为快速准确鉴定外部形态相似的赤拟谷盗(Tribolium castaneum(Herbst))和杂拟谷盗(Tribolium confusum Jacquelin du Val),分别对赤拟谷盗和杂拟谷盗的成虫和幼虫Cytb基因片段进行PCR扩增、测序,并分析两物种该基因片段的限制性内切酶...为快速准确鉴定外部形态相似的赤拟谷盗(Tribolium castaneum(Herbst))和杂拟谷盗(Tribolium confusum Jacquelin du Val),分别对赤拟谷盗和杂拟谷盗的成虫和幼虫Cytb基因片段进行PCR扩增、测序,并分析两物种该基因片段的限制性内切酶位点差异,根据PCR产物酶切图谱的差异进行物种鉴定。结果表明:两种害虫成虫和幼虫所选Cytb基因扩增片段长度均为640 bp,两物种该基因片段序列同源性为77.19%,核苷酸转换发生83次,颠换发生63次,转换与颠换次数比为1.3;两物种该片段内Bst X I、Sal I、Xba I、Vsp I和Age I等5种限制性内切酶酶切具有显著差异,对Bst X I、Sal I、Xba I和Vsp I 4种酶切图谱进行了验证,其酶切图谱与软件分析结果一致,可以通过这4种限制酶的酶切图谱对赤拟谷盗和杂拟谷盗的成虫及幼虫进行快速准确鉴定。用PCR-RFLP方法可以准确鉴定赤拟谷盗和杂拟谷盗的幼虫和成虫,为精准防控提供科学支持。展开更多
文摘为快速准确鉴定外部形态相似的赤拟谷盗(Tribolium castaneum(Herbst))和杂拟谷盗(Tribolium confusum Jacquelin du Val),分别对赤拟谷盗和杂拟谷盗的成虫和幼虫Cytb基因片段进行PCR扩增、测序,并分析两物种该基因片段的限制性内切酶位点差异,根据PCR产物酶切图谱的差异进行物种鉴定。结果表明:两种害虫成虫和幼虫所选Cytb基因扩增片段长度均为640 bp,两物种该基因片段序列同源性为77.19%,核苷酸转换发生83次,颠换发生63次,转换与颠换次数比为1.3;两物种该片段内Bst X I、Sal I、Xba I、Vsp I和Age I等5种限制性内切酶酶切具有显著差异,对Bst X I、Sal I、Xba I和Vsp I 4种酶切图谱进行了验证,其酶切图谱与软件分析结果一致,可以通过这4种限制酶的酶切图谱对赤拟谷盗和杂拟谷盗的成虫及幼虫进行快速准确鉴定。用PCR-RFLP方法可以准确鉴定赤拟谷盗和杂拟谷盗的幼虫和成虫,为精准防控提供科学支持。
