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《临床免疫学检验》实验课教学改革尝试 被引量：15
1
作者 徐军发 吕世静 +2 位作者 杨维青 陈章权 何德 《西北医学教育》 2008年第5期913-915,共3页
《临床免疫学检验》是医学检验专业重要的专业课程，实验教学改革是本课程教学改革的重要内容。近年来，由于医学检验专业的招生人数不断增加，给医学检验的教学工作带来了较大的压力，《临床免疫学检验》实验课的教学也面临了较大的困... 《临床免疫学检验》是医学检验专业重要的专业课程，实验教学改革是本课程教学改革的重要内容。近年来，由于医学检验专业的招生人数不断增加，给医学检验的教学工作带来了较大的压力，《临床免疫学检验》实验课的教学也面临了较大的困难。我们在教学中通过整合实验教学内容、采用灵活多样的实验教学方法、加大实验室开放力度、尝试实验设计竞赛和吸引学生参与教师科研课题的研究等途径加强对实验课教学改革，对培养学生的动手能力、科学素质、创造性思维和分析问题的能力起到了重要的促进作用。 展开更多
关键词 临床免疫学检验 实验教学 教学内容 教学方法 实验设计竞赛
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临床免疫学检验实验课PBL教学初探 被引量：8
2
作者 徐军发 吕世静 +2 位作者 陈章权 杨维青 张俊爱 《检验医学教育》 2009年第3期21-23,共3页
临床免疫学检验是医学检验专业重要的专业课程之一,实验教学改革是本课程教学改革的重要内容。近年来,我们在对该课程进行综合改革的基础上,将PBL教学法引入到实验课的教学中。实践证明推行PBL教学对培养学生的思维能力、分析问题能力... 临床免疫学检验是医学检验专业重要的专业课程之一,实验教学改革是本课程教学改革的重要内容。近年来,我们在对该课程进行综合改革的基础上,将PBL教学法引入到实验课的教学中。实践证明推行PBL教学对培养学生的思维能力、分析问题能力、自主学习能力和创新能力,培养团队精神,提高学生的动手能力起到了重要的促进作用。 展开更多
关键词 临床免疫学检验 实验教学 PBL 教学法
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白茅根多糖对人T淋巴细胞免疫调节效应的研究 被引量：36
3
作者 吕世静 黄槐莲 +2 位作者 袁汉尧 何德 龙启才 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期834-835,共2页
目的：研究白茅根多糖(RIP)对经植物血凝素(PHA)诱导的人外周血T淋巴细胞增殖与细胞周期的影响。方法：以MTT比色法及流式细胞术检测。结果：白茅根多糖对PHA诱导的正常人外周血T淋巴细胞增殖有显著的促进作用(P<0．05)，并能促进细... 目的：研究白茅根多糖(RIP)对经植物血凝素(PHA)诱导的人外周血T淋巴细胞增殖与细胞周期的影响。方法：以MTT比色法及流式细胞术检测。结果：白茅根多糖对PHA诱导的正常人外周血T淋巴细胞增殖有显著的促进作用(P<0．05)，并能促进细胞从G1期进入S期。结论：白茅根多糖具有调节人外周血T淋巴细胞免疫功能的效应。 展开更多
关键词 白茅根多糖 T细胞 细胞周期 增殖
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猫爪草多糖对小鼠急性化学性肝损伤保护作用的研究 被引量：21
4
作者 韩红霞 吕世静 《检验医学与临床》 CAS 2010年第9期769-770,773,共3页
目的研究猫爪草多糖(RTP)对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用及其机制。方法将小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯阳性对照组、RTP低、中、高剂量组(RTP剂量分别为100、200、400mg·kg-1.d-1),四氯化碳(CCl4)调和油溶液腹腔注射... 目的研究猫爪草多糖(RTP)对小鼠急性化学性肝损伤的保护作用及其机制。方法将小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯阳性对照组、RTP低、中、高剂量组(RTP剂量分别为100、200、400mg·kg-1.d-1),四氯化碳(CCl4)调和油溶液腹腔注射建立小鼠急性肝损伤模型,测定肝体指数、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肝组织匀浆的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,观察小鼠肝组织病理改变。结果 RTP组均能降低CCl4所致小鼠急性肝损伤肝体指数及血清ALT、AST活性,提高肝组织T-AOC、SOD活力,降低MDA含量,且可以不同程度地改善肝组织损伤。结论 RTP对CCl4所致小鼠急性化学性肝损伤有保护作用,其机制可能与RTP抗氧化作用有关。 展开更多
关键词 猫爪草多糖 四氯化碳 肝损伤 抗氧化 自由基 脂质过氧化
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3种白细胞介素与结核病免疫水平的关系 被引量：4
5
作者 邵燕丽 吕小华 +2 位作者 吕世静 黄罗佳 何德 《检验医学与临床》 CAS 2008年第10期577-578,580,共3页
目的研究白细胞介素-12(IL-12)、IL-18和IL-10在结核病免疫发病机制中的作用,为设计新的疫苗和开展辅助性免疫疗法提供依据。方法用ABC-酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)及双抗体夹心ELISA试剂盒检测39例结核性胸腔积液患者胸水中和血清中的... 目的研究白细胞介素-12(IL-12)、IL-18和IL-10在结核病免疫发病机制中的作用,为设计新的疫苗和开展辅助性免疫疗法提供依据。方法用ABC-酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)及双抗体夹心ELISA试剂盒检测39例结核性胸腔积液患者胸水中和血清中的IL-12、IL-18、IL-10水平。对结果进行显著性检验及相关性分析,并对治疗好转过程中的10例继发型肺结核和5例结核性胸膜炎患者的这3种细胞因子在胸水中的变化进行观测。结果除IL-18外,其他两种细胞因子在胸水中与血清中含量差异有统计学意义;只有IL-12与IL-10之间有相关关系。治疗好转过程中,绝大多数患者有IL-12、IL-18水平增高和IL-10水平降低。结论IL-18用作疫苗佐剂可能优于IL-12,这3种细胞因子均可用于开展免疫疗法,但不可一概而论。 展开更多
关键词 结核病 白细胞介素 免疫水平 发病机制
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太极拳运动对大学生外周血T细胞亚群的影响 被引量：9
6
作者 庞阳康 刘仿 《体育学刊》 CAS CSSCI 北大核心 2008年第6期100-103,共4页
为了探讨太极拳运动对大学生细胞免疫功能的影响。以60名身体健康的大学生随机分为实验组和对照组,实验组每周进行太极拳运动3次,而对照组不进行太极拳运动。12周后采取外周血,用双色法流式细胞术检测T细胞亚群变化。结果显示,实验组在... 为了探讨太极拳运动对大学生细胞免疫功能的影响。以60名身体健康的大学生随机分为实验组和对照组,实验组每周进行太极拳运动3次,而对照组不进行太极拳运动。12周后采取外周血,用双色法流式细胞术检测T细胞亚群变化。结果显示,实验组在实验后外周血Th细胞、Th1细胞以及Th与Tc、Th1与Th2细胞比值明显高于实验前和对照组(P<0.05),说明规律性太极拳运动可增强大学生的细胞免疫功能,促进T细胞亚群向Th1细胞分化。 展开更多
关键词 太极拳 大学生 T细胞亚群
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自身免疫性溶血性贫血患者外周血T细胞亚群的检测 被引量：6
7
作者 陈彦明 伍昌林 戴凤燕 《临床输血与检验》 CAS 2005年第4期244-247,共4页
目的分析自身免疫性溶血性贫血(A IHA)患者外周血T细胞亚群极化状态,探讨A IHA的免疫学发病机制。方法收集A IHA患者及健康者外周抗凝静脉血,分离纯化淋巴细胞。F ITC标记的抗CD 3单抗,Cy5标记的抗CD 4、CD 8单抗,PE标记的CRTH 2单抗,以... 目的分析自身免疫性溶血性贫血(A IHA)患者外周血T细胞亚群极化状态,探讨A IHA的免疫学发病机制。方法收集A IHA患者及健康者外周抗凝静脉血,分离纯化淋巴细胞。F ITC标记的抗CD 3单抗,Cy5标记的抗CD 4、CD 8单抗,PE标记的CRTH 2单抗,以CD 3/CD 4、CD 3/CD 8设门作双色流式细胞术,分析A IHA患者T细胞亚群极化状态。结果与正常对照相比,A IHA患者外周血CD 4+细胞百分率显著升高(P<0.01),CD 8+细胞百分率变化不显著(P>0.05),CD 4+/CD 8+比例显著升高(P<0.05);CD 3+CD 4+CRTH 2-T细胞百分率、CD 4+CRTH 2-T/CD 4+CRTH 2-T和CD 8+CRTH 2-T/CD 8+CRTH 2+T比例均显著升高(P<0.01),而CD 3+CD 4+CRTH 2+T、CD 3+CD 8+CRTH 2-T及CD 3+CD 8+CRTH 2+T细胞百分率的变化不显著(P>0.05)。结论A IHA患者外周血存在细胞免疫功能失调,T细胞亚群极化状态发生改变,呈明显的T h1/T c1型细胞优势;T h1/T c1型细胞介导的细胞免疫可能与A IHA的免疫学发病机制有关。 展开更多
关键词 自身免疫性溶血性贫血 T细胞亚群 流式细胞术
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CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞在免疫性血小板减少性紫癜中的调节作用 被引量：7
8
作者 刘家华 徐军发 +2 位作者 钟明 周君纯 陈小芳 《临床内科杂志》 CAS 2006年第6期382-384,共3页
目的检测免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后CD4+CD2+5调节性T细胞(Treg)的比例以及变化规律,探讨Treg在ITP发病机制中的作用。方法收集42例ITP患者治疗前、后外周血标本,分离血单个核细胞,采用流式细胞术检测ITP患者治疗前后Tre... 目的检测免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后CD4+CD2+5调节性T细胞(Treg)的比例以及变化规律,探讨Treg在ITP发病机制中的作用。方法收集42例ITP患者治疗前、后外周血标本,分离血单个核细胞,采用流式细胞术检测ITP患者治疗前后Treg的比例以及变化。结果ITP患者治疗前Treg比例明显低于正常对照组(P<0.01),治疗后Treg比例显著升高,明显高于治疗前,但仍低于正常对照组(P<0.01);治疗有效组ITP患者Treg比例显著高于治疗无效组(P<0.01),治疗显效组显著高于良效和进步组(P<0.01),良效和进步组与治疗无效组比较差别无显著性。(P>0.05)。结论ITP患者外周血Treg比例降低,提示Treg可能参与了ITP的发病机制。 展开更多
关键词 CD4^+CD25^+调节性T细胞 免疫性血小板减少性紫癜
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鼻咽癌PBMC金属元素与免疫效应的检测及其意义 被引量：1
9
作者 吕世静 袁汉尧 +2 位作者 何德 吕小华 周斌 《中国实验诊断学》 2002年第6期372-374,共3页
目的　了解鼻咽癌患者周围血单核细胞 (PBMC)的钙、镁、铜、锌、铁等 5种金属元素含量及其增殖反应 ,探讨PBMC中金属元素和细胞免疫在鼻咽癌发生、发展之间的关系。方法　采用日本岛津AA670型原子吸收光谱仪火焰法测定金属元素 ,以3H Td... 目的　了解鼻咽癌患者周围血单核细胞 (PBMC)的钙、镁、铜、锌、铁等 5种金属元素含量及其增殖反应 ,探讨PBMC中金属元素和细胞免疫在鼻咽癌发生、发展之间的关系。方法　采用日本岛津AA670型原子吸收光谱仪火焰法测定金属元素 ,以3H TdR掺入法检测PBMC对ConA的增殖反应。结果　 53例鼻咽癌患者PBMC与正常对照组比较 ,铜含量升高 (P <0 0 1 ) ,锌含量降低 (P <0 0 1 ) ,PBMC增殖反应指数下降 (P <0 0 1 )。结论　提示鼻咽癌患者PBMC的铜含量增高 ,而锌含量和淋巴细胞增殖反应指数降低 ,与鼻咽癌的发生。 展开更多
关键词 鼻咽癌 免疫效应 周围血单核细胞 金属元素 淋巴细胞增殖
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结核性胸腔积液中两种免疫抑制性细胞因子的研究 被引量：2
10
作者 邵燕丽 吕世静 黄罗佳 《临床和实验医学杂志》 2006年第10期1507-1509,共3页
目的研究结核性胸腔积液中两种免疫抑制性细胞因子肿瘤坏死因子-β1(TGF-β1)、白介素-10(IL-10)在结核病免疫发病机制中的作用,为发展免疫疗法提供依据。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测39例结核性胸腔积液患者(初治... 目的研究结核性胸腔积液中两种免疫抑制性细胞因子肿瘤坏死因子-β1(TGF-β1)、白介素-10(IL-10)在结核病免疫发病机制中的作用,为发展免疫疗法提供依据。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)试剂盒检测39例结核性胸腔积液患者(初治组29例,复治组10例;Ⅱ型结核病1例,Ⅲ型28例,Ⅳ型10例)胸水中和血清中TGF-β1、IL-10水平。对每种细胞因子胸水中和血清中含量及两组胸水及血清中细胞因子含量进行显著性检验,并进行相关性分析;对治疗过程中10例Ⅲ型病人和5例Ⅳ型病人X线片示进展期到好转期这些细胞因子在胸水中的变化进行观测。结果除复治组胸水、血清中TGF-β1含量无显著差异外,两种细胞因子胸水与血清中含量均有显著差异;两种细胞因子水平没有相关关系。治疗好转过程中,两种细胞因子的变化虽有一定的规律可循,但不是一成不变的。结论TGF-β1和IL-10参与了抗结核分枝杆菌(M tb)感染的免疫过程;开展免疫治疗时应该综合考虑机体的免疫状态,某种细胞因子的作用不是对所有病人都有效,与体内细胞因子间的平衡有关。 展开更多
关键词 结核病 TGF-Β1 IL-10
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IL-35及其与免疫性疾病关系的研究进展 被引量：4
11
作者 张慧 曾今诚 徐军发 《广东医学院学报》 2011年第5期540-542,共3页
IL-35是一种新发现的由Treg细胞特异性产生的IL-12家族新成员,结构上由p35和EBI3亚基组成。IL-35是Treg细胞发挥最大抑制效应所必需的一种抑制性细胞因子。IL-35可扩增Treg细胞数量,诱导iTR35细胞产生和促进Thl细胞分化,还可以抑制效应... IL-35是一种新发现的由Treg细胞特异性产生的IL-12家族新成员,结构上由p35和EBI3亚基组成。IL-35是Treg细胞发挥最大抑制效应所必需的一种抑制性细胞因子。IL-35可扩增Treg细胞数量,诱导iTR35细胞产生和促进Thl细胞分化,还可以抑制效应性T细胞产生和抑制Th17细胞分化,在自身免疫性疾病、病毒感染和真菌感染中发挥着重要作用。该文综述了IL-35的产生机制及其在自身免疫性疾病和感染性疾病中的调控机制。 展开更多
关键词 IL-35 TREG细胞 TH17细胞 iTR35细胞 综述文献
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开设综合性实验 培养学生的科研素质 被引量：2
12
作者 吕世静 徐军发 何德 《检验医学教育》 2004年第3期17-19,共3页
在临床免疫学检验这门专业课中开设了免疫血清制备系列综合性实验,从实验方案的设计、实施到撰写实验报告均由学生独立完成。通过6年的教学实践,培养和加强了学生实验技术的动手能力和实验的综合分析能力。历届学生对该系列综合性实验... 在临床免疫学检验这门专业课中开设了免疫血清制备系列综合性实验,从实验方案的设计、实施到撰写实验报告均由学生独立完成。通过6年的教学实践,培养和加强了学生实验技术的动手能力和实验的综合分析能力。历届学生对该系列综合性实验深感兴趣及欢迎。该项改革得到了同学、同行专家和社会的肯定。 展开更多
关键词 综合性实验 科研素质 教学实践 实验教学 医学检验
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TH17及其在抗结核免疫中的作用 被引量：1
13
作者 关向前 梁一 徐军发 《广东医学院学报》 2012年第1期66-69,共4页
TH17是一群分泌IL-17的CD4 T淋巴细胞,在自身免疫性疾病中起重要作用。近来发现TH17也参与抗感染免疫,在抗结核菌感染免疫中起重要作用。该文综述了近年TH17及其在抗结核免疫中的作用。
关键词 TH17 抗结核免疫 细胞因子 IL-17 综述文献
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恶性肿瘤病人血清SIL－2R与红细胞免疫功能测定及临床意义
14
作者 官成浓 陈垦 +3 位作者 银正民 汤斌 陈群 王春胜 《中国肿瘤临床与康复》 1996年第S1期6-8,共3页
本文对９１例恶性实体瘤病人的血清ＳＩＬ－２Ｒ、ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ、ＲＢＣ－ＩＣＲ进行测定，结果显示：恶性肿瘤病人血清ＳＩＬ－２Ｒ增高，ＲＢＣ－ＩＣＲ增多，而ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ降低（Ｐ＜０．００１）；不同类型恶性肿瘤病... 本文对９１例恶性实体瘤病人的血清ＳＩＬ－２Ｒ、ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ、ＲＢＣ－ＩＣＲ进行测定，结果显示：恶性肿瘤病人血清ＳＩＬ－２Ｒ增高，ＲＢＣ－ＩＣＲ增多，而ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ降低（Ｐ＜０．００１）；不同类型恶性肿瘤病人之间，血清ＳＩＬ－２Ｒ、ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ及ＲＢＣ－ＩＣＲ相比无显著差异性（Ｐ＜０．０５）；血清ＳＩＬ－２Ｒ水平与ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ呈负相关（ｒ＝－０．５１，Ｐ＜０．０５），与ＲＢＣ－ＩＣＲ呈正相关（ｒ＝０．４８，Ｐ＜０．０５）。这表明：恶性肿瘤病人血清ＳＩＬ－２Ｒ升高，红细胞免疫功能低下，其两者的变化可能与恶性肿瘤的发生、发展有密切关系，值得临床进一步研究。 展开更多
关键词 恶性肿瘤 血清SIL-2R RBC-C3bRR RBC-ICR 相关性
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肝癌者红细胞和NK细胞的免疫活性研究
15
作者 吕世静 袁汉尧 何德 《中国肿瘤临床与康复》 2001年第5期21-22,共2页
目的　对肝癌患者的红、白细胞免疫粘附功能与T细胞亚群变化和NK细胞活性的关系进行观察。方法　对 5 3例肝癌患者在入院与病情恶化时 ,采用患者外周静脉血进行红、白细胞免疫粘附功能、T细胞亚群和NK细胞活性的对比测定。结果　肝癌患... 目的　对肝癌患者的红、白细胞免疫粘附功能与T细胞亚群变化和NK细胞活性的关系进行观察。方法　对 5 3例肝癌患者在入院与病情恶化时 ,采用患者外周静脉血进行红、白细胞免疫粘附功能、T细胞亚群和NK细胞活性的对比测定。结果　肝癌患者的红细胞C3b受体花环率、白细胞 -补体受体花环率、CD3、CD4、CD8和CD4/CD8、及NK细胞的活性、第一次和第二次测定均低于对照组 ,P值分别为 (P <0 .0 5 )和 (P <0 .0 1)。同时还发现NK细胞的活性与红、白细胞的免疫功能密切相关。结论　肝癌患者的红、白细胞免疫功能、T细胞亚群和NK细胞的活性低下 ,并随着病情恶化其降低显著扩大 ;NK细胞活性与红、白细胞的免疫功能密切相关。 展开更多
关键词 肝癌 红细胞免疫 白细胞免疫 T细胞亚群 NK细胞活性
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BTLA与免疫性疾病关系的研究进展
16
作者 郑淑华 徐军发 《广东医学院学报》 2009年第6期682-685,共4页
BTLA是近年发现的CD28家族共抑制受体,主要表达于T、B细胞,在DC、单核及NK细胞上也有表达,其结构和功能与其它两种抑制性受体CTLA-4和PD-1相似。已证明BTLA的配体是HVEM,两者结合可负性调节T、B细胞的激活与增殖。最近研究发现BTLA与多... BTLA是近年发现的CD28家族共抑制受体,主要表达于T、B细胞,在DC、单核及NK细胞上也有表达,其结构和功能与其它两种抑制性受体CTLA-4和PD-1相似。已证明BTLA的配体是HVEM,两者结合可负性调节T、B细胞的激活与增殖。最近研究发现BTLA与多种免疫性疾病(如自身免疫性疾病、移植排斥反应、肿瘤等)的发生、发展有关。随着对BTLA生物学功能研究的不断深入,必将阐明BTLA在免疫性疾病发生、发展中的作用及机理,为免疫性疾病治疗提供新思路。 展开更多
关键词 BTLA 肿瘤 自身免疫性疾病
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检测可溶性B7-H4 ELISA夹心法的建立 被引量：29
17
作者 胡国艳 郑淑华 +4 位作者 刘伟 那志萍 肖欢 张良清 徐军发 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期831-833,共3页
目的:建立定量检测可溶性B7-H4的ELISA夹心法。方法:采用抗人B7-H4单克隆抗体(mAb)包被酶标板,以兔抗鼠B7-H4多克隆抗体为夹心抗体、HRP标记羊抗兔IgG为检测抗体、重组小鼠可溶性B7-H4为标准品,建立检测可溶性B7-H4的间接ELISA法,并对5... 目的:建立定量检测可溶性B7-H4的ELISA夹心法。方法:采用抗人B7-H4单克隆抗体(mAb)包被酶标板,以兔抗鼠B7-H4多克隆抗体为夹心抗体、HRP标记羊抗兔IgG为检测抗体、重组小鼠可溶性B7-H4为标准品,建立检测可溶性B7-H4的间接ELISA法,并对50例正常人和37例术后乳腺癌患者血清样本进行了检测。结果:建立的夹心ELISA法检测B7-H4的线性范围为3.13μg/L^200μg/L,批内、批间变异系数分别为7.92%和11.1%。50例正常人和37例术后乳腺癌患者血清B7-H4的含量分别为(31.62±9.85)μg/L和(42.52±16.63)μg/L,两者比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论:成功建立了一种灵敏度高、稳定性好的检测可溶性B7-H4的夹心ELISA法。 展开更多
关键词 ELISA 夹心法 B7-H4 乳腺癌
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小鼠B7-H4基因克隆及真核表达载体的构建 被引量：9
18
作者 徐军发 袁春雷 +3 位作者 杨衡 赵坤 胡国艳 龚非力 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期665-667,共3页
目的:克隆小鼠B7-H4(mB7-H4)基因cDNA全长,构建表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-GFP和表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-Fc。方法:采用RT-PCR技术从小鼠脾细胞总RNA中逆转录mB7-H4cDNA,将其全长cDN... 目的:克隆小鼠B7-H4(mB7-H4)基因cDNA全长,构建表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-GFP和表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白的真核表达载体pmB7-H4-Fc。方法:采用RT-PCR技术从小鼠脾细胞总RNA中逆转录mB7-H4cDNA,将其全长cDNA去掉中止密码克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,并转染293T细胞使其表达跨膜型mB7-H4-GFP融合蛋白;将其胞外功能区cDNA克隆入pcDNA3·1-hFc真核表达载体中,并转染COS-7细胞使其表达可溶性mB7-H4-Fc融合蛋白。结果:序列测定证实克隆的mB7-H4全长cDNA阅读框正确完整,酶切和序列测定证实mB7-H4分别正确插入pEGFP-N1和pcDNA3·1-hFc载体中,两种表达载体分别转染293T细胞和COS-7细胞后可分别表达跨膜型mB7-H4-GFP和可溶性mB7-H4-Fc。结论:成功地克隆mB7-H4基因并构建了两个真核表达载体,它们可分别表达跨膜型和可溶性融合蛋白。 展开更多
关键词 B7-H4 真核表达 基因克隆 载体构建
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小鼠可溶性CD83对树突状细胞表达共刺激分子和共刺激活性的影响 被引量：5
19
作者 徐军发 黄保军 +5 位作者 熊平 冯玮 徐勇 方敏 郑芳 龚非力 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期792-796,共5页
目的:研究可溶性小鼠CD83(mCD83)对树突状细胞(DC)表达共刺激分子及共刺激活性的影响。方法:克隆mCD83基因,构建mCD83胞外功能区与人IgG1αFc段融合基因的真核表达载体pmCD83-hIg,并在COS-7细胞中表达可溶性mCD83-hIg融合蛋白。采用ELIS... 目的:研究可溶性小鼠CD83(mCD83)对树突状细胞(DC)表达共刺激分子及共刺激活性的影响。方法:克隆mCD83基因,构建mCD83胞外功能区与人IgG1αFc段融合基因的真核表达载体pmCD83-hIg,并在COS-7细胞中表达可溶性mCD83-hIg融合蛋白。采用ELISA、Western blot和RT-PCR技术检测mCD83-hIg融合基因在COS-7细胞中的表达。用mCD83-hIg处理小鼠DC细胞系(DC2.4)采用流式细胞术检测DC细胞周期、细胞凋亡和共刺激分子CD80、CD86的表达影响;采用混合白细胞培养试验,检测mCD83-hIg对DC2.4刺激同种异基因T细胞增殖及产生IL-2和IFN-γ的影响。结果:酶切和序列测定鉴定显示构建的真核表达载体完全正确;mCD83-hIg对DC2.4细胞周期和细胞凋亡无影响,但可下调DC2.4表面共刺激分子CD80和CD86的表达;mCD83-hIg处理过的DC2.4刺激同种异基因T细胞增殖及产生IL-2和IFN-γ的能力显著下降。结论:mCD83-hIg可抑制DC表达共刺激分子并下调DC共刺激活性,从而抑制同种异基因T细胞增殖和产生细胞因子。 展开更多
关键词 mCD83-hIg 树突状细胞 DC2.4 共刺激分子 共刺激作用 混合白细胞培养 T细胞增殖 IL-2 IFN-γ
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脓毒症多器官损害与髓样细胞触发受体-1基因表达的关系 被引量：8
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作者 张良清 古妙宁 +2 位作者 徐军发 陈绪贵 那志萍 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期556-558,共3页
目的探讨髓样细胞触发受体-1(TREM-1)基因表达与脓毒症所致多器官损害的关系。方法采用小鼠盲肠结扎穿孔(CLP)造脓毒症模型。将60只雄性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、假手术组(n=10)和脓毒症组(n=40),并按不同的时间点留取肝、肺、肾... 目的探讨髓样细胞触发受体-1(TREM-1)基因表达与脓毒症所致多器官损害的关系。方法采用小鼠盲肠结扎穿孔(CLP)造脓毒症模型。将60只雄性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、假手术组(n=10)和脓毒症组(n=40),并按不同的时间点留取肝、肺、肾、小肠组织及血液样本,分别用于检测TREM-1mRNA,TNF-αmRNA表达及测定丙氨酸转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)、小肠组织二胺氧化酶(DAO)的活性。结果与对照组及假手术组相比,CLP后6h肝、肺、肾组织TREM-1 mRNA表达开始增多,肝组织24 h表达均达峰值(P<0.01),肺、肾组织12 h表达达峰值(P<0.01),小肠组织的TREM-1表达表现出了一定的升高趋势,但差异无显著性(P>0.05)。TNF-αmRNA在各组织的表达在CLP后6h开始升高(P<0.05或P<0.01),12h降低,48h再次升高(P<0.05)。相关分析结果显示,肝、肺、肾、小肠组织中TREM-1基因表达分别与TNF-αmRNA表达、ALT,Cr,MPO及DAO水平显著相关。结论脓毒症可导致多种组织TREM-1 mRNA表达增加,其改变与多器官损害密切相关。 展开更多
关键词 髓样细胞触发受体 1 脓毒症 多器官功能损伤
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