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HBX蛋白与M2巨噬细胞介导肝癌细胞上皮间质转化的实验研究 被引量：4
1
作者 杜恒 戴德坚 +3 位作者 郭晓雷 程明荣 汪运节 陈益鸣 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2016年第6期497-500,共4页
目的探讨乙肝病毒x蛋白（HBX）和炎症微环境M2巨噬细胞对肝癌细胞侵袭转移的影响。方法HBX／LV5慢病毒转染Hep3B细胞后与人单核细胞系THP-1来源的M2巨噬细胞共培养，形成肝癌微环境模型。实验分2组：感染组（Hep3B^＋、Hep3B^＋＋M2）... 目的探讨乙肝病毒x蛋白（HBX）和炎症微环境M2巨噬细胞对肝癌细胞侵袭转移的影响。方法HBX／LV5慢病毒转染Hep3B细胞后与人单核细胞系THP-1来源的M2巨噬细胞共培养，形成肝癌微环境模型。实验分2组：感染组（Hep3B^＋、Hep3B^＋＋M2）、非感染组（Hep3B^-、Hep3B2-＋LV5、Hep3B2-＋LV5＋M2，、Hep3B2-＋M2）。采用Western blot检测Hep3B细胞转染前后的上皮间质转化（epithelial—mesenchymal transition，EMT）、上皮标志物（E-cadhefin）和间叶标志物（N-cadhefin），用激光共聚焦显微镜观察E-cadherin和N-cadhefin在Hep3B细胞的分子定位，通过transwell实验评价其侵袭转移能力。结果HBX／LV5成功转染到Hep3B细胞内，并在细胞内稳定表达HBX蛋白（Hep3B^＋）。Hep3B^＋与M2共培养72h后．经Westernblot检测发现Hep3B^＋E—cadherin表达（0．42±0．11）较Hep3B-（1．00±0．18）明显下调（t=4．762，P〈0．05），N—cadherin表达（2．85±0．44）较Hep3B^-（1．00^0．17）明显上调（t=6．793，P〈0．05）。Hep3B^＋＋M2E—cadhefin（0．1±0．13）表达较Hep3B^＋显著下调（t=3．255，P〈0．05），N-cadhefin表达（4．18±0．52）较Hep3B^＋显著上调（t=10．009，P〈0．05）；非感染组EMT标记分子表达水平无明显变化；TransWell实验提示感染组侵袭转移能力显著提高。结论乙型肝炎病毒HBX蛋白和M2巨噬细胞通过EMT机制共同介导肝癌细胞侵袭转移。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 肿瘤侵袭 巨噬细胞
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