广东一株重组H9N2亚型禽流感病毒的鉴定及全基因组序列分析 被引量：6

1

作者 申翰钦 曾凡桂 +5 位作者 严专强 刘佳佳 覃健萍 毕英佐 李海燕 陈峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期607-612,共6页

本研究于2013年从广东某发病鸡场分离到一株H9N2亚型AIV,命名为A/chicken/Guangdong/LG1/2013。对病毒进行全基因组克隆测序和进化分析,其HA基因裂解基序为333PSRSSR↓GLF341,呈典型低致病性AIV分子特征。其HA基因发生Q226L突变和A316S... 本研究于2013年从广东某发病鸡场分离到一株H9N2亚型AIV,命名为A/chicken/Guangdong/LG1/2013。对病毒进行全基因组克隆测序和进化分析,其HA基因裂解基序为333PSRSSR↓GLF341,呈典型低致病性AIV分子特征。其HA基因发生Q226L突变和A316S突变,NA基因出现第63～65位氨基酸缺失。该病毒株HA、NA和NS基因属于类BJ/1/94分支,PB2属于类SD/H/09分支,PB1、PA、NP基因属于类SH/F/98分支,M基因属于类HK/G1/97分支,该基因型在广东地区未见报道,其内部基因与H7N9亚型人流感病毒SH/02/2013株核苷酸同源性在95.6%～98.6%之间。本研究表明我国H9N2亚型AIV呈现遗传演化的多样性及基因重组的复杂性,对该亚型病毒的监测和研究具有重要的兽医和公共卫生意义。 展开更多

关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 全基因组 基因特征

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免疫鸭群中一株变异型番鸭呼肠孤病毒的分离与特性研究 被引量：1

2

作者 陈峰 雷雯 +5 位作者 张祥斌 招丽婵 操胜 刘闯 覃健萍 李海燕 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期618-622,共5页

本研究从广东省某发病番鸭场分离得到的呼肠孤病毒(DRV)混合有番鸭细小病毒(MDPV)疫苗株。采用MDPV阳性血清中和后,经2轮番鸭胚有限稀释克隆获得纯化的DRV。电镜观察病毒粒子呈球形、无囊膜、双层衣壳、直径约70 nm。F6代病毒滴度为log1... 本研究从广东省某发病番鸭场分离得到的呼肠孤病毒(DRV)混合有番鸭细小病毒(MDPV)疫苗株。采用MDPV阳性血清中和后,经2轮番鸭胚有限稀释克隆获得纯化的DRV。电镜观察病毒粒子呈球形、无囊膜、双层衣壳、直径约70 nm。F6代病毒滴度为log107.5TCID50/0.1 mL,病毒能够致番鸭胚成纤维细胞产生细胞病变,并能够致死番鸭胚和SPF鸡胚,回归1日龄雏番鸭出现典型的肝脏点状或斑块状出血等特征性病变,与临床发病鸭相同。分离株S3基因核苷酸同源性与太湖流域2011年分离株DRV-TH11最高,为99.9%,与福建番鸭源分离株MDRV-J18为98%;与早期MDRV在66.8%～67.2%之间,处于不同进化分支上。本研究分离株对番鸭胚、SPF鸡胚及雏番鸭致病力强,而且其基因序列比早期分离株变异较大,应加强监测并及时筛选新疫苗株以有效防控该病的发生和蔓延。 展开更多

关键词 番鸭 呼肠孤病毒 分离 电镜 特性

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提高哺乳动物克隆效率的研究进展 被引量：3

3

作者 许卫华 吴珍芳 石俊松 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期2516-2523,共8页

体细胞核移植技术(somatic cell nuclear transfer,SCNT)又称为体细胞克隆技术,在生物医学、遗传修饰动物研究及大家畜的育种和良种扩繁等领域具有重要的理论意义和现实价值,但目前该项技术依然存在如克隆效率低下、克隆动物表型异常等... 体细胞核移植技术(somatic cell nuclear transfer,SCNT)又称为体细胞克隆技术,在生物医学、遗传修饰动物研究及大家畜的育种和良种扩繁等领域具有重要的理论意义和现实价值,但目前该项技术依然存在如克隆效率低下、克隆动物表型异常等问题。近年来,研究人员通过在培养基中添加小分子药物、选择优势供体细胞系(包括iPS细胞)、优化传统核移植参数、对发育关键基因(如XIST及H3K9me3去甲基化酶等)的靶向遗传调控等途径,探索提高克隆效率的新思路、新工艺和新方法,作者着重对上述研究进展进行简要综述。 展开更多

关键词 哺乳动物 体细胞核移植技术(SCNT) 克隆效率

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广东省新兴县鸭圆环病毒感染的PCR诊断及序列分析 被引量：15

4

作者 黎敏 宋延华 +3 位作者 温纳相 周全 周丽 宋永峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期164-167,共4页

根据已发表的鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)序列,合成了1对检测引物。利用此对引物对广东省新兴县发生的疑似圆环病毒感染的患病番鸭的肝、胰腺、心、肾、脾、肺、血液、腔上囊、胸腺、哈氏腺、粪便和羽毛进行了PCR扩增。结果显示,... 根据已发表的鸭圆环病毒(duck circovirus,DuCV)序列,合成了1对检测引物。利用此对引物对广东省新兴县发生的疑似圆环病毒感染的患病番鸭的肝、胰腺、心、肾、脾、肺、血液、腔上囊、胸腺、哈氏腺、粪便和羽毛进行了PCR扩增。结果显示,获得了与预期619 bp大小相符的DNA片段,经测序确认其为DuCV特异序列,证实鸭群感染了鸭圆环病毒。然后,再设计了2对引物从鸭组织提取的DNA中扩增出2条片段,拼接校对后获得了全基因组序列,并对其进行了分析。结果表明,在感染鸭体内各组织器官中都有DuCV存在,该株病毒基因组序列全长为1 988 bp,与部分已登录GenBank的DuCV同源性高达97.0%以上。 展开更多

关键词 鸭 圆环病毒 聚合酶链式反应 序列分析

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高致病性PRRSV变异株与经典株混合感染的研究 被引量：4

5

作者 苏润环 邓雨修 +4 位作者 李春梅 王东东 徐贵娟 何瑞强 宋延华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第3期10-13,共4页

应用RT-PCR技术对来自广东省某猪场患有明显呼吸道临床症状和高热死亡的仔猪肺脏组织进行检测,结果初步鉴定为PRRSV高致病性变异株(YGhp株)与经典株(YGcl株)混合感染。进一步对2个毒株的NSP2基因进行序列分析,结果发现YGhp株与VR-2332、... 应用RT-PCR技术对来自广东省某猪场患有明显呼吸道临床症状和高热死亡的仔猪肺脏组织进行检测,结果初步鉴定为PRRSV高致病性变异株(YGhp株)与经典株(YGcl株)混合感染。进一步对2个毒株的NSP2基因进行序列分析,结果发现YGhp株与VR-2332、JXA1和Lelystad株的核苷酸同源性分别为75.1%、99%和35%,而YGcl株与上述毒株的同源性分别为99%、77.7%和34.5%,表明YGhp株为高致病性变异株,YGcl株为经典株,均属美洲型。高致病性PRRSV变异株与经典株混合感染属非常罕见。 展开更多

关键词 猪繁殖与吸呼综合征病毒 变异株 经典株 混合感染

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PRRSV广东及周边地区分离株ORF5基因PCR-RFLP分析 被引量：3

6

作者 宋延华 邓雨修 +2 位作者 苏润环 李春梅 徐贵娟 《动物医学进展》 CSCD 2008年第9期9-12,共4页

用RT-PCR方法对分离自广东及周边地区包括43株高致病性PRRSV(HP-PRRSV)在内的共56株PRRSV ORF5基因进行了扩增,应用MluⅠ、HincⅡ和SacⅡ3种限制性内切酶对PCR扩增片段进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。结果56株分离株中共获得8种... 用RT-PCR方法对分离自广东及周边地区包括43株高致病性PRRSV(HP-PRRSV)在内的共56株PRRSV ORF5基因进行了扩增,应用MluⅠ、HincⅡ和SacⅡ3种限制性内切酶对PCR扩增片段进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析。结果56株分离株中共获得8种不同的RFLP模式,其中有6株分离株(10.7%)模式与美洲型PRRSV弱毒疫苗株一致,为2-5-2模式;其余50株分离株表现为7种不同的RFLP模式,均为野毒株。43株HP-PRRSV表现为除2-5-2模式外的其余7种模式;13株经典PRRSV也表现了4种模式。结果表明广东及周边地区的PRRSV发生了较大的变异。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 RT—PCR 限制性片段长度多态性分析

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猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传技术的研究进展 被引量：3

7

作者 邓雨修 王东东 +3 位作者 潘永飞 周庆丰 苏润环 李春梅 《四川畜牧兽医》 2012年第7期31-32,共2页

反向遗传操作技术可以在DNA水平上对RNA病毒基因组进行各种修饰或改造,然后通过拯救病毒的表型变化来判断这些基因操作的效果,从而可以对病毒基因组的表达调控机制、病毒致病的分子机理等进行研究。本文就反向遗传操作技术在PRRSV基因... 反向遗传操作技术可以在DNA水平上对RNA病毒基因组进行各种修饰或改造,然后通过拯救病毒的表型变化来判断这些基因操作的效果,从而可以对病毒基因组的表达调控机制、病毒致病的分子机理等进行研究。本文就反向遗传操作技术在PRRSV基因功能结构研究以及新型疫苗开发等研究中的应用进行了综述。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 反向遗传学 研究进展

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番鸭呼肠孤病毒YF株的分离鉴定及细胞培养特性研究 被引量：1

8

作者 周丽 宋永峰 +4 位作者 周全 黎敏 高恒 管凤霞 温纳相 《山东畜牧兽医》 2009年第10期10-11,共2页

从广东云浮地区采集一份疑是呼肠孤病毒病料,按常规研磨处理,接种番鸭胚收获尿囊液,提取核酸进行RT-PCR检测,结果是阳性。采用番鸭胚成纤维细胞、DF1鸡胚成纤维细胞系对收获尿囊液进行增殖培养,探索其培养特性,结果该毒株在这种细胞上... 从广东云浮地区采集一份疑是呼肠孤病毒病料,按常规研磨处理,接种番鸭胚收获尿囊液,提取核酸进行RT-PCR检测,结果是阳性。采用番鸭胚成纤维细胞、DF1鸡胚成纤维细胞系对收获尿囊液进行增殖培养,探索其培养特性,结果该毒株在这种细胞上增殖良好,均产生明显的细胞病变,其中在DF1鸡胚成纤维细胞系上病毒的TCID50最高。 展开更多

关键词 雏番鸭 呼肠孤病毒 分离 细胞培养

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中国畜禽粪污资源化利用PEST分析

9

作者 李强 刘梦雪 +6 位作者 李允亮 安一方 张皓天 王鹏 张玉龙 李永涛 张振 《中国农学通报》 2023年第17期92-98,共7页

通过对中国畜禽粪污资源化利用外部宏观环境分析,以期为保障中国畜牧业可持续发展提供依据。使用PEST分析模型,从政治、经济、社会和技术4方面因素对畜禽粪污资源化利用进行了研究。结果表明:政治环境方面,相关政策和标准得到进一步完善... 通过对中国畜禽粪污资源化利用外部宏观环境分析,以期为保障中国畜牧业可持续发展提供依据。使用PEST分析模型,从政治、经济、社会和技术4方面因素对畜禽粪污资源化利用进行了研究。结果表明:政治环境方面,相关政策和标准得到进一步完善;经济环境方面,畜禽粪污作为生物质经济潜力巨大,市场化运营机制得到发掘;社会环境方面,畜禽粪污资源化利用是养殖业绿色可持续发展的必然选择;技术环境方面,资源化技术模式和技术体系得到不断发展。当前中国畜禽粪污资源化利用具有良好的行动基础,但也存在较多问题与挑战。为进一步促进中国畜禽粪污资源化利用的可持续发展,提出了相应的发展对策及建议。 展开更多

关键词 畜禽粪污 资源化利用 PEST分析 宏观环境 对策建议

原文传递

供体细胞系基因座位特异DNA甲基化多态性及其与猪克隆效率的关联分析 被引量：1

10

作者 许卫华 吴珍芳 +5 位作者 余波 贺晓燕 石俊松 周荣 刘德武 李紫聪 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期165-170,共6页

利用甲基化限制性酶切试验(Combined bisulfite restriction analysis,COBRA)和亚硫酸盐转换PCR(Bisulfite sequencing PCR,BSP)后测序的方法,筛选猪体细胞克隆优势供体细胞提供基因座位特异的DNA甲基化遗传标记。比较8个发育重要基因... 利用甲基化限制性酶切试验(Combined bisulfite restriction analysis,COBRA)和亚硫酸盐转换PCR(Bisulfite sequencing PCR,BSP)后测序的方法,筛选猪体细胞克隆优势供体细胞提供基因座位特异的DNA甲基化遗传标记。比较8个发育重要基因的差异甲基化区域(Differentially methylated regions,DMRs)在不同克隆供体细胞系中的DNA甲基化多态性,并与猪克隆成绩进行关联分析。结果表明:除了XIST-DMR2和H19-DMR3 DNA甲基化变异幅度较小(低于10%)外,其他基因的相关座位均存在一定的COBRA多态性,其中,LINE1-DMR1、POU5F1-DMR1和NANOG-DMR1等3个差异甲基化化区域在克隆效率最高细胞系中处均处于最低程度的DNA甲基化状态,因此,可作为筛选猪体细胞克隆优势供体细胞系的潜在的DNA甲基化遗传标记。 展开更多

关键词 猪 供体细胞 DNA甲基化 多态性 克隆效率

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鸡传染性贫血病毒VP1和VP2基因共表达载体的构建 被引量：3

11

作者 陈降华 周庆丰 +1 位作者 刘忠华 李文平 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第11期68-71,共4页

根据GenBank中收录的鸡传染性贫血病毒(CIAV)基因组序列,设计了扩增CIAV VP1和VP2基因的特异性引物,运用PCR技术从发病鸡肝组织DNA中扩增得到VP1、VP2基因,并将其克隆至pMD18-T载体。核苷酸测序结果显示,其序列与发表的序列同源性达到99... 根据GenBank中收录的鸡传染性贫血病毒(CIAV)基因组序列,设计了扩增CIAV VP1和VP2基因的特异性引物,运用PCR技术从发病鸡肝组织DNA中扩增得到VP1、VP2基因,并将其克隆至pMD18-T载体。核苷酸测序结果显示,其序列与发表的序列同源性达到99.8%。将VP2基因克隆到pMD18-T载体,并对Vp3基因起始密码子进行定点突变,得到突变基因mVP2。将mVP2、VP1先后克隆至pIRES载体,并转化大肠埃希菌JM109,提取质粒通过酶切鉴定显示,成功获得了共表达质粒pIRES-VP1/mVP2。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病毒 VP1基因 VP2基因 共表达载体

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稳定转染纤维素酶相关基因的猪胎儿成纤维细胞系的建立 被引量：1

12

作者 黄妙容 张献伟 +5 位作者 刘德武 邹娴 帅亮 袁玉娟 朱财林 吴珍芳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期535-542,共8页

旨在构建带有双筛选标记的纤维素酶基因的腮腺特异性表达载体,筛选稳定转染该载体的猪胎儿成纤维细胞系,为制备转纤维素酶基因的转基因克隆猪提供核供体细胞。采用SOE-PCR和PCR方法,分别扩增获得筛选标记基因NEO-T2A-EGFP序列和纤维素... 旨在构建带有双筛选标记的纤维素酶基因的腮腺特异性表达载体,筛选稳定转染该载体的猪胎儿成纤维细胞系,为制备转纤维素酶基因的转基因克隆猪提供核供体细胞。采用SOE-PCR和PCR方法,分别扩增获得筛选标记基因NEO-T2A-EGFP序列和纤维素酶相关基因的融合序列SP-EGX-F2A-BGL1,构建腮腺特异性表达载体pPSP-SP-EGX-F2A-BGL1-CMV-NEO-T2A-EGFP,经PCR、酶切、测序鉴定正确后,通过脂质体转染猪胎儿成纤维细胞,利用G418抗性和绿色荧光蛋白进行稳定筛选,并利用PCR和Western blot进行检测。结果表明,成功构建了带双筛选标记的腮腺特异表达纤维素酶基因的表达载体,并获得稳定转染该载体的猪胎儿成纤维细胞系。该结果为生产腮腺特异表达纤维素酶的转基因克隆猪研究奠定基础。 展开更多

关键词 双筛选标记 纤维素酶 2A 猪胎儿成纤维细胞

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油葵对沼液灌溉引起的盐碱胁迫响应 被引量：5

13

作者 范佳雪 李永涛 +4 位作者 胡传鹤 李杰 张振 李冬琴 李文彦 《农业资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期193-200,共8页

为解决养殖业废弃物沼液长期灌溉引起农田盐渍化风险问题,本研究选择油葵作为沼液消纳作物研究其耐盐碱性并进行大田验证。通过室内模拟沼液中盐分主要的胁迫类型,配制不同浓度盐、碱离子进行油葵种子发芽胁迫实验,明确油葵发芽期对沼... 为解决养殖业废弃物沼液长期灌溉引起农田盐渍化风险问题,本研究选择油葵作为沼液消纳作物研究其耐盐碱性并进行大田验证。通过室内模拟沼液中盐分主要的胁迫类型,配制不同浓度盐、碱离子进行油葵种子发芽胁迫实验,明确油葵发芽期对沼液中盐、碱胁迫的耐受阈值,同时大田实验设置不同沼液灌溉量灌溉油葵,观测生长状况和农艺性状,综合分析油葵对盐、碱胁迫的响应机制。结果表明,油葵发芽对中性盐耐受阈值在180~240 mmol∙L^(-1)之间,对碱性盐离子耐受阈值在60~120 mmol∙L^(-1)之间。发芽过程中,碱性盐离子浓度为60 mmol∙L^(-1)时,细胞膜相对透性为24%,与中性盐(22%)相近,但相对盐害率为32.36%,显著高于中性盐处理(1.45%),K^(+)/Na^(+)下降91.11%~92.81%,中性盐处理下K^(+)/Na^(+)下降79.90%~87.33%。大田试验利用Na^(+)浓度约为35 mmol∙L^(-1)沼液长期灌溉油葵,在低灌溉量(150 m^(3)∙hm^(-2))下,油葵各农艺性状变化不大,且K^(+)/Na^(+)差异不显著,但在高灌溉量(600 m^(3)∙hm^(-2))下,油葵生长各农艺指标受到抑制,各组织K^(+)/Na^(+)下降57%~88%。研究表明,碱性盐产生的高pH危害高于盐离子渗透胁迫,且碱性盐会更大程度破坏油葵离子稳态,影响油葵发芽与生长。利用养殖业废弃物中沼液作为再生水资源灌溉农田,应控制其HCO_(3)^(-)、CO_(3)^(2-)的含量,调控废水pH,以降低对农作物的伤害。 展开更多

关键词 油葵 沼液 盐胁迫 碱胁迫 离子稳态

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中国畜禽粪污资源化种养循环现状与效益分析 被引量：9

14

作者 张晨 李永涛 +4 位作者 李强 文红平 李文彦 郭军康 张振 《化工管理》 2022年第16期99-103,共5页

畜禽粪污已成为农业面源污染的主要来源,合理进行畜禽粪污资源化利用,构建种养循环农业体系是解决畜禽粪污污染问题的有效途径。通过对中国大部分地区进行实地调研,发现当前各地均具有发展种养循环农业的良好条件,但仍存在原位安全消纳... 畜禽粪污已成为农业面源污染的主要来源,合理进行畜禽粪污资源化利用,构建种养循环农业体系是解决畜禽粪污污染问题的有效途径。通过对中国大部分地区进行实地调研,发现当前各地均具有发展种养循环农业的良好条件,但仍存在原位安全消纳标准体系缺乏和周边消纳农田面积不足等问题。当前沼气工程和好氧发酵是实现畜禽粪污资源化和促进种养循环的重要纽带,结合个案分析表明种养循环模式较于达标排放减少企业环保投资72.4%。最后建议要因地制宜地实现畜禽粪污还田无害化处理及资源化利用,同时建立种养结合数据库及运行长效机制。 展开更多

关键词 畜禽粪污 资源化 种养结合 循环农业

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猪白细胞介素2基因的克隆及腺病毒表达载体的构建 被引量：2

15

作者 周庆丰 刘忠华 +4 位作者 龚朋飞 周美华 苏润环 何津佳 毕英佐 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第1期17-22,共6页

根据GenBank中收录的猪白细胞介素2(pIL-2)基因序列,设计1对特异性引物。运用RT-PCR技术从刀豆素(Con A)诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到pIL-2基因,并将其克隆至pGEM-T Easy载体上。核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长493 bp... 根据GenBank中收录的猪白细胞介素2(pIL-2)基因序列,设计1对特异性引物。运用RT-PCR技术从刀豆素(Con A)诱导的猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到pIL-2基因,并将其克隆至pGEM-T Easy载体上。核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长493 bp,含465 bp的开放阅读框,编码154个氨基酸,与已知pIL-2核苷酸序列和氨基酸序列的同源性都高达100%。将克隆的pIL-2基因编码阅读框亚克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV,电转化含腺病毒基因组(pAdEasy-1)的大肠埃希菌细胞BJ5183-AD-1,成功获得了重组腺病毒DNA,将纯化后的重组腺病毒DNA转染AD-293细胞,经过病毒基因组的PCR鉴定和转录水平的RT-PCR鉴定,初步表明,获得了表达pIL-2的重组腺病毒。 展开更多

关键词 猪白细胞介素2 基因克隆 腺病毒载体 基因表达

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3种致猪腹泻病毒的多重RT-PCR检测 被引量：34

16

作者 田小艳 孙华 +3 位作者 邓雨修 苏润环 王东东 宋延华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第9期54-57,共4页

试验建立了用于检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与猪轮状病毒(PRV)的三重RT-PCR方法,以调查猪群中腹泻病毒感染情况。通过该方法对采自广东省规模化猪场的95份临床疑似病毒性腹泻病料进行了检测,结果表明,猪流行... 试验建立了用于检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)与猪轮状病毒(PRV)的三重RT-PCR方法,以调查猪群中腹泻病毒感染情况。通过该方法对采自广东省规模化猪场的95份临床疑似病毒性腹泻病料进行了检测,结果表明,猪流行性性腹泻病毒阳性率为33.7%,猪传染性胃肠炎病毒阳性率为4.2%,猪轮状病毒阳性率为20%;猪流行性性腹泻病毒和猪轮状病毒混合感染率为8.4%,猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒混合感染率为2.1%。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 猪轮状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 多重RT-PCR

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三种猪Ⅰ型干扰素基因的克隆与序列分析 被引量：3

17

作者 周庆丰 陈丽 +4 位作者 龚朋飞 周美华 郑志青 陈峰 毕英佐 《广东畜牧兽医科技》 2009年第1期37-40,共4页

根据GenBank中收录的三种猪I型干扰素(porcine interferon,pIFN)基因序列,设计了3对特异性引物。运用RT-PCR技术从长白猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到了三种猪干扰素基因,并将其克隆至pGEM-TEasy载体上。序列测定结果显示,获得的猪干... 根据GenBank中收录的三种猪I型干扰素(porcine interferon,pIFN)基因序列,设计了3对特异性引物。运用RT-PCR技术从长白猪外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到了三种猪干扰素基因,并将其克隆至pGEM-TEasy载体上。序列测定结果显示,获得的猪干扰素α1基因序列全长570bp,编码189个氨基酸,获得的猪干扰素α2基因序列全长540bp,编码179个氨基酸,获得的猪干扰素β基因序列全长563bp,编码186个氨基酸。三种猪I型干扰素基因与已知猪I型干扰素核苷酸序列和氨基酸序列的相似性最高可达99%～100%。 展开更多

关键词 猪I型干扰素 基因克隆 序列分析

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猪MRLC2基因内含子遗传多态性与胴体及肉质性状的关联分析

18

作者 余文敏 谢红涛 +3 位作者 徐永杰 李德臻 熊远著 杨明柳 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期189-192,共4页

克隆了大白、长白和梅山猪肌球蛋白轻链调控蛋白2基因(MRLC2)内含子2序列,经比对发现,在内含子2中18个碱基突变和8个碱基缺失,其中179bp处的C/T突变引起Hin6I酶切位点的改变,运用PCR-Hin6I-RFLP对179头大白×梅山F2代猪进行家系关... 克隆了大白、长白和梅山猪肌球蛋白轻链调控蛋白2基因(MRLC2)内含子2序列,经比对发现,在内含子2中18个碱基突变和8个碱基缺失,其中179bp处的C/T突变引起Hin6I酶切位点的改变,运用PCR-Hin6I-RFLP对179头大白×梅山F2代猪进行家系关联分析,结果表明该酶切位点与屠宰率呈极显著相关,表现为加性效应,CC基因型个体比CT基因型、TT基因型个体有更高的屠宰率;与大理石纹评分呈显著相关,CC基因型个体评分比CT基因型、TT基因型个体高。 展开更多

关键词 猪 肌球蛋白轻链调控蛋白2基因 多态性 关联分析

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我国猪繁殖与呼吸综合征流行概况 被引量：10

19

作者 王东东 邓雨修 +5 位作者 招丽婵 李春梅 苏润环 徐贵娟 杨明柳 宋延华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期101-104,共4页

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是目前危害世界养猪业最严重的传染病之一,并在我国广泛流行。2006年我国出现的美洲型高致病性PRRS病毒(PRRSV)变异株,更是对我国养猪业影响极大。论文概述了近年来我国PRRS的流行特点,对血清学及病原学方面的... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是目前危害世界养猪业最严重的传染病之一,并在我国广泛流行。2006年我国出现的美洲型高致病性PRRS病毒(PRRSV)变异株,更是对我国养猪业影响极大。论文概述了近年来我国PRRS的流行特点,对血清学及病原学方面的调查数据进行了统计分析,并对PRRSV分子流行病学进行了探讨。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 血清学 病原学 流行病学

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两株死胎源猪圆环病毒Ⅱ型的分离与序列分析 被引量：1

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作者 周庆丰 陈峰 +4 位作者 吴德铭 苏润环 陈靳松 宋延华 毕英佐 《广东畜牧兽医科技》 2008年第2期36-39,共4页

将两猪场Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)核酸阳性的流产死胎病料,接种猪肾传代细胞PK15,成功分离到2株PCV2。利用1对PCV2特异性引物,成功扩增出这2株PCV2长约1700bp的全基因组序列,并与其他PCV2毒株序列进行相似性比较。结果表明:2个分离株全基... 将两猪场Ⅱ型猪圆环病毒(PCV2)核酸阳性的流产死胎病料,接种猪肾传代细胞PK15,成功分离到2株PCV2。利用1对PCV2特异性引物,成功扩增出这2株PCV2长约1700bp的全基因组序列,并与其他PCV2毒株序列进行相似性比较。结果表明:2个分离株全基因组长度均为1767bp,核苷酸序列相似性为99.9%;ORF2基因核苷酸相似性为99.85%,所编码的衣壳蛋白氨基酸序列相似性为100%;2个分离株与SD-3等国内分离株核苷酸序列的相似性较高,最高可达99.9%。 展开更多

关键词 Ⅱ型猪圆环病毒 分离 序列分析

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