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基于马立克病病毒Meq蛋白单克隆抗体的免疫组化诊断方法的建立
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作者 王润锦 孙英杰 +5 位作者 石彬 吴少鹏 邵红霞 钱琨 叶建强 秦爱建 《中国家禽》 北大核心 2024年第1期70-76,共7页
为了对临床上马立克病(MD)准确诊断,研究利用杆状病毒表达系统表达马立克病病毒(MDV)强毒株Meq重组蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术研制MDV Meq蛋白特异性单克隆抗体,并以此为基础建立MD诊断方法。结果显示:试验成功制备了4株Meq蛋白特异... 为了对临床上马立克病(MD)准确诊断,研究利用杆状病毒表达系统表达马立克病病毒(MDV)强毒株Meq重组蛋白免疫小鼠,利用杂交瘤技术研制MDV Meq蛋白特异性单克隆抗体,并以此为基础建立MD诊断方法。结果显示:试验成功制备了4株Meq蛋白特异性单克隆抗体,分别命名为MDV-Meq-1D6、MDV-Meq-1D10、MDV-Meq-6B3、MDV-Meq-6D10;Western blot结果证明这些单克隆抗体不仅能与体外表达的Meq蛋白反应,而且能识别MD肿瘤细胞系MSB-1中的Meq蛋白和MD肿瘤组织细胞中的Meq蛋白;以Meq蛋白单克隆抗体成功建立免疫组化诊断MD的方法,该方法特异性强,结果稳定,易观察判定。研究表明,试验制备了4株Meq蛋白单克隆抗体(MDV-Meq-1D6、MDV-Meq-1D10、MDV-Meq-6B3、MDV-Meq-6D10),基于此建立的免疫组化MD诊断方法为临床MD鉴别诊断提供技术支撑。 展开更多
关键词 马立克病 Meq蛋白 单克隆抗体 免疫组化 诊断
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鸡CTLA-4蛋白在昆虫细胞中的表达及其单克隆抗体的制备
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作者 刘青 吴少鹏 +4 位作者 石彬 邵红霞 钱琨 叶建强 秦爱建 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2596-2604,共9页
旨在制备鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的特异性单克隆抗体,为家禽免疫检查点和疫苗研发提供有益制剂。利用杆状病毒表达系统体外表达鸡的CTLA-4蛋白,以其为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,经B淋巴细胞融合技术制备、筛选出针对鸡CT... 旨在制备鸡细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的特异性单克隆抗体,为家禽免疫检查点和疫苗研发提供有益制剂。利用杆状病毒表达系统体外表达鸡的CTLA-4蛋白,以其为免疫原免疫8周龄Balb/c小鼠,经B淋巴细胞融合技术制备、筛选出针对鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体。通过间接免疫荧光、蛋白免疫印迹、流式细胞术等方法分析抗CTLA-4单克隆抗体的生物学特性。结果显示:构建了在Sf9昆虫细胞中表达CTLA-4蛋白的重组杆状病毒,成功筛选出3株能稳定分泌抗鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体,分别命名为:mAb-CTLA4-3D7、mAb-CTLA4-5A4、mAb-CTLA4-6A12。亚类鉴定表明,mAb-CTLA4-3D7为IgG2a, Lambda链;mAb-CTLA4-5A4为IgG3,Kappa链;mAb-CTLA4-6A12为IgG2a, Kappa链。3株单克隆抗体均能与转染真核表达质粒pCAGGS-CTLA-4-Flag的DF-1细胞和感染重组杆状病毒rBac-CTLA-4的Sf9昆虫细胞反应。单克隆抗体mAb-CTLA4-3D7与鸡的PBMC有较好的结合活性,且能与CD3+T淋巴细胞结合,结合率约为16%。本研究首次成功制备了抗鸡CTLA-4蛋白的单克隆抗体,并分析了其反应活性及生物学特性,为免疫检查点在禽病的发病机制、信号通路、疫苗研发等研究领域提供了材料。 展开更多
关键词 鸡CTLA-4 杆状病毒 单克隆抗体 生物学特性
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3种重要鸡肿瘤病的鉴别诊断
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作者 许默儒 何叶峰 秦爱建 《养禽与禽病防治》 2023年第5期25-30,共6页
鸡的肿瘤性疾病主要包括禽白血病、马立克氏病以及禽网状内皮组织增殖病。这些肿瘤病的共同特点是在鸡的组织器官中产生实质性或弥散性肿瘤,机体严重免疫抑制,严重危害我国养禽业的发展。为了快速鉴别不同肿瘤病,本文对3种肿瘤病的病原... 鸡的肿瘤性疾病主要包括禽白血病、马立克氏病以及禽网状内皮组织增殖病。这些肿瘤病的共同特点是在鸡的组织器官中产生实质性或弥散性肿瘤,机体严重免疫抑制,严重危害我国养禽业的发展。为了快速鉴别不同肿瘤病,本文对3种肿瘤病的病原学、流行病学、临床症状以及鉴别诊断进行了综述,并明确了在肿瘤病鉴定过程中,不仅要检测到相应病原,更要注意检测肿瘤细胞中的相关抗原。本文将为从事相关研究的人员提供参考,从而更好地采取相应措施和策略控制这些传染性肿瘤病。 展开更多
关键词 禽白血病 马立克氏病 禽网状内皮组织增殖病 鉴别诊断
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