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雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL-6表达的影响及其机制
1
作者
赵学慧
王淮淮
+2 位作者
李维维
李迎婕
贾军利
《山东医药》
CAS
2024年第8期1-5,共5页
目的观察雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL-6表达的影响,并基于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(AKT)信号通路探讨相关机制。方法体外培养人肾小球足细胞系HGPC,分为对照组、高糖组、实验组,对照组不做干预...
目的观察雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL-6表达的影响,并基于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(AKT)信号通路探讨相关机制。方法体外培养人肾小球足细胞系HGPC,分为对照组、高糖组、实验组,对照组不做干预,高糖组、实验组加入30 mmol/L D-葡萄糖,实验组在此基础上分别加入2.5、5、10μmol/L雷帕霉素,检测各组细胞活力,筛选雷帕霉素最适浓度。将HGPC细胞分为对照组、高糖组、实验组、抑制剂组、雷帕霉素+抑制剂组、雷帕霉素+激动剂组;对照组不加药物,高糖组加入30 mmol/L D-葡萄糖,抑制剂组加入30 mmol/L D-葡萄糖+10μmol/L PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002,实验组、雷帕霉素+抑制剂组、雷帕霉素+激动剂组加入30 mmol/L D-葡萄糖+10μmol/L雷帕霉素,雷帕霉素+抑制剂组再加入10μmol/L LY294002,雷帕霉素+激动剂组再加入10μmol/L PI3K/AKT信号通路激动剂SC79;各组给药后培养24 h。采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷法检测细胞增殖能力,Hoechst 33258染色检测凋亡细胞;采用ELISA法检测细胞培养液上清中的白细胞介素6(IL-6);Western blotting法检测细胞中的细胞周期素D1(Cyclin D1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)及PI3K/AKT通路相关蛋白。结果高糖组细胞增殖率、Cyclin D1表达低于对照组,实验组和抑制剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达高于高糖组;与实验组相比,雷帕霉素+抑制剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达增高,雷帕霉素+激动剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达降低(P均<0.05)。高糖组细胞凋亡率、Caspase-3表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、IL-6水平高于对照组,实验组和抑制剂组细胞凋亡率、Caspase-3表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、IL-6水平低于高糖组;与实验组相比,雷帕霉素+抑制剂组细胞凋亡率、Caspase-3表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、IL-6水平下降,雷帕霉素+激动剂组凋亡率、Caspase-3表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、IL-6水平上升(P均<0.05)。结论雷帕霉素可促进高糖诱导的人肾小球足细胞增殖,减少细胞凋亡,减轻炎症损伤,其机制可能与抑制PI3K/AKT通路有关。
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关键词
糖尿病肾病
肾小球足细胞
雷帕霉素
PI3K/AKT信号通路
细胞增殖
细胞凋亡
白细胞介素6
下载PDF
职称材料
雷帕霉素对高糖诱导的足细胞增殖、迁移及上皮–间质转化的作用机制研究
被引量:
1
2
作者
赵学慧
王淮淮
+2 位作者
李维维
李迎婕
贾军利
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2023年第5期734-743,共10页
为探讨雷帕霉素对D-葡萄糖诱导的人肾小球足细胞增殖、迁移和上皮–间质转化(EMT)的影响及磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸–苏氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路的调控作用,该研究体外培养人肾小球足细胞HGPC细胞系,并将其分为对照组(5 mmol/L的D-...
为探讨雷帕霉素对D-葡萄糖诱导的人肾小球足细胞增殖、迁移和上皮–间质转化(EMT)的影响及磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸–苏氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路的调控作用,该研究体外培养人肾小球足细胞HGPC细胞系,并将其分为对照组(5 mmol/L的D-葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L的D-葡萄糖)、低/中/高浓度组(在30 mmol/L的D-葡萄糖的基础上加入2.5、5.0、10.0μmol/L雷帕霉素),用酶联免疫吸附实验(ELISA)、细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定炎症因子白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平及细胞活力,筛选出最适雷帕霉素后,又将细胞分为对照组、高糖组、雷帕霉素组、LY294002组(30 mmol/L的D-葡萄糖+10μmol/L PI3K/AKT通路抑制剂LY294002)、雷帕霉素+LY294002组(30 mmol/L的D-葡萄糖+10.0μmol/L雷帕霉素+10μmol/L PI3K/AKT通路抑制剂LY294002)和雷帕霉素+SC79组(30 mmol/L的D-葡萄糖+10.0μmol/L雷帕霉素+10μmol/L PI3K/AKT通路激动剂SC79),干预24 h。5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)检测细胞增殖情况;划痕法测定细胞的迁移能力;蛋白免疫印迹(WB)法测定EMT及PI3K/AKT通路相关蛋白表达水平。结果表明,与对照组相比,高糖组细胞炎症因子IL-8和TNF-α表达水平显著升高,细胞活力显著降低,与高糖组相比,高浓度组细胞炎症因子IL-8和TNF-α表达水平降低,细胞活力升高(P<0.05),所以确定10.0μmol/L雷帕霉素是最佳作用浓度,进行进一步的实验。与对照组相比,高糖组细胞增殖率和E-钙粘蛋白(cadherin)蛋白表达水平显著降低,细胞迁移率和N-cadherin、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)、p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT比值显著升高(P<0.05);与高糖组相比,雷帕霉素组和LY294002组逆转了上述指标的变化趋势(P<0.05);与雷帕霉素组相比,雷帕霉素+LY294002组中LY294002增强了上述指标变化趋势,雷帕霉素+SC79组SC79削弱了这些指标变化趋势(P<0.05)。总之,雷帕霉素可促进D-葡萄糖诱导的人肾小球足细胞HGPC细胞的增殖,抑制其迁移和EMT进程,作用机制可能与阻断PI3K/AKT通路的信号转导相关。
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关键词
糖尿病肾病
足细胞
雷帕霉素
磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸–苏氨酸激酶信号通路
D-葡萄糖
增殖
迁移
上皮–间质转化
原文传递
沙格列汀调控miR-23b-3p/EGR1轴对高糖诱导足细胞损伤的影响及机制研究
3
作者
杨宇翔
赵学慧
+3 位作者
李维维
许玉兰
李迎婕
贾军利
《世界临床药物》
CAS
2023年第12期1270-1278,共9页
目的 探讨沙格列汀通过调控微小RNA(micro RNA,miR)-23b-3p/早期生长反应因子(early growth response factor,EGR)1轴对高糖诱导足细胞损伤的影响。方法 将人足细胞分为对照组、高糖组、高糖+沙格列汀组、高糖+沙格列汀+anti-miR-对照...
目的 探讨沙格列汀通过调控微小RNA(micro RNA,miR)-23b-3p/早期生长反应因子(early growth response factor,EGR)1轴对高糖诱导足细胞损伤的影响。方法 将人足细胞分为对照组、高糖组、高糖+沙格列汀组、高糖+沙格列汀+anti-miR-对照组以及高糖+沙格列汀+anti-miR-23b-3p组。分别检测细胞miR-23b-3p、EGR1信使RNA(messenger RNA,mRNA)表达、增殖、凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肌间线蛋白、裂孔隔膜蛋白(Podocin、Nephrin)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(B cell lymphoma-2 related X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3以及EGR1表达,并验证miR-23b-3p与EGR1的靶向关系。结果 与对照组相比,高糖组的miR-23b-3p表达水平、增殖率、SOD、Podocin以及Nephrin均降低,EGR1表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、MDA、ROS、Caspase-3、Bax以及肌间线蛋白均升高(P <0.05);与高糖组相比,高糖+沙格列汀组miR-23b-3p表达、增殖率、SOD、Podocin以及Nephrin均升高,EGR1表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、MDA、ROS、caspase-3、Bax以及肌间线蛋白均降低(P <0.05);下调miR-23b-3p可减弱沙格列汀对足细胞损伤的改善(P <0.05);miR-23b-3p靶向负调控EGR1表达。结论 沙格列汀可能通过上调miR-23b-3p负调控EGR1,减轻高糖诱导的足细胞凋亡和损伤。
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关键词
沙格列汀
高糖
足细胞
微RNA-23b-3p
早期生长反应因子1
原文传递
题名
雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL-6表达的影响及其机制
1
作者
赵学慧
王淮淮
李维维
李迎婕
贾军利
机构
河北北方学院附属
第二
医院
肾
内科
张家口市第二医院肾内科
出处
《山东医药》
CAS
2024年第8期1-5,共5页
基金
河北省卫健委医学科学研究课题计划项目(20210125,20231466)。
文摘
目的观察雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL-6表达的影响,并基于磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸激酶(AKT)信号通路探讨相关机制。方法体外培养人肾小球足细胞系HGPC,分为对照组、高糖组、实验组,对照组不做干预,高糖组、实验组加入30 mmol/L D-葡萄糖,实验组在此基础上分别加入2.5、5、10μmol/L雷帕霉素,检测各组细胞活力,筛选雷帕霉素最适浓度。将HGPC细胞分为对照组、高糖组、实验组、抑制剂组、雷帕霉素+抑制剂组、雷帕霉素+激动剂组;对照组不加药物,高糖组加入30 mmol/L D-葡萄糖,抑制剂组加入30 mmol/L D-葡萄糖+10μmol/L PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002,实验组、雷帕霉素+抑制剂组、雷帕霉素+激动剂组加入30 mmol/L D-葡萄糖+10μmol/L雷帕霉素,雷帕霉素+抑制剂组再加入10μmol/L LY294002,雷帕霉素+激动剂组再加入10μmol/L PI3K/AKT信号通路激动剂SC79;各组给药后培养24 h。采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷法检测细胞增殖能力,Hoechst 33258染色检测凋亡细胞;采用ELISA法检测细胞培养液上清中的白细胞介素6(IL-6);Western blotting法检测细胞中的细胞周期素D1(Cyclin D1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)及PI3K/AKT通路相关蛋白。结果高糖组细胞增殖率、Cyclin D1表达低于对照组,实验组和抑制剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达高于高糖组;与实验组相比,雷帕霉素+抑制剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达增高,雷帕霉素+激动剂组细胞增殖率、Cyclin D1表达降低(P均<0.05)。高糖组细胞凋亡率、Caspase-3表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、IL-6水平高于对照组,实验组和抑制剂组细胞凋亡率、Caspase-3表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、IL-6水平低于高糖组;与实验组相比,雷帕霉素+抑制剂组细胞凋亡率、Caspase-3表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、IL-6水平下降,雷帕霉素+激动剂组凋亡率、Caspase-3表达及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、IL-6水平上升(P均<0.05)。结论雷帕霉素可促进高糖诱导的人肾小球足细胞增殖,减少细胞凋亡,减轻炎症损伤,其机制可能与抑制PI3K/AKT通路有关。
关键词
糖尿病肾病
肾小球足细胞
雷帕霉素
PI3K/AKT信号通路
细胞增殖
细胞凋亡
白细胞介素6
Keywords
diabetic nephropathy
glomerular podocytes
rapamycin
PI3K/AKT signaling pathway
cell prolifer‐ation
apoptosis
interleukin-6
分类号
R587.2 [医药卫生—内分泌]
下载PDF
职称材料
题名
雷帕霉素对高糖诱导的足细胞增殖、迁移及上皮–间质转化的作用机制研究
被引量:
1
2
作者
赵学慧
王淮淮
李维维
李迎婕
贾军利
机构
河北北方学院附属
第二
医院
肾
内科
张家口市第二医院肾内科
出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2023年第5期734-743,共10页
基金
河北省卫健委2021年度医学科学研究课题计划(批准号:20210125)资助的课题。
文摘
为探讨雷帕霉素对D-葡萄糖诱导的人肾小球足细胞增殖、迁移和上皮–间质转化(EMT)的影响及磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸–苏氨酸激酶(PI3K/AKT)信号通路的调控作用,该研究体外培养人肾小球足细胞HGPC细胞系,并将其分为对照组(5 mmol/L的D-葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L的D-葡萄糖)、低/中/高浓度组(在30 mmol/L的D-葡萄糖的基础上加入2.5、5.0、10.0μmol/L雷帕霉素),用酶联免疫吸附实验(ELISA)、细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定炎症因子白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平及细胞活力,筛选出最适雷帕霉素后,又将细胞分为对照组、高糖组、雷帕霉素组、LY294002组(30 mmol/L的D-葡萄糖+10μmol/L PI3K/AKT通路抑制剂LY294002)、雷帕霉素+LY294002组(30 mmol/L的D-葡萄糖+10.0μmol/L雷帕霉素+10μmol/L PI3K/AKT通路抑制剂LY294002)和雷帕霉素+SC79组(30 mmol/L的D-葡萄糖+10.0μmol/L雷帕霉素+10μmol/L PI3K/AKT通路激动剂SC79),干预24 h。5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)检测细胞增殖情况;划痕法测定细胞的迁移能力;蛋白免疫印迹(WB)法测定EMT及PI3K/AKT通路相关蛋白表达水平。结果表明,与对照组相比,高糖组细胞炎症因子IL-8和TNF-α表达水平显著升高,细胞活力显著降低,与高糖组相比,高浓度组细胞炎症因子IL-8和TNF-α表达水平降低,细胞活力升高(P<0.05),所以确定10.0μmol/L雷帕霉素是最佳作用浓度,进行进一步的实验。与对照组相比,高糖组细胞增殖率和E-钙粘蛋白(cadherin)蛋白表达水平显著降低,细胞迁移率和N-cadherin、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)、p-PI3K/PI3K及p-AKT/AKT比值显著升高(P<0.05);与高糖组相比,雷帕霉素组和LY294002组逆转了上述指标的变化趋势(P<0.05);与雷帕霉素组相比,雷帕霉素+LY294002组中LY294002增强了上述指标变化趋势,雷帕霉素+SC79组SC79削弱了这些指标变化趋势(P<0.05)。总之,雷帕霉素可促进D-葡萄糖诱导的人肾小球足细胞HGPC细胞的增殖,抑制其迁移和EMT进程,作用机制可能与阻断PI3K/AKT通路的信号转导相关。
关键词
糖尿病肾病
足细胞
雷帕霉素
磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸–苏氨酸激酶信号通路
D-葡萄糖
增殖
迁移
上皮–间质转化
Keywords
diabetes nephropathy
podocytes
rapamycin
phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase signaling pathway
D-glucose
proliferation
migration
epithelial-mesenchymal transformation
分类号
R587.2 [医药卫生—内分泌]
R692.9 [医药卫生—泌尿科学]
原文传递
题名
沙格列汀调控miR-23b-3p/EGR1轴对高糖诱导足细胞损伤的影响及机制研究
3
作者
杨宇翔
赵学慧
李维维
许玉兰
李迎婕
贾军利
机构
张家口市
第二
医院
药剂科
河北北方学院附属
第二
医院
肾
内科
张家口市第二医院肾内科
出处
《世界临床药物》
CAS
2023年第12期1270-1278,共9页
基金
河北省卫生健康委员会2021年度医学科学研究课题计划(20210125)。
文摘
目的 探讨沙格列汀通过调控微小RNA(micro RNA,miR)-23b-3p/早期生长反应因子(early growth response factor,EGR)1轴对高糖诱导足细胞损伤的影响。方法 将人足细胞分为对照组、高糖组、高糖+沙格列汀组、高糖+沙格列汀+anti-miR-对照组以及高糖+沙格列汀+anti-miR-23b-3p组。分别检测细胞miR-23b-3p、EGR1信使RNA(messenger RNA,mRNA)表达、增殖、凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肌间线蛋白、裂孔隔膜蛋白(Podocin、Nephrin)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(B cell lymphoma-2 related X protein,Bax)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3以及EGR1表达,并验证miR-23b-3p与EGR1的靶向关系。结果 与对照组相比,高糖组的miR-23b-3p表达水平、增殖率、SOD、Podocin以及Nephrin均降低,EGR1表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、MDA、ROS、Caspase-3、Bax以及肌间线蛋白均升高(P <0.05);与高糖组相比,高糖+沙格列汀组miR-23b-3p表达、增殖率、SOD、Podocin以及Nephrin均升高,EGR1表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、MDA、ROS、caspase-3、Bax以及肌间线蛋白均降低(P <0.05);下调miR-23b-3p可减弱沙格列汀对足细胞损伤的改善(P <0.05);miR-23b-3p靶向负调控EGR1表达。结论 沙格列汀可能通过上调miR-23b-3p负调控EGR1,减轻高糖诱导的足细胞凋亡和损伤。
关键词
沙格列汀
高糖
足细胞
微RNA-23b-3p
早期生长反应因子1
Keywords
saxagliptin
high glucose
podocyte
micro RNA-23b-3p
early growth response factor-1
分类号
R544.1 [医药卫生—心血管疾病]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
雷帕霉素对高糖诱导的人肾小球足细胞增殖、凋亡和IL-6表达的影响及其机制
赵学慧
王淮淮
李维维
李迎婕
贾军利
《山东医药》
CAS
2024
0
下载PDF
职称材料
2
雷帕霉素对高糖诱导的足细胞增殖、迁移及上皮–间质转化的作用机制研究
赵学慧
王淮淮
李维维
李迎婕
贾军利
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2023
1
原文传递
3
沙格列汀调控miR-23b-3p/EGR1轴对高糖诱导足细胞损伤的影响及机制研究
杨宇翔
赵学慧
李维维
许玉兰
李迎婕
贾军利
《世界临床药物》
CAS
2023
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