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杭州师范大学“实验动物科学实验室”简介
1
作者 吴宝金 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期232-232,共1页
杭州师范大学“实验动物科学实验室”由校实验动物中心和医学实验中心优化组合而成，隶属于杭州师大学实验室与设备管理处；2006年12月被确定为校级重点实验室，2008年12月被确定为杭州市重点实验室建设点；是浙江省首批实验动物公共服... 杭州师范大学“实验动物科学实验室”由校实验动物中心和医学实验中心优化组合而成，隶属于杭州师大学实验室与设备管理处；2006年12月被确定为校级重点实验室，2008年12月被确定为杭州市重点实验室建设点；是浙江省首批实验动物公共服务平台成员单位——浙江省大动物实验基地及浙江省唯一的实验动物技术人员培训基地。 展开更多
关键词 实验动物科学 大学实验室 师范大学 杭州市 实验动物中心 公共服务平台 重点实验室 实验室建设
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snthr^(-1Bao)稀毛小鼠突变基因的精确定位及克隆鉴定 被引量：7
2
作者 吴宝金 茅慧华 +8 位作者 曾咏梅 殷黎静 殷筱舒 杨伟伟 亢晓冬 刘桂杰 俞利平 顾美儿 吴培林 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期267-275,共9页
snthr-1Bao稀毛小鼠是本实验室培育的呈单基因隐性遗传的突变系小鼠,突变基因已被初步定位于第9号染色体末端;为了精确定位并鉴定snthr-1Bao稀毛小鼠的突变基因,将(C57BL/6J×snthr-1Bao)F1代互交繁殖F2代小鼠4400余只,其中稀毛小鼠... snthr-1Bao稀毛小鼠是本实验室培育的呈单基因隐性遗传的突变系小鼠,突变基因已被初步定位于第9号染色体末端;为了精确定位并鉴定snthr-1Bao稀毛小鼠的突变基因,将(C57BL/6J×snthr-1Bao)F1代互交繁殖F2代小鼠4400余只,其中稀毛小鼠1100只,并在2个微卫星、35个可能的简单序列重复标记(simple sequence repeat,SSR)及3个酶切扩增多态性序列(c1eaved amplified polymorphic sequences,CAPS)标记中找到4个合适的基因组标记。利用这些标记及F2代稀毛小鼠将突变基因精确定位到第9号染色体距着丝粒117.763kb及119.129kb之间1.367Mb的范围内,在其间的21个基因中确定Plcd1为稀毛突变的强力候选基因。通过对基因组的直接测序,发现snthr-1Bao稀毛小鼠基因组上有一个14883bp的缺失,这一缺失包含了Plcd1基因的4—15号外显子及Vill基因的10—19号外显子。推测极可能是Plcd1基因缺失导致snthr-1Bao小鼠出现稀毛表型。 展开更多
关键词 snthr-1Bao稀毛小鼠 精确定位 Plcd1 Vill 缺失
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豚鼠基因组26个多态性微卫星标记的筛选 被引量：5
3
作者 刘迪文 杨伟伟 吴宝金 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第3期78-83,共6页
目的筛选豚鼠基因组的多态性微卫星标记,为豚鼠遗传质量控制及基因定位等工作奠定基础。方法采用磁珠富集法和豚鼠基因组数据库筛选法获取微卫星位点序列,通过分析和初步筛选,挑选部分候选位点,根据其序列设计引物,对5种不同来源的豚鼠... 目的筛选豚鼠基因组的多态性微卫星标记,为豚鼠遗传质量控制及基因定位等工作奠定基础。方法采用磁珠富集法和豚鼠基因组数据库筛选法获取微卫星位点序列,通过分析和初步筛选,挑选部分候选位点,根据其序列设计引物,对5种不同来源的豚鼠基因组DNA标本进行PCR扩增,以期获得多态性分子标记。结果本实验采用磁珠富集法共获得微卫星序列304个,设计引物125对,最终获得多态性位点1个,暂未发现多态性的特异性位点17个;用数据库筛选法共获得微卫星序列292个,设计并合成相应引物178对,最终发现多态性位点25个,暂未发现多态性的特异性位点28个。结论本实验获得26个多态性微卫星标记,45个潜在的候选标记,为微卫星标记在豚鼠遗传质量监测及突变基因定位等工作的应用奠定了基础。 展开更多
关键词 豚鼠 微卫星 多态性标记 筛选
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Kit无义突变致W^(-3Bao)小鼠生殖腺异常及纯合子贫血死亡 被引量：1
4
作者 吴培林 尹洪萍 +8 位作者 殷黎静 朱洁 曾咏梅 刘桂杰 亢晓冬 俞利平 顾美儿 袁红 吴宝金 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期45-52,共8页
W-3Bao是本研究组通过诱变获得、Kit无义突变的白斑小鼠。突变基因杂合子小鼠腹部、四肢肢端及尾尖白化,其部分精曲小管内无精原细胞。突变纯合子小鼠在胚胎后期色泽苍白、个体矮小,于出生前后死亡;血液学检查发现纯合子小鼠血色素极低... W-3Bao是本研究组通过诱变获得、Kit无义突变的白斑小鼠。突变基因杂合子小鼠腹部、四肢肢端及尾尖白化,其部分精曲小管内无精原细胞。突变纯合子小鼠在胚胎后期色泽苍白、个体矮小,于出生前后死亡;血液学检查发现纯合子小鼠血色素极低且红细胞变大;18.5天胚胎的连续切片可见精曲小管轮廓欠清晰,精原细胞分散分布于睾丸间质,未迁入精曲小管;卵巢结构紊乱,无明显的原始卵泡结构;骨髓等器官组织未见显著异常。结论:Kit无义突变不仅导致了W-3Bao杂合子小鼠白斑形成及纯合子小鼠贫血死亡,同时影响生殖腺发育。 展开更多
关键词 W-3Bao小鼠 KIT基因 死亡 大红细胞贫血 生殖腺异常
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AKR/J小鼠的表型特征与疾病模型价值评估 被引量：1
5
作者 顾美儿 杨伟伟 +6 位作者 俞利平 卢增兰 邓巧凤 顾小丽 张艳丽 吴宝金 刘桂杰 《健康研究》 CAS 2012年第1期10-15,F0003,共7页
目的深入分析AKR/J小鼠的与胆固醇代谢相关的表型特征及其内在联系,探讨其作为人类疾病模型的价值。方法 AKR/J小鼠为实验组,BABL/C小鼠为对照组,取两组小鼠毛发镜下观察;取两组小鼠的肾上腺、卵巢、睾丸,冷冻切片后进行油红O染色;检测... 目的深入分析AKR/J小鼠的与胆固醇代谢相关的表型特征及其内在联系,探讨其作为人类疾病模型的价值。方法 AKR/J小鼠为实验组,BABL/C小鼠为对照组,取两组小鼠毛发镜下观察;取两组小鼠的肾上腺、卵巢、睾丸,冷冻切片后进行油红O染色;检测并比较两组小鼠肾上腺相关激素(皮质素、醛固酮、ACTH)水平;检测并比较血常规、血糖、血脂(甘油三酯,总胆固醇)、血电解质及血压。结果 AKR/J小鼠内部毛发结构排列紊乱,肾上腺脂类含量明显少于对照鼠,皮质素、醛固酮、总胆固醇浓度比对照小鼠有显著性降低(P<0.01);血液Na+、Cl-、Mg2+浓度及平均血红蛋白含量低于对照鼠,Ca2+浓度高于对照鼠(p<0.05),其他各项指标均无显著性差别。结论 AKR/J小鼠是人类毛发结构缺陷、肾上腺皮质机能减退等疾病的天然模型,也是胆结石及动脉粥样硬化的抗性模型。 展开更多
关键词 AKR/J小鼠 肾上腺脂质缺乏 毛髓缺失 疾病模型
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建立卵泡刺激素受体单位点基因突变体的卵巢癌SKOV3细胞和裸鼠模型
6
作者 姚济芬 俞利平 +6 位作者 董小龙 卢玲芬 张晓光 王亚云 韦兰芳 王水英 黄荷凤 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期767-771,共5页
目的建立转染卵泡刺激素受体(FSHR)307和680位点突变的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系和裸鼠动物模型。方法将人卵巢颗粒细胞(来自体外受精取卵时废弃的颗粒细胞),行原代培养后用于FSHR RNA提取;FSHR和FSHR307、680位点突变重组蛋白构建;将FSH... 目的建立转染卵泡刺激素受体(FSHR)307和680位点突变的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系和裸鼠动物模型。方法将人卵巢颗粒细胞(来自体外受精取卵时废弃的颗粒细胞),行原代培养后用于FSHR RNA提取;FSHR和FSHR307、680位点突变重组蛋白构建;将FSHR和FSHR307、680位点突变蛋白转染SKOV3细胞株;将处理后的3组SKOV3细胞接种到裸鼠皮下,8周后处死裸鼠,并取瘤组织验证。结果建立了307和680位点突变的FSH受体高表达的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系和裸鼠动物模型。结论成功地建立了307和680位点突变的FSH受体高表达的SKOV3上皮性卵巢癌细胞系和裸鼠移植瘤模型,为FSH在上皮性卵巢癌中的作用和治疗提供了一种新的细胞模型和动物模型。 展开更多
关键词 卵泡刺激素受体 突变 上皮性卵巢癌 SKOV3细胞系 反转录-聚合酶链反应 裸鼠
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温度对喜马拉雅低额溞生长与生殖的影响
7
作者 施心路 齐彩花 +2 位作者 刘桂杰 鲍双燕 黄小娜 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期794-805,共12页
对采自中国云南省高海拔地区一稀有低额溞-喜马拉雅低额溞(Simocephalus himalayensis)在低海拔地区实验室内不同温度梯度下的生长及生殖能力进行了研究。结果表明:高海拔地区生活的低额溞在低海拔地区的相应环境中同样生长繁殖良好,其... 对采自中国云南省高海拔地区一稀有低额溞-喜马拉雅低额溞(Simocephalus himalayensis)在低海拔地区实验室内不同温度梯度下的生长及生殖能力进行了研究。结果表明:高海拔地区生活的低额溞在低海拔地区的相应环境中同样生长繁殖良好,其繁殖率、最大生殖量及种群的增长能力不受海拔高度及不同环境条件的影响。在一定温度条件下(15—31℃,误差为±1℃),喜马拉雅低额溞的发育速率随温度的升高而加快,但在32℃时减慢。在通常培养条件下,喜马拉雅低额溞一般有4个幼龄期(15℃时部分溞体有5个幼龄),16—19个成龄,平均寿命通常为74d(15℃)、54d(20℃)、39d(25℃)和24d(30℃)。平均总产仔量在15—25℃最高,分别为449个(15℃)、482个(20℃)和447个(25℃)。各温度梯度下的体长增长模型都表明,其体长与龄期之间存在显著的对数关系。每溞平均生殖量以20℃时最高,种群的内禀增长率(rm)和一生的生殖次数都以25℃时最高,净增殖率(R0)以20℃最高。喜马拉雅低额溞最适合的繁殖温度范围在15—25℃。研究还对该种与相应种类在不同温度条件下的生殖量和生物学特性进行了比较。 展开更多
关键词 淡水枝角类 喜马拉雅低额溞 生长 生殖 种群增长
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Vill转基因小鼠的制备
8
作者 殷黎静 杨伟伟 +5 位作者 殷筱舒 顾小丽 张艳丽 李高天 郑经纬 吴宝金 《实验动物科学》 2014年第2期7-12,共6页
目的通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能。方法与结果首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物并引入酶切位点,将PCR扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切... 目的通过制备Vill转基因小鼠研究该基因的功能。方法与结果首先由RT-PCR方法获得全长约2 605 bp的Vill基因;经T载体克隆测序验证后,以克隆载体pMD19-T-Vill为模板,设计引物并引入酶切位点,将PCR扩增产物与pEF6/V5-His-LacZ同时进行酶切、连接,构建表达载体pEF6/V5His-Vill;经真核表达验证后,酶切获得含Vill基因的显微注射DNA构件;显微注射390枚受精卵后,在出生存活的77只仔鼠中获得转基因阳性G0代小鼠19只,其中16只能够稳定遗传并建系,转基因阳性小鼠外观未有明显改变。结论 Vill转基因小鼠为该基因的功能研究准备了实验材料。 展开更多
关键词 Vill基因 pEF6 V5His—Vill 显微注射 转基因小鼠
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三例眼部突变小鼠的培育及特征分析
9
作者 杨伟伟 金红颖 +7 位作者 吴晓玲 周祥 李高天 刘桂杰 顾美儿 俞利平 宋晓明 吴宝金 《实验动物科学》 2014年第5期1-4,I0001,I0002,共6页
目的筛选培育眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供材料。方法采用N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱变处理G0代小鼠,繁育获得G1代,筛选眼部突变表型个体,进行遗传力试验、临床诊断及病理学观察。结果本实验繁殖G1... 目的筛选培育眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供材料。方法采用N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)诱变处理G0代小鼠,繁育获得G1代,筛选眼部突变表型个体,进行遗传力试验、临床诊断及病理学观察。结果本实验繁殖G1代小鼠2782只,经筛查获得眼部突变表型小鼠65只,可稳定遗传小鼠3例,分别表现为:角膜混浊、小眼球和虹膜异常等特征。角膜混浊者其角膜症状严重程度差异较大,角膜病变部位明显增厚,部分伴有新生血管;小眼球者睑裂较小,甚至上下眼睑粘连,外观眼球不可见,病理学检查可见内有发育异常的小眼球;虹膜异常者可见瞳孔偏大,明显偏离中心位置,偏向位置不定,对光无反射,病理学观察可见虹膜晶状体粘连、虹膜缺损,严重者伴有视网膜异常等。结论本实验成功培育了3例眼部突变表型小鼠,为人类相关疾病的研究提供良好的材料。 展开更多
关键词 眼部疾病 小鼠模型 诱变
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Kit基因错义突变导致Kit^(W-2Bao)小鼠生殖腺的异常发育
10
作者 吴宝金 殷黎静 +9 位作者 卢增兰 殷筱舒 杨伟伟 杨蓉 亢晓冬 刘桂杰 尹洪萍 俞利平 顾美儿 吴培林 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第31期3032-3039,共8页
KitW-2Bao是本实验室培育的B6背景、呈单基因显性遗传的突变系小鼠,杂合子腹部、肢端及尾端白化,纯合子全身白化、黑眼、不育.突变纯合子小鼠生殖腺变小、结构异常、缺乏生殖细胞,杂合子雄鼠部分精曲小管内无生精细胞.通过连锁分析将突... KitW-2Bao是本实验室培育的B6背景、呈单基因显性遗传的突变系小鼠,杂合子腹部、肢端及尾端白化,纯合子全身白化、黑眼、不育.突变纯合子小鼠生殖腺变小、结构异常、缺乏生殖细胞,杂合子雄鼠部分精曲小管内无生精细胞.通过连锁分析将突变基因定位于第5号染色距着丝粒42.8cM处,确定Kit为候选基因.RT-PCR扩增Kit全长的mRNA,经测序发现其ORF的第1228位碱基由G转换成T,这一变化导致第410位的氨基酸由V变成F,预测会引起局部二级结构发生显著变化;随后将杂合子突变小鼠互交,在基因型鉴定的基础上,通过碱性磷酸酶染色等方法追踪生殖细胞异常发育过程,发现在胚胎11.5d,突变纯合子小鼠的原始生殖细胞未出现在尿生殖嵴区,突变杂合子小鼠的原始生殖细胞显著减少;在胚胎15.5d,纯合子小鼠睾丸内精曲小管结构分化不清,无精原细胞,卵巢内无原始卵泡;杂合子小鼠精原细胞及原始卵泡数量显著减少.W-2Bao为KIT胞外区第4个Ig结构域内唯一的等位突变,是研究其功能及生殖系统发育机制的新材料. 展开更多
关键词 小鼠 KIT 错义突变 生殖腺
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