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再程序化脂肪干细胞体外定向神经分化效率和机制 被引量：4
1
作者 钱腾达 代学良 +2 位作者 陆晓诚 陶轶 李立新 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1135-1139,共5页
目的探讨再程序化脂肪干细胞（adipose—derived stem cells，ADSCs）体外定向神经分化的效率和机制。方法体外培养大鼠ADSCs并纯化、鉴定，将第3代ADSCs分为三组：未进行慢病毒介导基因转染ADSCs组（空白组）；不含神经元生成素-2（neu... 目的探讨再程序化脂肪干细胞（adipose—derived stem cells，ADSCs）体外定向神经分化的效率和机制。方法体外培养大鼠ADSCs并纯化、鉴定，将第3代ADSCs分为三组：未进行慢病毒介导基因转染ADSCs组（空白组）；不含神经元生成素-2（neurogenin-2，Ngn2）基因慢病毒空载体转染ADSCs组（空病毒组）；慢病毒载体介导Ngn2基因转染ADSCs组（Ngn2组）；各组细胞均用含细胞生长因子的诱导培养基诱导15d。免疫荧光检测各组细胞神经元特异性蛋白（NeuN）阳性表达以观察神经元分化效率；Western blot检测各组细胞Mash1、Hes1、Dll1蛋白表达水平的差异，探索分化机制。结果诱导培养基诱导15d后，Ngn2组、空病毒组、空白组阳性表达NeuN分别为90．12％、45．34％、40．26％，各组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。Western blot结果显示，Ngn2组Dll1蛋白表达水平明显高于空病毒组和空白组（P〈0．01），Mashl、Hesl蛋白表达水平明显低于空病毒组和空白组（P〈0．01）；空病毒组和空白组Dll1、Mash1和Hes1蛋白表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论再程序化ADSCs诱导后神经元分化的比例较单纯ADSCs提高近99％，再程序化ADSCs定向分化神经元机制可能是通过上调Dll1蛋白水平，同时下调Mash1、Hes1蛋白水平，抑制notch信号通路，从而促进细胞的定向神经分化。 展开更多
关键词 脂肪组织 干细胞 神经元 再程序化
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