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兼抗河北省茎基腐病致病菌小种的小麦种质筛选
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作者 康旭 王晓彤 +7 位作者 李国良 张华宁 孟祥照 刘子会 马贞玉 郭秀林 赵敏 段硕楠 《河北农业科学》 2024年第4期68-76,共9页
发掘小麦种质资源中具有茎基腐病(Fusarium crown rot,FCR)抗性的品种,可以为小麦抗茎基腐病研究和抗病品种选育提供抗病材料。首先,以黄淮麦区小麦茎基腐病高致病力假禾谷镰刀菌(Fusarium psendograminearum,Fp)菌株WZ-8A为接种致病菌... 发掘小麦种质资源中具有茎基腐病(Fusarium crown rot,FCR)抗性的品种,可以为小麦抗茎基腐病研究和抗病品种选育提供抗病材料。首先,以黄淮麦区小麦茎基腐病高致病力假禾谷镰刀菌(Fusarium psendograminearum,Fp)菌株WZ-8A为接种致病菌,利用病情指数(disease index,DI),对来自国内外不同生态区的260份小麦品种进行3次苗期温室小麦茎基腐病抗病鉴定,结果显示,没有免疫和高抗的小麦材料,有中等抗性材料1份(轮选49,DI为16.67)、低抗材料80份、中感材料153份、高感材料26份。随后,以筛选出的具有良好抗性(DI≤27.50)的14份小麦品种为供试材料,分别接种分离于河北省不同地区且具有不同遗传背景的4个小麦茎基腐病致病菌小种,通过苗期抗病性评价获得兼抗多个河北省小麦茎基腐病小种的小麦种质,结果显示,衡Y16观164、农大2011、茶淀红对4个致病菌小种的平均DI较低,综合抗病性较好。衡Y16观164、农大2011、茶淀红可以为河北省小麦茎基腐病研究和抗病品种选育提供抗病材料。 展开更多
关键词 假禾谷镰刀菌 小麦茎基腐病 抗性评价 种质筛选 兼抗
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种子中特异表达IPT基因的植物双元载体构建及转基因水稻获得 被引量:1
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作者 张红心 王桂兰 +2 位作者 陈超 赵璞 马春红 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期61-65,共5页
为研究细胞分裂素在水稻籽粒发育中的作用,构建了p1300-p PG-5α-IPT-Nos植物表达载体,并对水稻进行遗传转化。以水稻品种9311为材料,采用PCR法获得种子中特异表达的PG-5α基因启动子,并将此启动子与p1300相连接,构建p1300-p PG-5α载体... 为研究细胞分裂素在水稻籽粒发育中的作用,构建了p1300-p PG-5α-IPT-Nos植物表达载体,并对水稻进行遗传转化。以水稻品种9311为材料,采用PCR法获得种子中特异表达的PG-5α基因启动子,并将此启动子与p1300相连接,构建p1300-p PG-5α载体,用NcoⅠ和SpeⅠ双酶切p SG516,获得IPT-Nos核酸片段,然后将此核酸片段插入到p1300-p PG-5α中,构建p1300-p PG-5α-IPT-Nos植物表达载体。以水稻品种日本晴愈伤组织为材料,采用农杆菌介导的方法进行遗传转化。成功构建了植物表达载体p1300-p PG-5α-IPT-Nos,获得了阳性率为81.3%转IPT基因群体。获得转基因株系后,将为进一步筛选高效表达株系及观察其籽粒生长发育过程提供基础。 展开更多
关键词 PG-5α启动子 IPT p1300-pPG-5α-IPT-Nos 水稻 遗传转化
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抗除草剂转基因小麦生态安全评估(二)——普通小麦与其近缘植物的属间和种间杂交研究 被引量:5
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作者 赵和 吴志明 +5 位作者 武伟霞 谢晓亮 马民强 GodovikovaVA 吕孟雨 王海波 《河北农业科学》 2000年第3期6-9,共4页
以普通小麦为父本,以与小麦亲缘关系较近的黑麦、偃麦草和山羊草等属中7个种的10个品种为母本进行人工杂交,结果表明普通小麦与卵穗山羊草的可交配性最高,其两个品种Ae23和Y100与普通小麦的杂交结实率分别为11.96%和14.10%,与黑麦杂... 以普通小麦为父本,以与小麦亲缘关系较近的黑麦、偃麦草和山羊草等属中7个种的10个品种为母本进行人工杂交,结果表明普通小麦与卵穗山羊草的可交配性最高,其两个品种Ae23和Y100与普通小麦的杂交结实率分别为11.96%和14.10%,与黑麦杂交的结实率最低,授粉496朵,未结1粒,与其他近缘种的杂交结实率介于前二者之问。与倍性高的种相比,二倍体种与普通小麦之间的可交配性要差,其杂种幼胚在培养基上也很难出愈。所得杂种的育性非常低,甚至雌雄蕊均不育。由此看来,自然条件下普通小麦基因漂流到野生近缘种中的可能性非常低,通过转基因小麦田间释放产生“超级杂草”是非常困难的。 展开更多
关键词 普通小麦 近缘植物 种间杂交 转基因 抗除草剂 生态安全性评估 属间杂交 抗性基因
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植物转基因技术的进展 存在问题及突破方向 被引量:4
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作者 董福双 张艳敏 +3 位作者 吕孟雨 杨帆 高义平 王海波 《河北农业科学》 2011年第3期57-65,共9页
目前植物转基因方法很多,按转基因的机制划分,可以归为3类:直接转化法、农杆菌介导法、自身机制法。概述了植物转基因的方法,指出当前植物转基因技术存在的主要问题,并展望了植物转基因技术未来突破的方向。
关键词 植物 转基因技术 转化方法 基因型依赖
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利用卡那霉素“浸种法”准确筛选转基因小麦种子的方法研究 被引量:3
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作者 董福双 高义平 +2 位作者 吕孟雨 柴建芳 王海波 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1105-1110,共6页
为了确定利用卡那霉素“浸种法”筛选转基因小麦后代种子的准确方法,以冬小麦种子为试材,探讨了卡那霉素溶液体积、浓度及种子粒数对筛选结果的影响。结果表明,卡那霉素溶液体积、小麦种子的粒数对筛选结果的影响与卡那霉素浓度同等... 为了确定利用卡那霉素“浸种法”筛选转基因小麦后代种子的准确方法,以冬小麦种子为试材,探讨了卡那霉素溶液体积、浓度及种子粒数对筛选结果的影响。结果表明,卡那霉素溶液体积、小麦种子的粒数对筛选结果的影响与卡那霉素浓度同等重要。在卡那霉素浓度为60~180mg·L^-1的范围内,以“单粒分享量”(单粒分享量=卡那霉素浓度×溶液体积/种子粒数)为筛选标准,能有效地对小麦种子进行筛选。利用此方法,我们对小麦金禾9123转基因后代7个株系的412个籽粒进行卡那霉素溶液筛选,获得84株抗性苗,经PCR检测,76株为阳性,卡那霉素筛选正确率达90.5%;同时以7个不同遗传背景的普通小麦品种也验证了此选择方法的可靠性。 展开更多
关键词 卡那霉素 小麦 转基因 抗性筛选 单粒分享量
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紫花苜蓿高频体胚发生及萌发成苗技术与转基因应用 被引量:4
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作者 温之雨 董福双 +2 位作者 张华宁 杨瑞娟 张艳敏 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期882-889,共8页
以紫花苜蓿的子叶或叶片为外植体,建立高频体胚发生及成苗技术体系,为苜蓿耐逆性状的遗传改良提供技术支撑。在愈伤诱导、体胚诱导、体胚成熟与萌发等几个关键环节,分析比较培养基组分对培养效果的影响。建立在SHDK培养基上诱导愈伤、MB... 以紫花苜蓿的子叶或叶片为外植体,建立高频体胚发生及成苗技术体系,为苜蓿耐逆性状的遗传改良提供技术支撑。在愈伤诱导、体胚诱导、体胚成熟与萌发等几个关键环节,分析比较培养基组分对培养效果的影响。建立在SHDK培养基上诱导愈伤、MB(-/+)+ABA 0.4mg/L+PEG-6000 50g/L+蔗糖50g/L培养基上诱导体胚、Bio2Y培养基上促体胚发育成熟、1/2 MS(或SH)培养基上体胚萌发成苗的高频再生技术体系。最适条件下,每克胚性愈伤组织可产生77.9个正常萌发成苗的健康体胚。再生植株在生长箱内经过2周20℃、16h/d的光照培养后移栽温室,成活率达90%以上。利用该离体再生技术成功地将凝集素基因PPA导入苜蓿中,获得抗蚜转基因苜蓿。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 体胚发生 离体再生 转基因
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转基因玉米抗卡那霉素筛选方法研究 被引量:4
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作者 吕孟雨 董福双 +1 位作者 张俊敏 王海波 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第6期1895-1899,共5页
为了建立简单有效地筛选抗卡那霉素标记基因玉米的方法,分别用玉米自交系"昌7-2"和杂交种"郑单958"为试验材料,用不同浓度、不同体积的卡那霉素溶液分别浸种3、4 d后播种,调查播种10 d后的玉米幼苗白化率,确定玉米... 为了建立简单有效地筛选抗卡那霉素标记基因玉米的方法,分别用玉米自交系"昌7-2"和杂交种"郑单958"为试验材料,用不同浓度、不同体积的卡那霉素溶液分别浸种3、4 d后播种,调查播种10 d后的玉米幼苗白化率,确定玉米对卡那霉素的抗性,结果表明用卡那霉素浸泡玉米种子,玉米苗的白化率不但与卡那霉素浓度有关,而且与浸种的用液量有关,杂交种和自交系之间差异并不大,利用100 mL浓度为200 mg/L的卡那霉素溶液浸种3 d后播种,白化苗率基本可以达到100%,用100 mL浓度为150mg/L的卡那霉素溶液浸种20粒种子3 d后播种进行抗性筛选,经过对玉米T1代转基因植株的筛选试验进行验证准确度达到了84.8%,表明该方法可行,可作为筛选玉米转化抗卡那霉素标记基因的一种简便方法。 展开更多
关键词 转基因玉米 卡那霉素 筛选方法
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抗除草剂转基因小麦生态安全评估(一)——禾本科麦田杂草、牧草和主要近缘野生种的分布特点及生物学特性 被引量:6
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作者 赵和 曹建如 +2 位作者 吴志明 吕孟雨 王海波 《河北农业科学》 2000年第2期28-33,共6页
本文通过对禾本科麦田杂草、主要的禾本科牧草和小麦近缘野生种的分布特点、生物学特性以及与小麦的远缘杂交情况的分析,就转抗除草剂小麦田间释放的生态安全性进行了评估,作者认为,在自然条件下抗除草剂基因从栽培小麦漂流到其它植物... 本文通过对禾本科麦田杂草、主要的禾本科牧草和小麦近缘野生种的分布特点、生物学特性以及与小麦的远缘杂交情况的分析,就转抗除草剂小麦田间释放的生态安全性进行了评估,作者认为,在自然条件下抗除草剂基因从栽培小麦漂流到其它植物的可能性极小。 展开更多
关键词 转基因小麦 抗除草剂 生态安全性 麦田杂草
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河北省鲜食糯玉米一年两季高产高效栽培技术 被引量:5
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作者 朱彦辉 赵璞 +1 位作者 刘玉强 马春红 《农业技术与装备》 2019年第5期66-68,共3页
文章从品种选择、栽培耕作、病虫害防治、采收销售和效益分析等方面,总结鲜食甜糯玉米在河北省春播、夏播区高产高效栽培技术模式,以期为当地农民增收提供新途径。
关键词 鲜食糯玉米 种植模式 高产高效 经济效益
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卡那霉素筛选转基因棉花技术研究 被引量:1
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作者 吕孟雨 杨帆 +5 位作者 董福双 柴建芳 赵和 刘永伟 周硕 王海波 《湖南农业科学》 2019年第2期1-3,共3页
为了提高带有npt-Ⅱ标记基因的转基因棉花后代的筛选效率,通过利用不同浓度的卡那霉素溶液进行浸种,同时比较浸种时间的长短对棉花子叶片伤害程度,并用PCR分子检测相互验证。结果表明:用浓度1 000 mg/L的硫酸卡那霉素溶液浸种3 d,每5 m... 为了提高带有npt-Ⅱ标记基因的转基因棉花后代的筛选效率,通过利用不同浓度的卡那霉素溶液进行浸种,同时比较浸种时间的长短对棉花子叶片伤害程度,并用PCR分子检测相互验证。结果表明:用浓度1 000 mg/L的硫酸卡那霉素溶液浸种3 d,每5 mL溶液浸泡1粒棉花种子,播种出苗以后,拔除子叶上有白化斑的棉花苗,剩余的子叶上没有出现白化斑的棉花苗即为转基因阳性植株,经PCR检测筛选的准确率达100%。利用卡那霉素溶液浸种的方法筛选带有npt-Ⅱ标记基因的转基因棉花后代材料的技术流程经济有效、准确可行。 展开更多
关键词 转基因棉花 卡那霉素 浸种 筛选
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一种简单有效的小麦转基因后代卡那霉素筛选方法 被引量:1
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作者 董福双 张立华 吕孟雨 《河北农业科学》 2015年第4期63-66,共4页
利用浸种法对转基因小麦后代进行卡那霉素筛选,种子在吸涨阶段所吸收的卡那霉素量决定着筛选效果,而种子的质量直接影响着卡那霉素的吸收量。针对不同遗传背景的小麦,为了省去每次筛选前对卡那霉素用量的调整,作者以与可变因素直接关联... 利用浸种法对转基因小麦后代进行卡那霉素筛选,种子在吸涨阶段所吸收的卡那霉素量决定着筛选效果,而种子的质量直接影响着卡那霉素的吸收量。针对不同遗传背景的小麦,为了省去每次筛选前对卡那霉素用量的调整,作者以与可变因素直接关联的种子质量为重点进行研究,探讨了一种简单、有效的筛选方法,并在小麦转基因后代检测中进行了验证。结果表明:以每克种子用150 mg/L卡那霉素溶液6 m L进行浸种,能够有效地对不同遗传背景的小麦进行鉴定。 展开更多
关键词 卡那霉素 小麦 转基因 抗性筛选
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茎尖转化法转基因小麦后代的遗传特性分析
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作者 董福双 刘永伟 +2 位作者 吕孟雨 周硕 杨帆 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期938-943,共6页
为了探讨农杆菌转化微创芽生长点法获得的转基因小麦后代的遗传特性,以3个世代的转基因小麦后代为材料,通过抗性筛选、PCR和PCR-Southern blot等方法分析外源基因遗传在T_2、T_3、T_4中的遗传分离情况。结果表明:T_2代33个株系中外源基... 为了探讨农杆菌转化微创芽生长点法获得的转基因小麦后代的遗传特性,以3个世代的转基因小麦后代为材料,通过抗性筛选、PCR和PCR-Southern blot等方法分析外源基因遗传在T_2、T_3、T_4中的遗传分离情况。结果表明:T_2代33个株系中外源基因完全丢失的株系占61%,其余39%的株系能够检测到外源基因,但分离比例分散偏离了孟德尔遗传分离规律;T_3代42个株系中检测不到外源基因的株系占55%,能检测到外源基因但分离比例复杂的株系占43%,符合孟德尔分离定律占2%;T_4代8个株系中检测不到外源基因的株系占25%,能检测到外源基因但分离比例复杂的株系占50%,转基因植株与非转基因植株的分离比例符合孟德尔分离定律占25%。可见,利用农杆菌转化微创芽生长点法获得的转基因小麦后代中,外源基因丢失的比例较高,转基因植株与非转基因植株的分离多不符合孟德尔分离比例,但随着世代的增加,外源基因遗传稳定性有所提高。 展开更多
关键词 小麦 转基因后代 遗传
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小麦Ta4CL1基因的克隆及其在促进转基因拟南芥生长和木质素沉积中的功能 被引量:5
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作者 孟颖 邢蕾蕾 +3 位作者 曹晓红 郭光艳 柴建芳 秘彩莉 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期63-75,共13页
4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL;EC 6.2.1.12)位于苯丙烷途径分支点的上游,是苯丙烷代谢途径的核心酶,可产生木质素、黄酮类等化合物,这些化合物对植物的生长发育及环境适应性均具有重要作用。在双子叶植物中,有关4CL的研究较多,而在单子叶植... 4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL;EC 6.2.1.12)位于苯丙烷途径分支点的上游,是苯丙烷代谢途径的核心酶,可产生木质素、黄酮类等化合物,这些化合物对植物的生长发育及环境适应性均具有重要作用。在双子叶植物中,有关4CL的研究较多,而在单子叶植物尤其是作物中的研究相对较少。本研究利用RACE技术从普通小麦中克隆了一个4CL基因Ta4CL1。系统发育分析表明,Ta4CL1与水稻、玉米和高粱等植物中在木质素合成中具有重要作用的4CLs聚成一类;利用Ta4CL1过表达、拟南芥4CLs突变体at4cl1、at4cl3和at4cl14cl3及其功能回复株系进行的分析表明,Ta4CL1与At4CL1功能相似,在植物木质素合成中具有重要作用,但未参与黄酮类化合物生物合成的调控过程;Ta4CL1是转基因拟南芥中4CL酶活性的主要贡献者。过表达Ta4CL1的转基因拟南芥叶片增大、茎更粗;Ta4CL1的表达还受茉莉酸甲酯(Methyl jasmonic acid,MeJA)、赤霉素(Gibberellin,GA)和生长素(Indoleacetic acid,IAA)等激素处理的影响。本研究为利用基因工程将Ta4CL1应用于改善小麦秸秆的利用效率提供了理论依据。 展开更多
关键词 4-香豆酸辅酶A连接酶 Ta4CL1 木质素沉积 促进生长 小麦 拟南芥
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43种植物CaM1基因密码子使用特征及遗传差异分析 被引量:1
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作者 李晨辉 赵子捷 +6 位作者 陈文烨 焦义然 杨帆 刘永伟 董福双 杜进民 周硕 《江苏农业科学》 2019年第5期28-32,共5页
为深入了解不同类植物CaM1基因(calmodulin 1,简称CaM1)在抵抗逆境进化过程所形成的密码子的使用特征和遗传差异。运用CodonW、BioEdit和MEGA软件对43种植物序列进行分析,并构建系统发育树。结果表明,CaM1基因对密码子的使用具有极强的... 为深入了解不同类植物CaM1基因(calmodulin 1,简称CaM1)在抵抗逆境进化过程所形成的密码子的使用特征和遗传差异。运用CodonW、BioEdit和MEGA软件对43种植物序列进行分析,并构建系统发育树。结果表明,CaM1基因对密码子的使用具有极强的偏好性,CUC、AUC、UCU、CCA、ACU、UGA为其最优密码子,禾本目植物更偏好使用G/C碱基。G、C碱基含量和位置是引起CaM1基因密码子偏性的主要原因。遗传距离分析表明,山柑目与白花菜目之间的亲缘关系最近,豆目和无患子目间的亲缘关系次之,与聚类分析结果相符。 展开更多
关键词 CaM1 密码子偏性 遗传距离 亲缘关系
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采前氨基乙氧基乙烯甘氨酸处理对‘黄冠’梨长期冷藏后果实品质和果心褐变的影响 被引量:1
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作者 何近刚 冯云霄 +1 位作者 程玉豆 关军锋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第3期159-166,共8页
为延长‘黄冠’梨贮藏期,减轻长期贮藏后货架期间果实品质劣变,采用不同浓度氨基乙氧基乙烯甘氨酸(aminoethoxyvinylglycine,AVG)在采前喷施‘黄冠’梨果实,在冷藏180 d及货架7 d((180+7)d)后检测相关指标。结果显示,采前喷施AVG可延缓... 为延长‘黄冠’梨贮藏期,减轻长期贮藏后货架期间果实品质劣变,采用不同浓度氨基乙氧基乙烯甘氨酸(aminoethoxyvinylglycine,AVG)在采前喷施‘黄冠’梨果实,在冷藏180 d及货架7 d((180+7)d)后检测相关指标。结果显示,采前喷施AVG可延缓‘黄冠’梨果实硬度下降,维持可溶性固形物含量以及可滴定酸含量,有效抑制果面褐斑和果心褐变的发生,其中以200 mg/L AVG效果最好。‘黄冠’梨果实在长期冷藏时果心发生褐变,同时熊果苷、绿原酸以及总酚含量增加,多酚氧化酶活性升高;PbPAL1、PbPAL2、PbPPO1、PbPPO5、PbLOX1以及PbLOX5在冷藏期间表达量升高,货架期表达量随之下降。采前200 mg/L AVG处理‘黄冠’梨,可显著促进熊果苷、绿原酸以及总酚在整个贮藏过程中含量的增加,抑制多酚氧化酶活性升高,抑制PbPAL1、PbPAL2、PbPPO1、PbPPO5以及PbLOX5的表达,进而有效减少果心褐变的发生。 展开更多
关键词 氨基乙氧基乙烯甘氨酸 果心褐变 酚类 多酚氧化酶
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ω-黑麦碱基因沉默对小麦1B/1R易位系加工品质的影响 被引量:13
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作者 柴建芳 王海波 +2 位作者 马秀英 张翠绵 董福双 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期627-632,共6页
ω-黑麦碱是造成小麦1B/1R易位系加工品质差的一个重要因素,为探索解决这一问题,构建了ω-黑麦碱基因沉默表达载体,并通过农杆菌介导转化小麦品种金禾9123,获得3个T_0代转基因植株,再经连续的扩繁和PCR检测,获得纯合转基因T_4代株系。酸... ω-黑麦碱是造成小麦1B/1R易位系加工品质差的一个重要因素,为探索解决这一问题,构建了ω-黑麦碱基因沉默表达载体,并通过农杆菌介导转化小麦品种金禾9123,获得3个T_0代转基因植株,再经连续的扩繁和PCR检测,获得纯合转基因T_4代株系。酸性PAGE检测结果表明,这些纯合转基因株系中ω-黑麦碱的总表达量平均下降53%。这些ω-黑麦碱基因沉默的转基因株系的面筋指数、沉降值和稳定时间均显著提高,而其农艺性状,如株高、穗粒数、千粒重和小区产量,均没有受到不良影响,说明沉默ω-黑麦碱基因可以在不影响产量的前提下提高小麦1B/1R易位系的加工品质。 展开更多
关键词 小麦1B/1R易位系 黑麦碱 RNA干扰 基因沉默 加工品质
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粒重基因TaCwi-A1等位变异在黄淮麦区小麦品种(系)中的分布及功能分析 被引量:12
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作者 刘永伟 周硕 +6 位作者 王雪征 孙果忠 朱金永 韩秋芬 李春杰 赵和 王海波 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期131-137,共7页
为探讨小麦粒重基因TaCwi-A1等位变异TaCwi-A1a和TaCwi-A1b在育种实践中的应用价值,首先利用TaCwi-A1功能标记对539份黄淮麦区小麦品种(系)进行分子检测,确定各供试材料的等位变异类型,从而获得TaCwi-A1a和TaCwi-A1b 2种等位变异的分布... 为探讨小麦粒重基因TaCwi-A1等位变异TaCwi-A1a和TaCwi-A1b在育种实践中的应用价值,首先利用TaCwi-A1功能标记对539份黄淮麦区小麦品种(系)进行分子检测,确定各供试材料的等位变异类型,从而获得TaCwi-A1a和TaCwi-A1b 2种等位变异的分布频率。对审定品种、参加区试品系以及自育品系进行了千粒质量(3个不同生长环境)及粒长、粒宽和籽粒面积(1个生长环境)测试分析,比较TaCwi-A1a和TaCwi-A1b等位变异籽粒表型性状的差异性。结果表明,在539份黄淮麦区小麦资源中TaCwi-A1a的分布频率为65.03%,TaCwi-A1b的分布频率为34.97%,TaCwi-A1a的分布频率明显高于TaCwi-A1b。籽粒表型性状分析表明,无论是审定品种,还是参加区试品系和自育品系,在3个生长环境下,TaCwi-A1a基因型材料的千粒质量均值都显著高于TaCwi-A1b;TaCwi-A1a基因型材料的粒长和粒宽均显著高于TaCwi-A1b。进一步验证了TaCwi-A1a等位变异的籽粒表型性状增效功能,说明其对粒重及其构成要素是优异的等位变异。此外,本研究鉴定了黄淮麦区中TaCwi-A1等位变异的分布情况,为亲本选配提供了参考。 展开更多
关键词 普通小麦 TaCwi-A1 分子标记 等位变异 千粒质量 粒长 粒宽
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小麦热激转录因子基因TaHsfB2d的克隆和特性及其对耐热性的调控 被引量:10
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作者 赵立娜 刘子会 +3 位作者 段硕楠 张园园 李国良 郭秀林 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期53-62,共10页
植物热激转录因子(heat shock transcription factor,Hsf)是响应热胁迫的主要调节因子,通过调节热激蛋白基因表达进而增强植物耐热性。小麦Hsf家族至少含有56个成员,其中B族11个,含B2亚族5个。本研究采用同源克隆技术,从37°C热处... 植物热激转录因子(heat shock transcription factor,Hsf)是响应热胁迫的主要调节因子,通过调节热激蛋白基因表达进而增强植物耐热性。小麦Hsf家族至少含有56个成员,其中B族11个,含B2亚族5个。本研究采用同源克隆技术,从37°C热处理的二叶一心小麦幼叶中克隆获得TaHsfB2d(序列号为AK331994)c DNA序列,序列长1191bp,编码396个氨基酸。蛋白序列包括DNA结合结构域DBD和核定位信号序列NLS。同源分析表明,TaHsfB2d蛋白与大麦未知蛋白的相似性最高,为92%。荧光定量分析表明,TaHsfB2d在小麦多个组织器官中组成型表达,其中在成熟植株根系中表达量较高。37°C热胁迫、外源水杨酸(SA)和H_2O_2处理均能不同程度上调TaHsfB2d的表达,热激能显著增强SA和H_2O_2对TaHsfB2d表达的诱导。H_2O_2合成抑制剂DPI和羟自由基清除剂DMTU联合处理显著抑制热激对TaHsfB2d表达的上调作用、完全抑制SA对TaHsfB2d表达的上调。通过在洋葱内表皮瞬时表达TaHsfB2d并观察GFP荧光发现,正常条件下,TaHsfB2d蛋白定位于细胞核。酵母中耐热性鉴定表明,正常条件下,转TaHsfB2d的酵母细胞与转空载体对照酵母细胞的长势没有明显差异,热激处理同时降低,但前者的长势相对更强,TaHsfB2d的导入不影响细胞的生长发育。推测TaHsfB2d通过水杨酸途径介导植株耐热性调控过程,该过程依赖于H_2O_2存在。 展开更多
关键词 小麦 TaHsfB2d 定量表达 亚细胞定位 耐热性
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小麦芽生长点的基因枪转化技术研究 被引量:13
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作者 董福双 张艳敏 +3 位作者 杨帆 梁新朝 刘桂如 王海波 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第5期1-6,共6页
为建立简易的不依赖组织培养和抗性筛选的小麦转基因技术,以小麦品种石4185为对象,以gus和badh/bar为外源基因,围绕适于基因枪转化的种子芽生长点受体的制备、基因枪轰击参数的优化等开展了试验,建立了"用解剖刀去除种子根、用镊子把... 为建立简易的不依赖组织培养和抗性筛选的小麦转基因技术,以小麦品种石4185为对象,以gus和badh/bar为外源基因,围绕适于基因枪转化的种子芽生长点受体的制备、基因枪轰击参数的优化等开展了试验,建立了"用解剖刀去除种子根、用镊子把芽鞘掰去、用镊尖扫去包盖生长点的未展开叶、将带生长点的部分与胚乳分离"为特点的受体制备方法;确定1100 Psi+9 cm为最佳轰击参数组合。对轰击后的小麦芽生长点(70个×3批)进行gus基因瞬时表达检测,以受体数统计时,转化率为22.9%-35.7%;以生长点数统计时,转化率为5.7%-8.6%。用含badh/bar的pABH9质粒转化1000个受体,发育成了802个T0植株,对T0植株所结种子长成的穗行喷200 mg/kg的PPT进行抗性筛选,获得了105个抗性株,究其来源为42个T0株,由此计算抗性率为5.2%。用PCR检测T1植株,6个呈阳性。初步建立了基因枪法转化小麦种子芽生长点的技术。 展开更多
关键词 小麦 芽生长点 基因枪 转化
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玉米热激蛋白70基因对温度胁迫的响应 被引量:19
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作者 李慧聪 郭秀林 +1 位作者 王冬梅 李国良 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期12-15,25,共5页
利用RT-PCR技术从玉米自交系H21叶片中克隆获得一热激蛋白70(HSP70)基因的完整开放阅读框,全长1 737 bp,编码578个氨基酸,命名为ZmHSP70。编码的氨基酸与其他作物比对分析表明,ZmHSP70与高粱中一推测的蛋白(SbHSP70,XP_002465635)同源... 利用RT-PCR技术从玉米自交系H21叶片中克隆获得一热激蛋白70(HSP70)基因的完整开放阅读框,全长1 737 bp,编码578个氨基酸,命名为ZmHSP70。编码的氨基酸与其他作物比对分析表明,ZmHSP70与高粱中一推测的蛋白(SbHSP70,XP_002465635)同源性最高,达95%,与水稻中一推测的蛋白(OsHSP70,EAY89062)同源性达87%。半定量RT-PCR的结果表明,该基因明显受42℃热激诱导表达,热激2 h其表达量达最大值;4℃冷胁迫也能诱导ZmHSP70表达量增加,冷胁迫4 h,其表达量达最大值。ZmHSP70是一个受温度诱导的热激蛋白。 展开更多
关键词 玉米 热激蛋白70 温度胁迫 基因表达
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