基于OBE理念的病理生理学教学改革探索 被引量：1

1

作者 胡莹莹 李明勇 李蓉 《基础医学教育》 2024年第8期629-632,共4页

广东医科大学病理生理学教研室从病理生理学课程的教学现状及存在的问题出发,基于成果导向型教育教学理念,通过凝练课程目标,优化教学内容,采用BOPPPS教学模式,完善评价体系等举措,实施以学习成果和岗位胜任力产出为导向、以专业知识与... 广东医科大学病理生理学教研室从病理生理学课程的教学现状及存在的问题出发,基于成果导向型教育教学理念,通过凝练课程目标,优化教学内容,采用BOPPPS教学模式,完善评价体系等举措,实施以学习成果和岗位胜任力产出为导向、以专业知识与课程思政有机融合为特点的教学改革,旨在提高护理学专业学生的综合能力,增强护理职业精神和人文素养,为培养创新型护理学专业人才、实现健康中国目标发挥引领示范作用。 展开更多

关键词 病理生理学 教学改革 成果导向教育 护理学专业 评价体系

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SARS-CoV-2 S蛋白引起呼吸道上皮细胞炎症反应的研究进展 被引量：1

2

作者 刘兴健 张华华 张锐钢 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期112-118,共7页

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)感染引起的肺炎对人类生命健康产生威胁,对社会经济造成巨大损失。病毒的结构蛋白刺突蛋白(S蛋白)一直被认为主要介导病毒侵入宿主细胞。S蛋白可独立于病毒引起多种细胞产生炎症反应,因此,了... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)感染引起的肺炎对人类生命健康产生威胁,对社会经济造成巨大损失。病毒的结构蛋白刺突蛋白(S蛋白)一直被认为主要介导病毒侵入宿主细胞。S蛋白可独立于病毒引起多种细胞产生炎症反应,因此,了解S蛋白本身对呼吸道的影响能够为防治新型冠状病毒感染提供新视角。本文对SARS-CoV-2结构蛋白S蛋白引起呼吸道上皮细胞炎症反应的可能机制、临床表现等方面的研究进展进行了梳理,以期为疾病的预防和治疗提供参考。 展开更多

关键词 SARS-CoV-2 S蛋白 ACE2 呼吸道炎症

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SARS-CoV-2 S蛋白主要结构与突变及S蛋白引起疾病的潜在机制 被引量：1

3

作者 刘兴健 张锐钢 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期857-861,共5页

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)对人类生命健康构成威胁,备受研究者的关注。研究发现,病毒的刺突蛋白(S蛋白)被认为是病毒感染的关键结构蛋白,该蛋白与靶细胞受体结合导致组织器官发生炎症反应。因此研究S蛋白引起疾病的潜... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)对人类生命健康构成威胁,备受研究者的关注。研究发现,病毒的刺突蛋白(S蛋白)被认为是病毒感染的关键结构蛋白,该蛋白与靶细胞受体结合导致组织器官发生炎症反应。因此研究S蛋白引起疾病的潜在机制对于疾病的治疗至关重要,然而病毒的演变进化给研究工作增加了一定的难度。本文总结了SARS-CoV-2 S蛋白的主要结构以及从Alpha到Omicron突变,及其引起多种疾病的潜在机制,从而为疾病的预防和治疗提供参考。 展开更多

关键词 SARS-CoV-2 S蛋白 ACE2 呼吸道炎症

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SARS-CoV-2 S蛋白与宿主细胞相互作用的相关受体研究进展

4

作者 方晓敏 刘兴健 张锐钢 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1326-1332,共7页

自2019年底新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染暴发以来,对其的研究成为热点。冠状病毒感染趋向性主要取决于刺突蛋白(spike protein,S蛋白)与细胞表面受体结合的能力,而S蛋白及其受体结合域(S-RBD)不仅在病毒与宿主细胞结合及病毒进入细胞... 自2019年底新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染暴发以来,对其的研究成为热点。冠状病毒感染趋向性主要取决于刺突蛋白(spike protein,S蛋白)与细胞表面受体结合的能力,而S蛋白及其受体结合域(S-RBD)不仅在病毒与宿主细胞结合及病毒进入细胞中起着关键作用,还可以与宿主细胞表面受体如血管紧张素转化酶2(ACE2)、Toll样受体(TLRs)、分化集群(CD)147、神经纤毛蛋白-1(NRP-1)等结合并激活不同的信号通路,从而促进病毒入侵宿主细胞及引发炎症等一系列致病进程。因此,研究S蛋白与宿主细胞相互作用的相关受体具有重要意义。本文综述S蛋白与宿主细胞相互作用的相关受体,以期为新型冠状病毒感染的防治提供理论依据。 展开更多

关键词 新冠病毒 S蛋白 受体 相互作用 SARS-CoV-2

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基于剪接因子SRSF9在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义的生物信息学分析

5

作者 刘玉婷 喻莹 +2 位作者 黎桂珍 史沁雪 李彬彬 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期379-391,共13页

目的:基于生物信息学方法分析富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子9(SRSF9)在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达情况、临床意义以及与肿瘤免疫浸润的关系,并探讨其作用机制。方法:利用癌症基因图谱(TCGA)数据库、基因表达综合(GEO)数据库中GSE30... 目的:基于生物信息学方法分析富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子9(SRSF9)在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达情况、临床意义以及与肿瘤免疫浸润的关系,并探讨其作用机制。方法:利用癌症基因图谱(TCGA)数据库、基因表达综合(GEO)数据库中GSE30784和GSE13601数据集、临床蛋白质组学肿瘤分析联盟(CPTAC)数据库、基因表达交互分析(GEPIA)数据库和Kaplan-Meier plotter数据库分析SRSF9在HNSCC中的表达及与患者临床病理特征和预后的关系;利用cBioPortal数据库分析SRSF9基因变异情况;应用ESTIMATE算法和肿瘤免疫估计资源(TIMER)数据库评估SRSF9表达与肿瘤微环境和肿瘤免疫细胞浸润的关系;利用LinkedOmics数据库分析SRSF9在HNSCC中的共表达基因及其调控通路;基于TCGA SpliceSeq数据库分析HNSCC中SRSF9调控的可变剪接事件,并对靶基因进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果:TCGA数据库、GEO数据库中GSE30784和GSE13601数据集分析,HNSCC组织中SRSF9 mRNA表达水平较癌旁正常组织明显升高(P<0.01);CPTAC数据库分析,与正常组织比较,HNSCC组织中SRSF9蛋白表达水平明显升高(P<0.001)。TCGA数据库分析,SRSF9 mRNA表达与HNSCC患者病理分级(P=0.004)和HPV感染(P=0.031)有关联。GEPIA和Kaplan-Meier plotter数据库分析,HNSCC组织中SRSF9 mRNA高表达均与患者总生存期(OS)较差相关[风险比(HR)=1.40,P=0.019;HR=1.55,P=0.003]。cBioPortal数据库分析,HNSCC中SRSF9基因拷贝数变异(CNV)占26.85%,其CNV与SRSF9 mRNA表达水平呈正相关关系(r=0.44,P<0.001)。ESTIMATE算法分析,SRSF9 mRNA高表达组基质评分和免疫评分均较SRSF9 mRNA低表达组低(P<0.001),肿瘤纯度则高于SRSF9 mRNA低表达组(P<0.001)。TIMER数据库分析,SRSF9 mRNA表达水平与CD4+T淋巴细胞浸润呈正相关关系(r=0.186,P<0.001),而与B淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞和树突状细胞浸润呈负相关关系(r=-0.269,P<0.001;r=-0.353,P<0.001;r=-0.304,P<0.001)。SRSF9共表达基因富集分析,核糖体、剪接体和代谢通路等相关基因上调,而黏着斑、细胞因子和细胞黏附分子等相关基因下调。SRSF9相关可变剪接靶基因主要涉及脂类代谢、胰高血糖素和紧密连接等通路。结论:SRSF9在HNSCC中呈高表达,且与患者预后不良和肿瘤微环境免疫细胞浸润相关,可成为HNSCC诊断、预后评估和治疗的潜在分子靶标。 展开更多

关键词 头颈部 鳞状细胞癌 富含丝氨酸/精氨酸剪接因子9 可变剪接 肿瘤免疫 生物信息学

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SARS-CoV-2 S1蛋白通过ATP/P2Y2和ERK1/2信号通路引起呼吸道上皮细胞IL-6和IL-8分泌

6

作者 刘兴健 方晓敏 +1 位作者 郭羽玲 张锐钢 《广东医科大学学报》 2024年第4期337-345,共9页

目的探究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)S1蛋白诱导呼吸道上皮细胞炎症反应机制以及嘌呤能受体(P2Y_(2))参与S1蛋白引起的炎症反应。方法酶联免疫吸附实验(ELISA)测量S1蛋白和/或单克隆抗体(MAb)刺激的16HBE14o-细胞培养上清... 目的探究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)S1蛋白诱导呼吸道上皮细胞炎症反应机制以及嘌呤能受体(P2Y_(2))参与S1蛋白引起的炎症反应。方法酶联免疫吸附实验(ELISA)测量S1蛋白和/或单克隆抗体(MAb)刺激的16HBE14o-细胞培养上清中白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)和腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)水平,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血红素氧合酶1(HO-1)、双特异性磷酸酶1(MKP-1)和P2Y_(2) mRNA的转录水平;小干扰RNA(siRNA)敲低P2Y_(2)表达后,ELISA检测S1蛋白刺激的16HBE14o-细胞培养上清中IL-6和IL-8水平。结果S1蛋白和MAb对细胞活力无显著影响(P>0.05)。S1蛋白刺激16HBE14o-细胞引起IL-6和IL-8分泌增加,上调HO-1、MKP-1和P2Y_(2) mRNA表达,增加了胞外ATP水平(P<0.001或0.01),MAb显著抑制了S1蛋白引起的IL-6和IL-8分泌(P<0.001或0.01)。siRNA敲低P2Y_(2)的表达能够显著降低S1蛋白诱导的IL-6和IL-8分泌,同时ERK1/2抑制剂PD98059也抑制了S1蛋白引起的IL-6和IL-8分泌(P<0.001)。结论SARS-CoV-2 S1蛋白能够通过ATP/P2Y_(2)和ERK信号通路诱导呼吸道上皮细胞发生炎症反应。 展开更多

关键词 SARS-CoV-2 S1蛋白 胞外ATP ERK1/2 支气管上皮细胞 炎症

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犹素修饰与免疫稳态调控的研究进展

7

作者 周军智 《广东医科大学学报》 2024年第4期329-336,共8页

翻译后修饰是细胞功能蛋白的必经之路,并最终调节着生命的几乎所有方面。犹素系统是一种新发现的类泛素修饰系统,具有重要的细胞生物学功能,然而其生物学意义很大程度上尚未明了。近年来该领域进展迅猛,已经成为研究热点之一,尤其是犹... 翻译后修饰是细胞功能蛋白的必经之路,并最终调节着生命的几乎所有方面。犹素系统是一种新发现的类泛素修饰系统,具有重要的细胞生物学功能,然而其生物学意义很大程度上尚未明了。近年来该领域进展迅猛,已经成为研究热点之一,尤其是犹素系统直接或间接地调节多种免疫过程进而影响肿瘤微环境。该文综述了生理或病理条件下犹素系统如何响应内源性和外源性刺激并维护免疫稳态的重要最新进展,为理解犹素系统的功能调控及其作为人类疾病诊治中的潜在靶点提供新的视野。 展开更多

关键词 翻译后修饰 犹素修饰 UFM1

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浅谈生理科学实验课程改革的利弊 被引量：4

8

作者 吴嫦丽 罗海兵 +1 位作者 徐明锋 张秀娟 《教育教学论坛》 2019年第9期272-273,共2页

生理科学实验是与生理学、病理生理学和药理学三门理论课程相配合的重要实验操作技能课。为了更好地发挥该门实验课的作用,培养和提高学生的实验操作能力和综合素质,我校从开课时间和教学内容等方面对生理科学实验进行了课程改革。

关键词 生理科学实验 教学内容 课程改革

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翻转课堂在生理科学实验中的运用效果初探 被引量：1

9

作者 张锐钢 罗海兵 +2 位作者 吴嫦丽 徐明锋 张秀娟 《教育教学论坛》 2022年第4期160-163,共4页

生理科学实验是一门融合了生理学实验、病理生理学实验和药理学实验三大模块的实践性的实验操作课程,旨在锻炼医学生的操作水平。为了更好地让学生掌握相关技能,完成实验操作,促进学习自主性,广东医科大学生理学教研室率先在生理学实验... 生理科学实验是一门融合了生理学实验、病理生理学实验和药理学实验三大模块的实践性的实验操作课程,旨在锻炼医学生的操作水平。为了更好地让学生掌握相关技能,完成实验操作,促进学习自主性,广东医科大学生理学教研室率先在生理学实验模块中探索重构教学过程,在机能学的实验中引入翻转课堂。经过教师实际上课感受反馈及分析前后两届学生的实验操作完成情况,在生理科学实验中运用翻转课堂取得了良好的教学效果,学生操作明显改善,学习自主性显著增强。 展开更多

关键词 生理科学实验 翻转课堂 教学改革

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生理科学实验课程改革初探

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作者 吴嫦丽 罗海兵 +1 位作者 徐明锋 张秀娟 《课程教育研究（学法教法研究）》 2016年第34期43-43,共1页

生理科学实验课程是配合生理学、病理生理学和药理学三门理论课程的重要实验操作课。为了更好地发挥该门课程的作用，培养和提高学生的实验操作能力和昝合素质，我校从师资、教学时间和教学内容节方面对生理科学实验进行了课程改革。

关键词 生理科学实验 教学时间 教学内容 课程改革

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非小细胞肺癌EGFR-TKIs获得性耐药机制研究进展 被引量：1

11

作者 赵燕 胡莹莹 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2023年第11期1280-1285,共6页

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌的主要病理类型,约占肺癌的85%,严重威胁人类健康。表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)的快速研发与... 非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌的主要病理类型,约占肺癌的85%,严重威胁人类健康。表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)的快速研发与应用使成千上万的NSCLC患者受益。然而大部分患者不可避免地会对EGFR-TKIs产生获得性耐药,最终导致疾病进展、复发和死亡。本综述重点关注NSCLC患者EGFR-TKIs靶向治疗获得性耐药分子机制的研究进展,以期为EGFR-TKIs耐药相关基础研究和临床治疗研究提供参考。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂 获得性耐药 肿瘤微环境 铁死亡

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基于生物信息学分析剪接因子SRSF11在胃癌中的表达及临床意义

12

作者 喻莹 刘玉婷 +2 位作者 黎桂珍 梁景皓 李彬彬 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第4期294-300,307,共8页

目的基于数据库分析剪接因子SRSF11在胃癌中的表达及其与临床病理特征、预后的关系,并探讨相关机制。方法基于癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达综合(GEO)数据库分析SRSF11在胃癌中的表达情况;利用UALCAN、KM Plotter评估SRSF11表达与临... 目的基于数据库分析剪接因子SRSF11在胃癌中的表达及其与临床病理特征、预后的关系,并探讨相关机制。方法基于癌症基因组图谱(TCGA)、基因表达综合(GEO)数据库分析SRSF11在胃癌中的表达情况;利用UALCAN、KM Plotter评估SRSF11表达与临床病理特征、预后的关系;利用TIMER工具分析SRSF11表达对肿瘤微环境免疫细胞浸润的影响;结合TCGA spliceSeq中可变剪接数据和RNA-seq数据分析SRSF11调控的可变剪接事件和基因,并对靶基因进行基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果胃癌组织中SRSF11表达明显上调(P<0.05),且与患者淋巴结转移和TP53基因突变有关(P<0.05);SRSF11高表达与胃癌患者预后不良相关(P<0.001);SRSF11表达可影响胃癌中多种免疫细胞的浸润水平,巨噬细胞高浸润量与患者预后不良相关(P<0.05);靶基因KEGG富集分析显示主要参与病毒感染、溶酶体、三磷酸腺苷结合盒转运体和肿瘤相关信号通路等。结论SRSF11在胃癌组织中呈现高表达,且与不良预后和免疫浸润相关。SRSF11有望成为胃癌诊断、预后评估和治疗的新靶点。 展开更多

关键词 胃癌 SRSF11 可变剪接 生物信息学

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血清反应因子全长及N端片段过表达慢病毒载体的构建及其对心脏干细胞分化的影响 被引量：4

13

作者 雷洪 王可可 +5 位作者 哈艳平 贾亚楠 李汝佳 申志华 郭峻莉 揭伟 《临床与实验病理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期1109-1115,共7页

目的探讨血清反应因子全长(SRF-Full)及N端片段(SRF-N,1-254aa)对TGF-β1诱导c-Kit+心脏干细胞(cardiac stem cell,CSC)分化的影响。方法从c DNA文库扩增大鼠SRF-Full及SRF-N表达序列并克隆入酶切线性化慢病毒载体GV358(Ubi-MCS-3FLAG-S... 目的探讨血清反应因子全长(SRF-Full)及N端片段(SRF-N,1-254aa)对TGF-β1诱导c-Kit+心脏干细胞(cardiac stem cell,CSC)分化的影响。方法从c DNA文库扩增大鼠SRF-Full及SRF-N表达序列并克隆入酶切线性化慢病毒载体GV358(Ubi-MCS-3FLAG-SV40-EGFP-IRES-puromycin),转化感受态细胞筛选出阳性克隆并测序鉴定。将SRF-Full及SRF-N过表达质粒与病毒包装辅助质粒共转染工具细胞HEK293T,包装慢病毒。磁激活细胞分选法分离乳SD大鼠c-Kit+CSC,将SRF-Full及SRF-N过表达慢病毒感染CSC并经TGF-β1诱导,定量PCR分析下游分化基因mRNA水平的变化。结果成功扩增出SRF-Full及SRF-N编码序列并正确连接入线性化载体,获得的阳性转化子经测序无误。将转化子质粒与病毒包装辅助质粒共转染HEK293T后,获得滴度为2×108TU/m L的慢病毒颗粒,Western blot检测到预期Flag融合蛋白。重组慢病毒感染CSC后细胞核中见e GFP信号。TGF-β1诱导CSC出现心肌细胞分化基因(Nkx2.5、Gata4、c Tn I)及平滑肌细胞分化基因(SM22α)的表达,内皮细胞分化(v WF)无影响,SRF-Full促进CSC的心肌细胞分化,而SRF-N则抑制这种分化。结论成功构建SRFFull及SRF-N过表达重组慢病毒质粒。SRF-Full促进而SRF-N减弱TGF-β1诱导CSC的心肌细胞分化。 展开更多

关键词 血清反应因子 血清反应因子N端片段 质粒构建 心脏干细胞 细胞分化

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HIF-1α过表达慢病毒载体的构建及对心肌细胞Notch配体Jagged1表达的影响 被引量：4

14

作者 王振良 丁然然 +5 位作者 哈艳平 雷洪 王可可 申志华 姜汉国 揭伟 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期416-420,共5页

目的 构建低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）过表达重组慢病毒质粒并包装病毒,将病毒感染乳鼠心肌细胞,分析其对Notch配体Jagged1表达的影响。方法 从cDNA文库中PCR扩增人HIF-1α编码序列并克隆入酶切线性化慢... 目的 构建低氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）过表达重组慢病毒质粒并包装病毒,将病毒感染乳鼠心肌细胞,分析其对Notch配体Jagged1表达的影响。方法 从cDNA文库中PCR扩增人HIF-1α编码序列并克隆入酶切线性化慢病毒载体GV218,转化感受态大肠杆菌细胞筛选出阳性克隆并测序鉴定。将HIF-1α过表达慢病毒质粒与病毒包装辅助质粒共转染工具细胞HEK293T,包装出慢病毒颗粒。原代分离SD乳大鼠心肌细胞,将HIF-1α过表达慢病毒感染心肌细胞,定量PCR分析Jagged1mRNA水平的变化。结果 成功扩增HIF-1α编码序列并正确连接入线性化载体GV218,获得阳性转化子并测序无误。将转化子质粒与病毒包装辅助质粒共转染HEK293T后,获得滴度为1×108TU/ml的慢病毒颗粒,Western blot法检测到HIF-1α-GFP融合蛋白。重组慢病毒感染乳鼠心肌细胞后,胞核中见GFP信号。与对照组相比,HIF-1α过表达5天后显著上调Jagged1mRNA的水平。结论 心肌细胞中HIF-1α可诱导Jagged1的表达。HIF-1α过表达重组慢病毒载体的成功构建,为研究缺血缺氧性心肌损伤反应的分子机制奠定了基础。 展开更多

关键词 质粒构建 慢病毒包装 心肌细胞 NOTCH信号 低氧诱导因子1Α

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持续低氧对小鼠胚胎成纤维细胞增殖及饲养层制备的影响 被引量：2

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作者 魏含清 裴轶劲 +3 位作者 王丹丹 蒋杨 王春 李洪梅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第9期1450-1456,共7页

背景:在传统的胚胎干细胞培养体系中,饲养层细胞制备和胚胎干细胞的培养扩增大都是在常氧条件下进行的,氧培养条件的改变有可能影响饲养层细胞,从而改变胚胎干细胞的生长特性或分化能力,但尚未见到这方面的系统研究报道。目的:观察低氧... 背景:在传统的胚胎干细胞培养体系中,饲养层细胞制备和胚胎干细胞的培养扩增大都是在常氧条件下进行的,氧培养条件的改变有可能影响饲养层细胞,从而改变胚胎干细胞的生长特性或分化能力,但尚未见到这方面的系统研究报道。目的:观察低氧培养对饲养层细胞及小鼠胚胎干细胞干性维持的影响。方法:原代小鼠胚胎成纤维细胞分为常氧组(体积分数20%O——2)和低氧组(体积分数5%O——2)持续传代培养,绘制生长曲线,检测活性氧水平和线粒体膜电位。将小鼠胚胎干细胞分为常氧组(饲养层为常氧组小鼠胚胎成纤维细胞,体积分数20%O——2条件下培养)和低氧组(饲养层为低氧组小鼠胚胎成纤维细胞,体积分数5%O——2条件下培养),观察胚胎干细胞的生长形态,检测干细胞多能性指标Oct4、Sox2以及低氧诱导因子HIF-1αmRNA表达。结果与结论:(1)与常氧组相比,低氧组小鼠胚胎成纤维细胞增殖较快,线粒体膜电位上升,产生活性氧减少(P<0.05);(2)胚胎干细胞碱性磷酸酶染色阳性,Oct4、Sox2高表达,低氧组形成的中小集落及HIF-1αmRNA表达比常氧组显著增多(P<0.05);(3)结果表明,体积分数5%O2持续低氧培养利于维持饲养层细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)的活力和胚胎干细胞的干性维持。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 成纤维细胞 细胞低氧 组织工程

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血清反应因子N端片段对鼻咽癌细胞增殖及迁移能力的影响 被引量：1

16

作者 袁建玲 邵钟铭 +6 位作者 邹园 伍彩霞 郑阿秀 邢敬慈 白建荣 揭伟 申志华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期535-542,共8页

目的:探讨血清反应因子N端剪切片段(SRF-N)对鼻咽癌(NPC)细胞增殖和迁移能力的影响与机制。方法:应用SRF全长(SRF-Full,1~508 aa)、SRF-N(1~254 aa)及阴性对照(NC)慢病毒颗粒感染人NPC细胞系6-10B,经嘌呤霉素抗性筛选结合Western blot检... 目的:探讨血清反应因子N端剪切片段(SRF-N)对鼻咽癌(NPC)细胞增殖和迁移能力的影响与机制。方法:应用SRF全长(SRF-Full,1~508 aa)、SRF-N(1~254 aa)及阴性对照(NC)慢病毒颗粒感染人NPC细胞系6-10B,经嘌呤霉素抗性筛选结合Western blot检测Flag标签化融合蛋白的表达获得单克隆细胞株,CCK-8实验分析细胞活力的改变,划痕损伤修复实验和Transwell实验分析细胞迁移能力,细胞-基质黏附实验分析细胞黏附能力,Western blot检测细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)和上皮-间充质转化(EMT)相关指标的表达,双萤光素酶报告基因实验检测SRF-Full和SRF-N对Snail1启动子的调节效应。结果:成功用SRF-Full、SRF-N及NC慢病毒感染6-10B细胞,经嘌呤霉素抗性筛选结合Flag标签蛋白的表达获得相应的单克隆细胞株,分别标记为6-10B^(SRF-Full)、6-10B^(SRF-N)和6-10B^(NC)。与6-10B^(NC)细胞相比,6-10B^(SRF-Full)细胞活力、迁移能力和与基质的黏附能力均显著增强(P<0.01),而6-10B^(SRF-N)细胞较6-10B^(SRF-Full)细胞活力、迁移能力及黏附能力均显著下降(P<0.01)。6-10B^(SRF-Full)细胞中波形蛋白(vimentin)、神经钙黏素(N-cadherin)和Snail1的表达水平较6-10B^(NC)细胞显著升高(P<0.01),上皮钙黏素(Ecadherin)表达水平显著下降(P<0.01);而6-10B^(SRF-N)细胞中vimentin、N-cadherin和Snail1的表达水平较6-10B^(SRF-Full)细胞显著下降(P<0.05),E-cadherin表达水平显著上升(P<0.05)。双萤光素酶活性实验结果表明,与NC相比,SRFFull显著激活Snail1启动子(P<0.001);与SRF-Full相比,SRF-N显著抑制Snail1启动子活性(P<0.01)。结论:SRF-Full促进而SRF-N抑制NPC细胞的增殖和迁移;SRF-N抑制Snail1启动子活性而介导NPC的EMT;SRF-N具有潜在的抗NPC作用。 展开更多

关键词 鼻咽癌 血清反应因子N端片段 细胞增殖 细胞迁移 上皮-间充质转化

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人诱导性多能干细胞及分化产物在发育毒性研究中的应用

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作者 王正媚 裴轶劲 《医学综述》 2021年第1期1-7,13,共8页

个体成年之前因接触外源化学物质而产生的任何有害影响均会造成自身生长发育异常,因此,药物开发乃至临床运用均需要可靠的发育毒性实验数据来证明其可用性。人诱导性多能干细胞(hiPSCs)作为一种新型的体外细胞来源,其生理特点与胚胎干... 个体成年之前因接触外源化学物质而产生的任何有害影响均会造成自身生长发育异常,因此,药物开发乃至临床运用均需要可靠的发育毒性实验数据来证明其可用性。人诱导性多能干细胞(hiPSCs)作为一种新型的体外细胞来源,其生理特点与胚胎干细胞类似,具有无限增殖和多向分化的潜能。近年来,不断有研究检测了外源物对hiPSCs及其衍生的各种成体细胞的毒性作用,除了对生长形态的影响外,还尝试探索了对生理功能及各种特异标志物等的影响及可能机制,以期为药物发育毒性评价提供一种简单、可再生、经济有效的体外细胞替代模型。 展开更多

关键词 人诱导性多能干细胞 发育毒性 心脏毒性 肝脏毒性 神经毒性

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三七总皂苷对大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的抑制作用 被引量：6

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作者 区泳芳 伏学坤 +1 位作者 梅兴莎 郑惠珍 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期285-292,共8页

本文旨在研究三七总皂苷(total saponins of Panax notoginseng,t PNS)对二氯化钴(CoCl_2)诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,r BMSCs)凋亡的抑制作用及机制。采用密度梯度离心法分离SD大鼠BMSCs。不... 本文旨在研究三七总皂苷(total saponins of Panax notoginseng,t PNS)对二氯化钴(CoCl_2)诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow mesenchymal stem cells,r BMSCs)凋亡的抑制作用及机制。采用密度梯度离心法分离SD大鼠BMSCs。不同浓度t PNS(1、10和100μg/m L)处理r BMSCs 48 h后,行流式细胞术检测细胞增殖(Ed U法)和细胞周期。300μmol CoCl_2孵育细胞24 h诱导凋亡,在CoCl_2处理的同时加入不同浓度t PNS(1、10和100μg/m L)。Annexin V-FITC/PI染色后,用流式细胞仪检测细胞凋亡率;罗丹明123染色后,在荧光显微镜下观察线粒体膜电位改变;q RT-PCR检测细胞Bcl-2家族的基因表达。结果显示,t PNS各浓度组细胞增殖率均较对照组升高,100μg/m L t PNS组G2+S期细胞百分比较对照组升高。与对照组相比,CoCl_2组细胞凋亡率增加14.2%,而t PNS三个浓度组细胞凋亡率分别较CoCl_2组减少14.4%、12.8%和13.9%(均P<0.01)。与对照组相比,CoCl_2组线粒体膜电位明显降低,而t PNS各浓度组膜电位降低程度明显低于CoCl_2组。t PNS各浓度组的Bcl-2和Bcl-xl m RNA表达均高于CoCl_2组(均P<0.05);10和100μg/m L t PNS组的Bax/Bcl-2比值较CoCl_2组显著降低。以上结果提示,t PNS对CoCl_2诱导的r BMSCs凋亡有抑制作用,其机制是通过提高细胞线粒体膜电位,上调抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl的表达,降低Bax/Bcl-2比值而实现的。 展开更多

关键词 三七总皂苷 骨髓间充质干细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 线粒体膜电位 大鼠

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低氧培养对小鼠胚胎成纤维细胞生长和线粒体分布及功能的影响 被引量：1

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作者 王春 魏含清 裴轶劲 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第19期2599-2603,共5页

目的研究低氧培养条件对小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)的生长和线粒体分布及功能的影响。方法将MEFs分为20%氧浓度的常氧培养组和5%氧浓度的低氧培养组连续培养,每24小时采用台盼蓝染色对MEFs活细胞计数;Mito-Tracker Green对细胞线粒体染... 目的研究低氧培养条件对小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)的生长和线粒体分布及功能的影响。方法将MEFs分为20%氧浓度的常氧培养组和5%氧浓度的低氧培养组连续培养,每24小时采用台盼蓝染色对MEFs活细胞计数;Mito-Tracker Green对细胞线粒体染色并在激光共聚焦显微镜下观察;腺苷三磷酸(ATP)试剂盒检测ATP合成。结果对数生长期低氧培养组活细胞数高于常氧培养组,差异有统计学意义(P<0.05);并且低氧培养组细胞内线粒体核周分布型比例高于常氧培养组,差异有统计学意义(P<0.05);同时两组细胞内ATP水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论低氧培养条件影响线粒体在MEFs细胞内的分布和能量的合成,对细胞生长的促进作用高于常氧培养。 展开更多

关键词 低氧 小鼠胚胎成纤维细胞 线粒体分布 腺苷三磷酸

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