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siRNA在恶性血液病中的研究进展
1
作者 胡海燕 张洹 何冬梅 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2004年第5期413-416,共4页
siRNA是 2 1～ 2 3个nt的短双链RNA ,它的 3′端有 2个AA的突出 ,结构稳定 ,半衰期长 ,能在低于反义核苷酸几个数量级的浓度下使靶基因降至极低水平甚至完全“敲除”。
关键词 恶性血液病 双链RNA 治疗手段 研究进展 靶基因 反义核苷酸 肿瘤治疗 敲除 数量级 水平
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Bcl-2反义寡核苷酸增强阿糖胞苷诱导原代白血病细胞凋亡的研究 被引量：10
2
作者 雷小勇 张洹 何冬梅 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1301-1304,共4页
背景与目的:有研究证实,针对bcl-2mRNA翻译起始区和蛋白编码区的2个有效反义作用靶点的反义寡核苷酸能增强HL-60和K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)、柔红霉素、足叶乙甙的敏感性。本研究观察这两个新靶点的反义寡核苷酸对Ara-C诱导原代培养... 背景与目的:有研究证实,针对bcl-2mRNA翻译起始区和蛋白编码区的2个有效反义作用靶点的反义寡核苷酸能增强HL-60和K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)、柔红霉素、足叶乙甙的敏感性。本研究观察这两个新靶点的反义寡核苷酸对Ara-C诱导原代培养的急性白血病(AL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞凋亡的影响。方法:用细胞记数法观察细胞的生存情况;免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测细胞Bcl-2蛋白水平;用姬姆萨染色法观察并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:靶向bcl-2mRNA翻译起始区与靶向蛋白编码区的两个反义寡核苷酸分别与Ara-C联合作用AL、CLL细胞48h,细胞的活性受到明显的抑制,分别同无关寡核苷酸(NS-ODN)联合Ara-C组、单用Ara-C组进行比较,差异有显著性(P<0.05)。这两个不同靶点的反义寡核苷酸分别与Ara-C联用均能明显下调AL、CLL细胞Bcl-2蛋白的表达,并且联合作用AL、CLL细胞48h的凋亡细胞百分率分别与NS-ODN联合Ara-C组、单用Ara-C组进行比较,差异有显著性(P<0.05)。与靶向bcl-2mRNA翻译起始区的反义寡核苷酸比较,靶向蛋白编码区的反义寡核苷酸提高AL细胞对Ara-C的敏感性作用要强些(P<0.05)。结论:针对bcl-2mRNA翻译起始区和蛋白编码区两个靶点的反义寡核苷酸能增强Ara-C诱导AL、CLL细胞的凋亡。 展开更多
关键词 Bcl-2 反义寡核苷酸 阿糖胞苷 白血病细胞 凋亡 免疫荧光标记法 姬姆萨染色法
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盐霉素增强长春新碱诱导急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡研究 被引量：5
3
作者 刘平平 朱锦灿 +2 位作者 刘革修 税朝祥 李小梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期653-657,共5页
目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检... 目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、caspase-3和caspase-8表达水平。结果:VCR、Sal单独及联合处理Jurkat细胞株均显示出明显的增殖抑制作用,两药联合使用的增殖抑制作用更显著(P<0.05),具有协同作用。联合用药组BCL-2蛋白水平较VCR和Sal单独处理组明显减少,而caspase-3和caspase-8水平明显增高;VCR和Sal联合用药组细胞凋亡率较VCR和Sal单独处理组明显提高(P<0.05)。结论:长春新碱联合盐霉素作用于Jurkat细胞具有协同抑制增殖及诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 长春新碱 盐霉素 急性T细胞白血病 JURKAT细胞株 细胞凋亡
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TIM-3、LAG-3和BTLA介导的血液肿瘤免疫耐受及其逆转研究 被引量：6
4
作者 陈少华 查显丰 李扬秋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1594-1597,共4页
近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑... 近年来认为肿瘤免疫抑制最为重要的原因,是免疫细胞异常表达一些T细胞免疫抑制受体所介导的T细胞功能耗竭,与肿瘤的发生发展密切相关,而阻断这些免疫负调控受体通路可以使T细胞部分或全部恢复功能。本文就近年来新近发现的T细胞免疫抑制受体T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)、淋巴细胞活化基因-3(LAG3)和B和T淋巴细胞弱化子(BTLA)在血液肿瘤介导T细胞免疫耐受中的作用及其靶向治疗研究进展作一综述,旨在为血液肿瘤的免疫靶向治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 血液肿瘤 细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3 淋巴细胞活化基因-3 B和T淋巴细胞弱化子 靶向治疗
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PPP2R5C转录本在正常人和血液肿瘤病人中的分布情况 被引量：3
5
作者 陈宇 郑海涛 +4 位作者 陈少华 杨力建 李萡 卢育洪 李扬秋 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期550-554,共5页
目的:建立分析不同PPP2R5C转录本检测方法,分析正常人和血液肿瘤病人中5种PPP2R5C基因转录本的表达特点。方法:根据PPP2R5C基因的结构特点,设计4对引物,利用RT-PCR方法分析9例正常人、7例T细胞-非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)、11例B细胞-急性... 目的:建立分析不同PPP2R5C转录本检测方法,分析正常人和血液肿瘤病人中5种PPP2R5C基因转录本的表达特点。方法:根据PPP2R5C基因的结构特点,设计4对引物,利用RT-PCR方法分析9例正常人、7例T细胞-非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)、11例B细胞-急性淋巴细胞白血病(B-ALL)和8例急性髓细胞白血病(AML)病人外周血单个核细胞(PBMC)中PPP2R5C基因的表达情况。结果:所设计的4对引物,均可在样本中扩增到预期PCR产物,其中第1对引物可扩增两个不同大小PCR产物(包含12+13+14外显子的大片段及仅含12+14外显子的小片段),而另3对对引物所扩增的产物分别为10+11+12+12 a外显子,Ⅲ+2外显子和Ⅳ+2外显子的基因片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。结果显示所有样本均表达全部PPP2R5C转录本。结论:初步建立区分不同PPP2R5C转录本的方法,各转录本在正常人和不同血液肿瘤病人中的分布情况基本一致。 展开更多
关键词 PPP2R5C基因 转录本 聚合酶链式反应 血液肿瘤
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胎肝Sca-1^+细胞治疗STZ诱导小鼠糖尿病的实验研究 被引量：3
6
作者 林晨 张洹 +3 位作者 廖继东 赵欣 姜铧 余卫 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期156-161,共6页
目的:探讨小鼠胎肝组织中的干细胞抗原1阳性的细胞(Sca - 1+细胞)治疗链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病鼠的潜能。方法:取14 5d的C5 7BL/6J小鼠胎肝,制作细胞悬液,用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca - 1+细胞,将2×10 5个雄性小鼠Sca ... 目的:探讨小鼠胎肝组织中的干细胞抗原1阳性的细胞(Sca - 1+细胞)治疗链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病鼠的潜能。方法:取14 5d的C5 7BL/6J小鼠胎肝,制作细胞悬液,用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca - 1+细胞,将2×10 5个雄性小鼠Sca - 1+细胞输注到STZ诱导的C5 7BL/6J雌性小鼠体内,以后每7d定时测定小鼠血糖,第38d处死受体小鼠取胰腺组织固定、切片,免疫组化观察胰腺组织中胰岛素阳性的β细胞变化。结果:小鼠胎肝Sca 1+细胞能够有效抑制STZ诱导小鼠血糖的持续升高,明显降低糖尿病鼠的死亡率。受体小鼠胰岛细胞结构清楚,其中可见表达胰岛素的β细胞,荧光原位杂交显示小鼠胰岛内有Y染色体阳性杂交点。结论:小鼠胎肝Sca - 展开更多
关键词 干细胞 链脲佐菌素 糖尿病
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VEGF反义核酸与柔红霉素联用对增加髓性白血病细胞化疗敏感性的研究 被引量：6
7
作者 费嘉 张洹 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第6期326-329,共4页
目的　探讨血管内皮生长因子VEGF(VascularEndothelialGrowthFactor)反义核酸与柔红霉素联用 ,对AML、CML细胞药物敏感性的影响。方法　采用以前实验筛选所得的最优反义核酸A7,长度为 2 0脱氧核糖核苷酸 ,全硫代修饰 ;以脂质体介导转染... 目的　探讨血管内皮生长因子VEGF(VascularEndothelialGrowthFactor)反义核酸与柔红霉素联用 ,对AML、CML细胞药物敏感性的影响。方法　采用以前实验筛选所得的最优反义核酸A7,长度为 2 0脱氧核糖核苷酸 ,全硫代修饰 ;以脂质体介导转染细胞 ,2 4h以后加入柔红霉素 ,继续培养 72h ,用0 .4 %苔盼蓝拒染法计数活细胞 ,用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白的浓度 ,用流式细胞仪检测细胞凋亡百分数。结果　VEGF反义核酸显著增加柔红霉素抑制AML、CML细胞生长 ,下调VEGF蛋白的表达 ,诱导AML、CML细胞凋亡。结论　VEGF反义核酸提高AML、CML细胞对柔红霉素敏感性 ;内源性VEGF蛋白使AML。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子(VEGF) 急性髓性白血病(AML) 慢性髓细胞白血病(CML) 硫代反义核酸 柔红霉素(DNR) 药物敏感性
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靶向抑制微小RNA-21提高白血病细胞对三氧化二砷的敏感性研究 被引量：2
8
作者 李育敏 谷景义 +5 位作者 朱雪娇 陈万群 郭敏 姚君琳 林春燕 费嘉 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期170-173,共4页
目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-m... 目的探讨以微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对三氧化二砷(As2O3)的敏感性及可能的作用机制。方法利用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染K562细胞。MTT法检测单独使用AMO-miR-21、As2O3以及两者联合使用对细胞增殖的抑制作用,并计算抑制率和IC50;PI单染检测细胞周期及凋亡;实时定量PCR检测miRNA-21表达水平的改变;免疫荧光法检测miRNA-21候选靶基因PDCD4蛋白表达的改变。结果AMO-miR-21与As2O3联合使用后,IC50从2.10μmol/L降低到1.23μmol/L,敏感性提高到单用As2O3的1.78倍;AMO-miR-21联合As2O3组细胞凋亡明显增加(P<0.05);单独转染AMO-miR-21可显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.01),同时抑癌基因PDCD4蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论AMO-miR-21与As2O3联合使用可提高K562细胞对As2O3的敏感性,为白血病的治疗提供了新的方法。AMO-miR-21通过靶向抑制miRNA-21,进而上调抑癌基因PDCD4的表达而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 微小RNA-21 反义寡核苷酸 三氧化二砷 白血病 化疗敏感性
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胎肝间充质干细胞治疗实验性糖尿病小鼠的研究 被引量：3
9
作者 余卫 何冬梅 张洹 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期558-561,共4页
目的：研究胎肝间充质干细胞向胰岛β样细胞分化和治疗1型糖尿病的可行性。方法：用贴壁筛选法从正常C57BL／6j胎鼠（孕11．5～15．5d）肝脏中分离出胎肝间充质干细胞，用高浓度葡萄糖、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和尼克酰胺体外... 目的：研究胎肝间充质干细胞向胰岛β样细胞分化和治疗1型糖尿病的可行性。方法：用贴壁筛选法从正常C57BL／6j胎鼠（孕11．5～15．5d）肝脏中分离出胎肝间充质干细胞，用高浓度葡萄糖、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和尼克酰胺体外诱导胎肝间充质干细胞向胰岛B样细胞分化；制作1型糖尿病小鼠模型，并将诱导后的细胞移植到1型糖尿病小鼠肾被膜下，连续6周观察血糖变化；用组织学分析移植细胞体内的发育。结果：胎肝间充质干细胞来源的胰岛β样细胞移植到糖尿病小鼠肾被膜下后，具有一定的降低血糖的作用，经过6周以后，接近正常水平；取出移植物，小鼠高血糖重新出现，并很快死亡；移植物作免疫组织化学染色，可以观察到肾被膜下区含有大量胰岛素阳性细胞。结论：胎肝间充质干细胞有望成为1型糖尿病胰岛移植的种子细胞。 展开更多
关键词 胎肝 间充质干细胞 分化 STZ-糖尿病
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T细胞介导炎症与血液肿瘤发生相关性研究进展 被引量：3
10
作者 李扬秋 杨力建 陈少华 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期111-115,共5页
慢性炎症是肿瘤发生过程中一个重要因素,越来越多的研究显示T细胞介导炎症与多种肿瘤发生密切相关。本文主要综述近期有关T细胞介导炎症与血液肿瘤发生的相关性及其分子机制的新进展。
关键词 T细胞 慢性炎症 自身免疫性疾病 血液肿瘤 肿瘤发生
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MicroRNA在白血病中的研究新进展 被引量：2
11
作者 何冬梅 吴红 +1 位作者 高杨军 胡小毛 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期362-368,共7页
微小RNA(microRNA,miRNA)是在真核生物中发现的一类内源性非编码RNA,其长度为21～25个核苷酸大小。miRNA在基因表达调控中发挥了重要作用。miRNA不仅在白血病中存在明显的表达失调,而且与白血病的诊断和预后有关。本文着重综述了白血病... 微小RNA(microRNA,miRNA)是在真核生物中发现的一类内源性非编码RNA,其长度为21～25个核苷酸大小。miRNA在基因表达调控中发挥了重要作用。miRNA不仅在白血病中存在明显的表达失调,而且与白血病的诊断和预后有关。本文着重综述了白血病中急性髓系白血病(AML),急性淋巴细胞性白血病(ALL)和慢性淋巴细胞性白血病(CLL)相关的miRNA的研究新进展。 展开更多
关键词 MIRNA 基因表达 基因调控 白血病
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髓性白血病的免疫调节和细胞免疫治疗研究进展 被引量：4
12
作者 李扬秋 陈少华 査显丰 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期571-576,共6页
T细胞免疫状态与白血病病人抗白血病效应息息相关,在髓性白血病中,随着病情进展T细胞功能抑制更为明显。近年来,对于不同疾病不同阶段以及同种异型造血干细胞移植后复发病人,已形成了一些免疫治疗的新措施。本文主要介绍新近一些针对髓... T细胞免疫状态与白血病病人抗白血病效应息息相关,在髓性白血病中,随着病情进展T细胞功能抑制更为明显。近年来,对于不同疾病不同阶段以及同种异型造血干细胞移植后复发病人,已形成了一些免疫治疗的新措施。本文主要介绍新近一些针对髓性白血病的特异免疫治疗包括过继性细胞免疫治疗以及可能的免疫调节治疗的研究进展。 展开更多
关键词 急性髓性白血病 慢性粒细胞性白血病 细胞毒T细胞 免疫抑制 免疫治疗
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慢性苯中毒病人相关TCR Vα12和Vα19 T细胞克隆性研究 被引量：1
13
作者 李萡 李扬秋 +4 位作者 陈少华 杨力建 余卫 刘薇薇 陈嘉榆 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期336-340,共5页
目的:了解慢性苯中毒病人外周血中TCR Vα克隆性增殖T细胞特点。方法:利用RT-PCR方法扩增3例慢性苯中毒病人外周血单个核细胞中29个TCR Vα基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性... 目的:了解慢性苯中毒病人外周血中TCR Vα克隆性增殖T细胞特点。方法:利用RT-PCR方法扩增3例慢性苯中毒病人外周血单个核细胞中29个TCR Vα基因的互补决定区3(CDR3),PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。克隆性增殖T细胞PCR产物进行CDR3区序列分析。结果:3例慢性苯中毒病人外周血中Vα12和Vα19亚家族T细胞呈克隆性增殖,序列分析显示3例慢性苯中毒病人Vα12(1例)和Vα19(2例)CDR3区氨基酸序列分别是FCALSDRNTGGF,YICAVSHSGGGA和VYICAVNYGGS已被GenBank收录(EU285264、EU379941和EU429520)。结论:在慢性苯中毒病人中发现3个新的TCR Vα亚家族重排序列,外周血T细胞出现的TCR Vα12和Vα19克隆性增殖T细胞可能是机体接触苯后所发生的特异性免疫反应。 展开更多
关键词 苯 T细胞受体Vα基因 T细胞克隆 互补决定区3
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急性髓性白血病患者异基因造血干细胞移植后早期T细胞免疫重建的研究 被引量：1
14
作者 吴秀丽 李扬秋 +5 位作者 朱康儿 杨力建 陈少华 卢育洪 陈洁 刘启发 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期828-830,共3页
目的:监测急性髓性白血病(AML)患者接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后外周血中的T细胞受体重排删除环(TRECs)水平,了解移植后早期的T细胞免疫重建情况。方法:AML患者15例分别在allo-HSCT前以及allo-HSCT后每隔2周收集外周血,采用... 目的:监测急性髓性白血病(AML)患者接受异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后外周血中的T细胞受体重排删除环(TRECs)水平,了解移植后早期的T细胞免疫重建情况。方法:AML患者15例分别在allo-HSCT前以及allo-HSCT后每隔2周收集外周血,采用实时定量PCR法检测外周血单个核细胞(PBMNCs)中的TRECs水平;7例年龄相近的正常人外周血样本作为对照。流式检测CD45RA+细胞亚群和CD45RO+细胞亚群的阳性率。结果:allo-HSCT组移植前的TRECs平均拷贝数为(1.42±1.51)拷贝/1000 PBMNCs,明显低于正常组的(3.03±0.45)拷贝/1000 PBMNCs水平;移植后第12周的TRECs平均拷贝数为(1.67±1.93)拷贝/1000 PBMNCs,与正常相比仍然较低。移植后8周内以CD45RO+/CD4+细胞的扩增为主,而外周血TRECs水平在allo-HSCT后4周左右出现短暂地升高趋势,随后又下降,至allo-HSCT8周后才开始稳步上升。有急性移植物抗宿主病(aGVHD)病史的移植患者的外周血TRECs水平显著降低,明显低于无aGVHD病史移植患者的外周血TRECs水平。3例移植后早期复发的患者的外周血TRECs水平降至基线水平或检测不到。结论:不同个体T细胞免疫重建时间存在差异;AML患者在allo-HSCT后早期(90d内)的胸腺输出功能仍处于恢复阶段,移植后4周内的免疫重建仍以来源于供者细胞的外周扩增为主;外周血TRECs水平可能与AML患者allo-HSCT后病情的发展、转归有关。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 异基因 T细胞受体重排删除环 免疫重建
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Bcl-2 shRNA诱导成人T淋巴细胞白血病细胞株Molt4凋亡的研究 被引量：1
15
作者 房宝英 何冬梅 +1 位作者 张洹 陈丽 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期541-545,共5页
目的:探讨以Pgenesil-1质粒为载体表达的Bcl-2短发夹样RNA(short hairpin,shRNA)诱导Molt4成人T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的作用。方法:采用脂质体介导的转染方法将表达Bcl-2 shRNA的两个RNA干扰质粒(Bcl-2 shRNA1和Bcl-2 shRNA2)、阴性... 目的:探讨以Pgenesil-1质粒为载体表达的Bcl-2短发夹样RNA(short hairpin,shRNA)诱导Molt4成人T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的作用。方法:采用脂质体介导的转染方法将表达Bcl-2 shRNA的两个RNA干扰质粒(Bcl-2 shRNA1和Bcl-2 shRNA2)、阴性组(针对非目的基因所构建的shRNA表达载体)、空白组及单纯脂质体组分别转染Molt4细胞。采用免疫细胞化学法检测转染48 h后的各组细胞Bcl-2蛋白表达水平;MTT法分别检测24,48,72 h各组细胞的增殖活性;用姬姆萨染色和流式细胞仪观察细胞凋亡情况。结果:转染Molt4细胞48 h后,Bcl-2 shRNA1组和Bcl-2 shRNA2组的细胞Bcl-2蛋白表达率均明显下降;与阴性对照shRNA组、空白组和单纯脂质体组相比差异有显著性(P<0.05),Bcl-2 shRNA1组的抑制作用要强于Bcl-2 shRNA2组。MTT测定显示Bcl-2shRNA1组和Bcl-2 shRNA2组细胞增殖活力均明显下降,分别与空白组和单纯脂质体组进行比较差异有显著性(P<0.05);阴性对照shRNA组与单纯脂质体组比较则无明显差异(P>0.05)。Bcl-2 shRNA1和Bcl-2 shRNA2作用于Molt4细胞48 h后,姬姆萨染色可见凋亡细胞。流式细胞仪检测示Bcl-2 shRNA1组和Bcl-2 shRNA2组细胞凋亡率随时间逐渐增高,与空白组和单纯脂质体组进行比较差异有显著性(P<0.05),但Bcl-2 shRNA1组和Bcl-2 shR-NA2组二者间无明显差异(P>0.05)。结论:Bcl-2 shRNA表达载体可促进Molt4细胞的凋亡。 展开更多
关键词 BCL-2 短发夹样RNA Molt4细胞 cell凋亡
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hTERT基因反义核酸促进顺铂诱导原代急性淋巴细胞白血病细胞凋亡的研究 被引量：1
16
作者 李文瑜 张洹 何冬梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1459-1462,共4页
目的 :利用人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因的反义寡核苷酸 (ASPS -ODN)抑制人原代急性淋巴细胞白血病 (ALL)细胞hTERT基因表达后 ,观察顺铂对ALL细胞凋亡的影响。方法 :采用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达量的变... 目的 :利用人类端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因的反义寡核苷酸 (ASPS -ODN)抑制人原代急性淋巴细胞白血病 (ALL)细胞hTERT基因表达后 ,观察顺铂对ALL细胞凋亡的影响。方法 :采用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白表达量的变化 ;以台盼蓝拒染法计数细胞数 ,确定细胞的增殖情况 ;Hoechst 332 5 8和PI双染色法观察凋亡细胞的形态变化 ;通过流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析。结果 :hTERT反义核酸作用于ALL细胞 72hhTERT蛋白表达阳性率为 (32 17± 3 0 0 ) % ,与空白对照组 (6 6 31± 2 84 ) %及正义核酸作用组 (6 2 5 6± 6 11) %比有显著差异 (P <0 0 5 ) ;而正义核酸作用组与空白对照组比无显著差异 (P >0 0 5 )。hTERT反义核酸作用于ALL细胞 2 4h加入顺铂 ,再共同作用 4 8h ,ALL活细胞均数为 1 75 0× 10 8cells/L ,与单用顺铂组 (2 0 90× 10 8cells/L)及hTERT正义核酸联用顺铂组 (1 990× 10 8cells/L)相比 ,对细胞抑制明显增强 (P <0 0 5 )。hTERTASPS -ODN作用于ALL细胞 2 4h再加入顺铂作用 4 8h ,细胞出现典型的凋亡形态学改变。hTERTASPS -ODN与 2 5 μmol/L顺铂联合作用于ALL细胞 4 8h的凋亡细胞百分率 (37 85± 2 4 4 ) %分别同SPS -ODN与顺铂联合作用组 (15 16±2 展开更多
关键词 HTERT基因 人类端粒酶逆转录酶基因 反义寡核甘酸类 原代急性淋巴细胞白血病 顺铂 细胞凋亡
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白血病患者异基因造血干细胞移植后T细胞免疫重建的研究 被引量：1
17
作者 杜欣 李扬秋 +8 位作者 陈少华 杨力建 翁建宇 陆泽生 陈安薇 吴穗晶 谢蓉 林伟 黄梓伦 《现代临床医学生物工程学杂志》 CAS 2003年第5期393-395,共3页
目的　通过分析TCRVβ基因片段选择性扩增 ,了解白血病患者异基因外周血干细胞移植后T淋巴细胞的免疫重建及其在移植物抗宿主病 (GVHD)患者中的表达特点 .方法　采用RT -PCR扩增 10例移植后患者外周血的单个核细胞的TCRVβ 2 4个基因片... 目的　通过分析TCRVβ基因片段选择性扩增 ,了解白血病患者异基因外周血干细胞移植后T淋巴细胞的免疫重建及其在移植物抗宿主病 (GVHD)患者中的表达特点 .方法　采用RT -PCR扩增 10例移植后患者外周血的单个核细胞的TCRVβ 2 4个基因片段 ,分析其TCRVβ基因的表达情况 ,GVHD患者的PCR产物进一步经基因扫描分析确定T细胞克隆性 .结果　经 2 4个Vβ引物所分别进行的RT -PCR检测TCRVβ各亚家族基因的表达情况 ,发现 10例病人外周血与正常人表达 2 4个Vβ亚家族有明显的不同 ,病人的部分Vβ亚家族T细胞仍未能重建 ,仅表达 5～ 2 2个亚家族基因 ;9例GVHD患者外周血仅表达 2～ 8个TCRVβ亚家族 ,其中 7例均表达Vβ3.对 6例GVHD患者的基因扫描显示 ,均存在克隆性T细胞生长 .结论　移植后病人外周血淋巴细胞TCRVβ基因片段部分受抑制 ,部分基因片段呈选择性扩增 .GVHD患者有Vβ3和Vβ8基因的优势表达 。 展开更多
关键词 白血病 异基因造血干细胞移植 T细胞 免疫重建 移植物抗宿主病
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中华眼镜蛇毒对K562/ADM和难治性急性髓性白血病细胞作用研究 被引量：1
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作者 吴穗晶 杜欣 +6 位作者 沈伟哉 李扬秋 凌伟 翁建宇 郭荣 钟立业 林伟 《新医学》 2013年第1期68-72,共5页
目的:探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对人红白血病/阿霉素细胞(K562/ADM细胞)及原代难治性急性髓性白血病细胞的作用。方法:以K562/ADM细胞及10例急性髓性白血病(AML)患者的原代初发难治性急性髓性白血病细胞为研究对象进行实验,应用不同剂量的... 目的:探讨中华眼镜蛇毒(NNAV)对人红白血病/阿霉素细胞(K562/ADM细胞)及原代难治性急性髓性白血病细胞的作用。方法:以K562/ADM细胞及10例急性髓性白血病(AML)患者的原代初发难治性急性髓性白血病细胞为研究对象进行实验,应用不同剂量的NNAV作用于细胞后,采用噻唑蓝实验法(MTT)测定细胞增殖情况,免疫细胞化学法检测凋亡相关蛋白Bcl2表达,流式细胞仪测定凋亡率,蛋白质印迹法检测Caspase-3表达。流式细胞仪检测NNAV对细胞周期的影响,检测原代初发难治性急性髓性白血病细胞细胞周期蛋白D(Cyclin-D)的表达情况;观察以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组有无差异。结果:经过不同浓度的NNAV处理后,无论是K562/ADM细胞还是初发难治性急性髓性白血病细胞,Bcl-2表达下调,Caspase-3表达上调;细胞增殖抑制明显,并具有时间依赖性及剂量依赖性。流式细胞仪检测证实0.8 mg/L和1.0 mg/L的NNAV均能够使原代初发难治性细胞阻滞于细胞周期的G0/G1期,而处于G2/M期的细胞含量减少。10例原发难治性急性髓性白血病细胞中Cyclin-D表达阳性7例,Cyclin-D表达阴性3例,但以上指标在Cyclin-D阳性表达组和阴性表达组无显著差异。结论:NNAV在体外可明显抑制K562/ADM细胞和原代初发难治性AML细胞增殖;调节细胞周期停滞于G0/G1期,减少G2/M期的细胞含量,提示NNAV有可能通过干预Bcl-2、Caspase-3表达而诱导细胞凋亡,细胞周期进程可能是中华眼镜蛇毒组分对原发难治性AML细胞的发挥增殖抑制作用的机制。 展开更多
关键词 中华眼镜蛇毒 白血病 K562 ADM细胞 细胞周期蛋白D
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血液肿瘤患者细胞免疫功能状态的研究 被引量：2
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作者 尹青松 李扬秋 《国外医学（输血及血液学分册）》 CAS 2005年第6期515-518,共4页
血液肿瘤患者均存在严重的免疫功能紊乱,由此而影响机体自发抗肿瘤免疫反应和各种抗肿瘤治疗效果。本文就新近有效的免疫检测手段——T细胞受体Vβ基因谱型分析和T细胞受体删除 DNA环及其检测的意义,血液肿瘤的细胞免疫功能缺陷状况和... 血液肿瘤患者均存在严重的免疫功能紊乱,由此而影响机体自发抗肿瘤免疫反应和各种抗肿瘤治疗效果。本文就新近有效的免疫检测手段——T细胞受体Vβ基因谱型分析和T细胞受体删除 DNA环及其检测的意义,血液肿瘤的细胞免疫功能缺陷状况和免疫缺陷的影响因素等作一综述。 展开更多
关键词 血液肿瘤 T细胞受体删除DNA环 T细胞受体Vβ基因谱 细胞免疫功能状态 肿瘤患者 抗肿瘤免疫反应 细胞免疫功能缺陷 T细胞受体 免疫功能紊乱 检测手段
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慢性粒细胞白血病患者细胞免疫功能研究进展 被引量：1
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作者 耿素霞 李扬秋 《现代临床医学生物工程学杂志》 CAS 2005年第5期373-375,共3页
细胞免疫在抗恶性肿瘤中起重要作用,白血病患者细胞免疫功能明显缺陷是影响其抵抗肿瘤的一个重要因素.慢性粒细胞白血病(CML)是白血病中较常见的类型,居第三位,其免疫功能异常主要体现在T淋巴细胞数量和质量、NK细胞、红细胞以及相关的... 细胞免疫在抗恶性肿瘤中起重要作用,白血病患者细胞免疫功能明显缺陷是影响其抵抗肿瘤的一个重要因素.慢性粒细胞白血病(CML)是白血病中较常见的类型,居第三位,其免疫功能异常主要体现在T淋巴细胞数量和质量、NK细胞、红细胞以及相关的细胞因子等方面的改变,本文就此进行综述. 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 T细胞 NK细胞 TCR VΒ基因 白细胞介素 免疫功能
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