于角膜创面愈合。 展开更多
关键词 翼状胬肉 角膜缘干细胞 生物羊膜 移植
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新生大鼠原代心肌细胞分离方法的改进 被引量：8
15
作者 李杨 王丽 +2 位作者 王晓晖 白枫 刘慧荣 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期163-168,共6页
目的对传统的原代乳鼠心肌细胞分离方法进行改良,获得活性好、纯度高、反应性好的原代乳鼠心肌细胞。方法利用断头开胸取心法取新生24 h内的Wistar大鼠心肌组织,无菌剪碎后用0.25%不含EDTA胰酶混合II型胶原酶消化法,采用自制消化组合装... 目的对传统的原代乳鼠心肌细胞分离方法进行改良,获得活性好、纯度高、反应性好的原代乳鼠心肌细胞。方法利用断头开胸取心法取新生24 h内的Wistar大鼠心肌组织,无菌剪碎后用0.25%不含EDTA胰酶混合II型胶原酶消化法,采用自制消化组合装置分离消化细胞。逐日在倒置相差显微镜下观察细胞状态。采用心肌细胞特异性蛋白α-横纹肌肌动蛋白（α-actin）单克隆抗体对培养的心肌细胞进行免疫荧光鉴定。另外使用异丙肾上腺素和去甲肾上腺素作用于细胞,观察细胞反应情况。结果培养后24 h即可观察到部分细胞搏动,可初步确定为心肌细胞;48 h后细胞逐渐展开,连续观察20 d,发现心肌细胞在3～14 d期间搏动频率与形态无明显变化。对比观察发现断头开胸取心法获取的原代心肌细胞中红细胞数量明显减少。免疫荧光鉴定发现,本方法获得的心肌细胞纯度高达95%。此外,分离的原代乳鼠心肌细胞对异丙肾上腺素和去甲肾上腺素反应灵敏。结论断头开胸取心法配以混合酶液消化心脏组织分得的原代乳鼠心肌细胞反应性好、纯度高、有活力,可满足大多数实验的要求。 展开更多
关键词 乳鼠 断头开胸取心 原代心肌细胞 混合酶液消化 鉴定 活性
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非酒精性脂肪性肝病在动脉粥样硬化发生发展中的作用 被引量：11
16
作者 李素红 韩德五 +2 位作者 周鑫 许瑞龄 赵元昌 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期30-36,共7页
目的探讨非酒精性脂肪性肝病在动脉粥样硬化发生发展中的作用。方法 64只SD大鼠随机分为正常对照组及高糖高脂组,每组再分3、6、9个月和12个月4个时段进行观察,每时段8只。对照组喂饲基础饲料,高糖高脂组喂饲高糖高脂饲料。放射免疫法... 目的探讨非酒精性脂肪性肝病在动脉粥样硬化发生发展中的作用。方法 64只SD大鼠随机分为正常对照组及高糖高脂组,每组再分3、6、9个月和12个月4个时段进行观察,每时段8只。对照组喂饲基础饲料,高糖高脂组喂饲高糖高脂饲料。放射免疫法及酶联免疫吸附实验测定外周血中丙氨酸氨基转移酶、游离脂肪酸、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、血糖、空腹胰岛素及内毒素、肿瘤坏死因子、C反应蛋白、单核细胞趋化蛋白1、一氧化氮、内皮素1的水平;摘取主动脉及肝脏组织观察病理形态学变化;CD68免疫组织化学染色单核巨噬细胞观察其在动脉壁的浸润情况;苏丹Ⅳ特殊染色观察脂质在动脉壁的异位沉积情况;Tunnel免疫组织化学染色观察内皮细胞及平滑肌细胞的凋亡情况。结果高糖高脂组大鼠甘油三酯、外周血总胆固醇、低密度脂蛋白、丙氨酸氨基转移酶及空腹血糖、空腹胰岛素水平均升高,且内毒素、C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、单核细胞趋化蛋白1、内皮素1水平也明显升高,而高密度脂蛋白和一氧化氮水平明显降低;高糖高脂组大鼠3个月时即发生了脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎,此时动脉内皮表面出现单核细胞黏附,且内皮细胞出现散在凋亡现象;6个月时肝脏出现纤维化,动脉内皮下脂质明显沉积,单核细胞在斑块内浸润,粥样斑块形成;同时动脉内皮及平滑肌细胞的凋亡明显加重;9个月时肝脏纤维化进一步加重,动脉壁粥样斑块内大量单核细胞浸润,部分斑块出现钙盐沉积,大部分内皮及平滑肌细胞发生凋亡;12个月时肝脏发展为早期肝硬化,动脉壁粥样斑块大片钙盐沉积,内皮及平滑肌细胞发生广泛且弥漫凋亡。结论高糖高脂膳食可诱发非酒精性脂肪性肝病,并伴有肠源性内毒素血症及脂代谢紊乱和慢性炎症的发生。肠源性内毒素血症直接或间接引起内皮细胞受损及功能紊乱,启动动脉粥样硬化的发生,并随着脂质异位沉积及单核细胞浸润,加剧动脉粥样硬化的发展。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 动脉粥样硬化 内毒素 免疫组织化学 细胞凋亡
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IgG亚型及M型磷脂酶A2受体在膜性肾病中的表达及意义 被引量：10
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作者 韩伟霞 高丽芳 +3 位作者 王莹 张晓琴 魏荣 王晨 《中国药物与临床》 CAS 2016年第3期310-314,共5页
目的通过观察Ig G亚型及M型磷脂酶A2受体(PLA2R)在膜性肾病中的表达,回顾性分析二者在特发性膜性肾病(IMN)与病因不明的不典型膜性肾病(UAMN)中的表达意义及鉴别诊断价值。方法收集我中心于2015年2月至9月经肾穿刺活检病理(免疫荧光、... 目的通过观察Ig G亚型及M型磷脂酶A2受体(PLA2R)在膜性肾病中的表达,回顾性分析二者在特发性膜性肾病(IMN)与病因不明的不典型膜性肾病(UAMN)中的表达意义及鉴别诊断价值。方法收集我中心于2015年2月至9月经肾穿刺活检病理(免疫荧光、光镜、电镜)确诊为膜性肾病120例,对其进行免疫组织化学Ig G亚型及PLA2R表达的观察分析,结合其临床资料及病理学特点,进行回顾性统计分析,评价它们在IMN和UAMN鉴别诊断中的价值。结果 1共收集病例120例,其中IMN占69.2%,UAMN占30.8%;UAMN组的平均发病年龄低于IMN组,差异具有统计学意义,组间蛋白尿水平差异无统计学意义。2UAMN组Ig A、Ig M、C3、FRA、C1q的阳性率均高于IMN组,且Ig A及补体C1q的表达中组间差异有统计学意义。3IMN组以Ig G4阳性为主,阳性率显著高于其他亚型,且与UAMN组差异有统计学意义;UAMN组Ig G1、Ig G2均具有较高比例的阳性沉积,Ig G4的阳性率明显低于IMN组。4IMN组PLA2R的阳性率显著高于Ig G各亚型,且与UAMN组差异有统计学意义。5Ig G4与PLA2R联合表达鉴别诊断IMN与UAMN的价值评估中,Ig G4以强度1为界值,灵敏度为79.5%,特异度为59.5%;PLA2R以强度>1为界值,灵敏度为90.4%,特异度为35.1%;二者联合评价后,灵敏度为71.1%,特异度为64.9%。结论 1经免疫组织化学方法测定,IMN组以Ig G4沉积为主,而UAMN组存在Ig G1、Ig G2、Ig G4多种亚型的沉积;2PLA2R和Ig G4在IMN组具有较高的阳性一致率;Ig G4与PLA2R联合应用,有助于IMN与UAMN的鉴别诊断。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 膜性 免疫组织化学 磷脂酶A
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Aβ25-35通过钙超载导致HT22神经细胞Per2异常表达 被引量：3
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作者 李亚蒙 赵学玲 +5 位作者 任亚楠 张蕊 赵今 原媛 王丽 王晓晖 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期418-424,共7页
目的探讨钙超载在Aβ25-35引起HT22细胞Per2表达变化中的作用。方法体内研究将C57BL/6小鼠双侧海马注射Aβ25-35(300μmol/kg)和无菌水后,利用跑轮行为学实验评估小鼠的昼夜节律。体外研究将HT22细胞分为对照组、Aβ25-35处理组、Nim+A... 目的探讨钙超载在Aβ25-35引起HT22细胞Per2表达变化中的作用。方法体内研究将C57BL/6小鼠双侧海马注射Aβ25-35(300μmol/kg)和无菌水后,利用跑轮行为学实验评估小鼠的昼夜节律。体外研究将HT22细胞分为对照组、Aβ25-35处理组、Nim+Aβ25-35处理组。以MTT法检测细胞存活率,实时荧光定量PCR检测per2 mRNA表达水平,Western Blotting检测PER2蛋白相对表达量,免疫荧光染色观察PER2蛋白原位表达情况,流式细胞术检测胞内钙离子浓度。结果体内研究表明Aβ25-35导致C57BL/6小鼠在跑轮行为学实验中表现出明显的昼夜节律紊乱。离体研究发现,5、10、15、20、25、30μmol/L Aβ25-35剂量组细胞存活率较对照组显著降低(P<0.05)。经20μmol/L Aβ25-35处理后,per2 mRNA及PER2蛋白水平在CT16较对照组显著降低(P<0.05)。经钙离子拮抗剂尼莫地平预处理后,由Aβ25-35在CT16所致per2 mRNA及PER2蛋白水平的降低均显著升高(P<0.05)。结论钙超载在Aβ25-35引起HT22细胞Per2异常表达中发挥重要作用。 展开更多
关键词 昼夜节律 AΒ25-35 PER2 钙超载
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SF3B1敲减通过RAS等信号通路影响MDAMB-231乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡 被引量：4
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作者 张玲 高迎真 +3 位作者 卞琳 殷文娟 张燕燕 刘静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1587-1594,共8页
目的:检测剪接因子3B亚基1(SF3B1)基因敲减对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡等生物学行为的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将SF3B1基因RNA干扰慢病毒载体(LV-SF3B1-RNAi)转染MDA-MB-231细胞,以敲减SF3B1基因。... 目的:检测剪接因子3B亚基1(SF3B1)基因敲减对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡等生物学行为的影响,并初步探讨其作用机制。方法:将SF3B1基因RNA干扰慢病毒载体(LV-SF3B1-RNAi)转染MDA-MB-231细胞,以敲减SF3B1基因。实验分为阴性对照组(转染空载体)和SF3B1敲减组(转染SF3B1-shRNA-1和SF3B1-shRNA-2)。采用qPCR和Western blot检测SF3B1的敲减效率;分别用MTT法和集落形成实验检测SF3B1敲减对细胞生长及集落形成能力的影响;Transwell小室法测定SF3B1敲减对细胞侵袭和迁移能力的影响;annexin V-APC单染法结合流式细胞术检测SF3B1敲减对细胞凋亡的影响;采用转录组测序检测SF3B1敲减后的差异表达基因及富集的信号通路。结果:MTT结果显示,SF3B1敲减组MDA-MB-231细胞的A值在96和120 h均显著低于阴性对照组(P<0.01);SF3B1敲减组的集落形成数显著低于阴性对照组(P<0.01),凋亡率显著高于阴性对照组(P<0.01),侵袭和迁移细胞数均显著低于阴性对照组(P<0.01);SF3B1敲减后差异表达基因富集的信号通路包括RAS信号通路、紧密连接、MAPK信号通路等。结论:在MDA-MB-231乳腺癌细胞中敲减SF3B1可能通过RAS等信号通路的异常抑制细胞增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 剪接因子3B亚基1 乳腺癌 生物学行为 RAS信号通路
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自噬下降对β1受体自身抗体诱导的H9c2心肌细胞凋亡的作用 被引量：4
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作者 李杨 乔爱秀 +3 位作者 徐云云 王晓晖 王丽 刘慧荣 《中国心血管病研究》 CAS 2017年第3期279-283,I0003,I0004,共7页
目的探讨自噬下降对β1肾上腺素受体自身抗体（β1-AA）诱导的H9c2心肌细胞凋亡的作用。方法使用1μM的β1-AA对H9c2心肌细胞进行处理，Realtime—PCR检测自噬相关基因LC3mRNA表达的改变，Westernblot检测LC3、Beclin1以及P62蛋白表达... 目的探讨自噬下降对β1肾上腺素受体自身抗体（β1-AA）诱导的H9c2心肌细胞凋亡的作用。方法使用1μM的β1-AA对H9c2心肌细胞进行处理，Realtime—PCR检测自噬相关基因LC3mRNA表达的改变，Westernblot检测LC3、Beclin1以及P62蛋白表达水平的变化；使用流式细胞术、Caspase-3活性检测及Hoechst33258染色反映细胞凋亡情况；使用经典的自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）预处理30min，以及mTOR通路抑制剂雷帕霉素（RAPA）预处理1h后，再给予细胞β1-AA处理，检测此时细胞凋亡的变化情况。结果与对照组相比，1μM的β1-AA干预H9c2心肌细胞6h可以明显降低细胞存活率[（83．46±12．87）％比（96．45±6．99）％]。与对照组（1．01±0．14）相比，β1-AA干预细胞6h、12h、24h，LC3 mRNA水平依次降低[6h（0．85±0．11），12h（0．71±0．10），24h（0．62±0．07）]，LC3Ⅱ和Beclin 1蛋白水平依次降低，P62蛋白水平逐渐增加，表明β1-AA可以引起心肌细胞自噬水平逐渐下降。同时发现，与对照组（1．13±0．24）相比，β1-AA干预细胞6h、12h，细胞凋亡水平明显升高，分别达到3．21±0．89和2．14±0．24。使用经典自噬抑制剂3-MA预处理心肌细胞30min抑制自噬后，H9c2心肌细胞凋亡水平较β1-AA单独处理组显著增加[（41．45±6．37）％比（29．55±4．32）％]；而使用经典mTOR通路抑制剂RAPA预处理心肌细胞1h上调自噬后，心肌细胞凋亡水平较β1-AA单独处理组明显下降[（17．36±2．98）％比（29．55±4．32）％]，说明自噬水平改变可以影响心肌细胞凋亡水平。结论自噬下调能够增加β1-AA诱导的H9e2心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 自噬 β1肾上腺素受体自身抗体 H9C2 凋亡
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