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鸟分枝杆菌耐受表面活性物质基因的筛选及其相关功能分析（英文）
1
作者 宁雪萍 田爽 +2 位作者 张依 梁家毓 凌敏 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第8期1215-1221,共7页
目的:筛选鸟分枝杆菌(MAV)中耐受表面活性物质的基因并探究其相关功能,以认识MAV适应肺部环境的机制。方法:构建MAV基因组文库,采用生物活性水平筛选策略从基因组文库中筛选耐受十二烷基硫酸钠(SDS)的克隆子,运用生物信息学分析该克隆... 目的:筛选鸟分枝杆菌(MAV)中耐受表面活性物质的基因并探究其相关功能,以认识MAV适应肺部环境的机制。方法:构建MAV基因组文库,采用生物活性水平筛选策略从基因组文库中筛选耐受十二烷基硫酸钠(SDS)的克隆子,运用生物信息学分析该克隆子的完整的开放阅读框架(ORF)及其编码蛋白的二级结构特点。将克隆子的全基因序列与pGEX-4T-3表达质粒连接后转化大肠杆菌,构建过表达目的蛋白的重组菌,然后检测重组菌分别在含SDS、H2O2、NaNO2和GSNO条件下的存活率。结果:成功构建滴度为1.18×10^4 CFU/mL的MAV基因组文库,并从文库中筛选到一个耐受SDS的基因MAV-4012。生物信息学分析显示,MAV-4012蛋白是一个无信号肽的跨膜蛋白,二级结构以α-螺旋为主。过表达MAV-4012重组菌在2%SDS、5 mmol/L H2O2、20 mmol/L NaNO2和10 mmol/L GSNO体外条件下的存活率均比空载菌显著提高(P<0.05)。结论:MAV-4012是MAV中的一个耐受表面活性物质的基因,其编码的蛋白参与了肺部表面活性物质、活性氧(ROS)及活性氮(RNS)的胁迫应答,是MAV重要的毒力因子。 展开更多
关键词 鸟分枝杆菌 MAV-4012 表面活性物质 毒力因子
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鸟分枝杆菌中耐受表面活性物质相关基因的分离及功能鉴定
2
作者 田爽 宁雪萍 +1 位作者 龙倩 凌敏 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1796-1802,共7页
为筛选鸟分枝杆菌中耐受表面活性物质的基因并探究其相关功能,以认识鸟分枝杆菌适应肺部环境的杀(抑)菌机制,本研究构建鸟分枝杆菌基因组文库,采用生物活性水平筛选策略从基因组文库中筛选耐受十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,S... 为筛选鸟分枝杆菌中耐受表面活性物质的基因并探究其相关功能,以认识鸟分枝杆菌适应肺部环境的杀(抑)菌机制,本研究构建鸟分枝杆菌基因组文库,采用生物活性水平筛选策略从基因组文库中筛选耐受十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)的克隆子,运用生物信息学分析该克隆子完整的开放阅读框及其编码蛋白的二级结构特点。将克隆子的全基因序列与pGEX-4T-3表达质粒连接后转化大肠杆菌,构建过表达目的蛋白的重组菌。检测重组菌分别在含SDS、H2O2、NaNO2和GSNO条件环境下的存活率。结果表明成功构建滴度为1.18×10^4 cfu/mL的鸟分枝杆菌基因组文库,从文库中筛选到一个耐受SDS的基因MAV-4292。生物信息学分析显示,MAV-4292蛋白是一个无信号肽的跨膜蛋白,二级结构以α-螺旋为主。过表达MAV-4292重组菌在2%SDS、5 mmol/L H2O2、20 mmol/L NaNO2和10 mmol/L GSNO体外条件下的存活率均比空载菌显著提高(p<0.05)。结果表明,MAV-4292是鸟分枝杆菌中一个耐受表面活性物质的基因,它编码的蛋白参与了肺部表面活性物质、活性氧(reactive oxygen species,ROS)及活性氮(reaetive nitrogen species,RNS)的胁迫应答,是鸟分枝杆菌的毒力因子。 展开更多
关键词 鸟分枝杆菌 MAV-4292 表面活性物质 毒力因子
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