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甘氨酸对缺氧/复氧心肌细胞[Ca^(2+)]i和TNF-α浓度的影响 被引量:10
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作者 李晓娟 陆大祥 +3 位作者 王华东 戚仁斌 王彦平 李楚杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期571-574,共4页
目的 :观察甘氨酸对缺氧 /复氧心肌细胞内游离钙、心肌细胞存活率和TNF -α浓度的影响。方法 :利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立心肌缺氧 /复氧 (H/R)模型 ,实验分 7组 :①对照组 ;②缺氧 /复氧 (H/R)组 ;③ 0 5mmol/L甘氨酸 (GLY... 目的 :观察甘氨酸对缺氧 /复氧心肌细胞内游离钙、心肌细胞存活率和TNF -α浓度的影响。方法 :利用原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞建立心肌缺氧 /复氧 (H/R)模型 ,实验分 7组 :①对照组 ;②缺氧 /复氧 (H/R)组 ;③ 0 5mmol/L甘氨酸 (GLY) +H/R组 ;④ 1 0mmol/LGLY +H/R组 ;⑤ 2 0mmol/LGLY +H/R组 ;⑥ 4 0mmol/LGLY +H/R组 ;⑦ 4 0mmol/LGLY对照组。结果 :在一定浓度范围内 (0 5 - 2 0mmol/L) ,甘氨酸能抑制缺氧 /复氧损伤引起的细胞内钙超载 ,并呈现剂量依赖性关系 ,在 2 0mmol/L浓度水平 ,达到最佳抑制效应。甘氨酸能抑制心肌细胞产生TNF -α ,避免心肌H/R损伤的加重 ,增加心肌细胞的存活率。结论 :甘氨酸对缺氧 /复氧心肌具有保护作用 ,其机制与抑制钙超载 ,减少TNF -α的生成有关。 展开更多
关键词 缺氧 甘氨酸 肿瘤坏死因子
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人羊膜上皮细胞的原代及传代培养 被引量:8
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作者 刘小勇 陈剑 +5 位作者 吴静 周清 王彦平 李红 徐锦堂 赵松滨 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期181-183,共3页
目的建立体外培养人羊膜上皮细胞的方法,观察体外培养的羊膜上皮细胞的生物学特性。方法取足月剖宫产术后羊膜,经胶原酶和胰蛋白酶消化后,获取的羊膜上皮细胞接种于含10%胎牛血清培养基中进行原代和传代培养,探索其合适的培养条件... 目的建立体外培养人羊膜上皮细胞的方法,观察体外培养的羊膜上皮细胞的生物学特性。方法取足月剖宫产术后羊膜,经胶原酶和胰蛋白酶消化后,获取的羊膜上皮细胞接种于含10%胎牛血清培养基中进行原代和传代培养,探索其合适的培养条件,用倒置显微镜观察培养的人羊膜上皮细胞体外生长的特征。用苏木精-伊红染色、扫描电镜和细胞角蛋白免疫组织化学染色的方法对培养细胞进行形态学观察和鉴定。结果人羊膜上皮细胞可以在体外成功的培养传代,体外可连续传8~10代。体外培养细胞呈多角形,长满后呈上皮细胞特有的铺路石样外观。扫描电镜观察细胞表面有丰富的微绒毛。细胞角蛋白keratin单克隆抗体染色阳性。结论人羊膜上皮细胞在体外可成功进行原代和传代培养,体外培养的人羊膜上皮细胞在一定时间内可维持增殖能力。 展开更多
关键词 羊膜 上皮细胞 细胞培养
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大鼠羊膜上皮细胞体外培养的初步研究 被引量:6
3
作者 金玲 陈剑 +4 位作者 吴静 徐锦堂 王彦平 赵松槟 郑佩娥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1036-1038,共3页
目的:研究大鼠羊膜上皮细胞(AECs)在体外培养时的形态变化和其生长特性,探讨EGF和血清对AECs生长和增殖性的影响。方法:分别取妊娠中期SD大鼠(12-14 d)和妊娠晚期SD大鼠(18-19 d)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用DMEM/F12培养液培养、传代... 目的:研究大鼠羊膜上皮细胞(AECs)在体外培养时的形态变化和其生长特性,探讨EGF和血清对AECs生长和增殖性的影响。方法:分别取妊娠中期SD大鼠(12-14 d)和妊娠晚期SD大鼠(18-19 d)的羊膜,制成AECs单细胞悬液,用DMEM/F12培养液培养、传代。光镜、扫描电镜下观察其生长的形态变化;MTT法检测EGF和血清对AECs生长和增殖性的影响。结果:妊娠中期和晚期AECs在体外培养时均生长良好、增殖活跃,但妊娠晚期AECs生长周期相对较短。结论:EGF和血清均能促进AECs增殖,其中EGF促进AECs的增殖更为显著。这为利用AECs进行细胞治疗和组织工程技术奠定了实验基础。 展开更多
关键词 大鼠 羊膜 上皮细胞 细胞培养
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视觉发育可塑性关键期后弱视大鼠视皮质c-fos的表达 被引量:5
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作者 周清 陈剑 +3 位作者 刘珏 徐锦堂 王彦平 赵松滨 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1594-1596,共3页
目的观察双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光照刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况,探讨已过视觉发育可塑性关键期的弱视大鼠视皮质内视觉可塑性的存留程度。方法14日龄SD大鼠共21只,随机分为无光照弱视组8只、光照弱视组8只和正常对照组5只... 目的观察双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠光照刺激诱导视皮质神经元c-fos表达情况,探讨已过视觉发育可塑性关键期的弱视大鼠视皮质内视觉可塑性的存留程度。方法14日龄SD大鼠共21只,随机分为无光照弱视组8只、光照弱视组8只和正常对照组5只,弱视组行双侧眼睑缝合术建立双眼形觉剥夺性弱视模型。饲养至100日龄后光照弱视组和对照组暴露于外界光线中0.5h,无光照弱视组不接触光线。取材后采用Nissl染色法及电镜观察3组视皮质神经元的形态改变,并用免疫组化技术检测c-fos蛋白表达情况。结果①弱视组视皮质神经元比正常组体积变小:②超微结构显示:弱视组视皮质出现早期类凋亡改变的神经元;③光照弱视组视皮质内Ⅱ~Ⅳ层各层中c-fos免疫刚性神经元密度明显高于另外两组(P<0.05)。结论双眼形觉剥夺性弱视成年大鼠视皮质经光照刺激诱导c-fos表达增加,提示已过视觉发育敏感期成年大鼠的视皮质仍存留一定程度的视觉可塑性。 展开更多
关键词 形觉剥夺性弱视 SD成年大鼠 C-FOS 视觉发育可塑性
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山茱萸总甙滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究 被引量:3
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作者 孟晶 陈建苏 +4 位作者 李辰 赵松滨 杨皓庄 张穗梅 狄静芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期511-513,T004,共4页
目的 :观察山茱萸总甙 (COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,用裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜排斥反应发生时间 ;并进行病理学和扫描电镜检查。结果 :病理学检查B、C组 15d时的角膜... 目的 :观察山茱萸总甙 (COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,用裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜排斥反应发生时间 ;并进行病理学和扫描电镜检查。结果 :病理学检查B、C组 15d时的角膜植片淋巴细胞浸润及新生血管明显少于A组。免疫组化显示 :ICAM - 1的表达在 15d时B、C组明显少于A组。结论 :COG滴眼液能有效地防治角膜移植免疫排斥反应。 展开更多
关键词 山茱萸总甙 滴眼液 防治 角膜移植 免疫排斥反应 实验研究
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兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的培养及冻存 被引量:2
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作者 苗晓晴 陈剑 +2 位作者 吴静 徐锦堂 王彦平 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期171-173,共3页
目的探讨体外培养兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的最佳方法,为进一步研究结膜的生物学特性和结膜重建提供基础。方法分别用组织块法培养结膜上皮细胞和混合消化法培养结膜基质细胞,用倒置显微镜观察其生长方式和形态特征;收集第2代细胞,... 目的探讨体外培养兔眼结膜上皮细胞和成纤维细胞的最佳方法,为进一步研究结膜的生物学特性和结膜重建提供基础。方法分别用组织块法培养结膜上皮细胞和混合消化法培养结膜基质细胞,用倒置显微镜观察其生长方式和形态特征;收集第2代细胞,-80℃冻存。结果兔眼结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞可以在体外成功培养,结膜上皮细胞呈圆形或多角形,成纤维细胞呈长梭形;冻存细胞1个月后复苏成功率达80%。结论组织块法和混合消化法培养可成功获得结膜上皮细胞和上皮下成纤维细胞。 展开更多
关键词 结膜 上皮细胞 成纤维细胞 细胞培养 冻存 复苏
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层粘连蛋白促进兔角膜内皮细胞bcl2表达的最适浓度测定
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作者 朱晓谦 吴静 王彦平 《眼科新进展》 CAS 2004年第6期426-428,共3页
目的 探索层粘连蛋白促进兔角膜内皮细胞bcl 2表达的最适浓度。方法 给于体外培养的兔角膜内皮细胞以不同浓度的层粘连蛋白 ,采用酶联免疫技术找到最适作用浓度。结果 在一定的浓度范围内 (2 0~ 6 0mg·L-1)层粘连蛋白能够促进... 目的 探索层粘连蛋白促进兔角膜内皮细胞bcl 2表达的最适浓度。方法 给于体外培养的兔角膜内皮细胞以不同浓度的层粘连蛋白 ,采用酶联免疫技术找到最适作用浓度。结果 在一定的浓度范围内 (2 0~ 6 0mg·L-1)层粘连蛋白能够促进家兔角膜内皮细胞bcl 2的表达 ,并且成量效依赖关系 ,在 6 0mg·L-1时有最佳的促进作用。结论 层粘连蛋白可以促进兔角膜内皮细胞bcl 2基因表达的作用 ,最适作用浓度为 6 0mg·L-1。 展开更多
关键词 最适浓度 层粘连蛋白 BCL-2基因 兔角膜内皮细胞 酶联免疫技术
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