重组人热休克蛋白70生物活性的快速鉴定 被引量：1

1

作者 杨瑞 杨献军 +2 位作者 田玉慧 岳汉军 王辉 《新乡医学院学报》 CAS 2002年第1期29-30,33,共3页

目的　快速鉴定纯化后的重组人热休克蛋白 70 (rHSP70 )的特异性及其是否具有生物活性。方法　将rHSP70与肿瘤细胞内的小分子多肽在一定条件下温育 ,并利用含 5 %甘油的Nativepage电泳分析。 结果　可快速鉴定出rHSP70是否具有生物活性 ... 目的　快速鉴定纯化后的重组人热休克蛋白 70 (rHSP70 )的特异性及其是否具有生物活性。方法　将rHSP70与肿瘤细胞内的小分子多肽在一定条件下温育 ,并利用含 5 %甘油的Nativepage电泳分析。 结果　可快速鉴定出rHSP70是否具有生物活性 ,电泳后凝胶可做Western -blot特异性鉴定。结论　该法操作简便 ,重复性好 ,既可快速鉴定rhsp70的生物活性 。 展开更多

关键词 重组人热休克蛋白70 抗原肽 非变性凝胶电脉 生物活性

下载PDF 职称材料

大豆异黄酮和钙对大鼠成骨细胞增殖分化和矿化的作用 被引量：4

2

作者 田玉慧 杨献军 +2 位作者 李万里 杨瑞 岳汉军 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期361-362,401,共3页

为探讨大豆异黄酮和钙对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和矿化的作用 ,体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮和葡萄糖酸钙对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 ... 为探讨大豆异黄酮和钙对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和矿化的作用 ,体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮和葡萄糖酸钙对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响。结果单纯补钙组大鼠成骨细胞增殖、分化和矿化无显著促进作用。大豆异黄酮可显著地促进成骨细胞的增殖和分化 ,并促使成骨细胞形成矿化结节 ,而补充大豆异黄酮同时补钙可使矿化结节团块增大。大豆异黄酮可以提高成骨细胞的增殖和分化 。 展开更多

关键词 大豆异黄酮 钙 骨质疏松 成骨细胞 细胞增殖 细胞矿化

下载PDF 职称材料

大豆异黄酮对成骨细胞转化生长因子-β_1及其受体Ⅰ、Ⅱ的影响 被引量：5

3

作者 李万里 田玉慧 +1 位作者 杨献军 沈关心 《中医药学刊》 CAS 2004年第1期47-48,共2页

目的 :探讨大豆异黄酮对成骨细胞的TGF -β信号转导系统的影响。方法 :制作新生大鼠颅骨成骨细胞体外培养模型 ,在第三代成骨细胞培养液中添加大豆异黄酮 ,通过免疫组化方法观察大豆异黄酮对成骨细胞中转化生长因子 -β1 及其受体Ⅰ、... 目的 :探讨大豆异黄酮对成骨细胞的TGF -β信号转导系统的影响。方法 :制作新生大鼠颅骨成骨细胞体外培养模型 ,在第三代成骨细胞培养液中添加大豆异黄酮 ,通过免疫组化方法观察大豆异黄酮对成骨细胞中转化生长因子 -β1 及其受体Ⅰ、Ⅱ表达的影响。用HPIAS0 0 0图像分析仪对各组表达进行定量分析。结果 :免疫组织化学染色显示 ,大豆异黄酮培养的大鼠第三代成骨细胞中转化生长因子 -β1 及其受体Ⅰ、Ⅱ呈阳性表达 ,阳性细胞胞浆出现棕黄色颗粒。图像分析显示大豆异黄酮组的TGF -β1 、TGF -βR1、TGF -βR2平均光密度都显著高于阴性对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :在成骨细胞形成中 ,大豆异黄酮对TGF-β1 及其TGF -βR1、TGF -βR2受体信号传导系统有显著促进作用。 展开更多

关键词 大豆 异黄酮 成骨细胞 TGF-β1 TGF-Β受体 转化生长因子-Β 信号转导系统

下载PDF 职称材料

大豆异黄酮对成骨细胞生长因子表达的影响 被引量：5

4

作者 田玉慧 李万里 +2 位作者 杨献军 杨瑞 岳汉军 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1438-1439,共2页

目的　探讨大豆异黄酮对成骨细胞胰岛素样生长因子 -1(IGF -1)表达的影响。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用塞唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮对成骨细胞的增殖作用 ,过氧化物酶标记的链霉卵白素(SP)免疫组织化学染色试剂盒检测... 目的　探讨大豆异黄酮对成骨细胞胰岛素样生长因子 -1(IGF -1)表达的影响。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用塞唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮对成骨细胞的增殖作用 ,过氧化物酶标记的链霉卵白素(SP)免疫组织化学染色试剂盒检测IGF -1抗体表达 ,用原位杂交方法检测IGF -1mRNA基因表达 ,用HPIAS -10 0 0图象分析仪对各组表达进行定量分析。结果　大豆异黄酮培养的大鼠第 3代成骨细胞的IGF -1抗体和IGF -1mRNA呈阳性表达 ,并显著高于阴性对照组 (P <0 0 5) ,阳性细胞胞浆呈棕黄色阳性表达。结论　大豆异黄酮可通过促进大鼠成骨细胞IGF -1分泌而影响成骨细胞形成。 展开更多

关键词 大豆异黄酮 成骨细胞 胰岛素样生长因子(IGF-1)

下载PDF 职称材料

麦胚提取物对大鼠成骨细胞增殖分化和矿化的影响 被引量：2

5

作者 田玉慧 崔艳燕 +2 位作者 杨献军 杨瑞 岳汉军 《新乡医学院学报》 CAS 2002年第4期242-244,共3页

目的　探讨麦胚提取物对骨质疏松症的防治作用。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑蓝 (MTT)法测定麦胚提取物对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,茜素红染色方法 (ARS)... 目的　探讨麦胚提取物对骨质疏松症的防治作用。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑蓝 (MTT)法测定麦胚提取物对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响。结果　 0 10 g·L-1的麦胚提取物可以促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖和分化作用 ,0 5 0g·L-1促使成骨细胞矿化结节的形成。结论　麦胚提取物可以提高成骨细胞的增殖和分化 。 展开更多

关键词 麦胚提取物 大鼠 成骨细胞 增殖分化 矿化 骨质疏松症

下载PDF 职称材料

提高基因工程中重组蛋白质表达效率及可溶性产物的一种新方法 被引量：6

6

作者 杨瑞 王淑秀 +1 位作者 陈正跃 秦川 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第29期92-93,共2页

目的:建立一种使基因工程中重组蛋白质高效表达并提高可溶性比率的新方法。方法:2002-09/2005-03在新乡医学院分子生物研究室用不含葡萄糖的M9ZB培养基分别培养转化过的含Tac启动子或T7启动子的工程菌,采用终浓度为0.02mmol/L的IPTG及5m... 目的:建立一种使基因工程中重组蛋白质高效表达并提高可溶性比率的新方法。方法:2002-09/2005-03在新乡医学院分子生物研究室用不含葡萄糖的M9ZB培养基分别培养转化过的含Tac启动子或T7启动子的工程菌,采用终浓度为0.02mmol/L的IPTG及5mmol/L的乳糖进行诱导。采用SDS-PAGE及岛津薄层扫描分析仪进行表达效率检测、蛋白可溶性的扫描分析。结果:用常规方法(1mmol/LIPTG,LB培养基)诱导,重组基因的表达效率不高,表达量占菌体总蛋白25%,且可溶性产物比例较低,占表达蛋白的20%,采用0.02mmol/L的IPTG及5mmol/L乳糖诱导后重组蛋白表达效率占菌体总蛋白的65%,可溶性产物比例亦大幅升高占表达蛋白90%～93%,此方法没有选择性,对T7启动子表达系统和Tac启动子表达系统均有效。结论:采用0.02mmol/L的IPTG及5mmol/L乳糖诱导后,不仅使含Tac启动子或T7启动子的表达系统中重组蛋白表达增加而且产物可溶性升高。 展开更多

关键词 基因 基因表达 重组蛋白质类

下载PDF 职称材料

同型半胱氨酸通过核因子κB途径诱导人内皮细胞表达RANTESmRNA和蛋白的表达 被引量：4

7

作者 王淑秀 杨瑞 郭晓静 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第45期88-90,I0007,共4页

目的:观察同型半胱氨酸诱导培养人脐静脉内皮细胞表达RANTESmRNA及蛋白,并分析其机制。方法:实验于2004-11/2005-11在新乡医学院分子生物研究室完成。①采用酶消化法分离脐静脉内皮细胞。②当脐静脉内皮细胞生长至汇合状态时,随机分为... 目的:观察同型半胱氨酸诱导培养人脐静脉内皮细胞表达RANTESmRNA及蛋白,并分析其机制。方法:实验于2004-11/2005-11在新乡医学院分子生物研究室完成。①采用酶消化法分离脐静脉内皮细胞。②当脐静脉内皮细胞生长至汇合状态时,随机分为对照组、同型半胱氨酸组和二硫代氨基甲酸吡咯烷预处理组。对照组用无血清培养基、同型半胱氨酸组用含0.1mmol/L同型半胱氨酸的无血清培养基培养,分别孵育8h;二硫代氨基甲酸吡咯烷预处理组用含100μmol/L二硫代氨基甲酸吡咯烷的无血清培养基培养20min后,再加入0.1mmol/L的同型半胱氨酸孵育8h。③采用斑点杂交检测脐静脉内皮细胞中RANTESmRNA的表达。④采用Westernblot检测脐静脉内皮细胞中RANTES蛋白的表达。⑤用免疫细胞化学方法检测正常对照组和同型半胱氨酸组核因子κBP65蛋白的表达。结果:①脐静脉内皮细胞中RANTESmRNA的表达:图像分析显示,同型半胱氨酸组、二硫代氨基甲酸吡咯烷预处理组的积分吸光度值分别为18790和16420,分别为对照组(积分吸光度值为12680)的1.48倍和1.29倍。②脐静脉内皮细胞中RANTES蛋白的表达:图像分析显示,同型半胱氨酸组RANTES蛋白印迹条带的积分吸光度值为0.7942,而二硫代氨基甲酸吡咯烷预处理组的积分吸光度值为0.5013,分别是对照组(0.2930)的2.72倍和1.72倍。③脐静脉内皮细胞中核因子κBP65蛋白的表达:在对照组脐静脉内皮细胞中,核因子κBP65蛋白的表达以细胞质为主;同型半胱氨酸刺激后,细胞核染色的阳性率明显增加,由对照组的8.3%上升到43.5%(P<0.01)。结论:同型半胱氨酸能诱导人脐静脉内皮细胞表达RANTESmRNA和蛋白,核因子κB可能参与了该过程。同型半胱氨酸可能通过诱导内皮细胞表达RANTES在动脉粥样硬化形成中起作用。 展开更多

关键词 高半胱氨酸 RANTES 内皮 血管 动脉硬化

下载PDF 职称材料

建立序列特异性引物PCR检测儿茶酚胺氧位转移酶与单胺氧化酶基因多态性的方法 被引量：3

8

作者 杨瑞 杨献军 +1 位作者 秦川 刘峻 《新乡医学院学报》 CAS 2005年第3期192-194,共3页

目的建立用PCR-SSP检测儿茶酚胺氧位转移酶(COMT)与单胺氧化酶(MAOA)的基因多态性的方法。方法根据COMT与MAOA的基因序列,采用针对变异位点的点突变方式设计出顺序特异性引物(SSP)进行PCR扩增,并借助常规电泳确定基因型。结果用PCR-SSP... 目的建立用PCR-SSP检测儿茶酚胺氧位转移酶(COMT)与单胺氧化酶(MAOA)的基因多态性的方法。方法根据COMT与MAOA的基因序列,采用针对变异位点的点突变方式设计出顺序特异性引物(SSP)进行PCR扩增,并借助常规电泳确定基因型。结果用PCR-SSP来研究COMT与MAOA基因多态性的方法特异性强,重复性好,而且简便、经济、快速。结论PCR-SSP可对具有单核苷酸突变的基因分型,应用前景良好。 展开更多

关键词 序列特异性引物 多聚酶链反应 基因多态性

下载PDF 职称材料

人结核杆菌HSP70原核表达质粒的构建及其抗肿瘤效应 被引量：2

9

作者 杨瑞 陈正跃 王淑秀 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期627-629,共3页

目的构建可在大肠杆菌中表达编码人结核杆菌(TB)热休克蛋白70(HSP70)基因的表达质粒,并经纯化后研究重组蛋白rHSP70抗肿瘤效应。方法采用基因工程技术将HSP70基因经PCR及末端修饰后装入大肠杆菌质粒pRSET-B中,构建成新的重组质粒pMT70-... 目的构建可在大肠杆菌中表达编码人结核杆菌(TB)热休克蛋白70(HSP70)基因的表达质粒,并经纯化后研究重组蛋白rHSP70抗肿瘤效应。方法采用基因工程技术将HSP70基因经PCR及末端修饰后装入大肠杆菌质粒pRSET-B中,构建成新的重组质粒pMT70-3。诱导表达纯化后经Western-blot、抗原肽结合试验、native-page鉴定,在有ADP、MgCl2存在时利用重组人 TB的HSP70与小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210的上清于37℃温育形成HSP70-肿瘤抗原肽复合物,以此作为抗原进行体内肿瘤免疫保护试验。结果 HSP70基因的表达质粒构建成功,其产物人TB rHSP70经纯化后具有生物活性。实验动物的腹水量较对照组下降,表明该复合物可引起一定的免疫保护反应(与对照组比较P<0．05)。结论人TB rHSP70-肿瘤抗原肽复合物免疫刺激后可使小鼠产生针对同种肿瘤的强烈免疫作用,与其剂量有一定的相关性。人TB HSP70不仅可起到免疫佐剂的作用,且肿瘤抗原肽复合物也起到一定的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 结核杆菌 原核质粒 热休克蛋白70 抗原肽 肿瘤

下载PDF 职称材料

人结核分支杆菌HSP70的原核表达质粒的构建及诱导表达 被引量：1

10

作者 杨瑞 田玉慧 +1 位作者 高革 杨献军 《新乡医学院学报》 CAS 2002年第5期355-359,共5页

目的　构建编码人结核分支杆菌 (TB)热休克蛋白 70 (HSP70 )的Dnak基因的重组原核表达质粒 ,并研究其表达动力学。方法　质粒pMT70用限制性内切酶消化、核酸体外扩增 (PCR)及末端修饰后可获得Dnak基因全长 ,与大肠杆菌质粒 pRSET连接重... 目的　构建编码人结核分支杆菌 (TB)热休克蛋白 70 (HSP70 )的Dnak基因的重组原核表达质粒 ,并研究其表达动力学。方法　质粒pMT70用限制性内切酶消化、核酸体外扩增 (PCR)及末端修饰后可获得Dnak基因全长 ,与大肠杆菌质粒 pRSET连接重组 ,阳性克隆经酶切分析鉴定后即为质粒 pMT70 3,转入受体菌BL2 1DE3中 ,经诱导剂异丙基硫代 - β -D-半乳糖 (IPTG)诱导 ,由SDS -PAGE、Western -blot鉴定 ,并以薄层扫描分析。结果　重组表达质粒 pMT70 3构建成功 ,可在大肠杆菌中高效表达 ,诱导后 1h即开始表达 ,16h达高峰期。表达量占菌体总蛋白的 6 5 % ,可溶性产物占总表达量的 90 %。结论　pMT70 3质粒不仅构建成功且更有利于对分支杆菌HSP70蛋白的纯化 ,方便对其抗结核。 展开更多

关键词 结核分支杆菌 原核表达 热休克蛋白70 质粒 核酸体外扩增 限制性内切酶

下载PDF 职称材料

用序列特异性引物多聚酶链反应的方法进行大样本、多基因的多态性鉴定 被引量：1

11

作者 杨瑞 王淑秀 +1 位作者 秦川 杨献军 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期321-324,共4页

目的:建立多个基因同时进行多态性分析的序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以满足其在临床检验中进行基因多态性鉴定时的应用。方法:实验于2005-10/2006-05于河南省新乡医学院分子生物研究室完成。进行临床普通血液常规检测的患者血样... 目的:建立多个基因同时进行多态性分析的序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以满足其在临床检验中进行基因多态性鉴定时的应用。方法:实验于2005-10/2006-05于河南省新乡医学院分子生物研究室完成。进行临床普通血液常规检测的患者血样200份(由新乡医学院第三附属医院提供),采用临床血样,提取DNA后采用多聚酶链反应扩增,并以扩增后的样品进行琼脂糖凝胶电泳,以是否出现相应的扩增条带作为基因分型的标准。应用优化后的序列特异性引物多聚酶链反应的方法分析以下基因的多态性:肿瘤坏死因子α-308A/G和-238G/A变异、白细胞介素6-174G/C变异、细胞色素P4502D6(CYP2D6)*10B外显子第188位的C/T变异。并由此优化序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以达到应用同一个多聚酶链反应扩增程序,可同时对多个基因、多个临床样本的基因多态性同时进行分析,且基因型清晰,分型快速、准确。结果:①用20 g/L的琼脂糖凝胶电泳可看到每泳道内可有2条或1条扩增产物,其中阳性对照β珠蛋白基因的扩增片段长268 bp,此条带可以出现、减弱或者不出现。②其中肿瘤坏死因子α-308A/G存在G/G和A/G两种基因型;肿瘤坏死因子α-238G/A位点可检测到的基因型有G/A、G/G和A/A3型;白细胞介素6-174G/C变异位点可检测到的基因型均为G/G纯合子;细胞色素P4502D6*10B外显子第188位的C/T位点可检测到的基因型为C/C、C/T、T/T3型。结论:优化后的序列特异性引物多聚酶链反应适合对大样本,多个基因的单核苷酸位点变异进行多态性分析,快速、准确、成本低。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 多态性 单核苷酸 基因 变异(遗传学)

下载PDF 职称材料

甲泼尼龙对幼鼠心肌缺血再灌注损伤免疫反应的抑制作用 被引量：1

12

作者 张艳芳 杨瑞 +2 位作者 张俊河 杨廷桐 李磊 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期61-62,共2页

目的探讨甲泼尼龙对幼年大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)血清IL-1、8、10水平的影响,探讨其对心肌的保护作用。方法70只健康清洁级2～4周龄大鼠随机分为3组:对照组10只,模型和药物组各30只。后二组又分为缺血0.5h,再灌注2、4、8、12、24h... 目的探讨甲泼尼龙对幼年大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)血清IL-1、8、10水平的影响,探讨其对心肌的保护作用。方法70只健康清洁级2～4周龄大鼠随机分为3组:对照组10只,模型和药物组各30只。后二组又分为缺血0.5h,再灌注2、4、8、12、24h共6个亚组(各5只),对照组只取12h一个时相点作总体对照。建立MIRI模型,比较各组心肌形态学变化,检测其血清IL-1、8、10的动态表达。采用SPSS10.0软件进行统计学分析。结果光镜下,对照组心肌细胞无变化;模型组有炎性细胞浸润及心肌细胞变化坏死,并随再灌注时段的延长而加重;药物组各时段炎性反应及心肌细胞变性坏死程度均明显轻于模型组。模型与药物组比较心肌炎性反应明显减弱,同一时相点IL-1、8的表达显著降低(Pa<0.05),IL-10表达升高且峰值提前至缺血再灌注8h。结论适当应用甲泼尼龙可通过抑制IL-1、8及促进IL-10的分泌而起到保护缺血心肌的作用。 展开更多

关键词 心肌缺血再灌注损伤 炎性反应 白细胞介素 甲泼尼龙

下载PDF 职称材料

大豆异黄酮与大鼠成骨细胞BMP_2PCR产物表达 被引量：1

13

作者 李万里 余冰 +2 位作者 田玉慧 杨献军 沈关心 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期561-562,共2页

目的探讨大豆异黄酮对体外培养大鼠成骨细胞骨形态发生蛋白2(BMP2)表达的影响。方法制作新生大鼠颅骨成骨细胞体外培养模型,用不同浓度的大豆异黄酮刺激分离培养的大鼠成骨细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR扩增BMP2基因cDNA,同时扩增β-actin ... 目的探讨大豆异黄酮对体外培养大鼠成骨细胞骨形态发生蛋白2(BMP2)表达的影响。方法制作新生大鼠颅骨成骨细胞体外培养模型,用不同浓度的大豆异黄酮刺激分离培养的大鼠成骨细胞,提取细胞总RNA,RT-PCR扩增BMP2基因cDNA,同时扩增β-actin cDNA作为内对照,扫描RCR产物电泳照片,计算BMP-2/β-actincDNA的积分吸光度比值,推算BMP2基因相对表达水平;并通过免疫组化方法观察成骨细胞BMP2的表达,用HPIAS-2000图象分析仪对各组表达进行定量分析。结果大豆异黄酮增加体外培养成骨细胞BMP2的水平,并且在基因转录水平促进大鼠成骨细胞BMP2表达,呈剂量-效应关系(P<0.01)。结论大豆异黄酮对成骨细胞形成BMP2表达有显著促进作用。提示大豆异黄酮促进成骨细胞增殖、分化的作用可能与通过增加BMP2基因的表达有关。 展开更多

关键词 大豆异黄酮 成骨细胞 BMP2

下载PDF 职称材料

序列特异性引物多聚酶链反应方法进行大样本多基因的多态性鉴定(英文) 被引量：1

14

作者 王淑秀 张艳芳 +2 位作者 杨献军 秦川 杨瑞 《新乡医学院学报》 CAS 2007年第4期325-328,共4页

目的建立多个基因同时进行多态性分析的序列特异性引物多聚酶链反应(PCR-SSP)方法,以满足其在临床检验中进行基因多态性鉴定时的应用。方法应用优化后的PCR-SSP的方法分析以下基因的多态性:TNF-α-308A/G和-238G/A变异、IL-6-174G/C变异... 目的建立多个基因同时进行多态性分析的序列特异性引物多聚酶链反应(PCR-SSP)方法,以满足其在临床检验中进行基因多态性鉴定时的应用。方法应用优化后的PCR-SSP的方法分析以下基因的多态性:TNF-α-308A/G和-238G/A变异、IL-6-174G/C变异、CYP2D6*10B外显子第188位的C/T变异。结果应用同一个PCR扩增程序,可同时对多个基因、多个临床样本的基因多态性同时进行分析,基因型清晰,而且基因分型快速、准确。结论优化后的PCR-SSP适合对大样本、多个基因的单核苷酸位点变异进行多态性分析,值得在临床检验的应用中推广。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 顺序特异性引物 基因多态性

下载PDF 职称材料

麦胚提取物对成骨细胞TGF-β_1和IGF-1表达的影响

15

作者 田玉慧 杨瑞 +4 位作者 李万里 祝振富 杨献军 岳汉军 艾淑娟 《新乡医学院学报》 CAS 2003年第2期80-82,共3页

目的　通过研究成骨细胞中转化生长因子 (TGF) - β1 和胰岛素样生长因子(IGF) - 1的表达 ,进一步探讨麦胚乙醇提取物对大鼠成骨细胞的作用机理。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,用免疫组化方法测定成骨细胞中TGF β1 和IGF 1的... 目的　通过研究成骨细胞中转化生长因子 (TGF) - β1 和胰岛素样生长因子(IGF) - 1的表达 ,进一步探讨麦胚乙醇提取物对大鼠成骨细胞的作用机理。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,用免疫组化方法测定成骨细胞中TGF β1 和IGF 1的表达情况 ,用HPIAS - 1 0 0 0图象分析仪对各组表达进行定量分析。结果　麦胚提取物培养的大鼠第 3代成骨细胞的TGF β1 和IGF 1呈阳性表达 ,麦胚提取物组的TGF - β1 和IGF 1平均光密度都显著高于阴性对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ,但与阳性对照组比较无显著差异 (P >0 .0 5)。结论　麦胚乙醇提取物可增强新生大鼠成骨细胞TGF β1 和IGF 展开更多

关键词 麦胚提取物 成骨细胞 转化生长因子-Β1 胰岛素生长因子-1 免疫组织化学

下载PDF 职称材料

热休克诱导艾氏腹水癌细胞的抗肿瘤效应

16

作者 杨瑞 祁玉霞 +1 位作者 杨献军 陈正跃 《新乡医学院学报》 CAS 2006年第2期128-129,共2页

目的研究热休克后的肿瘤细胞内多种热休克蛋白(HSP)的抗肿瘤效果及其作用机理。方法应用丝裂霉素C(MMC)灭活经43℃热休克2 h或14 h的小鼠艾氏腹水癌细胞(EAC),以此作抗原进行体内肿瘤免疫保护试验及小鼠淋巴细胞体外肿瘤杀伤实验。结果... 目的研究热休克后的肿瘤细胞内多种热休克蛋白(HSP)的抗肿瘤效果及其作用机理。方法应用丝裂霉素C(MMC)灭活经43℃热休克2 h或14 h的小鼠艾氏腹水癌细胞(EAC),以此作抗原进行体内肿瘤免疫保护试验及小鼠淋巴细胞体外肿瘤杀伤实验。结果经43℃热休克2 h或14 h的EAC细胞攻击后,小鼠淋巴细胞对EAC细胞杀伤率分别为67.6%、80.6%,与对照组比较均有显著性差异(P<0.05,P<0.01);腹水生成量明显低于对照组(P<0.05)。结论热休克后的EAC细胞内的HSPs表达增多,并随热休克时间的延长而增加,其免疫效果也相应增强与多种HSPs的联合作用有关。 展开更多

关键词 艾氏腹水癌 热休克蛋白 抗肿瘤

下载PDF 职称材料

食管鳞癌组织中P-选择素和缺氧诱导因子1α的表达及其临床意义

17

作者 王淑秀 杨瑞 李娜 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2006年第7期867-869,共3页

目的:探讨P-选择素和缺氧诱导因子1((Hypox ia-inducib le factor 1,αH IF-1α)在食管鳞癌中的表达及其与食管癌临床生物学行为的关系。方法:采用SP免疫组化法检测10例正常食管粘膜和60例食管鳞癌组织中P-选择素和H IF-1α蛋白的表达,... 目的:探讨P-选择素和缺氧诱导因子1((Hypox ia-inducib le factor 1,αH IF-1α)在食管鳞癌中的表达及其与食管癌临床生物学行为的关系。方法:采用SP免疫组化法检测10例正常食管粘膜和60例食管鳞癌组织中P-选择素和H IF-1α蛋白的表达,并分析其相关性。结果:P-选择素在正常食管粘膜的阳性表达率为40.00%,在鳞癌组织中为66.67%,二者无显著性差异。P-选择素在低分化食管鳞癌中的阳性表达率(87.50%)显著高于高/中分化组(59.09%),在浸润至全层的阳性率(83.33%)显著高于浸润至肌层组(55.55%),在淋巴结转移阳性组的阳性率(82.61%)显著高于淋巴结转移阴性组(56.76%)。H IF-1α在正常食管粘膜无表达,而在食管鳞癌组织中阳性表达率为61.67%,二者相比具有显著性差异;随着食管鳞癌肿瘤体积的增大、组织学分化程度的降低,H IF-1α的阳性表达率逐渐增高;H IF-1α在淋巴结转移阳性组的阳性表达率显著高于阴性组。食管鳞癌中P-选择素和H IF-1α的表达呈显著正相关。结论:P-选择素可能参与了食管鳞癌的组织分化、浸润和淋巴结转移。H IF-1α的高表达可能促进了食管鳞癌癌细胞的增殖,抑制其组织分化,并参与了淋巴结转移。H IF-1α和P-选择素在食管鳞癌发生发展过程中可能具有协同作用。 展开更多

关键词 食管肿瘤/病理学 P选择素/病理学 缺氧诱导因子-1 免疫组织化学

下载PDF 职称材料

形态异常的人单核细胞株THP-1中β-肌动蛋白mRNA的表达

18

作者 马晓 杨瑞 王淑秀 《新乡医学院学报》 CAS 2009年第1期10-12,共3页

目的探讨形态异常的人单核细胞株THP-1中β-肌动蛋白(β-actin)mRNA表达的特点。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测THP-1细胞和形态异常的THP-1细胞中β-actin mRNA的表达。结果RT-PCR产物长度为256 bp和580 bp的β-actin片段在传... 目的探讨形态异常的人单核细胞株THP-1中β-肌动蛋白(β-actin)mRNA表达的特点。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测THP-1细胞和形态异常的THP-1细胞中β-actin mRNA的表达。结果RT-PCR产物长度为256 bp和580 bp的β-actin片段在传代5次以内的THP-1细胞中均有表达,但RT-PCR产物长度为256 bpβ-actin片段在传代20次以上、形态异常的THP-1细胞中未见表达。结论传代次数较多、形态异常的THP-1细胞中β-actin的基因可能发生了变异。 展开更多

关键词 人类单核细胞 Β-肌动蛋白 基因

下载PDF 职称材料