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重症肌无力患者外周血单个核细胞中线粒体自噬和凋亡相关基因表达及其诊断价值
1
作者 蔡东红 李青 +4 位作者 柯铃铃 钟慧雅 江其龙 张涵 宋雅芳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期481-488,共8页
目的:探讨重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中线粒体自噬和凋亡相关基因的表达水平,阐明其对MG诊断的指导价值。方法:收集并提取50名健康对照者(对照组)和50例MG患者(MG组)的PBMCs,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western b... 目的:探讨重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中线粒体自噬和凋亡相关基因的表达水平,阐明其对MG诊断的指导价值。方法:收集并提取50名健康对照者(对照组)和50例MG患者(MG组)的PBMCs,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测线粒体自噬因子磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)诱导激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶PARK2(Parkin)、泛素结合蛋白62(p62)、微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)及凋亡因子细胞色素C(Cyt-C)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶9(caspase 9)的mRNA以及蛋白表达水平,根据mRNA检测结果设定多个不同临界值,在每个临界值处计算出相应的灵敏度和特异度,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线。结果:与对照组比较,MG组患者PBMCs中的自噬因子PINK1、Parkin和LC3Ⅱ的mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p62 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01);凋亡因子Cyt-C、Bax、caspase 3和caspase 9 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Cyt-C mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),而Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。ROC曲线检测,PINK1、Parkin、p62和LC3Ⅱ的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.9696(95%CI:0.9435~0.9957)、0.9440(95%CI:0.9047~0.9833)、0.8556(95%CI:0.7767~0.9345)及0.9088(95%CI:0.8526~0.9650)(P<0.01),灵敏度分别为92%、92%、78%和84%,特异度分别为88%、82%、92%和82%;而Cyt-C、Bax、Bcl-2、caspase 3和caspase 9的AUC均为1.000(P<0.01),灵敏度和特异度均达到100%。结论:MG患者PBMCs中存在线粒体自噬障碍和凋亡增加现象,其对临床诊断MG具有较高的指导价值。 展开更多
关键词 重症肌无力 线粒体自噬 细胞凋亡 外周血单个核细胞 诊断价值
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以自发性脾破裂出血为首发临床表现的急性胰腺炎1例
2
作者 钟慧雅 叶梓轩 +3 位作者 李培武 樊冬梅 宋雅芳 赵利娜 《现代消化及介入诊疗》 2023年第1期133-136,共4页
急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)是指胰酶损伤胰腺组织,导致腺体乃至其他器官受炎症性损伤。急性胰腺炎全球年发病率为34/10万,首次发作后21%的患者发展为复发性急性胰腺炎,36%的患者在反复发作急性胰腺炎后发展为慢性胰腺炎,约20%... 急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)是指胰酶损伤胰腺组织,导致腺体乃至其他器官受炎症性损伤。急性胰腺炎全球年发病率为34/10万,首次发作后21%的患者发展为复发性急性胰腺炎,36%的患者在反复发作急性胰腺炎后发展为慢性胰腺炎,约20%的患者会发展为中度或重症胰腺炎[1]。典型的急性胰腺炎一般以持续性上腹痛为首要症状,疼痛可向背部放射,如伴有血淀粉酶和(或)脂肪酶显著升高且CT提示胰腺坏死和渗出改变,一般不难诊断。 展开更多
关键词 自发性脾破裂 急性胰腺炎 持续性疼痛 酒精 胸腔积液
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白术多糖对小肠上皮细胞细胞屏障及黏附连接蛋白表达的影响 被引量：4
3
作者 罗蒙 伍婷婷 +4 位作者 李茹柳 张东 朱惠彬 胡玲 陈蔚文 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期533-539,共7页
目的观察白术多糖对小肠上皮细胞(IEC-6)渗透性的影响,并从其对黏附连接蛋白表达影响的角度,探讨白术多糖对肠黏膜上皮屏障的作用及机制。方法在3种实验条件下[正常含钙、含钙+多胺合成抑制剂(DFMO)、无钙培养],以检测Transwell小室酚... 目的观察白术多糖对小肠上皮细胞(IEC-6)渗透性的影响,并从其对黏附连接蛋白表达影响的角度,探讨白术多糖对肠黏膜上皮屏障的作用及机制。方法在3种实验条件下[正常含钙、含钙+多胺合成抑制剂(DFMO)、无钙培养],以检测Transwell小室酚红透过率的方法观察细胞间渗透性;以Western Blot法检测细胞黏附连接蛋白(E-cadherin、α-catenin和β-catenin)的表达。结果(1)正常含钙培养时,白术多糖(25、50、100 mg·L-1)能降低细胞间渗透性并提高黏附连接蛋白表达(P<0.05或P<0.01);(2)含钙+DFMO负荷时,细胞间渗透性增加且黏附连接蛋白表达下降(P<0.01);各剂量的白术多糖能逆转DFMO所致的细胞间渗透性增加,且对黏附连接蛋白表达下降有拮抗作用(P<0.05或P<0.01);(3)无钙培养时,细胞间渗透性增加且黏附连接蛋白表达下降(P<0.01),各剂量的白术多糖可逆转无钙培养所致的细胞间渗透性增加及E-cadherin表达降低(P<0.05或P<0.01),但对α-catenin和β-catenin表达无明显影响。结论白术多糖有增强小肠上皮屏障的作用,其机制与影响黏附连接蛋白表达有关,研究结果为探讨益气健脾中药白术对胃肠黏膜保护作用提供了参考。 展开更多
关键词 白术多糖 IEC-6细胞 细胞间渗透性 上皮屏障 黏附连接蛋白
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四君子汤对脾虚大鼠骨骼肌细胞色素c氧化酶Ⅰ、ⅣmRNA及蛋白表达的影响 被引量：4
4
作者 李岚其 郭丽娜 +3 位作者 陈肖家 季幸姝 钟慧雅 宋雅芳 《广州中医药大学学报》 CAS 2022年第4期876-883,共8页
【目的】探讨脾虚证中线粒体能量代谢障碍机制及健脾益气方药的干预作用。【方法】采用皮下注射利血平法构建脾虚大鼠模型,将造模成功后的大鼠分为脾虚模型组和四君子汤组,每组各7只,另取正常组7只。四君子汤组给予四君子汤1.0 g·m... 【目的】探讨脾虚证中线粒体能量代谢障碍机制及健脾益气方药的干预作用。【方法】采用皮下注射利血平法构建脾虚大鼠模型,将造模成功后的大鼠分为脾虚模型组和四君子汤组,每组各7只,另取正常组7只。四君子汤组给予四君子汤1.0 g·mL^(-1)·kg^(-1)灌胃,脾虚模型组和正常组灌胃等体积生理盐水,每日1次,持续21 d。给药期间记录大鼠一般情况。给药结束后,采用对溴苯胺法测定尿D-木糖排泄率,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察骨骼肌病理改变,采用聚合酶链反应(PCR)法检测大鼠骨骼肌细胞色素c氧化酶(COX)Ⅰ、COXⅣmRNA表达,采用免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法检测大鼠骨骼肌COXⅠ、COXⅣ蛋白表达。【结果】与正常组比较,脾虚模型组大鼠骨骼肌肌纤维排列紊乱、间隙增大,细胞核分布不均,胞质染色不匀;与脾虚模型组比较,四君子汤组骨骼肌纤维排列较整齐。脾虚模型组大鼠骨骼肌COXⅠ、COXⅣmRNA和蛋白表达水平较正常组降低(P<0.05或P<0.01);四君子汤组大鼠骨骼肌COXⅠ、COXⅣmRNA和蛋白表达水平较脾虚模型组升高(P<0.05或P<0.01)。【结论】脾虚大鼠存在骨骼肌病理形态损伤,骨骼肌COXⅠ、COXⅣmRNA和蛋白表达均降低。四君子汤改善脾虚大鼠骨骼肌病理结构,提高COXⅠ、COXⅣm RNA和蛋白表达可能是其修复脾虚证能量代谢障碍的机制之一。 展开更多
关键词 四君子汤 脾虚证 健脾益气 细胞色素C氧化酶 能量代谢 大鼠
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