G蛋白偶联受体激酶5与脑老化相关神经退行性疾病的研究进展 被引量：1

1

作者 尹明康 赵江浩 +3 位作者 蔡玉洁 黄鹏如 崔理立 赵斌 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第23期3626-3629,共4页

与脑老化相关的神经退行性疾病主要包括阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease,AD）和帕金森氏病（Parkinson＇s disease,PD）。AD是发病率最高的老年神经退行性疾病,临床表现以近记忆障碍为主并逐步发展至全面性痴呆[1]。PD则是继AD之后... 与脑老化相关的神经退行性疾病主要包括阿尔茨海默病（Alzheimer＇s disease,AD）和帕金森氏病（Parkinson＇s disease,PD）。AD是发病率最高的老年神经退行性疾病,临床表现以近记忆障碍为主并逐步发展至全面性痴呆[1]。PD则是继AD之后发病率第二高的神经退行性疾病, 展开更多

关键词 神经退行性疾病 受体激酶 脑老化 帕金森氏病 全面性痴呆 近记忆障碍 阿尔茨海默病 胆碱能假说 多巴胺受体 胶质细胞

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环状RNA在脑血管疾病中的研究进展 被引量：5

2

作者 胡伟东 李友 +4 位作者 李胜男 王梦旭 刘菡 陈少凤 钟望涛 《系统医学》 2019年第11期196-198,共3页

环状RNA(circRNA)是一类新型的非编码RNA(ncRNA),有着保守性、稳定性及高度特异性的特点,在基因表达调控和蛋白翻译等方面发挥了重要生物学功能。研究表明circRNA在中枢神经系统中含量极其丰富,在大脑中差异性表达,是神经疾病发生发展... 环状RNA(circRNA)是一类新型的非编码RNA(ncRNA),有着保守性、稳定性及高度特异性的特点,在基因表达调控和蛋白翻译等方面发挥了重要生物学功能。研究表明circRNA在中枢神经系统中含量极其丰富,在大脑中差异性表达,是神经疾病发生发展的重要调节因子,并通过复杂机制参与脑血管疾病的病理生理过程,故circRNA在脑血管疾病诊疗方面有着广阔的前景。 展开更多

关键词 环状RNA 非编码RNA 微小RNA 脑血管疾病

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microRNA-182与缺血性脑卒中的相关性研究进展

3

作者 吴钊淳 李胜男 +2 位作者 黄少婷 何嘉文 李友 《医学研究杂志》 2023年第12期8-11,19,共5页

脑卒中是全球第二大死因,是我国死亡和残疾的主要病因,给我国国民健康及经济发展带来了极大的负担。缺血性脑卒中占所有脑卒中病例的82%,其难以早期发现、难以有效治疗的现状急需得到进一步改善。microRNA-182(miR-182)近年来已被证实... 脑卒中是全球第二大死因,是我国死亡和残疾的主要病因,给我国国民健康及经济发展带来了极大的负担。缺血性脑卒中占所有脑卒中病例的82%,其难以早期发现、难以有效治疗的现状急需得到进一步改善。microRNA-182(miR-182)近年来已被证实参与缺血性脑卒中及其危险因素,即动脉粥样硬化、糖尿病、血脂异常等的病理生理过程。现就miR-182与缺血性脑卒中的相关性进行综述,旨在揭示miR-182在缺血性脑卒中及其危险因素中作为新型生物学标志物及潜在治疗靶点的作用。 展开更多

关键词 miR-182 缺血性脑卒中 危险因素 动脉粥样硬化 糖尿病

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生物大分子相分离及其在神经退行性疾病中的研究进展

4

作者 崔理立 《广东医科大学学报》 2022年第4期361-367,共7页

生物学进程中生物大分子会根据自身性质以及外界刺激出现相分离,进而发挥独特的生物学功能,如基因组的组装、转录调控、信号转导等。在一些疾病进程中一些关键生物大分子会在病理情况下也出现相分离变化。该文总结了相分离的发展、生物... 生物学进程中生物大分子会根据自身性质以及外界刺激出现相分离,进而发挥独特的生物学功能,如基因组的组装、转录调控、信号转导等。在一些疾病进程中一些关键生物大分子会在病理情况下也出现相分离变化。该文总结了相分离的发展、生物学机制及其在神经退行性疾病中的研究状况,展望未来研究的发展方向。 展开更多

关键词 生物分子凝聚物 相分离 神经退行性疾病 TAU

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胰岛素信号转导通路相关基因多态性与阿尔茨海默病的关系 被引量：1

5

作者 郑南 赵和丹 +5 位作者 田华伟 王金龙 黄通 李小玲 周国强 刘盛元 《新医学》 2017年第8期550-554,共5页

目的探讨胰岛素信号转导通路相关基因胰岛素磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)多态性与阿尔兹海默病(AD)之间的关系。方法选择AD患者231例(AD组)、健康对照者231名(健康对照组)为研究对象,提取研究对象外周静脉血全血样本的DNA,通过PCR法和单核苷... 目的探讨胰岛素信号转导通路相关基因胰岛素磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)多态性与阿尔兹海默病(AD)之间的关系。方法选择AD患者231例(AD组)、健康对照者231名(健康对照组)为研究对象,提取研究对象外周静脉血全血样本的DNA,通过PCR法和单核苷酸多态性测序检测PI3K多态性,同时利用ELISA检测其血清PI3K的蛋白水平,比较2组PI3K基因型和等位基因分布情况以及PI3K蛋白水平的差异,并分析PI3K多态性rs3730087与PI3K蛋白表达水平的关系。结果 2组PI3K多态性参考ID PIK3R1 rs3730087的各基因型和等位基因以及PI3K蛋白水平比较差异均具统计学意义(P均<0.05)。2组内不同基因多态性的PI3K蛋白表达水平比较差异均有统计学意义,其中AD组TT和TC比较的P为0.004、TT和CC比较的P为0.016,健康对照组TT和TC比较的P为0.001、TT和CC比较的P为0.022。结论胰岛素信号转导通路相关基因PI3K多态性与AD有一定关系,PIK3R1 rs3730087(T>C)增加了AD的患病风险。 展开更多

关键词 基因多态性 胰岛素信号 阿尔兹海默病 转导通路

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PRDM5过表达慢病毒载体的构建及稳定转染Neuro-2a细胞的建立

6

作者 吴钊淳 李友 +2 位作者 何嘉文 廖科棋 李胜男 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期1-8,共8页

目的:构建PR锌指区域蛋白(PRDM)5基因的过表达慢病毒载体,建立稳定转染的小鼠神经瘤母细胞Neuro-2a,为探讨PRDM5在缺血性脑卒中(IS)发病机制中的作用奠定基础。方方法法:在NCBI上搜索PRDM5的序列并设计引物,PCR法扩增获取PRDM5基因序列... 目的:构建PR锌指区域蛋白(PRDM)5基因的过表达慢病毒载体,建立稳定转染的小鼠神经瘤母细胞Neuro-2a,为探讨PRDM5在缺血性脑卒中(IS)发病机制中的作用奠定基础。方方法法:在NCBI上搜索PRDM5的序列并设计引物,PCR法扩增获取PRDM5基因序列,将其与Bam HⅠ和AgeⅠ限制性内切酶双酶切后的慢病毒载体GV492进行连接,构建GV492-PRDM5过表达重组质粒,采用PCR法筛选并鉴定出的与目的基因片段长度相近的阳性克隆送生工生物工程(上海)股份有限公司测序。将测序正确的GV492-control质粒和GV492-PRDM5过表达重组质粒分别转染至人胚胎肾细胞HEK293T中,转染48 h后离心收集慢病毒,分别为GV492-control慢病毒和GV492-PRDM5过表达慢病毒,采用慢病毒滴度测定法检测上述2种慢病毒滴度。将Neuro-2a细胞分为GV492-control组和GV492-PRDM5组,分别使用GV492-control慢病毒和GV492-PRDM5过表达慢病毒感染Neuro-2a细胞,慢病毒感染复数(MOI)为100,感染72 h后使用嘌呤霉素(10 mg·L^(-1))对成功感染GV492-control慢病毒和GV492-PRDM5过表达慢病毒的Neuro-2a细胞进行筛选,通过荧光显微镜观察GV492-control组和GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞的生长状态及绿色荧光蛋白的表达情况。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组Neuro-2a细胞中PRDM5 mRNA表达水平;Western blotting法检测2组Neuro-2a细胞中PRDM5蛋白表达水平。结果:PCR法,GV492-PRDM5重组质粒阳性转化子的长度约为684 bp,GV492-PRDM5过表达重组质粒基因序列与设计合成的PRDM5过表达序列一致;GV492-control慢病毒和GV492-PRDM5过表达慢病毒的滴度均为2.5×108 TU·mL^(-1)。荧光显微镜,GV492-control组和GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞的生长状态均良好,且能观察到绿色荧光蛋白的表达。RT-qPCR法,与GV492-control组比较,GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞中PRDM5 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。Western blotting法,GV492-control组和GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞在相对分子质量为75000附近出现特异性条带;与GV492-control组比较,GV492-PRDM5组Neuro-2a细胞中PRDM5蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论:成功构建PRDM5过表达慢病毒载体,建立了稳定转染的GV492-PRDM5-Neuro-2a细胞。 展开更多

关键词 PR锌指区域蛋白 过表达慢病毒载体 稳定表达 Neuro-2a细胞

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益智醒脑方联合西医治疗对阿尔茨海默病患者脑脊液炎性因子及神经递质的影响 被引量：14

7

作者 赵姝 李克深(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期699-702,共4页

目的:探讨益智醒脑方联合西医治疗对阿尔茨海默病患者脑脊液炎性因子及神经递质的影响。方法:选择2014年10月~2016年10月收治的阿尔茨海默病患者124例为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各62例。对照组给予多奈派齐片等西... 目的:探讨益智醒脑方联合西医治疗对阿尔茨海默病患者脑脊液炎性因子及神经递质的影响。方法:选择2014年10月~2016年10月收治的阿尔茨海默病患者124例为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组各62例。对照组给予多奈派齐片等西医常规治疗,观察组给予益智醒脑方联合西医治疗。治疗12周后,比较两组脑脊液炎性因子、神经递质、临床疗效等指标。结果:观察组有效率80.65%明显高于对照组64.52%(χ~2=4.052 9,P<0.05);脑脊液TNF-α、IL-6明显低于对照组,IL-4、IL-10含量明显高于对照组(t=10.911、8.739、5.000、4.046,P<0.05、P<0.01);多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)含量明显高于对照组(t=9.435、7.916、5.985,P<0.05、P<0.01)。结论:益智醒脑方联合西医治疗有助于缓解阿尔茨海默病临床症状,提高治疗效果,可能与抑制患者炎症症状、调节神经递质表达水平有关。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 益智醒脑方 炎性因子 神经递质

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1例反复脑卒中发作Fabry病患者的临床资料及家系基因检测结果分析

8

作者 陈林发 李友 +8 位作者 戴永武 贺文麟 刘娟丽 蔡秀曲 黄靓 唐劭年 李江 黄志勇 颜津津 《山东医药》 CAS 2021年第21期39-42,共4页

目的分析反复脑卒中发作Fabry病患者的临床资料及其家系基因检测结果,总结其临床特点和遗传特征。方法1例青年脑卒中患者,3年内先后3次出现脑卒中症状,分析其临床表现及辅助检查结果,并进行家系调查。抽取患者、患者女儿、患者母亲外周... 目的分析反复脑卒中发作Fabry病患者的临床资料及其家系基因检测结果,总结其临床特点和遗传特征。方法1例青年脑卒中患者,3年内先后3次出现脑卒中症状,分析其临床表现及辅助检查结果,并进行家系调查。抽取患者、患者女儿、患者母亲外周静脉血各2 mL,进行高通量外显子区基因测序,分析其遗传特点。结果患者反复脑卒中,影像学检查发现颅内多发异常钙化、椎基底动脉异常扩张、卵圆孔未闭,出现肢端感觉异常、发作性疼痛等神经系统病变,视物模糊、视力下降等眼部病变,听力减退及耳鸣症状。患者母亲、患者女儿均有Fabry病临床特征。患者、患者母亲、患者女儿均存在GLA基因g.8319 A>G突变,为X染色体连锁遗传代谢疾病,符合Fabry病诊断。结论Fabry病患者可以表现为反复脑卒中、椎基底动脉异常扩张等临床特征,GLA基因g.8319 A>G突变为其致病原因之一,本例患者突变基因遗传自母亲,并遗传给女儿。 展开更多

关键词 FABRY病 青年卒中 半乳糖甘酶基因 突变 基底动脉扩张 颅内钙化

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microRNA-146a与缺血性脑卒中的研究进展 被引量：4

9

作者 方健斌 蔡玉洁 +2 位作者 崔理立 彭尧群 钟望涛 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第9期1435-1437,共3页

脑卒中是一种以高病死率和高致残率著称的脑系疾病。最近几年的调查表明该病的发病率在我国以9％的年增长率上升。在中国14亿人口中，脑卒中的年度病死率约为157／10万，超过了心脏病的病死率，成为成年人中具有最高病死率和致残率的病... 脑卒中是一种以高病死率和高致残率著称的脑系疾病。最近几年的调查表明该病的发病率在我国以9％的年增长率上升。在中国14亿人口中，脑卒中的年度病死率约为157／10万，超过了心脏病的病死率，成为成年人中具有最高病死率和致残率的病种旧0，而大约80％的卒中类型为缺血性卒中（ischemic stroke，IS）。IS是因为大脑主要动脉血流暂时或持久性阻断导致的，而血流的减少大部分是由于动脉附壁斑块形成致血管阻塞所致，少部分是血栓阻塞。 展开更多

关键词 缺血性脑卒中 动脉血流 血管阻塞 缺血性卒中 病死率 脑系疾病 年增长率 卒中类型

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长链非编码RNA调控神经退行性疾病的研究进展 被引量：4

10

作者 李文 赵斌 +6 位作者 郑春燕 张振华 马一明 赵江浩 李树朋 陈浩 冯杜 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2017年第1期100-102,共3页

长链非编码RNA（lncRNA）是一种新的调控基因表达的非编码RNA。它本身不编码蛋白质,其长度在200-100 000nt之间[1]。与其他的非编码RNA相比,lncRNA的特点表现为：类型多、作用模式多和数量多。lncRNA的功能特性在某种程度上取决于它在... 长链非编码RNA（lncRNA）是一种新的调控基因表达的非编码RNA。它本身不编码蛋白质,其长度在200-100 000nt之间[1]。与其他的非编码RNA相比,lncRNA的特点表现为：类型多、作用模式多和数量多。lncRNA的功能特性在某种程度上取决于它在染色体上的位置。 展开更多

关键词 神经变性疾病 阿尔茨海默病 帕金森病 肌萎缩侧索硬化 基因表达调控 微RNAS

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老年脑梗死患者VEGF、IL-33及hs-CRP水平与预后的关系 被引量：7

11

作者 李嘉辉 吴显斌 王祈骅 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第1期34-38,共5页

目的 探析老年脑梗死(CI)患者血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素33(IL-33)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平及其与预后的关系。方法 选择2018年1月至2020年1月于广东医科大学附属医院神经内科就诊的老年CI患者112例为CI组,根据改良Rankin(... 目的 探析老年脑梗死(CI)患者血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素33(IL-33)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平及其与预后的关系。方法 选择2018年1月至2020年1月于广东医科大学附属医院神经内科就诊的老年CI患者112例为CI组,根据改良Rankin(mRS)评分分为预后良好组(n=78)和预后不良组(n=34),另按同期、年龄匹配原则选择在本院体检且体检结果正常的健康者40名作为对照组。对比三组血清VEGF、IL-33、hs-CRP水平差异,采用Pearson法分析各指标与mRS评分之间的关系,绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估VEGF、IL-33、hs-CRP对老年CI不良预后的预测价值,同时采用Logistic回归分析影响老年CI预后的危险因素。结果 三组血清VEGF、IL-33、hs-CRP水平比较:预后不良组>预后良好组>对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果表明,血清VEGF、IL-33、hs-CRP水平与mRS评分呈负相关(P均<0.001)。ROC曲线显示,VEGF、IL-33、hs-CRP联合预测老年CI不良预后的效能更高,其曲线下面积(AUC)为0.817,灵敏度、特异度分别为94.12%、69.23%。Logistic多因素分析显示,年龄≥70岁、高脂血症史、入院时NIHSS评分≥5分及VEGF、IL-33、hs-CRP过度表达是影响老年CI不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 血清VEGF、IL-33、hs-CRP水平与老年CI患者不良预后密切相关,其表达对老年CI预后具有良好的预测价值。 展开更多

关键词 老年 脑梗死 血管内皮生长因子 白细胞介素-33 超敏C反应蛋白

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微小RNA在神经退行性疾病发病机制中作用的研究进展 被引量：1

12

作者 黄文辉 顾雪锋 李克深 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第41期106-109,共4页

微小 RNAs（miRNAs）是一类长度21～24核苷酸、序列高度保守的非编码单链小 RNA 分子，他们通过与靶基因的3＇非翻译区结合，抑制靶基因 mRNA 的翻译或促进其降解，在转录后水平调控基因表达。神经退行性疾病主要特征是中枢神经系统典... 微小 RNAs（miRNAs）是一类长度21～24核苷酸、序列高度保守的非编码单链小 RNA 分子，他们通过与靶基因的3＇非翻译区结合，抑制靶基因 mRNA 的翻译或促进其降解，在转录后水平调控基因表达。神经退行性疾病主要特征是中枢神经系统典型的迟发型不断进展的神经元变性、坏死和丢失。miRNAs 表达的改变在包括阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症在内的神经退行性疾病的多种生理和病理过程中发挥重要的调控作用。此外，越来越多的证据表明 miRNAs 与神经退行性疾病的特定致病蛋白有关。 展开更多

关键词 神经退行性疾病 阿尔茨海默病 帕金森病 亨廷顿病 肌萎缩性脊髓侧索硬化症 微小 RNA

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miRNA-9参与脑卒中调控的研究进展 被引量：2

13

作者 王莹 李胜男 +4 位作者 胡幸娟 黄少婷 吴钊淳 何嘉文 李友 《医学研究杂志》 2022年第12期18-21,共4页

脑卒中是一种常见的脑血管疾病,也是威胁人类健康最严重的疾病之一。目前溶栓及机械介入取栓等治疗方案已广泛运用于临床医疗,但由于狭窄的时间窗限制以及可能发生的并发症等难题,需要进一步探究脑卒中发生、发展过程中的分子机制,期望... 脑卒中是一种常见的脑血管疾病,也是威胁人类健康最严重的疾病之一。目前溶栓及机械介入取栓等治疗方案已广泛运用于临床医疗,但由于狭窄的时间窗限制以及可能发生的并发症等难题,需要进一步探究脑卒中发生、发展过程中的分子机制,期望能提供更有效的预防策略和更安全的治疗方案。miRNA是一类能够特异性结合mRNA的低分子RNA,研究表明,miRNA-9是一种与神经功能相关的miRNA,参与调控了神经细胞的增殖、凋亡和细胞周期等生物学过程,因此它可能在脑卒中的发生、发展过程中起重要作用。本文就miRNA-9在脑卒中发病过程中参与调控的分子机制做一综述。 展开更多

关键词 miRNA-9 脑卒中 内质网应激 凋亡 炎症 神经再生 血管重塑

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过表达及RNA干扰糖尿病相关锚定重复序列蛋白基因腺病毒的制备及鉴定

14

作者 汪亚君 左湘 +1 位作者 黄靓 马国达 《广东医学院学报》 2016年第4期337-340,共4页

目的构建含糖尿病相关锚定重复序列蛋白(DARP)基因的重组腺病毒过表达及RNA干扰载体。方法应用PCR技术扩增大鼠DARP基因序列,设计并合成shRNA序列,分别插入表达载体GV-314和GV-119,经基因测序鉴定。用重组DARP过表达和shRNA表达穿梭载... 目的构建含糖尿病相关锚定重复序列蛋白(DARP)基因的重组腺病毒过表达及RNA干扰载体。方法应用PCR技术扩增大鼠DARP基因序列,设计并合成shRNA序列,分别插入表达载体GV-314和GV-119,经基因测序鉴定。用重组DARP过表达和shRNA表达穿梭载体与辅助包装质粒pBHGloxΔE1共转染人胚肾细胞HEK293,进行病毒包装、出毒和扩增,采用终点稀释法测定病毒滴度。用重组腺病毒感染大鼠H9c2细胞,荧光显微镜观察绿色荧光强度,Western Blot检测DARP蛋白表达。结果基因测序显示DARP过表达及shRNA载体序列与原设计序列完全相符,转染HEK293细胞包装成功。DARP过表达和shRNA腺病毒明显影响H9c2细胞中DARP蛋白表达水平。结论成功构建了大鼠DARP过表达及特异性shRNA腺病毒表达载体。 展开更多

关键词 糖尿病相关锚定重复序列蛋白 RNA干扰 腺病毒 H9C2细胞

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APOE多态性在炎症因子诱导的神经毒性反应性星形胶质细胞中的差异作用 被引量：1

15

作者 王岩 李晓慧 +2 位作者 季瑶 崔理立 蔡玉洁 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期33-41,共9页

目的:探讨载脂蛋白E(APOE)基因多态性在神经毒性反应性星形胶质细胞中的差异作用,为阿尔茨海默病(AD)发病机制的研究提供理论依据。方法:体外分离培养APOE基因敲除小鼠(APOE^(-/-))原代皮层星形胶质细胞,免疫荧光染色法鉴定细胞纯度。... 目的:探讨载脂蛋白E(APOE)基因多态性在神经毒性反应性星形胶质细胞中的差异作用,为阿尔茨海默病(AD)发病机制的研究提供理论依据。方法:体外分离培养APOE基因敲除小鼠(APOE^(-/-))原代皮层星形胶质细胞,免疫荧光染色法鉴定细胞纯度。构建人APOE3和APOE4重组过表达质粒,分别转染至原代APOE^(-/-)星形胶质细胞中,以APOE^(-/-)原代细胞为对照,采用Western blotting法检测细胞中APOE和神经胶质酸性蛋白(GFAP)蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清中APOE水平。采用白细胞介素1α(IL-1α)、肿瘤坏死因子(TNF)和补体C1q联合刺激转染APOE3和转染APOE4的原代星形胶质细胞制备炎症模型,分为APOE3+PBS组、APOE4+PBS组、APOE3+IL-1α+TNF+CC1q组和APOE4+IL-1α+TNF+C1q组,采用细胞免疫荧光染色法观察各组细胞形态表现,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(Gpc4)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖6(Gpc6)、血小板反应蛋白1(Thbs1)、血小板反应蛋白2(Thbs2)、酸性分泌蛋白类似蛋白1(Sparcl1)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、C3和S100钙结合蛋白B(S100B)mRNA表达水平,微球吞噬实验检测各组细胞吞噬能力,Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果:与APOE^(-/-)组比较,转染APOE3和APOE4组细胞中APOE和GFAP蛋白表达水平及细胞培养上清中APOE水平明显升高(P<0.01)。荧光显微镜下观察,分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组星形胶质细胞突起变短,胞体变大;与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组星形胶质细胞突起更短。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Gpc4、Gpc6、Thbs1、Thbs2和Sparcl1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Gpc4、Gpc6、Thbs1、Thbs2和Sparcl1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中GDNF mRNA表达水平明显降低(P<0.01),C3和S100B mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中GDNFmRNA表达水平明显降低(P<0.05),C3和S100B mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞吞噬微珠数量明显减少;与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞吞噬微珠数量明显减少。分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:APOE4基因型比APOE3诱导炎症因子能力更强,可诱导神经毒性反应性星形胶质细胞表型,增加神经毒性,影响星形胶质细胞凋亡,从而加剧神经元损伤。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 星形胶质细胞 载脂蛋白E 基因多态性 细胞凋亡 神经毒性

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心源性卒中的遗传学研究进展

16

作者 唐恒磊 郑树涛 +1 位作者 李友 钟望涛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期373-386,共14页

心源性卒中是缺血性脑卒中的重要病因之一,表现出病情重、预后差和复发率高的特点。在遗传学研究中已经有相当多与心源性卒中相关的基因被鉴定,这些易感基因在疾病风险预测及危险因素评估的潜力也陆续被发掘。本文从全基因组关联研究、... 心源性卒中是缺血性脑卒中的重要病因之一,表现出病情重、预后差和复发率高的特点。在遗传学研究中已经有相当多与心源性卒中相关的基因被鉴定,这些易感基因在疾病风险预测及危险因素评估的潜力也陆续被发掘。本文从全基因组关联研究、拷贝数变异研究、全基因组测序研究等方面综述了心源性卒中遗传学研究的相关进展,并介绍了其遗传数据集在多基因风险评分、孟德尔随机化的应用,旨在为将来深入研究心源性卒中的遗传发生机制提供借鉴和参考。 展开更多

关键词 脑卒中 心源性卒中 全基因组关联研究 多基因风险评分 孟德尔随机化

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胞质分裂作用因子4过表达慢病毒载体的构建和稳定转染Neuro-2a细胞的建立

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作者 李胜男 何嘉文 +1 位作者 廖科棋 李友 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1322-1329,共8页

目的:构建胞质分裂作用因子4(DOCK4)过表达慢病毒载体,建立DOCK4稳定过表达的Neuro-2a细胞。方法:在美国国家生物信息中心(NCBI)查找DOCK4的序列并设计合成引物,采用聚合酶链式反应(PCR)法扩增获取DOCK4基因序列,通过Bam HⅠ和AgeⅠ限... 目的:构建胞质分裂作用因子4(DOCK4)过表达慢病毒载体,建立DOCK4稳定过表达的Neuro-2a细胞。方法:在美国国家生物信息中心(NCBI)查找DOCK4的序列并设计合成引物,采用聚合酶链式反应(PCR)法扩增获取DOCK4基因序列,通过Bam HⅠ和AgeⅠ限制性内切酶酶切后,将其与酶切后的慢病毒载体GV492进行连接,构建GV492-DOCK4过表达重组质粒,PCR法鉴定筛选出与目的基因片段长度大小相近的阳性克隆。将GV492-对照质粒和GV492-DOCK4过表达重组质粒分别转染至HEK293T细胞中,转染48 h后收集慢病毒进行包装并测定病毒滴度。将Neuro-2a细胞分为GV492-对照组和GV492-DOCK4组,分别采用GV492-对照组慢病毒和GV492-DOCK4过表达慢病毒感染Neuro-2a细胞,慢病毒感染复数(MOI)为100,感染72 h后采用嘌呤霉素(10 mg·L^(-1))筛选出成功感染GV492-对照组慢病毒和GV492-DOCK4过表达慢病毒的Neuro-2a细胞,荧光显微镜观察各组Neuro-2a细胞生长状态及绿色荧光蛋白表达情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组Neuro-2a细胞中DOCK4 mRNA和DOCK4蛋白表达水平。结果:PCR检测,GV492-DOCK4过表达重组质粒的基因片段长度约为691 bp,测序结果显示GV492-DOCK4过表达重组质粒基因序列与设计合成的DOCK4过表达序列一致;GV492-对照组和GV492-DOCK4过表达组慢病毒的滴度分别为2.5×10^(8) TU·mL^(-1)和2.5×10^(8) TU·mL^(-1);荧光显微镜观察,各组Neuro-2a细胞生长状态良好且存在绿色荧光蛋白表达;RT-qPCR法检测,与GV492-对照组比较,GV492-DOCK4组Neuro-2a细胞中DOCK4 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);Western blotting法检测,各组细胞在相对分子质量225000附近出现特异性条带,与GV492-对照组比较,GV492-DOCK4组Neuro-2a细胞中DOCK4蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:本研究成功构建DOCK4过表达慢病毒载体,建立了稳定过表达DOCK4的Neuro-2a细胞。 展开更多

关键词 胞质分裂作用因子4 过表达慢病毒载体 Neuro-2a细胞 稳定转染 过表达慢病毒

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EIF4A3 shRNA慢病毒载体的构建及其稳定转染细胞系的建立

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作者 何嘉文 李友 +1 位作者 廖科棋 李胜男 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期831-839,共9页

目的:构建真核细胞翻译起始因子4A3(EIF4A3)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,建立Neuro-2a-EIF4A3-shRNA稳定转染细胞系。方法:通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库检索EIF4A3基因序列,设计并合成PCR鉴定引物,并将其连接至经EcoRⅠ和... 目的:构建真核细胞翻译起始因子4A3(EIF4A3)-短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,建立Neuro-2a-EIF4A3-shRNA稳定转染细胞系。方法:通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库检索EIF4A3基因序列,设计并合成PCR鉴定引物,并将其连接至经EcoRⅠ和AgeⅠ酶切的慢病毒GV493载体,构建GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒质粒,PCR筛选阳性克隆并测序鉴定。将GV493空载质粒和GV493-EIF4A3-shRNA重组质粒分别转染至HEK293T细胞中,分别为GV493对照慢病毒和GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒,转染48 h后收集慢病毒进行包装并测定病毒滴度。将Neuro-2a细胞分为空白组、GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组,空白组不作处理,GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组分别采用相应慢病毒感染Neuro-2a细胞,慢病毒感染复数(MOI)为100,使用10 mg·L-1嘌呤霉素筛选成功感染慢病毒的Neuro-2a细胞,荧光显微镜观察各组Neuro-2a细胞的生长状态和绿色荧光表达情况;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组Neuro-2a细胞中EIF4A3 mRNA及蛋白表达水平。结果:PCR测序结果显示GV493-EIF4A3-shRNA重组质粒基因序列与设计合成的EIF4A3-shRNA序列一致,成功构建GV493-EIF4A3慢病毒载体。荧光显微镜观察可见HEK293T细胞荧光表达强烈,生长状态良好,慢病毒包装成功。GV493-对照慢病毒和GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒的滴度均为2×10~8 TU·mL^(-1),GV493对照组和GV493-EIF4A3 shRNA组Neuro-2a细胞生长状态良好且表达绿色荧光,表明慢病毒感染稳定细胞系构建成功。RT-qPCR法,与空白组和GV493对照组比较,GV493-EIF4A3shRNA组Neuro-2a细胞EIF4A3mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。Western blotting法,各组在相对分子质量49000处出现特异性条带,提示Neuro-2a细胞中EIF4A3蛋白表达成功;与空白组和GV493对照组比较,GV493-EIF4A3 shRNA组Neuro-2a细胞中EIF4A3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:成功构建GV493-EIF4A3-shRNA慢病毒载体,建立了Neuro-2a-EIF4A3-shRNA稳定转染细胞系,为EIF4A3在颅内动脉粥样硬化的作用机制研究提供了参考。 展开更多

关键词 真核细胞翻译起始因子4A3 短发夹RNA 慢病毒 稳定转染细胞系 Neuro-2a细胞

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长链非编码RNA GAS5在脑卒中及相关疾病发生发展中的作用 被引量：1

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作者 朱佩仪 李胜男 +3 位作者 邓福 王莹 胡幸娟 李友 《神经疾病与精神卫生》 2021年第3期176-180,共5页

脑卒中仍然是全球第二大死亡原因,严重威胁人类的健康.导致脑卒中最常见相关疾病主要包括动脉粥样硬化、高血压、心房颤动、糖尿病等.目前,急性缺血性脑卒中的治疗方法主要有溶栓治疗及机械取栓治疗,但由于治疗时间窗的限制及缺血再灌... 脑卒中仍然是全球第二大死亡原因,严重威胁人类的健康.导致脑卒中最常见相关疾病主要包括动脉粥样硬化、高血压、心房颤动、糖尿病等.目前,急性缺血性脑卒中的治疗方法主要有溶栓治疗及机械取栓治疗,但由于治疗时间窗的限制及缺血再灌注所带来的损害,迫切需要从脑卒中的潜在分子机制出发寻找新的治疗方法,为脑卒中提供有效的治疗手段,从而降低脑卒中对人群带来的伤害.长链非编码RNA(LncRNA)是一种位于细胞核或胞质内不具备编码能力的RNA,生长停滞特异性5(GAS5)是LncRNA家族成员之一.研究表明,LncRNA GAS5可直接或间接参与细胞周期、增殖和凋亡等过程,导致脑卒中及多种疾病的发生、发展.现就LncRNA GAS5在脑卒中及相关疾病中发生、发展的作用进行综述,旨在揭示LncRNA GAS5在脑卒中中作为潜在生物标志物和治疗靶标的作用. 展开更多

关键词 LncRNA GAS5 脑卒中 动脉粥样硬化 心房颤动 高血压 糖尿病 综述

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急性缺血性脑卒中患者血浆CXCL9、CCL21与病情和预后的关系研究

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作者 杨佳白 刘颖璇 +3 位作者 张宇 李胜男 蔡玉洁 崔理立 《现代生物医学进展》 2025年第1期99-105,共7页

目的:探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血浆C-X-C基序趋化因子配体9(CXCL9)、C-C基序趋化因子配体21(CCL21)与病情和预后的关系。方法:选取2020年1月~2023年9月北京市和平里医院收治的AIS患者197例(AIS组)和同期100例健康体检者(对照组),... 目的:探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血浆C-X-C基序趋化因子配体9(CXCL9)、C-C基序趋化因子配体21(CCL21)与病情和预后的关系。方法:选取2020年1月~2023年9月北京市和平里医院收治的AIS患者197例(AIS组)和同期100例健康体检者(对照组),AIS患者根据病情分为轻度AIS组(39例)、中度AIS组(54例)、中重度AIS组(31例)、重度AIS组(73例),根据出院后3个月的预后分为不良预后组(55例)和良好预后组(142例)。分析AIS患者血浆CXCL9、CCL21水平与病情以及预后的关系。结果:重度AIS组血浆CXCL9、CCL21水平高于中重度AIS组、中度AIS组、轻度AIS组和对照组(P均<0.05)。AIS患者不良预后的独立危险因素为梗死体积增加、NIHSS评分增加和CXCL9、CCL21升高(P均<0.05)。血浆CXCL9联合CCL21预测AIS患者预后不良的曲线下面积(AUC)最高,AUC为0.861。结论:AIS患者血浆CXCL9、CCL21水平升高,与病情加重和不良预后有关,血浆CXCL9联合CCL21预测AIS患者预后的效能良好。 展开更多

关键词 急性缺血性脑卒中 C-X-C基序趋化因子配体9 C-C基序趋化因子配体21 病情 预后

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