广东省产业扶贫中的问题与对策 被引量：3

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作者 袁明贵 向蓉 +5 位作者 彭新宇 余丹妮 黄胜 陈敏忠 卢爵广 邓铭光 《合作经济与科技》 2019年第10期182-185,共4页

本文调查研究广东省湛江市数十个省市级贫困村的产业扶贫情况,分析发现产业扶贫主要存在的问题,并提出解决对策,希望对广东乃至全国的产业扶贫具有警示作用和借鉴意义。

关键词 产业扶贫 精准扶贫 问题 对策 湛江

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广东10个屠宰场猪肉中3种食源性致病菌的检测 被引量：11

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作者 韩依辛 田雅 +5 位作者 马广宇 丁立 邓森荣 魏琦麟 徐志宏 向蓉 《动物医学进展》 北大核心 2021年第2期50-54,共5页

为了解肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7、沙门氏菌和空肠弯曲菌等3种食源性致病菌在生猪屠宰场的污染情况。采集广东惠州和清远两地共10家生猪屠宰场498头猪肉样品,分别经改良EC新生霉素增菌肉汤、SC(亚硒酸盐胱氨酸增菌液)和Bolton肉汤增... 为了解肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7、沙门氏菌和空肠弯曲菌等3种食源性致病菌在生猪屠宰场的污染情况。采集广东惠州和清远两地共10家生猪屠宰场498头猪肉样品,分别经改良EC新生霉素增菌肉汤、SC(亚硒酸盐胱氨酸增菌液)和Bolton肉汤增菌,用大肠埃希氏菌O157:H7、沙门氏菌和空肠弯曲菌的特异性引物进行PCR扩增及测序检测,阳性菌液再分别涂抹于山梨醇麦康凯平板、DHL(胆硫乳琼脂)和Skirrow血琼脂,挑取疑似菌落再次PCR验证,计算检出率。结果显示,检出大肠埃希氏菌O157:H7阳性样本2份,检出率0.4%,检出沙门氏菌阳性样本70份,检出率14.06%,空肠弯曲菌未检出。结果表明,惠州和清远两地屠宰场均存在食源性致病菌污染情况,其中沙门氏菌污染较为严重,惠州地区检出率高于清远地区。提示屠宰场应加强屠宰过程中环境和加工用具的消毒,以保证屠宰环节的食品安全。 展开更多

关键词 屠宰场 大肠埃希氏菌O157:H7 沙门氏菌 空肠弯曲菌 污染

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一例猪传染性胸膜肺炎的诊断及防治 被引量：5

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作者 姜林林 宋帅 +6 位作者 蔡汝健 蒋智勇 李艳 勾红潮 楚品品 李春玲 李冰 《广东畜牧兽医科技》 2020年第6期26-29,共4页

广东省某规模化猪场育肥猪出现喘气症状,病理解剖显示肺脏肿大出血。采集发病猪只的肺脏、肝脏等病变组织进行实验室检测和鉴定,病毒性病原为阴性,经细菌分离培养获得了分离菌株。经TSA平板鉴别培养、染色镜检和病原菌特异性引物的PCR鉴... 广东省某规模化猪场育肥猪出现喘气症状,病理解剖显示肺脏肿大出血。采集发病猪只的肺脏、肝脏等病变组织进行实验室检测和鉴定,病毒性病原为阴性,经细菌分离培养获得了分离菌株。经TSA平板鉴别培养、染色镜检和病原菌特异性引物的PCR鉴定,鉴定出分离菌株为胸膜肺炎放线杆菌,并对分离菌株进行药敏试验,结果显示:分离的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌菌株对氟苯尼考、阿莫西林等临床常用抗生素产生耐药性,对泰万菌素、头孢唑啉和头孢拉定表现出较高的敏感性。用敏感性药物进行临床防治后,猪群中没有新增病例出现,且发病的猪只逐渐恢复健康。 展开更多

关键词 胸膜肺炎放线杆菌 分离鉴定 药敏试验 防治措施

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脂多糖修饰对革兰阴性菌毒力及外膜囊泡生物学特性影响的研究进展 被引量：4

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作者 杨君 李冰 +7 位作者 蔡汝健 宋帅 勾红潮 楚品品 卞志标 王令 闫鹤 李春玲 《动物医学进展》 北大核心 2020年第2期98-103,共6页

脂多糖(LPS)是革兰阴性(G^-)菌的内毒素,刺激机体引发炎症反应,为细菌的一种毒力因子,主要存在于细菌细胞壁外膜上,也是外膜囊泡(OMVs)的主要成份。OMVs是细菌从膜上脱落下来的一种囊状结构,含有大量的LPS、外膜蛋白及其他成分,具有良... 脂多糖(LPS)是革兰阴性(G^-)菌的内毒素,刺激机体引发炎症反应,为细菌的一种毒力因子,主要存在于细菌细胞壁外膜上,也是外膜囊泡(OMVs)的主要成份。OMVs是细菌从膜上脱落下来的一种囊状结构,含有大量的LPS、外膜蛋白及其他成分,具有良好的免疫原性,被认为是最具潜力的亚单位疫苗。大多数LPS由类脂A、核心寡糖和O抗原多糖组成,这3个组分的合成影响着LPS的结构,继而影响细菌的毒力和细菌分泌OMVs的产量、毒性及免疫原性等生物学特性。论文主要对LPS的合成转运过程中结构修饰对G^-菌毒力及其OMVs生物学特性的影响进行综述,为革兰阴性菌致病机理研究及开发新型亚单位疫苗提供新思路。 展开更多

关键词 脂多糖 结构 革兰阴性菌 毒力 外膜囊泡 生物学特性

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高温高湿诱发猪传染性胸膜肺炎和链球菌混合感染的诊断 被引量：2

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作者 徐民生 柯海意 +5 位作者 杨冬霞 臧莹安 翟少伦 蒙嘉佳 张德泉 李春玲 《广东畜牧兽医科技》 2022年第4期24-29,共6页

为了确定广东省某规模化猪场病死猪的发病原因,走访猪场的了解状况,解剖并采集发病猪只的心脏、肺脏等病变组织进行实验室检测鉴定,并对分离到的致病菌进行血清型鉴定和药敏试验分析。结果显示,该猪场感染了猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinoba... 为了确定广东省某规模化猪场病死猪的发病原因,走访猪场的了解状况,解剖并采集发病猪只的心脏、肺脏等病变组织进行实验室检测鉴定,并对分离到的致病菌进行血清型鉴定和药敏试验分析。结果显示,该猪场感染了猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)7型和猪链球菌(Streptococcus suis,SS)2型。其中夏季高温高湿的环境应激是细菌病的主要诱发因素,并根据确诊结果和猪场整体环境情况提出相应的防治建议。 展开更多

关键词 胸膜肺炎放线杆菌 猪链球菌 混合感染 检测鉴定 防治措施

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非洲猪瘟病毒防污染双重荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：3

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作者 卞志标 郭怡德 +5 位作者 席振军 柯海意 蔡汝健 孙铭飞 勾红潮 李春玲 《动物医学进展》 北大核心 2023年第1期19-26,共8页

荧光定量聚合酶链反应(qPCR)技术在非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测中发挥重要作用,然而该方法也存在一些局限性。一方面由于检测环境中易产生气溶胶污染,经常导致qPCR检测产生假阳性结果。另一方面,临床上已发现MGF基因缺失的变异株,现有的... 荧光定量聚合酶链反应(qPCR)技术在非洲猪瘟病毒(ASFV)的检测中发挥重要作用,然而该方法也存在一些局限性。一方面由于检测环境中易产生气溶胶污染,经常导致qPCR检测产生假阳性结果。另一方面,临床上已发现MGF基因缺失的变异株,现有的检测方法将无法满足野毒株与变异株鉴别检测的需求。为了解决qPCR易产生假阳性,ASFV核酸检测靶标基因过分单一的问题,建立了ASFV的防污染双重qPCR检测方法。该检测方法根据C962R基因和MGF-505-2R基因的保守序列设计引物和探针,并在反应体系中加入UNG酶达到防污染的目的,建立了ASFV的防污染双重qPCR检测方法。结果表明,利用该方法对C962R基因和MGF-505-2R的基因标准品进行检测,该检测方法具有较好的鉴别诊断效果。该检测方法的标准曲线具有良好的线性关系,相关系数为0.99;敏感性高,最低检测限为10 copies/μL的ASFV基因标准品;特异性强,与猪丹毒丝菌(Erysipelothrix rhusiopathiae)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、副猪嗜血杆菌(Hoemophilus parasuis)、猪链球菌(Streptococcus suis)、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)及猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)均无交叉反应;重复性较好,变异系数小于1.75%,使用该检测方法对194份临床组织样品检测,与商品化非洲猪瘟病毒抗原检测试剂盒比较,检测结果均为阴性,符合率为100%。该方法预期可用于ASFV野毒株与MGF-505-2R基因缺失株的鉴别诊断,为深入开展分子流行病学调查提供技术储备。 展开更多

关键词 非洲猪瘟病毒 荧光定量聚合酶链反应 MGF-505-2R基因

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猪增生性肠炎的诊治 被引量：3

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作者 徐民生 柯海意 +9 位作者 杨冬霞 宋帅 勾红潮 张昆丽 蒋智勇 李艳 楚品品 翟少伦 简运华 李春玲 《广东畜牧兽医科技》 2023年第1期35-38,共4页

广东省某规模化养猪场部分圈舍猪群发生腹泻、拉血便症状,病理解剖显示肠道组织肿大出血,死亡猪只粪便呈黑色煤焦油状。本文采集了病死猪只的粪便进行PCR检测和鉴定,结合发病症状,确定发病原因是由于胞内劳森菌引起的猪增生性肠炎。用... 广东省某规模化养猪场部分圈舍猪群发生腹泻、拉血便症状,病理解剖显示肠道组织肿大出血,死亡猪只粪便呈黑色煤焦油状。本文采集了病死猪只的粪便进行PCR检测和鉴定,结合发病症状,确定发病原因是由于胞内劳森菌引起的猪增生性肠炎。用药物泰妙菌素进行临床治疗,结合其他药物辅助治疗,猪群健康状况逐渐趋于稳定。 展开更多

关键词 猪增生性肠炎 胞内劳森菌 诊断 综合防治

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副猪嗜血杆菌lpxM基因缺失株构建及生物学特性分析 被引量：4

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作者 杨君 楚品品 +8 位作者 宋帅 蔡汝健 杨冬霞 卞志标 勾红潮 李艳 蒋智勇 李春玲 闫鹤 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期3394-3403,共10页

【目的】研究副猪嗜血杆菌脂寡糖合成相关基因lpxM对其生长、生物被膜形成能力、抗50%猪血清杀菌能力、对巨噬细胞毒力和抗生素敏感性部分生物特性的影响,为揭示HPS致病机制,lpxM基因缺失疫苗的构建奠定理论基础,为猪场防治HPS进行药物... 【目的】研究副猪嗜血杆菌脂寡糖合成相关基因lpxM对其生长、生物被膜形成能力、抗50%猪血清杀菌能力、对巨噬细胞毒力和抗生素敏感性部分生物特性的影响,为揭示HPS致病机制,lpxM基因缺失疫苗的构建奠定理论基础,为猪场防治HPS进行药物选择时提供依据。【方法】以高致病性血清5型HPS地方分离株H45为研究对象,自杀性质粒PK18mobsacB为载体,通过自然转化法将构建好的重组质粒转进H45,使其在抗生素的压力下发生同源重组,最终经过抗生素筛选并通过PCR和测序验证得到lpxM基因缺失株H45-△lpxM,比较两者之间部分生物学特性的差异。测定两者的OD600-t关系曲线比较生长情况;用结晶紫染色法比较两者在培养24h后生物被膜形成的能力;测定两者在50%猪血清中存活率,比较两者的抗血清补体杀菌能力;将两者同时刺激小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞,作用时间为6、12和24h,检测细胞培养上清液中LDH的释放量,比较两者对巨噬细胞毒力影响;利用K-B纸片扩散法研究两者对氨苄西林等临床上常用13种抗生素和多粘菌素B抗生素敏感性,通过测定抑菌圈直径来并参照耐药标准判断对抗生素的敏感性。【结果】成功构建lpxM基因缺失株H45-△lpxM,生长情况比较发现菌株生长前期缺失株慢于野生株,8h后保持一致,结果表明lpxM基因缺失能在一定程度上抑制H45的生长;两者均能形成生物被膜,但是缺失株弱于野生株;野生菌株在50%猪血清中存活率为16.1%,而缺失株只有0.71%,缺失株明显低于野生菌株;两者均能引起巨噬细胞的死亡,作用6、12和24h后,野生株对细胞的致死率分别为6.63%、10.86%和22.17%,而缺失株对细胞的致死率为2.62%、6.35%和18.01%,结果表明随着作用时间的延长,两者对细胞的毒力作用越来越大,具有一定的时间依赖性,在各个时间点,缺失株的毒力作用均低于野生株;抗生素敏感性结果发现,两者对头孢噻吩等10种抗生素均表现敏感,对恩诺沙星均表现抗性,但对阿莫西林克拉维酸、磺胺二甲异噁唑和氨苄西林三种抗生素的耐药性发生了较大的差异,阿莫西林克拉维酸和磺胺二甲异噁唑两种抗生素由耐药变成了敏感,氨苄西林也从中介变成敏感,结果表明lpxM基因缺失对H45抗生素敏感性具有一定影响。【结论】lpxM基因缺失能一定程度地抑制HPS生长,降低其生物被膜形成能力、抗血清杀菌能力和对巨噬细胞的毒力作用,增大对临床上多数常用抗生素的敏感性,揭示lpxM基因可能是HPS毒力基因,与HPS的致病能力密切有关,但具体机制还需要进一步研究。 展开更多

关键词 副猪嗜血杆菌 lpxM基因 生物被膜 抗血清杀菌 细胞毒性 抗生素耐药性

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屠宰场分离大肠埃希氏菌O157:H7药敏试验及耐药基因分析 被引量：4

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作者 钟巧贤 袁淑英 +4 位作者 梁秋燕 袁明贵 彭新宇 徐志宏 向蓉 《动物医学进展》 北大核心 2021年第6期140-144,共5页

为了解2018年-2019年从广东省内生猪屠宰场分离的19株大肠埃希氏菌O157:H7耐药情况,采用微量肉汤稀释法测定阿莫西林等16种抗菌药物对分离菌株的最小抑菌浓度(MIC),并用普通PCR法检测blaNDM-1等10种耐药基因。结果表明,19株大肠埃希氏菌... 为了解2018年-2019年从广东省内生猪屠宰场分离的19株大肠埃希氏菌O157:H7耐药情况,采用微量肉汤稀释法测定阿莫西林等16种抗菌药物对分离菌株的最小抑菌浓度(MIC),并用普通PCR法检测blaNDM-1等10种耐药基因。结果表明,19株大肠埃希氏菌O157:H7分离菌株对不同抗生素存在耐药差异,其中对阿莫西林、氨苄西林、青霉素、氯霉素和恩诺沙星的耐药率均为100%,对头孢哌酮的耐药率最低为5.26%,其余10种抗菌药物的耐药率位于31.58%~84.21%之间;mcr-1、tetM、floR和rmtB 4种耐药基因未检出,blaNDM-1等6种耐药基因检出率范围为5.26%~89.47%。生猪屠宰场大肠埃希氏菌O157:H7耐药且多重耐药严重,分离株携带丰富的耐药基因。 展开更多

关键词 屠宰场 大肠埃希氏菌O157:H7 微量肉汤稀释法 耐药

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猪流行性腹泻病毒变异株GDqy2017的分离及S和ORF3基因序列分析 被引量：1

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作者 楚品品 蒋智勇 +6 位作者 林德锐 徐志宏 李艳 勾红潮 卞志标 李春玲 蔡汝健 《动物医学进展》 北大核心 2018年第9期10-17,共8页

2017年广东某猪场送检腹泻死亡仔猪小肠样本,经实验室检测、细胞分离及RT-PCR鉴定,确定分离到1株猪流行性腹泻病毒,命名为GDqy2017,克隆并测定其S基因与ORF3基因序列,并对序列进行分析。结果显示,该分离株对Vero细胞高度适应,第1代即出... 2017年广东某猪场送检腹泻死亡仔猪小肠样本,经实验室检测、细胞分离及RT-PCR鉴定,确定分离到1株猪流行性腹泻病毒,命名为GDqy2017,克隆并测定其S基因与ORF3基因序列,并对序列进行分析。结果显示,该分离株对Vero细胞高度适应,第1代即出现细胞病变(CPE),第4代起1d内即出现CPE,且CPE时间和形态稳定。其S基因长4 158nt,与经典毒株CV777、中国疫苗株CV777及韩国疫苗株attenuated DR13核苷酸同源性为94.2%、94.1%、94.2%,氨基酸同源性为93.4%、92.7%、93.0%,存在2处插入、2处缺失及98处突变(与经典毒株CV777相比),属于不同进化群,与国内2010年后参考株(除CHXBC-01-2015、CH/GDQY/2011)在同一进化群,S蛋白的主要抗原表位存在突变,其中有1处新突变出现(640位F→S),其ORF3全长675nt,不存在疫苗株中的大片段缺失及表达截短现像,但存在突变,进化树分析显示与经典毒株CV777、疫苗株属于不同进化群,亲缘关系较远。研究结果为后续PEDV分子生物学分析、流行病学调查及研制更为有效的疫苗提供基础数据。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 分离 S基因 ORF3基因 序列分析

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猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠血清中细胞因子表达的抗体芯片分析

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作者 李艳 王磊 +5 位作者 蔡汝健 蒋智勇 勾红潮 楚品品 宋帅 李春玲 《广东农业科学》 CAS 2018年第8期113-117,174,共6页

为分析猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠不同时间点血清中炎性细胞因子表达的变化,收集猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠不同感染时段(24、48 h)的血清,采用细胞因子抗体芯片技术检测32种细胞因子水平。结果显示,猪葡萄球菌感染小鼠后血清细胞因子表... 为分析猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠不同时间点血清中炎性细胞因子表达的变化,收集猪葡萄球菌感染BALB/c小鼠不同感染时段(24、48 h)的血清,采用细胞因子抗体芯片技术检测32种细胞因子水平。结果显示,猪葡萄球菌感染小鼠后血清细胞因子表达水平发生了明显变化:与对照相比,感染后24 h,血清细胞因子中有5种细胞因子表达出现了显著性变化,其中表达升高2倍以上的细胞因子有4种(G-CSF、IL-6、KC、MCP-5);感染后48 h,血清细胞因子中共有4种细胞因子表达出现了显著性变化,其中表达升高2倍以上的细胞因子有3种(G-CSF、KC、MCP-5);感染24 h和48 h后IL-12的表达均显著低于对照。炎性细胞因子在猪葡萄球菌感染中发挥重要作用,利用细胞因子抗体芯片从血清中筛选猪葡萄球菌相关蛋白分子标记物是可行的。 展开更多

关键词 抗体芯片 猪葡萄球菌 炎性细胞因子 分子标记物

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革兰阴性菌外膜囊泡的研究进展 被引量：5

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作者 卞志标 李冰 +3 位作者 勾红潮 杨君 臧莹安 李春玲 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第5期136-142,共7页

外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是革兰阴性(G^-)菌从细胞膜上脱落下来的囊泡,携带有细菌的大量组分,如外膜蛋白、脂多糖、脱氧核糖核酸等。由于OMVs无活性、不能复制且具有免疫原性,所以被认为是最具潜力的亚单位疫苗,同时OMV... 外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是革兰阴性(G^-)菌从细胞膜上脱落下来的囊泡,携带有细菌的大量组分,如外膜蛋白、脂多糖、脱氧核糖核酸等。由于OMVs无活性、不能复制且具有免疫原性,所以被认为是最具潜力的亚单位疫苗,同时OMVs对细菌本身具有多种作用,故OMVs成为研究的热点。本文从G^-菌OMVs的组成成分、形成机制、生物学功能、提取纯化方法及其开发应用前景5个方面综述其研究现状,为G^-菌的致病机制研究、OMVs的疫苗开发应用提供技术指导。 展开更多

关键词 OMVs 形成机制 组分分析 生物学功能

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