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广东省耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型研究 被引量：1
1
作者 黄革 蒋文玲 +1 位作者 黄爱伟 李运雄 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期745-749,共5页
目的分析本地区分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄球菌盒染色体mec(SCCmec)类型。方法利用3套多重PCR体系扩增耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec型特异性位点、共同位点、鉴别位点、内参照位点以及mec基因复合物和ccr基因复合物进... 目的分析本地区分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄球菌盒染色体mec(SCCmec)类型。方法利用3套多重PCR体系扩增耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec型特异性位点、共同位点、鉴别位点、内参照位点以及mec基因复合物和ccr基因复合物进行SCCmec分型。结果分离的156株MRSA中,6株MRSA不能分型,可分型率为96.2%。其中,Ⅲ型SCCmec 125株,占83.3%,Ⅱ型SCCmec 11株,占7.3%,Ⅳ、Ⅴ型SCCmec各7株,占4.7%。结论本地区分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌流行携带最多耐药基因的Ⅲ型SCCmec。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 葡萄球菌盒染色体mec 多重PCR 分型
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广东省非综合征耳聋患者GJA1基因及常见耳聋基因突变分析 被引量：6
2
作者 蒙翠原 盛晓丽 +1 位作者 崔勇 林秋雄 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期1075-1077,共3页
目的:研究广东省非综合征耳聋患者常见耳聋基因突变的发病情况。方法:对来自广东省某特殊学校的73例非综合征感觉神经性耳聋患者采集外周血,对GJA1、GJB2、GJB3、SLC26A4、mtDNA12SrRNA基因编码区进行测序。结果:73例患者中检测到GJB2... 目的:研究广东省非综合征耳聋患者常见耳聋基因突变的发病情况。方法:对来自广东省某特殊学校的73例非综合征感觉神经性耳聋患者采集外周血,对GJA1、GJB2、GJB3、SLC26A4、mtDNA12SrRNA基因编码区进行测序。结果:73例患者中检测到GJB2基因突变235delC5例;GJB3基因突变547G>A1例;SLC26A4基因突变IVS7-2A>G7例,2168A>G杂合突变1例;mtDNA12SrRNA纯合突变3例。结论:本研究为19.18%的研究对象明确了分子病因;GJB2基因突变不是本研究的主要致病基因,SLC26A4为最常见的耳聋突变基因;未检测到GJA1基因突变。 展开更多
关键词 聋 非综合征型耳聋 基因突变 广东省
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广东省人民医院2005—2006年新生儿地中海贫血类型分析 被引量：3
3
作者 荣卡彬 李运雄 +2 位作者 陈冬 陈和平 黄革 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期180-181,共2页
地中海贫血丝我国南方常见的单基因遗传病。在我国广东，广西、海南。等地有较高的发病率。至今，对典型地中海贫血缺乏有效的治疗方法。在人群中实施遗传筛查预防计划，通过产前诊断防止受累胎儿的出生，是预防该病发生的有效办法。血... 地中海贫血丝我国南方常见的单基因遗传病。在我国广东，广西、海南。等地有较高的发病率。至今，对典型地中海贫血缺乏有效的治疗方法。在人群中实施遗传筛查预防计划，通过产前诊断防止受累胎儿的出生，是预防该病发生的有效办法。血液学筛查结合基因诊断是临床上筛查诊断地中海贫血的重要手段。我们对2005年11月到2006年1月出生的新生儿作一调查，以了解地中海贫血发生频率，探讨采用以预防为主的综合方案对地中海贫血防治和优生的效果。 展开更多
关键词 广东省人民医院 地中海贫血 新生儿 贫血类型 单基因遗传病 预防计划 血液学筛查 治疗方法
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实验性动脉粥样硬化家兔MIF、TNF-α和IL-6水平的研究 被引量：15
4
作者 林秋雄 刘晓颖 +6 位作者 杨敏 符永恒 单志新 余细勇 黄小穗 郑猛 林曙光 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第6期843-845,共3页
目的:对实验性动脉粥样硬化家兔血清中巨噬细胞移动抑制因子、肿瘤坏死因子、白介素-6含量进行分析,以探讨它们在冠心病发病过程中的意义。方法:研究对象为新西兰大白兔,随机分成对照组(10只)和实验组(10只)。对照组喂食基础饲料,实验... 目的:对实验性动脉粥样硬化家兔血清中巨噬细胞移动抑制因子、肿瘤坏死因子、白介素-6含量进行分析,以探讨它们在冠心病发病过程中的意义。方法:研究对象为新西兰大白兔,随机分成对照组(10只)和实验组(10只)。对照组喂食基础饲料,实验组喂食高脂饲料(基础饲料中加入1%胆固醇+5%猪油)。均喂饲8周后采用ELISA法检测其血清MIF、TNF-α、IL-6水平。结果:组织病理切片结果显示实验组兔主动脉弓内膜增厚,动脉粥样斑块明显。与对照组比较,实验组MIF、TNF-α、IL-6水平均升高,其差别有显著性(p＜0．01)。结论:MIF、TNF-α、IL-6与动脉粥样硬化的发生有密切关系,这些细胞因子可通过相互诱导、相互协同共同参与冠心病的发生、发展过程。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 巨噬细胞移动抑制因子 肿瘤坏死因子-Α 白介素-6
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甘油三酯对血管内皮细胞GRK2表达时序性的研究 被引量：5
5
作者 林秋雄 余细勇 +3 位作者 单志新 杨敏 林曙光 Huiyaolan 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B06期37-38,共2页
[目的]探讨甘油三酯对血管内皮细胞G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)时序性表达的影响。[方法]体外培养人血 管内皮细胞(EAhy926),在培养基中加入终浓度为150 mg／L的甘油三酯进行时间效应实验,于0、3、6、12、24、36 h收集细胞 后立即进行蛋... [目的]探讨甘油三酯对血管内皮细胞G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)时序性表达的影响。[方法]体外培养人血 管内皮细胞(EAhy926),在培养基中加入终浓度为150 mg／L的甘油三酯进行时间效应实验,于0、3、6、12、24、36 h收集细胞 后立即进行蛋白抽提,用Western blot检测甘油三酯作用后血管内皮细胞GRK2的改变。[结果]0、3、6、12、24和36 h组 GRK2／Actin灰度比值分别为0.31±0.02、0.41±0.02、0.49±0.03、0.54±0.04、0.61±0.11、0.59±0.05。随着甘油三酯作 用时间延长,GRK2含量呈时间依赖性增加,24 h达到高峰。[结论]甘油三酯可能通过上调血管内皮细胞的GRK2,导致内皮 细胞功能障碍,从而参与了动脉粥样硬化的发生发展进程。 展开更多
关键词 甘油三酯 人血管内皮细胞 表达 发生发展 内皮细胞功能障碍 改变 动脉粥样硬化 时序性 G蛋白偶联受体激酶 时间依赖性
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共培养系统下骨髓间充质干细胞分化为颌下腺腺泡细胞的实验研究 被引量：10
6
作者 黄晓明 罗小宁 +3 位作者 郑亿庆 林秋雄 孙伟 梁发雅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期562-565,共4页
目的研究使用共培养系统将骨髓间充质干细胞分化为有分泌功能的颌下腺腺泡细胞的可行性。方法分离成年SD大鼠骨髓间充质干细胞于体外培养、纯化和鉴定,同时分离新生SD大鼠的颌下腺细胞于体外培养、纯化和鉴定,取颌下腺腺泡细胞第二代和... 目的研究使用共培养系统将骨髓间充质干细胞分化为有分泌功能的颌下腺腺泡细胞的可行性。方法分离成年SD大鼠骨髓间充质干细胞于体外培养、纯化和鉴定,同时分离新生SD大鼠的颌下腺细胞于体外培养、纯化和鉴定,取颌下腺腺泡细胞第二代和间充质干细胞第一代置于共培养系统诱导干细胞定向分化。使用免疫细胞化学法分析骨髓间充质干细胞是否表达淀粉酶抗体。结果纯化后的颌下腺腺泡细胞呈铺路石样形态,原代至第5代培养基及细胞内均可检测到淀粉酶表达;体外培养的骨髓间充质干细胞呈梭形,呈束状、漩涡状排列,可成功诱导成脂肪细胞,油红-O染色显示含有脂滴;共培养后的骨髓间充质干细胞表达淀粉酶抗体,约30%的骨髓间充质干细胞在共培养1周后转化为腺泡细胞,约50%的骨髓间充质干细胞在共培养2周后转化为腺泡细胞。结论成功构建大鼠颌下腺腺泡细胞和骨髓间充质干细胞的体外培养体系,并证明大鼠骨髓间充质干细胞具有转化为腺泡细胞的能力,因此骨髓间充质干细胞将有望应用于涎腺组织工程。 展开更多
关键词 细胞分化 间质干细胞 颌下腺 组织工程
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含人AGM区基质细胞培养体系定向诱导胚胎干细胞为造血干细胞的实验研究 被引量：10
7
作者 张绪超 陈惠芹 +3 位作者 黄绍良 吴北燕 黄永兰 蔡耘 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1747-1751,共5页
目的:体外模拟胚胎早期AGM区造血微环境,诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为造血干细胞(HSCs)。方法:将小鼠E14ESCs在含BMP-4及VEGF的半固体培养基中诱导为拟胚体(EB),分别于3、6、9、12、15d时收获EB,流式细胞术检测Flk-1+细胞含量。取Flk-1+... 目的:体外模拟胚胎早期AGM区造血微环境,诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为造血干细胞(HSCs)。方法:将小鼠E14ESCs在含BMP-4及VEGF的半固体培养基中诱导为拟胚体(EB),分别于3、6、9、12、15d时收获EB,流式细胞术检测Flk-1+细胞含量。取Flk-1+细胞处于高峰期的EB细胞,在人AGM区基质细胞饲养层上进一步诱导分化,并设无饲养层对照,分别于3、6、9、12d时收获细胞计数、流式细胞术检测Sca-1+c-kit+细胞含量,并分析造血细胞集落形成能力。结果:诱导E14细胞形成EB过程中添加BMP4+VEGF的因子组Flk-1+细胞在第9d达峰值(27.53%±2.84%),与未添加因子组(8.77%±1.12%)比较差异显著(P<0.05)。将培养9d的EB细胞在hAGMS3、hAGMS4饲养层上进一步诱导分化,第6d时Sca-1+c-kit+细胞达峰值,分别为7.31%±1.21%、7.62%±1.52%,其绝对数分别扩增(2.57±0.48)倍、(2.35±0.36)倍,与无饲养层组比较显著差异(P<0.05)。该分化阶段的Sca-1+c-kit+细胞具有形成各系造血细胞集落的能力。结论:人胚早期AGM区基质细胞能促进小鼠ESCs定向分化为HSCs,为研究ESCs分化为HSCs的分子机制提供了实验模型。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 造血干细胞 细胞分化
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脂蛋白对培养巨噬细胞表达噬巨细胞移动抑制因子的实验研究 被引量：5
8
作者 林秋雄 单志新 +3 位作者 余细勇 杨敏 林曙光 Hui-yao LAN 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第3期329-332,共4页
目的:探讨不同脂蛋白对培养的人巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子基因和蛋白水平的影响。方法:2 8SC人巨噬细胞株用含有1×10 5U·L-1青霉素、10 0mg·L-1链霉素和10 %FBS的RPMI 16 40培养基于37℃,5 %的CO2 中培养。以每... 目的:探讨不同脂蛋白对培养的人巨噬细胞表达巨噬细胞移动抑制因子基因和蛋白水平的影响。方法:2 8SC人巨噬细胞株用含有1×10 5U·L-1青霉素、10 0mg·L-1链霉素和10 %FBS的RPMI 16 40培养基于37℃,5 %的CO2 中培养。以每孔1×10 4个细胞接种于6孔板中,每孔2ml培养液,加入终浓度为15 0mg·L-1的不同脂蛋白,于37℃共同孵育2 4h收集细胞和培养介质。采用RT PCR和ELISA分别测定MIFmRNA和蛋白表达水平。结果:巨噬细胞有MIF表达,低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白、胆固醇和甘油三脂组诱导巨噬细胞MIFmRNA和蛋白表达水平,试验组较正常对照组升高(P <0 .0 5 ) ;而高密度脂蛋白和极低密度脂蛋白组诱导巨噬细胞MIFmRNA和蛋白表达水平,试验组与正常对照组变化相近(P >0 .0 5 )。结论:不同脂质对巨噬细胞MIFmRNA和蛋白表达作用不同。MIF可能参与了低密度脂蛋白、氧化型低密度脂蛋白、胆固醇和甘油三脂所致的动脉粥样硬化进程。 展开更多
关键词 脂蛋白类 巨噬细胞移动抑制因子 动脉粥样硬化 细胞培养 逆转录聚合酶链反应 酶联免疫分析
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空心莲子草抗登革病毒作用的实验研究 被引量：22
9
作者 蒋文玲 罗宪玲 邝素娟 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期454-456,共3页
目的采用中药空心莲子草提取液进行体外抗登革病毒的研究,寻找新的抗登革病毒药物。方法利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞病变效应(CPE),观察检测空心莲子草对C6/36传代细胞株的细胞毒性作用和抗登革病毒作用。结果空心莲子草的4种提取... 目的采用中药空心莲子草提取液进行体外抗登革病毒的研究,寻找新的抗登革病毒药物。方法利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞病变效应(CPE),观察检测空心莲子草对C6/36传代细胞株的细胞毒性作用和抗登革病毒作用。结果空心莲子草的4种提取物除>320μg/ml组以外,各浓度组均未见对细胞有明显的毒性作用。用统计软件SPSS11.5的Probit回归法计算药物的半数毒性浓度(TD50)和半数有效抑制浓度(ED50),香豆精类提取物对细胞的毒性最小(TD50=535.91),石油醚提取物对病毒的抑制作用大于另3种提取物和药物对照(ED50=47.43)。结论空心莲子草在体外有抗登革病毒作用。 展开更多
关键词 空心莲子草 登革病毒 抗病毒作用
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生长抑素类似物奥曲肽抑制肝癌细胞血管内皮生长因子表达的研究 被引量：4
10
作者 刘宇斌 邝素娟 +3 位作者 黄小穗 简志祥 刘子贤 林叶 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1677-1678,共2页
目的探讨生长抑素类似物奥曲肽对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将40只小鼠随机分为2组,每组各20只。每只小鼠于腋窝皮下注射小鼠肝癌细胞株细胞。A组为实验组,皮下接种肿瘤24 h后予生长抑素奥曲肽(100μg.kg-1.d-1)... 目的探讨生长抑素类似物奥曲肽对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将40只小鼠随机分为2组,每组各20只。每只小鼠于腋窝皮下注射小鼠肝癌细胞株细胞。A组为实验组,皮下接种肿瘤24 h后予生长抑素奥曲肽(100μg.kg-1.d-1)腹腔注射,连用20 d,B组为对照组,予以相同容积的无菌生理盐水腹腔注射,连用14 d。20 d后处死小白鼠,检测肿瘤大小、血管内皮生长因子(VEGF)。结果皮下接种7 d及14 d后A组皮下肿瘤的体积均明显小于B组(P<0.05,P<0.01)。A组VEGF表达明显低于B组,统计学有显著差异性(Ridit检验,P<0.05);A组微血管密度MVD亦较B组为低,但统计学差异无显著性(P=0.075)。结论奥曲肽对小白鼠肝癌移植瘤具有抑制作用,其作用机制是抑制肝癌细胞VEGF的表达,对肿瘤组织血管形成的抑制作用亦可能为其原因。 展开更多
关键词 生长抑素 奥曲肽 肝癌细胞 血管内皮生长因子
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利培酮及其活性代谢产物的药动学研究 被引量：8
11
作者 周志凌 李新 +7 位作者 谢永标 李焕德 张毕奎 彭文兴 苏芬丽 王峰 余细勇 杨敏 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第15期1174-1176,共3页
目的研究利培酮(risperdal)及其活性代谢产物9-羟基利培酮(9-OH-risperdal)在中国女性精神分裂症患者的临床药动学。方法单周期实验,20例女性患者经过17d的利培酮治疗,收集系列标本,高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定血浆中的药物浓... 目的研究利培酮(risperdal)及其活性代谢产物9-羟基利培酮(9-OH-risperdal)在中国女性精神分裂症患者的临床药动学。方法单周期实验,20例女性患者经过17d的利培酮治疗,收集系列标本,高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定血浆中的药物浓度。结果利培酮吸收迅速,其tmax和t1/2分别为1.6和3.3h。9-羟利培酮的tmax和t1/2分别为2.6和25.1h。利培酮和9-羟基利培酮的ρassv分别为30.5和136.8μg.L-1,AUC0ss-12分别为482.4和1744.3μg.h.L-1。利培酮的CL/F和V/F分别为8.4L.h-1和33.2L。结论利培酮和9-羟基利培酮的血药浓度,尤其是利培酮,存在着巨大的个体差异。结果表明,治疗药物浓度监测对维思通的合理用药有重要意义。 展开更多
关键词 利培酮 9-羟基利培酮 药动学
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左氧氟沙星分散片人体相对生物利用度及生物等效性研究 被引量：4
12
作者 周志凌 余细勇 +9 位作者 杨敏 林秋雄 陈树桢 陈铁峰 单志新 邓春玉 郑猛 刘晓颖 江桂芬 林曙光 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期220-223,共4页
目的研究国产左氧氟沙星片剂的相对生物利用度，并且评价该制剂的生物等效性。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药，分别口服单剂量左氧氟沙星试验制剂及参比制剂，采用反相高效液相色谱法测定血药浓度，计算两者的药动学参数及... 目的研究国产左氧氟沙星片剂的相对生物利用度，并且评价该制剂的生物等效性。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药，分别口服单剂量左氧氟沙星试验制剂及参比制剂，采用反相高效液相色谱法测定血药浓度，计算两者的药动学参数及相对生物利用度，并评价试验制剂的生物等效性。结果口服左氧氟沙星200mg试验和参比制剂的主要药代力学参数，t1／2分别为（11．0±3．2）h和（9．5±2．6）h；Tmax分别为（0．90±0．46）h和（1．3±0．62）h；Cmax分别为（2．7±0．75）μg·mL^-1和（2．65±0．70）μg·mL^-1；AUC0-T分别为（16．6±3．0）μg·h·mL^-1和（16．5±2．6）μg·h·mL^-1；AUC0-∞分别为（18．2±3、9）μg·h·mL^-1和（19．2±3．5）μg·h·mL^-1。按实测值AUC0-T计算，试验制剂对于参比制剂的平均相对生物利用度为（100．6±10．2）％。Cmax、AUC0-T和AUC0-∞三个药动学参数制剂间均无显著性差异（P〉0．05），服药周期对Cmax，AUC0-T和AUC0-∞三个参数亦无明显影响（P〉0．05），Cmax、AUC0-T和AUC0-∞三个药动学参数均存在明显的个体间差异（P〈0．05）。统计结果显示，AUC0-T的置信区间为100．7％～113．0％，AUC0-∞的置信区间为100．1％～112．2％，Cmax的置信区间为95.0％～115．4％，均符合等效标准；Cmax，AUC0-T和AUC0-∞三个参数的双向t检验结果同样符合等效标准；Tmax经非参检验结果合格。结论左氧氟沙星分散片试验制剂相对参比制剂生物等效。 展开更多
关键词 左氧氟沙星 生物利用度 高效液相色谱
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阿奇霉素分散片人体药动学和相对生物利用度研究 被引量：8
13
作者 周志凌 李柳 +9 位作者 余细勇 杨敏 单志新 林秋雄 麦丽萍 陈铁峰 邓春玉 刘晓颖 江桂芬 林曙光 《中南药学》 CAS 2009年第2期113-116,共4页
目的对阿奇霉素血药浓度测定方法进行改进,研究阿奇霉素分散片的相对生物利用度。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药,分别口服单剂量阿奇霉素试验制剂及参比制剂500 mg后于不同的时间点采血,100μL血样经乙腈沉淀蛋白后,HPLC-MS... 目的对阿奇霉素血药浓度测定方法进行改进,研究阿奇霉素分散片的相对生物利用度。方法20名男性健康受试者随机交叉双周期给药,分别口服单剂量阿奇霉素试验制剂及参比制剂500 mg后于不同的时间点采血,100μL血样经乙腈沉淀蛋白后,HPLC-MS/MS检测。DAS2.0软件计算两者的药物动力学参数,并评价试验制剂的生物等效性。结果阿奇霉素在1~1 000 ng.mL-1范围内线性好,日内或日间差均小于1 0%,准确度在97%~110%。稳定性良好。萃取回收率至少大于91%。受试药与对照药的药动学参数t1/2,Tmax,Cmax,AUC0~t,AUC0~∞,分别为：（40.3±6.5）h,（2.1±0.7）h,（541.7±179.4）ng.mL-1,（4 772.4±913.9）ng.h.mL-1,（5 346.9±1 300.0）ng.h.mL-1和（35.6±5.1）h,（1.8±0.5）h,（584.9±147.3）ng.mL-1,（5 059.5±1347.4）ng.h.mL-1,（5 480.5±1 484.3）ng.h.mL-1。结果显示：单剂量给药后,阿奇霉素受试制剂的相对生物利用度为（99.4%±28.3%）。结论本方法简单快速,灵敏可靠,成功应用于阿奇霉素生物等效性研究,阿奇霉素试验制剂相对参比制剂生物等效。 展开更多
关键词 阿奇霉素 生物等效性 高效液相色谱-串联质谱法
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人ACE2基因真核表达载体的构建及其转染人内皮细胞的研究 被引量：7
14
作者 钟久昌 余细勇 +3 位作者 于汇民 林秋雄 周志凌 杨敏 《心血管康复医学杂志》 CAS 2007年第4期325-328,330,共5页
目的:克隆人血管紧张素转换酶2(ACE2)基因,构建其真核表达载体并将之转染入体外培养的人血管内皮细胞中。方法:采用PCR方法从人胎儿心脏cDNA文库扩增出人ACE2cDNA全长基因,克隆到pcDNA3.1-D/V5-His表达载体上,构建重组真核表达质粒phAC... 目的:克隆人血管紧张素转换酶2(ACE2)基因,构建其真核表达载体并将之转染入体外培养的人血管内皮细胞中。方法:采用PCR方法从人胎儿心脏cDNA文库扩增出人ACE2cDNA全长基因,克隆到pcDNA3.1-D/V5-His表达载体上,构建重组真核表达质粒phACE2,经酶切和测序鉴定。采用脂质体法将phACE2转染至人血管内皮细胞中,分别利用实时定量PCR和Western印迹检测重组ACE2的mRNA和蛋白的表达情况。结果:经PCR、酶切和基因序列测定证实重组入载体的片段(2419bp)为目的基因序列,在转染的内皮细胞中发现ACE2的mRNA和蛋白的表达明显增加(P<0.01)。结论:本研究成功构建并表达了pcDNA3.1-hACE2重组真核表达载体,为该基因在高血压病防治中的功效研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肽基二肽酶A 基因 质粒 高血压
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3T3-L1脂肪细胞诱导分化与肿瘤抑制因子PTEN的表达研究 被引量：3
15
作者 李运雄 孟锦绣 +5 位作者 蔡雪珍 李东风 荣卡彬 蒋文玲 张仁礼 余细勇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期259-263,共5页
目的优化3T3-L1脂肪细胞分化条件,研究信号因子PTEN在分化过程中的表达,以了解PTEN是否通过表达量来调节正常脂肪细胞形成,为探索PTEN的药物靶标作用奠定基础。方法DMEM高糖培养基培养3T3-L1脂肪前体细胞,地塞米松、3-异丁基1-甲基黄磦... 目的优化3T3-L1脂肪细胞分化条件,研究信号因子PTEN在分化过程中的表达,以了解PTEN是否通过表达量来调节正常脂肪细胞形成,为探索PTEN的药物靶标作用奠定基础。方法DMEM高糖培养基培养3T3-L1脂肪前体细胞,地塞米松、3-异丁基1-甲基黄磦呤(IBMX)和胰岛素按2种组合方案分别诱导3T3-L1细胞分化,油红O染色鉴定脂肪细胞,蛋白裂解液提取细胞总蛋白,SDS-PAGE和Western blotting鉴定分化过程中PTEN的表达量,用生物信息学进行小鼠和人类PTEN的同源性分析。结果1μmol/L地塞米松、0.5μmol/LIBMX和5μg/ml胰岛素诱导48h后,再用含5μg/ml胰岛素的DMEM高糖营养液培养48h的方案对3T3-L1细胞诱导分化效果较好,脂肪细胞分化率高且均一,在分化第10天可见90%以上细胞分化为脂肪细胞。PTEN在脂肪细胞分化过程中表达量在第0、4th、6th、9th和第12天时不一致,在12天时明显下降,显著低于诱导前。同源性比对分析表明,小鼠和人类的PTEN mRNA编码序列匹配率为96%,而氨基酸序列匹配率为100%。结论内源性PTEN在小鼠3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化为脂肪细胞的时相过程中表达量有所变化,提示PTEN可能在生理条件下即可发挥提高胰岛素敏感性和促进脂肪细胞形成的作用。 展开更多
关键词 PTEN 脂肪细胞 胰岛素抵抗 地塞米松 IBMX 胰岛素
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体外诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的实验研究 被引量：8
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作者 刘雄英 蒋宁一 +8 位作者 张绪超 周敦华 陈贵兵 胡莹莹 刘幸光 张弘 刘生 孟瑛 黄绍良 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期50-53,共4页
目的探讨体外定向诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为甲状腺细胞的可行性及相关分子表达检测。方法 E14小鼠 ESCs 诱导发育为胚胎体,再逐步添加 TSH、胰岛素、碘化钾(KI)等共同培养。以培养的小鼠甲状腺细胞为阳性对照,观察分化过程中细胞形态... 目的探讨体外定向诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为甲状腺细胞的可行性及相关分子表达检测。方法 E14小鼠 ESCs 诱导发育为胚胎体,再逐步添加 TSH、胰岛素、碘化钾(KI)等共同培养。以培养的小鼠甲状腺细胞为阳性对照,观察分化过程中细胞形态变化;用免疫荧光法检测分化标志物 TSH 受体(TSHR)、paired box gene 8(PAX8)、thyroid transcription factor-2(TW-2)、thyroidtranscription factor-1(TTF-1)的表达;RT-PCR 法检测分化相关基因 TSHR、PAX8、钠碘同向转运体(NIS)、过氧化物酶(TPO)、甲状腺球蛋白(Tg)的表达。结果诱导培养第6天分化细胞中存在甲状腺细胞特有基因 PAX8、NIS、TPO、Tg、TSHR 的表达;第8天分化细胞中检测到甲状腺细胞标志物TSHR、TTF-1、PAX8、TTF-2的表达,阳性细胞形态类似对照组甲状腺细胞。结论 ESCs 经胚胎体发育阶段,在特定条件下可定向分化为甲状腺细胞。 展开更多
关键词 胚胎诱导 细胞分化 细胞 培养的 甲状腺
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空心莲子草有效成分抗呼吸道合胞病毒作用的实验研究 被引量：7
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作者 蒋文玲 杨占秋 +2 位作者 陈文 肖红 罗宪玲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期62-64,共3页
目的利用呼吸道合胞病毒(RSV)感染的小白鼠模型,观察空心莲子草对小白鼠感染RSV的保护作用。方法空心莲子草经口服治疗RSV感染的BALB/C鼠,药物剂量为2.5、4.5和6.5g/(kg·d),疗程5d,同时以病毒唑作为标准阳性对照,观察动物的发病情... 目的利用呼吸道合胞病毒(RSV)感染的小白鼠模型,观察空心莲子草对小白鼠感染RSV的保护作用。方法空心莲子草经口服治疗RSV感染的BALB/C鼠,药物剂量为2.5、4.5和6.5g/(kg·d),疗程5d,同时以病毒唑作为标准阳性对照,观察动物的发病情况,血液和肺组织内病毒滴度和病毒检出率作为考核药物的疗效指标。结果空心莲子草4.5g/(kg·d)和6.5g/(kg·d)剂量作用下的小白鼠其病死率与未经治疗的病毒对照比较,有显著差异;空心莲子草6.5g/(kg·d)剂量作用后动物血液中病毒检出率为31.3%,肺组织病毒检出率为37.5%,与病毒对照比较有显著性差异,4.5g/(kg·d)剂量作用后动物肺组织病毒检出率为43.8%,与病毒对照比较有显著性差异;空心莲子草3个不同剂量作用下小鼠的肺指数与病毒对照比较均有显著性差异。结论空心莲子草有望成为治疗RSV感染的有效药物。这亦为中草药抗病毒作用的研究开辟了新的途径。 展开更多
关键词 空心莲子草 呼吸道合胞病毒
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妊娠糖尿病患者孕早期血清脂联素与妊娠结局相关性的临床研究 被引量：14
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作者 陈红梅 胡小平 +5 位作者 李明 谭虹虹 林秋雄 杨华章 邝建 裴剑浩 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第3期389-390,共2页
目的:多项研究提示血清脂联素水平降低可预示妊娠糖尿病的发生,但是孕早期脂联素水平的改变与妊娠结局的相关性仍不清楚。本实验拟采用巢式病例对照研究方法探讨孕早期脂联素水平的改变与妊娠结局的相关性。方法:本研究拟通过巢式病例... 目的:多项研究提示血清脂联素水平降低可预示妊娠糖尿病的发生,但是孕早期脂联素水平的改变与妊娠结局的相关性仍不清楚。本实验拟采用巢式病例对照研究方法探讨孕早期脂联素水平的改变与妊娠结局的相关性。方法:本研究拟通过巢式病例对照研究,观察2007年10月至2008年6月期间在广东省人民医院产检分娩的孕妇843例,-80℃保存孕早期(16～20周)血清,并追踪随访至分娩。发现单胎妊娠的妊娠糖尿病患者73例(GDM组),随机抽取年龄匹配的正常单胎妊娠妇女73例为对照组(NGDM组)。采用全自动生化分析仪测定空腹血糖(FBG)水平,放免法测定空腹胰岛素(FINS)水平并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),采用酶联免疫方法测定脂联素水平。结果:GDM组孕早期血清脂联素水平明显低于NGDM组[(54.23±2.96)nmol/Lvs(68.24±4.54)nmol/L],P<0.05)。GDM组孕早期血清脂联素水平与HOMA1-IR呈负相关(r=-0.364,P<0.01),但与产筛血糖和OGTT血糖水平均未发现相关性,合并巨大胎,早产的孕妇孕早期血清脂联素水平无差异。结论:妊娠糖尿病患者孕早期血清脂联素水平降低,孕早期血清脂联素水平与胰岛素抵抗有关,但未发现与血糖水平和妊娠不良结局的相关性。 展开更多
关键词 妊娠 糖尿病 脂联素 血糖 妊娠结局
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表皮生长因子受体抑制剂吉非替尼诱导人表皮角质细胞凋亡的研究 被引量：5
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作者 赵成利 蓝飞晓 +5 位作者 谭红梅 匡斌 邓国三 许鹏 王文 郭爱林 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期33-36,共4页
目的:探讨表皮因子受体抑制剂吉非替尼对分离培养的人表皮角质细胞的生长抑制及其诱导凋亡的作用机制,为探寻其对皮肤的毒副作用机制奠定基础。方法:采用分散酶分离表皮细胞,无血清培养法进行表皮细胞的培养,MTT法检测吉非替尼对角质细... 目的:探讨表皮因子受体抑制剂吉非替尼对分离培养的人表皮角质细胞的生长抑制及其诱导凋亡的作用机制,为探寻其对皮肤的毒副作用机制奠定基础。方法:采用分散酶分离表皮细胞,无血清培养法进行表皮细胞的培养,MTT法检测吉非替尼对角质细胞生长的影响,Annexin V-FITC/7-AAD双染流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blotting检测Bcl-2、bim的变化,采用caspase-3试剂盒检测caspase-3活性的变化。结果:以分散酶分离法成功得到8例人角质细胞,吉非替尼对人角质细胞生长有显著的抑制作用,并能显著诱导细胞发生凋亡,其作用呈明显的量效依赖性。吉非替尼能明显提高bim表达水平,促进caspase-3的活性。结论:吉非替尼通过调节Bcl-2家族蛋白及激活caspase-3诱导人角质细胞凋亡,抑制角质细胞增殖,这可能是其皮肤毒性的分子生物学基础。 展开更多
关键词 受体 表皮生长因子 角皮细胞 凋亡 吉非替尼
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生长抑素类似物抑制肿瘤细胞血管内皮生长因子表达及诱导细胞凋亡的研究 被引量：7
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作者 刘宇斌 邝素娟 +1 位作者 胡伟贤 林叶 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第2期196-198,共3页
目的:探讨生长抑素类似物抑制肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达和阻止癌细胞增殖及诱导其凋亡的作用。方法:将小鼠随机分为两组,每只小鼠于腋窝皮下注射小鼠肝癌细胞株细胞。A组皮下接种肿瘤24h后予生长抑素奥曲肽[100μg/(kg·... 目的:探讨生长抑素类似物抑制肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达和阻止癌细胞增殖及诱导其凋亡的作用。方法:将小鼠随机分为两组,每只小鼠于腋窝皮下注射小鼠肝癌细胞株细胞。A组皮下接种肿瘤24h后予生长抑素奥曲肽[100μg/(kg·d)]腹腔注射,连用20d;B组予以相同容积的无菌生理盐水腹腔注射,连用14d。20d后处死小白鼠,检测肿瘤大小、VEGF。另将10μg/mL的奥曲肽置入经体外培养的肝癌细胞SMMC-7721中,经RNA酶消化和DNA-Stain染色后,用流式细胞仪式测定细胞DNA含量,并做细胞周期分析,计算凋亡率。结果:皮下接种7d及14d后,A组皮下肿瘤的体积均明显小于B组(P<0.05,P<0.01),A组VEGF表达明显低于B组(P<0.05);A组微血管密度MVD亦较B组为低,但差异无显著性(P=0.075)。另将奥曲肽置入经体外培养的肝癌细胞SMMC-7721后,癌细胞增殖停留在G0/G1期,同时S期和G2/M期的细胞数量减少,出现癌细胞增殖能力降低和凋亡率升高。结论:奥曲肽可以抑制肝癌细胞VEGF的表达,还可以降低癌细胞的增殖能力并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 生长抑素 肿瘤 血管内皮生长因子 细胞增殖 凋亡
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