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抑制长链非编码RNA MALAT1对糖脂毒性诱导的内皮细胞功能障碍的影响及可能机制
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作者 张志扬 刘芬 +5 位作者 张雪鹤 房彬彬 张冀鑫 谢骞 杨毅宁 李晓梅 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2024年第2期185-193,共9页
目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、... 目的:探讨糖脂毒性环境中抑制长链非编码RNA(lnc RNA)人类肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达水平对人脐静脉内皮细胞功能影响的分子机制。方法:用葡萄糖和棕榈酸处理人脐静脉内皮细胞,建立体外糖脂毒性内皮细胞模型,并分为对照组、高糖高脂组、高糖高脂对照组以及小干扰RNA(si-RNA)干预的高糖高脂+si-MALAT1组、高糖高脂+si-丝裂原活化蛋白激酶1(si-MAPK1)组。应用实时荧光定量PCR检测MALAT1、MAPK1的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测自噬、线粒体融合分裂、凋亡、通路相关蛋白的表达水平;免疫荧光共聚焦定位检测自噬及溶酶体相关蛋白的荧光共定位情况;透射电镜观察内皮细胞中自噬溶酶体的数目;线粒体探针染色检测线粒体形态;免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)的产生;流式细胞仪检测各组细胞的凋亡;细胞增殖及划痕实验检测不同时间点各组细胞的增殖及迁移能力;血管形成试验检测各组细胞中新生血管数量。结果:与对照组相比,高糖高脂组、高糖高脂对照组的MALAT1 mRNA、磷酸化的丝裂原活化蛋白激酶1(p-MAPK1)的表达水平增加,磷酸化的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达水平下降,P均<0.05。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MALAT1组微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、螯合体1(p62)、ROS、剪切后活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、p-MAPK1的表达水平均下降,线粒体融合蛋白视神经萎缩蛋白1(OPA1)、BCL-2、p-mTOR的表达水平均增加,P均<0.05;LC3和溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)蛋白的荧光共定位阳性颗粒增加(P均<0.01),溶酶体数目减少;细胞增殖、迁移、成管能力均增加(P均<0.01)。与高糖高脂对照组相比,高糖高脂+si-MAPK1组内皮细胞中p-MAPK1的表达下降,p-mTOR的表达上升(P均<0.01)。结论:抑制MALAT1表达,可降低糖脂毒性环境中线粒体的自噬水平,减少内皮细胞的凋亡及改善内皮细胞的功能,可能与调节MAPK1/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA人类肺腺癌转移相关转录本1 丝裂原活化蛋白激酶1 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 糖脂毒性 内皮细胞功能 线粒体自噬 凋亡
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新疆阿克苏地区维吾尔族35岁以上人群血脂异常患病率、知晓率、治疗率及控制率的调查研究 被引量:3
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作者 马建军 高静 +2 位作者 罗俊一 刘芬 杨毅宁 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期1050-1054,共5页
目的调查分析新疆阿克苏地区维吾尔族35岁以上人群血脂异常患病率、知晓率、治疗率及控制率。方法本研究于2012年4月至2014年6月采用分层整群随机抽样的方法,对阿克苏地区8县1市35岁以上成年维吾尔族人群进行现场调查。结果新疆阿克苏... 目的调查分析新疆阿克苏地区维吾尔族35岁以上人群血脂异常患病率、知晓率、治疗率及控制率。方法本研究于2012年4月至2014年6月采用分层整群随机抽样的方法,对阿克苏地区8县1市35岁以上成年维吾尔族人群进行现场调查。结果新疆阿克苏地区维吾尔族35岁以上成年人总血脂异常患病率为53.6%,性别与年龄分组组间患病率无明显差异。女性亚组中,55岁以上组血脂异常患病率明显高于35~54岁组(53.1%比51.5%,P=0.024)。血脂异常的人群中知晓率为34.5%,治疗率为28.0%,控制率为16.8%。总人群和35~54岁组女性血脂异常治疗率显著高于男性(总人群为30.3%比24.9%,P=0.004;35~54岁组为29.7%比24.2%,P=0.028)。总人群女性血脂异常的控制率显著高于男性(18.1%比15.0%,P=0.047)。结论新疆阿克苏地区35岁以上维吾尔族是血脂异常高发的人群,其血脂异常知晓率、治疗率及控制率较低。男性血脂异常治疗率和控制率显著低于女性,尤其应重视男性血脂异常的防治。 展开更多
关键词 血脂异常 患病率 知晓率 治疗率 控制率
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血管生成相关长链非编码RNA:冠状动脉慢性完全闭塞病变的潜在治疗靶点 被引量:2
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作者 邵梦娇 田婷 +3 位作者 罗俊一 刘芬 李晓梅 杨毅宁 《中国心血管病研究》 CAS 2021年第3期269-273,共5页
长链非编RNA参与生物的生理过程和疾病的病理过程,是重要的生物标志物或公认的治疗的疾病靶点。长链非编RNA通过调控两种效应细胞(血管内皮细胞和平滑肌细胞)调控动脉生成和血管新生过程参与冠状动脉侧支循环的形成,从而影响冠状动脉慢... 长链非编RNA参与生物的生理过程和疾病的病理过程,是重要的生物标志物或公认的治疗的疾病靶点。长链非编RNA通过调控两种效应细胞(血管内皮细胞和平滑肌细胞)调控动脉生成和血管新生过程参与冠状动脉侧支循环的形成,从而影响冠状动脉慢性完全闭塞病变(chronic total occlusion of coronary artery,CTOCA)的预后。"治疗性血管生成"作为促进冠状动脉侧支循环的一种替代疗法,已被证明能显着改善CTO患者的预后和生活质量。因此,通过调节血管生成过程,长链非编RNA有望成为CTO治疗的新靶点。本文综述了血管生成相关长链非编RNA的分类和功能,以及它们在调节血管生成在冠状动脉侧支循环的作用。 展开更多
关键词 心血管疾病 长链非编码RNA 血管生成 慢性完全闭塞病变
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抑制P53上调GLUT4改善高糖合并缺血缺氧诱导的心肌细胞糖代谢紊乱及减轻细胞凋亡 被引量:4
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作者 张冀鑫 刘芬 +4 位作者 张桐 张雪鹤 房彬彬 李晓梅 杨毅宁 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2023年第3期212-217,共6页
[目的]探讨抑制心肌细胞P53,增加葡萄糖转运体4(GLUT4)表达,能否改善高糖(HG)合并缺血缺氧(IH)诱导的心肌细胞糖代谢紊乱,减轻细胞凋亡。[方法]建立体外HG+IH心肌细胞模型,实验分为:对照组、HG组、IH组、HG+IH组、HG+IH+P53抑制剂组(HG+... [目的]探讨抑制心肌细胞P53,增加葡萄糖转运体4(GLUT4)表达,能否改善高糖(HG)合并缺血缺氧(IH)诱导的心肌细胞糖代谢紊乱,减轻细胞凋亡。[方法]建立体外HG+IH心肌细胞模型,实验分为:对照组、HG组、IH组、HG+IH组、HG+IH+P53抑制剂组(HG+IH+Pifithrin-α组)、HG+IH+P53抑制剂+GLUT4抑制剂组(HG+IH+Pifithrin-α+Fasentin组)。CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、糖酵解关键酶活性和ATP含量,Western blot检测P53、GLUT4、Bax/Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡。[结果](1)体外HG+IH心肌细胞模型中,与对照组比较,心肌细胞P53表达增加75%,GLUT4表达减少16%,细胞ATP含量下降51%,细胞活力减低45%,LDH活性增加3.6倍,Caspase-3和Bax/Bcl-2表达分别增加54%和77%,细胞凋亡率增加(P均<0.05)。(2)抑制心肌细胞P53表达后,与HG+IH组比较,HG+IH+Pifithrin-α组心肌细胞GLUT4表达增加34%,细胞ATP含量增加60%,细胞活力增加50%,LDH活性减低13%,Caspase-3和Bax/Bcl-2表达分别减少31%和53%,细胞凋亡率下降(P均<0.05)。(3)在抑制GLUT4后,与HG+IH+Pifithrin-α组比较,HG+IH+Pifithrin-α+Fasentin组GLUT4表达减少22%,细胞内ATP含量减少39%,细胞存活力减低25%,LDH活性增加21%,Caspase-3和Bax/Bcl-2表达分别增加43%和89%,细胞凋亡率增加(P均<0.05)。[结论]在高糖合并缺血缺氧心肌细胞模型中,抑制P53可增加GLUT4表达,改善高糖合并缺血缺氧诱导的心肌细胞糖代谢紊乱,减轻细胞凋亡。 展开更多
关键词 P53 葡萄糖转运体4 高糖合并缺血缺氧 糖代谢紊乱 细胞凋亡
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氧化型低密度脂蛋白对NF-κB信号通路的作用 被引量:5
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作者 翟慧 杨毅宁 +6 位作者 马依彤 李晓梅 陈邦党 向阳 刘芬 于子翔 郭俊林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1254-1257,共4页
目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)P65、P50、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法设立空白对照组(15、30、60、120)μg/mL ox-LDL分别刺激12、24、48 h的ox-LDL诱导组及NF-κB抑... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)P65、P50、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法设立空白对照组(15、30、60、120)μg/mL ox-LDL分别刺激12、24、48 h的ox-LDL诱导组及NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氢基甲酸盐(PDTC)干预联合ox-LDL诱导组。提取核蛋白,Western blot法检测NF-κB信号通路P65和P50的蛋白表达;ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-6的浓度变化。结果 Western blot法结果显示ox-LDL诱导HUVEC后P65和P50随ox-LDL诱导时间延长及诱导浓度增加而表达增加,各诱导组之间均存在统计学差异(P<0.05)。而给予PDTC干预后,P65和P50蛋白表达较ox-LDL诱导组明显降低(P<0.05)。ELISA结果显示经ox-LDL诱导24 h后,细胞上清液中的TNF-α和IL-6显著高于正常对照组,而用PDTC干预联合ox-LDL诱导后TNF-α和IL-6浓度明显降低。各组间比较有显著统计学差异(P<0.05)。结论 ox-LDL激活NF-κB信号通路存在时间和浓度效应关系,可增强TNF-α、IL-6表达。 展开更多
关键词 氧化型低密度脂蛋白 动脉粥样硬化 核因子ΚB 人脐静脉内皮细胞
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原代脐静脉内皮细胞NFKB1基因启动子区缺失型较插入型P50蛋白表达降低 被引量:1
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作者 周韵 杜冬梅 +5 位作者 罗俊一 李芳 古丽那孜.穆哈提 陈小翠 马依彤 杨毅宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期352-355,359,共5页
目的探讨核因子κB1基因(NFKB1)启动子区-94位点插入/缺失ATTG碱基(-94ins/del ATTG)多态性在氧化应激中对人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)NF-κB信号通路中P50、P65水平的影响。方法分离并培养HUVEC,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应... 目的探讨核因子κB1基因(NFKB1)启动子区-94位点插入/缺失ATTG碱基(-94ins/del ATTG)多态性在氧化应激中对人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)NF-κB信号通路中P50、P65水平的影响。方法分离并培养HUVEC,采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)法将HUVEC分为插入型(Ⅱ型)、缺失型(DD型)以及杂合子型(ID型),并依据其基因型分型在空白组及H2O2诱导组中分为Ⅱ型、ID型、DD型3个亚组;H2O2建立HUVEC氧化应激模型,采用CCK-8法检测细胞增殖活性选取最适宜的H2O2诱导浓度及时间;Western blot法检测各组HUVEC总蛋白及核蛋白P50、P65蛋白水平。结果共收集23例HUVEC,其中Ⅱ型8例、ID型9例、DD型6例;CCK-8试剂盒确定H2O2诱导浓度为200μmol/L,诱导时间为12 h;在空白组及H2O2诱导组中纯合子DD型P50蛋白水平均较Ⅱ型显著降低。结论 NFKB1(rs28362491)基因多态性对P50蛋白表达影响显著。 展开更多
关键词 核因子κB(NF-κB) 脐静脉内皮细胞 NFKB1 P50 氧化应激 H2O2
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甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值对非ST段抬高型心肌梗死合并2型糖尿病患者心源性死亡的预测价值 被引量:3
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作者 张冀鑫 刘芬 +5 位作者 张雪鹤 李文玲 田婷 房彬彬 李晓梅 杨毅宁 《中国心血管病研究》 CAS 2022年第11期973-977,共5页
目的探讨甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值(TG/HDL-C)对非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)合并2型糖尿病患者院内及院外心源性死亡的预测价值。方法连续纳入2013年12月至2020年3月于新疆医科大学第一附属医院确诊为NSTEMI合并2型糖尿病患者... 目的探讨甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值(TG/HDL-C)对非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)合并2型糖尿病患者院内及院外心源性死亡的预测价值。方法连续纳入2013年12月至2020年3月于新疆医科大学第一附属医院确诊为NSTEMI合并2型糖尿病患者317例。采用多因素logistic、Cox回归,ROC曲线和Kaplan-Meier生存分析,评价TG/HDL-C对NSTEMI合并2型糖尿病患者院内及院外心源性死亡的预测价值。结果多因素logistic和Cox回归结果表明,TG/HDL-C是NSTEMI合并2型糖尿病患者院内及院外心源性死亡的独立危险因素(院内:OR=1.796,95%CI 1.382~2.335,P<0.001;院外:HR=1.726,95%CI 1.341~2.222,P<0.001)。ROC曲线显示,TG/HDL-C对患者院内及院外心源性死亡均具有一定的预测价值(院内:AUC=0.77,95%CI 0.689~0.855,P<0.001;院外:AUC=0.695,95%CI 0.573~0.817,P=0.003)。Kaplan-Meier生存分析显示,TG/HDL-C升高,患者的心源性死亡率明显增加,预后较差(Log-rank,P=0.013)。结论TG/HDL-C是NSTEMI合并2型糖尿病患者院内及院外心源性死亡的独立危险因素,其对患者远期预后具有预测价值。 展开更多
关键词 非ST段抬高型心肌梗死 2型糖尿病 甘油三酯与高密度脂蛋白胆固醇比值 心源性死亡
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高糖高脂微环境中NFKB1基因缺失突变调控线粒体分裂增加内皮细胞凋亡 被引量:2
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作者 金思妤 罗俊一 +3 位作者 王钧 刘芬 李晓梅 杨毅宁 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2020年第7期566-571,共6页
目的探讨B细胞κ轻肽基因增强子核因子1(NFKB1)基因启动子区-94位点ATTG插入/缺失突变对高糖高脂微环境诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及其潜在机制。方法建立NFKB1不同基因型原代HUVEC细胞的高糖高脂模型,采用Annexin-V-FLUOS... 目的探讨B细胞κ轻肽基因增强子核因子1(NFKB1)基因启动子区-94位点ATTG插入/缺失突变对高糖高脂微环境诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的影响及其潜在机制。方法建立NFKB1不同基因型原代HUVEC细胞的高糖高脂模型,采用Annexin-V-FLUOS染色检测细胞凋亡,Mito Tracker染色后通过激光共聚焦显微镜观察线粒体形态,Western blot检测核因子κB(NF-κB)信号通路中p50、p65蛋白,线粒体分裂相关蛋白Drp1、Drp1-s637、Drp1-s616和Fis1,线粒体融合相关蛋白Mfn1、Mfn2和Opa1,以及凋亡相关蛋白细胞色素C(CytC)。结果高糖高脂诱导原代HUVEC凋亡显著增加,与Ⅱ型细胞相比,DD型细胞凋亡指数更高;线粒体过度分裂成碎片状;DD型细胞中NF-κB通路中关键蛋白p50表达明显降低,线粒体融合相关蛋白Mfn2表达降低,线粒体分裂动力相关蛋白Drp1-s616磷酸化增加,CytC表达增加。结论NFKB1基因缺失突变可能是DD型HUVEC更容易受到高糖高脂微环境损伤的重要原因,其潜在的机制可能与线粒体过度分裂相关。 展开更多
关键词 B细胞κ轻肽基因增强子核因子1 高糖高脂 人脐静脉内皮细胞 线粒体融合与分裂
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“麻花辫”样冠状动脉的治疗及预后分析
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作者 田婷 邵梦娇 +4 位作者 罗俊一 刘芬 单春方 李晓梅 杨毅宁 《新疆医科大学学报》 CAS 2021年第9期999-1005,共7页
目的探讨“麻花辫”样冠状动脉的诊治策略及远期预后。方法纳入经冠状动脉造影证实存在“麻花辫”样冠状动脉病变的患者,根据治疗方案,将患者分为单纯药物治疗组和经皮冠状动脉介入治疗组(percutaneous coronary intervention,PCI)。回... 目的探讨“麻花辫”样冠状动脉的诊治策略及远期预后。方法纳入经冠状动脉造影证实存在“麻花辫”样冠状动脉病变的患者,根据治疗方案,将患者分为单纯药物治疗组和经皮冠状动脉介入治疗组(percutaneous coronary intervention,PCI)。回顾性分析两组患者的临床资料、影像学特点、治疗方案及随访结果,并分析其预后。结果单纯药物治疗组患者10例(52.63%);PCI组患者9例(47.37%)。与单纯药物治疗组相比,PCI组患者高密度脂蛋白胆固醇[0.75(0.64,0.99)mmol/L vs 1.11(0.83,1.30)mmol/L,P=0.037]水平降低。与单纯药物治疗组相比,PCI组患者“麻花辫”样病变支狭窄程度[(79.78±21.28)%vs(49.00±12.89)%,P=0.001]明显升高。随访期间,单纯药物治疗组和PCI组分别发生1例(10.0%)和2例(22.2%)主要不良心脑血管事件,两组患者不良心脑血管事件发生率和Kaplan-Meier生存分析差异均无统计学意义。结论“麻花辫”样冠状动脉并非完全是一种良性病变,应充分评估心肌缺血,综合患者临床症状和病变程度进行治疗,并密切随访以预防心血管不良事件的发生。 展开更多
关键词 急性冠状动脉综合征 急性心肌梗死 冠状动脉造影 经皮冠状动脉介入治疗
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