浅谈医学免疫学教学中的课堂互动 被引量：1

1

作者 张绍兰 李晋川 +2 位作者 邹强 陈纬 程晓刚 《商情》 2009年第4期70-70,73,共2页

在医学免疫学的教学过程中，课堂互动是培养学生兴趣至关重要的一环，它有利于充分发挥学生的主观能动性，使学生学会自主学习；有利于提高学生灵活运用所学知识解决实际问题的能力。

关键词 医学免疫学 课堂互动 教学效果

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流式细胞术检测细胞存活率的方法学建立 被引量：8

2

作者 刘阳 赖翼 +11 位作者 李敏惠 杨淑霞 郑静 阳泰 李丽梅 邓勇 张强 任荣梅 李钱梅 张帅 邹强 李华 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第15期1663-1664,共2页

目的探讨流式细胞术测定细胞存活率的可行性及准确性，为药物筛选、细胞增殖测定、药物毒性检测等提供新的选择。方法使用流式细胞术、CCK8比色法以及台盼蓝染色排除法测定Jurkat细胞存活率。结果使用流式细胞术，细胞浓度大于10^5／mL... 目的探讨流式细胞术测定细胞存活率的可行性及准确性，为药物筛选、细胞增殖测定、药物毒性检测等提供新的选择。方法使用流式细胞术、CCK8比色法以及台盼蓝染色排除法测定Jurkat细胞存活率。结果使用流式细胞术，细胞浓度大于10^5／mL时，CV值小于5％；细胞浓度小于10^4／mL时，CV值为5％～10％。使用流式细胞术r^2为0．9935，斜率为0．9994；使用CCK8比色法r^2为0．9912，斜率为1．011；使用台盼蓝染色排除法r^2为0．9698，斜率为1．057。结论流式细胞术进样流速稳定，且与活细胞数量成正比，可用于测定细胞存活率。 展开更多

关键词 流式细胞术 辛卡利特 台盼蓝染色排除法 细胞流速

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影响琼脂糖凝胶电泳条带扭曲程度的因素 被引量：5

3

作者 刘阳 杨淑霞 +3 位作者 赖翼 李敏惠 胡松 邹强 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期70-72,共3页

在不同的电压与载样量下,分别使用溴化乙锭(EB)与新型核酸染料GoldViewna II及GoldView对凝胶中的DNA进行染色,观察电泳条带扭曲程度,了解电压、载样量与核酸染料对琼脂糖凝胶电泳条带扭曲程度的影响。使用GoldViewna II染色,当电压≥10... 在不同的电压与载样量下,分别使用溴化乙锭(EB)与新型核酸染料GoldViewna II及GoldView对凝胶中的DNA进行染色,观察电泳条带扭曲程度,了解电压、载样量与核酸染料对琼脂糖凝胶电泳条带扭曲程度的影响。使用GoldViewna II染色,当电压≥10V/cm时,DNA条带的扭曲程度随载样量增大而加剧;当DNA载样量≥10ng时,DNA条带的扭曲程度随电压升高而加剧。使用EB染色,仅当载样量≥50ng时,条带出现轻微扭曲,扭曲程度与电压无明显关系。结果表明使用GoldView染色,当电压不超过20V/cm或载样量不超过100ng时,DNA条带不扭曲。在琼脂糖凝胶电泳中,若要避免DNA条带扭曲干扰实验结果,使用GoldViewna II染色,若DNA载样量≥10ng,应控制电压≤5V/cm;使用EB染色,载样量应≤50ng;使用GoldView染色,可以使用20V/cm的电压缩短实验时间。 展开更多

关键词 核酸染料 琼脂糖凝胶电泳 扭曲

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三种染色方式下四种核酸染料的灵敏度比较 被引量：6

4

作者 刘阳 杨淑霞 +3 位作者 李敏惠 胡松 任文娟 邹强 《成都医学院学报》 CAS 2008年第1期20-23,共4页

目的探讨补镁对高脂高糖膳食诱导大鼠肥胖模型形成的影响及作用机制。使用染胶法、染样品法及后染法比较溴化乙锭(EB)与3种新型核酸染料GoldViewnaII、GoldView及DNA Green染色DNA的灵敏度。方法在琼脂糖凝胶电泳中,分别在3种染色方式... 目的探讨补镁对高脂高糖膳食诱导大鼠肥胖模型形成的影响及作用机制。使用染胶法、染样品法及后染法比较溴化乙锭(EB)与3种新型核酸染料GoldViewnaII、GoldView及DNA Green染色DNA的灵敏度。方法在琼脂糖凝胶电泳中,分别在3种染色方式下使用4种核酸染料对凝胶中的DNA进行染色,观察并分析电泳结果。结果核酸染料比较结果:GoldViewnaII的灵敏度最高,DNA Green的灵敏度与EB相当,GoldView的灵敏度略低于EB。染色方式比较结果:使用染胶法的灵敏度最高,后染法次之,染样品法最低。结论三种新型核酸染料完全可以替代EB,用于琼脂糖凝胶电泳DNA染色。使用新型核酸染料建议采用染胶法染色DNA。 展开更多

关键词 琼脂糖凝胶电泳 核酸染料 溴化乙锭

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鲍曼不动杆菌生物被膜对抗菌药物耐药性的影响 被引量：19

5

作者 蔺飞 杜冰洁 +1 位作者 高灿 凌保东 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期1-5,共5页

目的了解临床分离的鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力及生物被膜形成后对耐药性的影响。方法收集临床分离的鲍曼不动杆菌47株,采用结晶紫染色法测定鲍曼不动杆菌生物被膜的形成能力,检测12种抗菌药物对形成生物被膜的菌株在浮游状态及生物... 目的了解临床分离的鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力及生物被膜形成后对耐药性的影响。方法收集临床分离的鲍曼不动杆菌47株,采用结晶紫染色法测定鲍曼不动杆菌生物被膜的形成能力,检测12种抗菌药物对形成生物被膜的菌株在浮游状态及生物被膜状态下的最低抑菌浓度(MIC);阳性菌株在不同培养条件(振荡与静止)、不同材料(玻璃试管和聚丙烯塑料离心管)中生物被膜形成能力。结果 13株(27.66%)临床菌株形成生物被膜。浮游状态下13株菌对检测抗菌药物的耐药率均<35%,未出现对多粘菌素和替加环素耐药的菌株;生物被膜状态下替加环素耐药率为15.38%,其余抗菌药物的耐药率均为100%。13株试验菌株,在振荡条件下≥10株菌形成的生物被膜菌吸光度高于静止培养条件下形成的生物被膜菌,≥10株菌在聚丙烯离心管中形成生物被膜菌吸光度高于玻璃试管中形成的生物被膜菌。结论鲍曼不动杆菌形成生物被膜后对抗菌药物的耐药性发生巨大变化,可能导致抗菌药物治疗感染的失败。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 生物被膜 玻璃试管 聚丙烯塑料 替加环素 多粘菌素 耐药性

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鲍曼不动杆菌对消毒剂耐药机制的研究 被引量：9

6

作者 蔺飞 贾旭 凌保东 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期81-89,共9页

鲍曼不动杆菌是主要的医院获得性病原菌之一。临床分离的鲍曼不动杆菌不仅对抗菌药物具有耐药性,而且对控制感染的消毒剂或杀菌剂具有耐药性。耐药表型的特点对于抗菌药物的治疗和感染控制是一个巨大的挑战。虽然消毒剂与抗菌药物相比... 鲍曼不动杆菌是主要的医院获得性病原菌之一。临床分离的鲍曼不动杆菌不仅对抗菌药物具有耐药性,而且对控制感染的消毒剂或杀菌剂具有耐药性。耐药表型的特点对于抗菌药物的治疗和感染控制是一个巨大的挑战。虽然消毒剂与抗菌药物相比往往具有不同作用方式和较高的使用浓度,但是鲍曼不动杆菌已经发展了多种机制来抵抗消毒剂的作用。因此,鲍曼不动杆菌对消毒剂的耐药一旦获得,对感染的控制是一个不利的影响。此外,已经观察到鲍曼不动杆菌对消毒剂和抗菌药物耐药性之间的联系,这是由于诸如外排泵或抗菌药物和消毒剂耐药基因共存而造成。由消毒剂和抗生素抗性的共同选择作用还有待进一步研究,但需要一个策略来优化消毒剂的使用效能和减少消毒剂耐药性的发展。本文主要就鲍曼不动杆菌消毒剂的耐药机制进行综述。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 消毒剂 耐药机制

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淋巴毒素α基因多态性与心肌梗死关系的Meta分析 被引量：3

7

作者 李亚 王伦安 贺勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期2023-2026,共4页

目的采用Meta分析系统评价淋巴毒素α(lymphotoxin-α,LTA)基因A252G、C804A多态性与心肌梗死(my-ocardial infarction,MI)的关系。方法检索PubMed和CNKI数据库(2002-2008年)中所有有关上述两种多态与MI相关性的随机病例对照研究,并用Re... 目的采用Meta分析系统评价淋巴毒素α(lymphotoxin-α,LTA)基因A252G、C804A多态性与心肌梗死(my-ocardial infarction,MI)的关系。方法检索PubMed和CNKI数据库(2002-2008年)中所有有关上述两种多态与MI相关性的随机病例对照研究,并用Revman4.2软件进行统计分析。结果共纳入9篇符合条件的文献,累计A252G多态研究例数:MI病例15809例、对照9566例;C804A多态研究人数:MI病例16356例、对照9966例。数据合并结果显示,病例与对照之间GG252/(GA252+AA252)基因型的比值比(oddsratio,OR)为1.14,95%CI:0.94-1.38(P=0.19);AA804/(AG804+GG804)基因型的OR=1.06,95%CI:0.85-1.30(P=0.62)。另外,按东西方人群分组后的分析结果也与上述结果一致(P>0.05)。结论LTA基因GG252和AA804基因型不是MI的风险因子。受纳入文献数量的限制,本Meta分析结果尚有待更多高质量的大样本研究予以进一步证实。 展开更多

关键词 心肌梗死 META分析 淋巴毒素Α

原文传递

异丙酚对大鼠脊髓缺血再灌注早期自由基和超氧化物歧化酶的影响 被引量：2

8

作者 徐贵森 杨淑霞 +1 位作者 代雪梅 刘合年 《四川医学》 CAS 2006年第3期232-233,共2页

目的研究异丙酚对大鼠脊髓缺血再灌注早期脊髓组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性变化的影响,以探讨异丙酚在抗脊髓氧化损伤中的作用。方法45只成年雄性SD大鼠采用腹主动脉肾下夹闭法造成脊髓缺血再灌注模型,观察缺血前(假... 目的研究异丙酚对大鼠脊髓缺血再灌注早期脊髓组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性变化的影响,以探讨异丙酚在抗脊髓氧化损伤中的作用。方法45只成年雄性SD大鼠采用腹主动脉肾下夹闭法造成脊髓缺血再灌注模型,观察缺血前(假手术组)、再灌注后8h(再灌注组)脊髓组织内MDA含量和SOD活性变化,并与不同剂量异丙酚组比较。结果脊髓缺血再灌注后脊髓组织MDA含量上升,SOD活性显著下降。异丙酚能抑制脊髓组织缺血再灌注后MDA上升,增强SOD活性。结论异丙酚能减轻脊髓缺血再灌注损伤。 展开更多

关键词 异丙酚 缺血再灌注 自由基 超氧化物歧化酶 动物 实验

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TWEAK蛋白对肝癌细胞增殖的影响 被引量：1

9

作者 程晓刚 陈玮 +6 位作者 陈恬 李晋川 邹强 杨淑霞 刘阳 李敏惠 白云 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期510-513,共4页

目的观察TWEAK蛋白对肝癌细胞系增殖的影响,探讨TWEAK对肝癌细胞增殖的作用。方法构建PAVU6-TWEAKsiRNA干涉质粒,转染HepG2和QGY7703肝癌细胞株,MTT法检测抑制TWEAK蛋白表达对肝癌细胞增殖的影响,并于培养体系中加入TWEAK蛋白,检测肝癌... 目的观察TWEAK蛋白对肝癌细胞系增殖的影响,探讨TWEAK对肝癌细胞增殖的作用。方法构建PAVU6-TWEAKsiRNA干涉质粒,转染HepG2和QGY7703肝癌细胞株,MTT法检测抑制TWEAK蛋白表达对肝癌细胞增殖的影响,并于培养体系中加入TWEAK蛋白,检测肝癌细胞增殖活性。结果成功构建PAVU6-TWEAKsiRNA干涉质粒,转化肝癌细胞后肝癌细胞增殖受抑。肝癌培养体系中加入TWEAK蛋白后,肝癌细胞增殖活性有所增强。结论TWEAK蛋白可促进肝癌细胞的增殖活性,抑制TWEAK表达,一定程度上可抑制肝癌细胞增殖。 展开更多

关键词 TWEAK 肝癌 RNA干涉 增殖

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流式细胞术检测细胞亚群存活率的应用研究 被引量：1

10

作者 刘阳 赖翼 +11 位作者 李敏惠 杨淑霞 郑静 阳泰 李丽梅 邓勇 张强 任荣梅 李钱梅 张帅 李华 邹强 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第2期130-131,共2页

目的采用流式细胞术直接检测小鼠脾细胞中T细胞与Treg细胞存活率,探讨流式细胞术测定混合细胞中细胞亚群存活率的可行性。方法荧光抗体及碘化丙锭联合使用,测定小鼠脾细胞中T细胞与调节性T细胞的存活率。结果使用流式细胞术测定脾细胞中... 目的采用流式细胞术直接检测小鼠脾细胞中T细胞与Treg细胞存活率,探讨流式细胞术测定混合细胞中细胞亚群存活率的可行性。方法荧光抗体及碘化丙锭联合使用,测定小鼠脾细胞中T细胞与调节性T细胞的存活率。结果使用流式细胞术测定脾细胞中T细胞存活率时,r2=0.9925,斜率为1.012;测定调节性T细胞存活率时,r2=0.9831,斜率为0.9823。结论流式细胞术可以应用于测定混合细胞中细胞亚群的存活率,为药物筛选提供新的选择。 展开更多

关键词 流式细胞术 存活率 细胞 细胞亚群

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第3～5周人胚肝的细胞特征和生长因子及其受体表达(英文) 被引量：1

11

作者 蒋吉英 李爱冬 +5 位作者 姜红心 羊惠君 魏志新 李磊 王箐 于树娜 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第37期141-143,i0006,共4页

背景:早期肝的发育与横隔间充质和原始心脏的发育在时间和空间上存在密切关系,来自原始心脏和横隔间充质的信号分子可诱导前肠内胚层细胞向肝细胞的特化,横隔间充质为肝芽的形成提供了一个适宜的环境,并可促进其生长和分化。但这一诱导... 背景:早期肝的发育与横隔间充质和原始心脏的发育在时间和空间上存在密切关系,来自原始心脏和横隔间充质的信号分子可诱导前肠内胚层细胞向肝细胞的特化,横隔间充质为肝芽的形成提供了一个适宜的环境,并可促进其生长和分化。但这一诱导过程的分子机制尚不清楚。目的:利用发育第3～5周人胚标本,选择甲胎蛋白、细胞角蛋白19、c-Met作为肝干细胞的标记物,观察早期人胚胎的发育及肝干细胞的形态特征,以明确肝干细胞的特征和影响其增殖、分化的因素,为肝干细胞的基础研究和临床应用提供实验依据。设计:开放性实验。单位:潍坊医学院人体解剖学教研室。材料:实验于2004-09/2005-01在成都医学院科研中心完成。选择2个月内流产的新鲜人胚胎标本20例,20min内用40g/L多聚甲醛固定,常规石蜡包埋、连续切片,苏木精-伊红染色,显微镜下观察,参照Jirasek的人胚发育分期标准,根据胚胎的长度、体节的数目及器官发育状况确定胚龄。方法:选择胚龄第3～5周的标本,SABC法进行免疫组织化学染色。多克隆抗肝细胞生长因子、c-Met、胰岛素样生长因子I及其受体、转化生长因子β1、转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2抗体,单克隆抗增殖细胞核抗原、甲胎蛋白和细胞角蛋白19抗体,4℃孵育过夜,羊抗兔或羊抗鼠IgG及SABC液室温下分别孵育2h,二氨基联苯胺显色。以磷酸盐缓冲液代替一抗作阴性对照。光学显微镜下观察、拍照。主要观察指标:第3～5周人胚肝干细胞的形态特征及标记物的免疫组织化学染色,肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子I及其受体在第3～5周人胚肝、原始心脏及横隔间充质细胞中的表达。结果:①第3～5周人胚肝干细胞的形态特征及标记物的免疫组织化学染色观察:第3周末肝芽形成,第4周肝芽的细胞伸入横隔间充质内形成肝索,构成肝索的细胞具有与第3周末相同的形态特点。第5周时这些细胞数量明显增加,细胞体积有所增大,胞核嗜碱性稍减弱,胞质的嗜酸性增强,但细胞的形态仍均匀一致。第3～4周时肝索的细胞呈增殖细胞核抗原的反应阴性,5周时开始出现阳性反应,主要分布在细胞核,少数细胞的胞质为弱阳性。第3～5周时多数肝索细胞都为甲胎蛋白和c-Met阳性,甲胎蛋白阳性细胞的免疫反应沉淀物在胞核、胞质及细胞膜中均存在;c-Met阳性反应主要分布于细胞核,胞质亦可见较弱的阳性反应。而这些细胞为细胞角蛋白19阴性。②肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子I及其受体在第3～5周人胚肝、原始心脏及横隔间充质细胞中的表达:发育第4周组成肝索的细胞表达c-Met,而不表达其他的因子或受体。第5周时,除了肝细胞生长因子以外的其他因子均在肝索细胞表达。转化生长因子β1及其受体转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2的免疫反应沉淀物主要存在于细胞质和细胞膜,胰岛素样生长因子I及其受体的阳性反应在细胞核、细胞质以及细细胞膜均可见。第3～5周时,肝芽或肝索周围的心肌细胞和间充质细胞呈肝细胞生长因子、转化生长因子β1、胰岛素样生长因子I免疫反应阳性,阳性信号主要聚集在细胞质,少数胞核亦有阳性。结论:①人胚胎发育的第3周末,前肠腹侧的部分内胚层细胞特化为肝干细胞。②发育第3～5周人胚肝的细胞为未分化的肝干细胞,若拟研究人胚肝干细胞,此时取材、并利用肝干细胞特异性的标记物,可得到具有双向分化潜能的肝干细胞。对于鼠胚肝干细胞的研究,也可利用人、鼠胚龄的对应关系,推算出其肝干细胞存在的时间、从而决定取材的时间点。③肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子I、转化生长因子β1等生长因子促进早期人胚肝的发育。 展开更多

关键词 干细胞 肝 胚胎 肝细胞生长因子

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人胚早期心脏发育过程中VEGF及其受体的表达 被引量：1

12

作者 于振海 李爱冬 +2 位作者 杨淑霞 洪华容 羊惠君 《四川解剖学杂志》 2005年第4期1-4,共4页

目的观察人胚早期心脏VEGF-A和VEGF-C及其受体VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3的表达变化,探讨VEGF-A和VEGF-C在早期心脏发育过程中的作用.方法收集第3～8周人胚,石蜡切片,免疫组化染色,光镜观察,分析心脏组织发育中VEGF家族及其相关受体的... 目的观察人胚早期心脏VEGF-A和VEGF-C及其受体VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3的表达变化,探讨VEGF-A和VEGF-C在早期心脏发育过程中的作用.方法收集第3～8周人胚,石蜡切片,免疫组化染色,光镜观察,分析心脏组织发育中VEGF家族及其相关受体的表达变化、心脏组织的分化和形成.结果VEGF-A、VEGF-C、VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3在心内膜内皮细胞及心肌细胞发育第3、4周开始表达,随胎龄增加表达先增强后逐渐减弱,第7周左右消失.结论VEGF-A和VEGF-C参与了人胚早期心脏的形成过程,对早期心脏发育发挥了一定的作用. 展开更多

关键词 人胚 心脏发育 VEGF-A VEGF-C 受体

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差异表达基因分离技术研究进展 被引量：1

13

作者 刘阳 赖翼 李敏惠 《技术与市场》 2006年第02A期59-60,共2页

研究不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下(正常状态、发育、衰老、损伤及疾病)差异基因的表达状况,将有助于了解调控细胞分化的机制,为分析生命活动过程提供重要信息。而分离与克隆差异表达的基因是了解这些生命过程的基... 研究不同细胞或同类细胞在不同发育阶段、不同生理状态下(正常状态、发育、衰老、损伤及疾病)差异基因的表达状况,将有助于了解调控细胞分化的机制,为分析生命活动过程提供重要信息。而分离与克隆差异表达的基因是了解这些生命过程的基础。1990年以来,出现了mRNA差异显示技术、代表性差异分析、抑制性削减杂交、cDNA微阵列技术等多种分离差异表达基因的手段,本文对以上方法的优缺点、发展趋势及其应用前景作了简要综述。 展开更多

关键词 差异表达基因 MRNA差异显示技术 代表性差异分析 抑制性削减杂交 cDNA微阵列技术

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异丙酚预处理对再灌注脊髓自由基和超氧化物歧化酶的影响

14

作者 徐贵森 刘合年 +2 位作者 杨淑霞 代雪梅 刘英海 《西南国防医药》 CAS 2006年第3期250-252,共3页

目的:研究异丙酚预处理对脊髓缺血再灌注早期脊髓组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性变化的影响,以探讨异丙酚在抗脊髓继发性损伤中的作用。方法:54只成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、再灌注组和异丙酚组,再灌注组和异... 目的:研究异丙酚预处理对脊髓缺血再灌注早期脊髓组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性变化的影响,以探讨异丙酚在抗脊髓继发性损伤中的作用。方法:54只成年雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、再灌注组和异丙酚组,再灌注组和异丙酚组又各分1 h、4 h、8 h、16 h4个观察时相点组(各组n=6)。除假手术组外,所有动物均采用腹主动脉肾下夹闭法造成脊髓缺血再灌注模型,观察各组脊髓组织内MDA含量和SOD活性。结果:脊髓缺血再灌注后脊髓组织MDA立即上升,8 h达最高峰,此后随之下降,但至16 h仍高于正常对照组:而SOD活性显著下降,8 h达最低, 随后逐渐回升,至16 h仍低于缺血前。与再灌注组比较,异丙酚组各时相点MDA含量降低,SOD活性增强。结论:异丙酚预处理对脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 异丙酚 缺血再灌注 自由基 超氧化物歧化酶 预处理

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斑马鱼rnf141基因结构与表达分析

15

作者 李亚 王伦安 +3 位作者 王玉明 杨平 潘克俭 黄明孔 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期967-970,共4页

目的:探讨斑马鱼rnf141基因在物种间进化以及在斑马鱼胚胎发育和成体中表达分布特点。方法:采用生物信息学方法分析斑马鱼rnf141基因结构特征;运用胚胎整体原位杂交和多组织RT-PCR技术分别检测斑马鱼胚胎发育不同阶段和成体各组织rnf14... 目的:探讨斑马鱼rnf141基因在物种间进化以及在斑马鱼胚胎发育和成体中表达分布特点。方法:采用生物信息学方法分析斑马鱼rnf141基因结构特征;运用胚胎整体原位杂交和多组织RT-PCR技术分别检测斑马鱼胚胎发育不同阶段和成体各组织rnf141基因表达情况。结果:斑马鱼RNF141蛋白与人类和小鼠同源蛋白(ZNF230、Znf230)分别具有79.8%、78.5%的同源性,其中C3HC4型锌指结构域及其保守的半胱氨酸和组氨酸残基组成与人类(或小鼠)的同源性分别为84.8%、100%;而且,斑马鱼RNF141蛋白与人类ZNF230蛋白在C3HC4型锌指区域具有完全相同的二级结构。杂交结果显示,rnf141基因在斑马鱼胚胎中广泛表达,尤以端脑、小脑和后脑表达丰度为高。RT-PCR结果表明,rnf141基因在受检的成体组织中均有表达,但在睾丸组织中表达丰度较高。结论:斑马鱼rnf141基因为脊椎动物保守基因,并可能在胚胎发育和精子发生过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 斑马鱼 rnf141基因 整体原位杂交

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利用流式监控高质量小鼠脾细胞的制备

16

作者 李敏惠 刘阳 +6 位作者 杨平 郑静 杨淑霞 阳泰 张露 邹强 李华 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第2期136-137,140,共3页

目的流式技术监控小鼠脾细胞裂解过程,在确保脾淋巴细胞高活力的同时,充分裂解其中的红细胞。方法以流式细胞术监控ACK和Tris-NH4Cl两种红细胞裂解液的裂解效果,通过细胞融合率判断淋巴细胞活力。结果结合FSC和PI荧光强度分析,在确保淋... 目的流式技术监控小鼠脾细胞裂解过程,在确保脾淋巴细胞高活力的同时,充分裂解其中的红细胞。方法以流式细胞术监控ACK和Tris-NH4Cl两种红细胞裂解液的裂解效果,通过细胞融合率判断淋巴细胞活力。结果结合FSC和PI荧光强度分析,在确保淋巴细胞相对存活率大于或等于90%的前提下,ACK处理0.5～1min即可去除90%以上的红细胞,Tris-NH4Cl处理10min也可去除82%的红细胞,获得的淋巴细胞的融合效率为85%～90%。结论流式细胞术能够实时监控ACK和Tris-NH4Cl的裂解过程,获得高质量的脾淋巴细胞以适用于杂交瘤细胞的制备。 展开更多

关键词 流式细胞术 细胞融合 红细胞裂解液

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核糖体停靠与抗生素耐药 被引量：5

17

作者 郑薇 凌保东 +1 位作者 贾旭 李显志 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期161-170,共10页

蛋白质在核糖体的合成受多个分子层面的精细调控,包括核糖体停靠(ribosome stalling,亦称为核糖体延宕)机制,即核糖体可与tRNA及氨基酸、肽或其它化合物如抗生素持久结合形成复合物,使核糖体停靠在正在转录的前导肽mRNA的开放阅读框内,... 蛋白质在核糖体的合成受多个分子层面的精细调控,包括核糖体停靠(ribosome stalling,亦称为核糖体延宕)机制,即核糖体可与tRNA及氨基酸、肽或其它化合物如抗生素持久结合形成复合物,使核糖体停靠在正在转录的前导肽mRNA的开放阅读框内,并促使前导肽下游未翻译结构基因如耐药基因mRNA的表达。核糖体停靠需要前导肽参与,可分为非抗生素依赖和抗生素依赖两种类型,后者诱导多种作用于核糖体靶位抗生素(如大环内酯类、氯霉素类及四环素类等)的耐药性形成。对大环内酯类介导的核糖体停靠已有深入了解,这些研究有助于了解抗生素耐药机制及进化,并从干扰蛋白质表达的角度探索控制耐药性和研发新型抗菌化合物。本文也讨论了影响蛋白质表达的核糖体拯救(ribosme rescue)和核糖开关(riboswitch)机制。 展开更多

关键词 抗生素耐药 核糖体停靠(核糖体延宕) 核糖体拯救 核糖开关 前导肽

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伪石蒜碱抑制活化T细胞增殖与功能的机制研究

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作者 吴利红 邓弘仙 +7 位作者 张云惠 黄玲 范诗逸 蒋海静 赖翼 罗兴燕 刘阳 杨淑霞 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期1818-1824,共7页

目的探究伪石蒜碱抑制活化T细胞增殖与功能的机制。方法密度梯度离心法和免疫磁珠法分离纯化T细胞,抗CD3/CD28或植物凝集素(phytohemagglutinin,PHA)活化T细胞。流式细胞术检测细胞增殖、细胞凋亡、CD25表达及细胞周期;ELISA检测细胞因... 目的探究伪石蒜碱抑制活化T细胞增殖与功能的机制。方法密度梯度离心法和免疫磁珠法分离纯化T细胞,抗CD3/CD28或植物凝集素(phytohemagglutinin,PHA)活化T细胞。流式细胞术检测细胞增殖、细胞凋亡、CD25表达及细胞周期;ELISA检测细胞因子IL-2、IL-6、IL-17A、IFN-γ的分泌水平。结果伪石蒜碱抑制抗CD3/CD28或PHA活化T细胞增殖,IC50分别为(0.97±0.22)μmol·L-1和(0.82±0.07)μmol·L-1。在完全抑制活化T细胞增殖的浓度下,伪石蒜碱不诱导活化T细胞凋亡,且不对静息T细胞的细胞活力产生显著影响。伪石蒜碱不影响活化T细胞表达CD25和分泌IL-2,但阻滞细胞周期于G0/G1期。伪石蒜碱显著抑制IL-6、IL-17A、IFN-γ的分泌。结论伪石蒜碱不影响T细胞的活化,但通过阻滞细胞周期于G0/G1期抑制活化T细胞的增殖,提示伪石蒜碱有望成为先导化合物用于开发新型免疫抑制剂。 展开更多

关键词 免疫抑制剂 T细胞增殖 伪石蒜碱 细胞因子

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