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重组人碱性成纤维细胞生长因子肽图分析方法的优化
1
作者 石俊芳 滕凌 +2 位作者 谭雅超 周婷 姚晓林 《中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生》 2023年第12期78-80,共3页
随着重组人碱性成纤维细胞生长因子在临床应用越来越广泛,肽图分析是其质量控制的主要方法,探索并确定重组人碱性成纤维细胞生长因子的最佳酶解条件,建立酶解更完全、特异性更强的适用于重组人碱性成纤维细胞生长因子的HPLC肽图的分析... 随着重组人碱性成纤维细胞生长因子在临床应用越来越广泛,肽图分析是其质量控制的主要方法,探索并确定重组人碱性成纤维细胞生长因子的最佳酶解条件,建立酶解更完全、特异性更强的适用于重组人碱性成纤维细胞生长因子的HPLC肽图的分析方法尤为迫切。方法 采用蛋白酶裂解-反相高效液相色谱法,以2M UA溶液作为酶解缓冲液,加入酶解比例蛋白质:酶w/w =20:1的Trypsin,于37 ℃酶解16 h终止反应。通过梯度洗脱,采用超高效液相色谱质谱对各色谱峰进行目标肽段的分离和鉴定。结论 重组人碱性成纤维细胞生长因子基本完全酶解,酶解时间为16 h,缩短了8 h,酶解比例为蛋白质:酶w/w =20:1,酶量大大减少,节约实验成本,酶解的完全性与有效性大幅提高,产生的10个特征峰重复率高,特征肽段理论塔板数大于2000,特征肽段与相邻峰之间的分离度大于1.2,且色谱图基线平稳。 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 酶解条件 肽图分析 反相高效液相色谱法
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重组人碱性成纤维细胞生长因子冻干品复溶稳定性研究
2
作者 谭雅超 谢钰怡 +2 位作者 周婷 滕凌 石俊芳 《中文科技期刊数据库（全文版）自然科学》 2023年第12期68-70,共3页
研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)冻干品复溶后的稳定性.方法 将rh-bFGF冻干品经注射用水复溶后,置于4℃、25℃、37℃条件下,采用MTT法检测不同时间点的生物学活性,同时进行微生物限度检查。结果 rh-bFGF冻干品复溶后在2-8℃... 研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)冻干品复溶后的稳定性.方法 将rh-bFGF冻干品经注射用水复溶后,置于4℃、25℃、37℃条件下,采用MTT法检测不同时间点的生物学活性,同时进行微生物限度检查。结果 rh-bFGF冻干品复溶后在2-8℃条件下其活性均随时间的延长而缓慢下降,放置7天仍有活性;在25℃下可维持3天的活性,在37℃下可保留1小时的活性;微生物限度及控制菌检查,所有时间点的样品均未检出微生物,均符合规定要求。结论 rh-bFGF冻干品复溶后,首选放置2-8℃冰箱中,有7天使用有效期;若无冰箱,可置于屋内干燥清凉处保存,有3天使用有效期;不建议37℃保存。 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 稳定性 生物学活性
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重组人碱性成纤维细胞生长因子中的游离巯基含量测定
3
作者 石俊芳 谢钰怡 +2 位作者 梁庆 黄桂海 谭雅超 《中文科技期刊数据库（全文版）自然科学》 2023年第12期71-73,共3页
通过检测重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)中的游离巯基的含量,探讨rh-bFGF分子中游离巯基的存在状态。方法 通过Ellman法对大规模生产的3批rh-bFGF原液中的游离巯基进行含量测定。结果 3批rh-bFGF原液每摩尔蛋白中游离巯基的实... 通过检测重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)中的游离巯基的含量,探讨rh-bFGF分子中游离巯基的存在状态。方法 通过Ellman法对大规模生产的3批rh-bFGF原液中的游离巯基进行含量测定。结果 3批rh-bFGF原液每摩尔蛋白中游离巯基的实测值为3.675摩尔、3.889摩尔、3.664摩尔。结论 rh-bFGF分子中游离巯基的理论值为4摩尔/摩尔蛋白,实测值与理论值较为一致,说明目标蛋白rh-bFGF基本没有形成二硫键。 展开更多
关键词 重组人碱性成纤维细胞生长因子 Ellman法 游离巯基
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液质联用分析rh-bFGF的翻译后修饰
4
作者 付廷灵 陈美明 +2 位作者 黄桂海 滕凌 石俊芳 《中文科技期刊数据库（全文版）自然科学》 2023年第12期97-99,共3页
液质联用分析重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rh-bFGF) 的翻译后修饰。将rh-bFGF进行酶解,经毛细管高效液相色谱分离,然后使用质谱仪进行检测分析,对翻译后修饰进行鉴定和定量。检测到该蛋白各批次之间具有相同位点的翻译后修饰,主要包... 液质联用分析重组人碱性成纤维细胞生长因子 (rh-bFGF) 的翻译后修饰。将rh-bFGF进行酶解,经毛细管高效液相色谱分离,然后使用质谱仪进行检测分析,对翻译后修饰进行鉴定和定量。检测到该蛋白各批次之间具有相同位点的翻译后修饰,主要包括氧化修饰和脱酰胺化修饰。液质联用结合适当的样品前处理方式, 可快速、准确地对该蛋白的翻译后修饰进行鉴定。 展开更多
关键词 液质联用 翻译后修饰 RH-BFGF
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负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗难愈性创面的临床效果分析
5
作者 滕凌 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2024年第10期0032-0035,共4页
探讨负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗难愈性创面的临床效果。方法 在2023年第三及第四季度期间,在本院的难愈性创面患者中选择了96例患者,按照数量对等原则将这些患者分为研究组及参照组两种,对参照组采用常规的手术清创... 探讨负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗难愈性创面的临床效果。方法 在2023年第三及第四季度期间,在本院的难愈性创面患者中选择了96例患者,按照数量对等原则将这些患者分为研究组及参照组两种,对参照组采用常规的手术清创、机械清创及酶学法清创等治疗方法,对研究组患者则采用负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗,每个患者均治疗、观察半个月以上,跟踪并记录这些患者的肉芽生长情况、创面愈合情况,对他们进行诊疗护理满意度调查。结果 研究组患者肉芽生长情况的良好率、较好率、一般率、较差率分别为56.25%、39.58%、4.17%、00.00%。参照组患者肉芽生长情况的良好率、较好率、一般率、较差率分别为27.08%、22.92%、31.25%、18.78%。研究组患者24h后的残创面积、平均愈合时间、平均住院时间、半年后的瘢痕面积均值、半年内不良事件发生率分别是12.45±2.94cm、15.76±1.29天、12.45±2.94天、5.64±1.21cm、27.08%;参照患者24h后的残创面积、平均愈合时间、平均住院时间、半年后的瘢痕面积均值、半年内不良事件发生率分别是19.33±3.14cm、23.47±2.81天、15(31.25)天、13.47±2.15cm、85.42%。P<0.05。结论 对于难愈性创面患者的治疗而言,应用负压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子治疗方法可催动肉芽组织实现更为快速的生长,并且能确保较好的治愈率,有着比较不错的临床效果。 展开更多
关键词 压引流联合重组人碱性成纤维细胞生长因子 难愈性创面 临床效果 愈合
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