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Gli抑制剂GANT61对肺癌细胞上皮-间质转化作用的研究 被引量：2
1
作者 王雷 杜媛鲲 王娜 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第21期2903-2905,共3页
目的研究GANT61对人肺癌细胞H1703和A549的上皮-间质转化(EMT)的影响,并初步探讨其作用机制。方法以二甲基亚砜(DMSO)作为对照(DMSO组),用GANT61处理H1703和A549细胞24h后,采用实时荧光定量PCR法检测Gli-1、Gli-2、E-cadherin和Vimenti... 目的研究GANT61对人肺癌细胞H1703和A549的上皮-间质转化(EMT)的影响,并初步探讨其作用机制。方法以二甲基亚砜(DMSO)作为对照(DMSO组),用GANT61处理H1703和A549细胞24h后,采用实时荧光定量PCR法检测Gli-1、Gli-2、E-cadherin和Vimentin基因变化;蛋白质印迹法(Western blotting)观察GANT61作用于H1703和A549细胞后对E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响,划痕愈合实验观察GANT61作用于H1703和A549细胞后对肿瘤细胞侵袭能力的影响。结果与DMSO组比较,实时荧光定量PCR结果显示GANT61可下调H1703和A549细胞Gli-1、Gli-2及Vimentin mRNA的表达,升高E-cadherin mRNA的表达(P<0.01);Western blotting显示,GANT61可以下调H1703和A549细胞Vimentin蛋白表达,升高E-cadherin蛋白表达(P<0.01);划痕愈合实验显示,GANT61处理组H1703和A549细胞的侵袭能力明显下降(P<0.01)。结论肺癌的EMT与Hedgehog信号转导通路中Gli-1和Gli-2的异常激活有关,GANT61通过下调Gli-1和Gli-2的表达影响肺癌细胞的EMT能力,Gli可能成为抑制肺癌细胞转移的新的分子靶点。 展开更多
关键词 肺癌 HEDGEHOG信号通路 GANT61 Gli蛋白 上皮-间质转化
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GANT61对食管鳞癌细胞上皮-间质转化作用的研究 被引量：1
2
作者 王雷 杜媛鲲 +2 位作者 王林 米源 王娜 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期249-254,共6页
目的研究GANT61对人食管鳞癌细胞OE21和KYSE-30的上皮-间质转化的影响,同时使用N-Shh蛋白刺激Hedgehog通路作为阳性对照,探讨GANT61抗肿瘤机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测GANT61和N-Shh蛋白作用于OE21和KYSE-30细胞后Gli... 目的研究GANT61对人食管鳞癌细胞OE21和KYSE-30的上皮-间质转化的影响,同时使用N-Shh蛋白刺激Hedgehog通路作为阳性对照,探讨GANT61抗肿瘤机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测GANT61和N-Shh蛋白作用于OE21和KYSE-30细胞后Gli1、Gli2、N-cadherin和β-catenin基因变化;Western blot观察药物GANT61和N-Shh蛋白作用于OE21和KYSE-30细胞后对Gli1、Gli2、N-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响。划痕愈合试验观察GANT61和N-Shh蛋白作用于OE21和KYSE-30细胞后对细胞迁移侵袭能力的影响。结果实时荧光定量PCR结果显示,GANT61可以下调OE21和KYSE-30的Gli-1、Gli-2、N-cadherin和β-cateninm RNA表达;Western blot显示GANT61可以下调OE21和KYSE-30的Gli1、Gli2、Ncadherin和β-catenin蛋白表达。划痕愈合试验显示GANT61导致OE21和KYSE-30细胞的迁移能力明显下降。应用N-Shh蛋白可以上调OE21和KYSE-30的Gli1、Gli2表达,N-cadherin和β-catenin表达,同时促进OE21和KYSE-30的迁移能力。结论GANT61通过下调Hedgehog信号转导通路中Gli1和Gli2的表达来影响食管鳞癌细胞上皮-间质转化能力,Gli可成为抑制食管鳞癌细胞转移新的有效的分子靶点。 展开更多
关键词 食管鳞癌 HEDGEHOG信号通路 GANT61 GLI 上皮-间质转化
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E-钙粘蛋白基因多态性与食管癌、贲门癌的关系 被引量：14
3
作者 张秀凤 王益民 +5 位作者 王瑞 魏丽珍 李琰 郭炜 王娜 张健慧 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期513-519,共7页
背景与目的:E-钙粘蛋白(E-cadherin,CDH1)是钙粘蛋白家族中的一个成员,与肿瘤侵袭转移密切相关。该基因启动子区存在的多态性位点可通过改变转录活性而影响该蛋白的表达。本研究旨在探讨该基因启动子区C-160A和G-347GA单核苷多态性(sing... 背景与目的:E-钙粘蛋白(E-cadherin,CDH1)是钙粘蛋白家族中的一个成员,与肿瘤侵袭转移密切相关。该基因启动子区存在的多态性位点可通过改变转录活性而影响该蛋白的表达。本研究旨在探讨该基因启动子区C-160A和G-347GA单核苷多态性(single nucleotide polym orphism,SNP)与中国北方人食管鳞状细胞癌(esophagealsquam ous cellcarcinom a,ESCC)、贲门腺癌(gastric cardiacadenocarcinom a,GCA)易感性和淋巴结转移的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polym erase chain reaction-restrictionfragm entlength polym orphism,PCR-RFLP)分析方法检测333名ESCC患者、239名GCA患者和343名健康对照的CDH1C-160A及G-347GA SNP的基因型。结果:CDH1C-160A及G-347GA SNP的基因型及等位基因型分布在总体ESCC患者、GCA患者和健康对照中无显著性差异(P=0.08)。根据吸烟状况及上消化道肿瘤家族史分层分析及淋巴结转移状况的分析也未发现CDH1SNPs对ESCC和GCA发病及淋巴结转移的影响。然而,与G-347GA G/G基因型相比,携带GA等位基因(G/GA+GA/GA基因型)可显著增加GCA患病风险,经性别、年龄校正后的OR值为1.45(95%CI=1.03～2.04)。应用EH软件分析显示。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 贲门腺癌 E钙粘蛋白 多态性 肿瘤易感性
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胸苷酸合成酶基因多态性及其蛋白表达与食管鳞状细胞癌淋巴结转移的关系 被引量：11
4
作者 董稚明 崔雅静 +3 位作者 邝刚 王瑞 于凤玲 张健慧 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1225-1229,共5页
背景与目的:胸苷酸合成酶(thymidylatesynthase,TS)是DNA合成的关键酶。TS基因5′非编码区(untranslatedregion,UTR)串联重复序列和G/C单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)可能导致酶表达或活性的改变,从而改变个体对肿... 背景与目的:胸苷酸合成酶(thymidylatesynthase,TS)是DNA合成的关键酶。TS基因5′非编码区(untranslatedregion,UTR)串联重复序列和G/C单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)可能导致酶表达或活性的改变,从而改变个体对肿瘤的易感性及预后。本实验的目的是探讨TS5′-UTR多态性与食管鳞状细胞癌(esophagealsquamouscellcarcinoma,ESCC)淋巴结转移的关系,并探讨此多态性对TS蛋白表达的影响。方法:从232例ESCC患者和348例健康对照的外周血中提取白细胞DNA,分别用PCR和PCR-RFLP方法检测TS5′UTR28bp串联重复序列和G/CSNP的基因型。51例患者的术后切除组织采用免疫组织化学染色的方法(S-P法)检测肿瘤组织中的TS蛋白的表达情况。结果:5′UTR的3G/3G,3G/3C,3C/3C,2R/3G,2R/3C,2R/2R和其它基因型频率在健康对照组分别为17.5%,17.3%,29.3%,12.9%,17.8%,3.7%,1.5%和在病例组中分别为16.0%,16.0%,29.3%,13.8%,17.6%,4.3%,3.0%;3G,3C,2R和其它等位基因型频率在健康对照组中分别为32.8%,47.0%,19.5%,0.7%和在病例组中分别为31.2%,46.8%,20.5%,1.5%。与3G/3G基因型相比,2R/3G基因型显著增加淋巴结转移的危险性(年龄和性别校正OR=11.53,95%CI=2.67～49.74)。TS表达水平与患者的性别、年龄、淋巴结转移和临床病理分期无关,而与TS5'UTR基因型密切相关(P<0.05)。结论:TS5′UTR重复序列及SNP多态性与ESCC淋巴结转移有关,而TS蛋白表达水平与淋巴结转移无关。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 鳞状细胞 胸苷酸合成酶 基因多态性 淋巴结转移
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基质金属蛋白酶3基因多态性与非小细胞肺癌遗传易感性及淋巴结转移的关系 被引量：9
5
作者 方淑梅 金霞 +4 位作者 李琰 王瑞 郭炜 王娜 张健慧 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期305-310,共6页
背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)可能通过降解细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)和基底膜(basementmembrane,BM)参与肿瘤的侵袭和转移。MMP-3启动子区-1171bp处5A或6A单核苷酸多态性(singlenucleotidepoly... 背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)可能通过降解细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)和基底膜(basementmembrane,BM)参与肿瘤的侵袭和转移。MMP-3启动子区-1171bp处5A或6A单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)可改变该基因的转录水平,从而影响MMP-3的表达。本实验目的是研究MMP-3启动子区SNP与中国北方人非小细胞肺癌(non-smallcelllungcarcinoma,NSCLC)遗传易感性及淋巴结转移的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP)方法,分析173名NSCLC患者和350名健康对照者的MMP-3启动子区SNP位点的基因型。结果:MMP-3基因型在NSCLC病例组和健康对照组的分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05);病例组和健康对照组的6A/6A、5A/6A和5A/5A基因型频率分别为65.3%、30.6%、4.1%和67.7%、30.0%、2.3%,6A和5A等位基因频率分别为79.3%、20.7%和82.7%、17.3%,总体分布均无显著性差异(P>0.05);根据吸烟状况及病理类型分层分析发现,吸烟患者组5A等位基因频率(21.0%)显著高于健康吸烟组(12.9%)(χ2=4.81,P=0.03),携带5A/5A或5A/6A基因型可显著增高吸烟者的NSCLC发病风险(经性别。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 基质金属蛋白酶3 多态性 肿瘤 易感性
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CDH1基因3’非编码区单核苷酸多态性与食管癌、贲门癌的关系 被引量：8
6
作者 张秀凤 王益民 +7 位作者 李琰 郭炜 王娜 王瑞 魏丽珍 葛晖 曹延延 张健慧 《实用诊断与治疗杂志》 2007年第4期241-244,共4页
目的:探讨CDH1基因3’非编码区(untranslated region,UTR)+54 C／T单核苷酸多态性与中国北方人食管鳞状细胞癌、贲门腺癌易感性和淋巴结转移的关系。方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析方法检测了333例食管鳞状细胞癌患者、... 目的:探讨CDH1基因3’非编码区(untranslated region,UTR)+54 C／T单核苷酸多态性与中国北方人食管鳞状细胞癌、贲门腺癌易感性和淋巴结转移的关系。方法:采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析方法检测了333例食管鳞状细胞癌患者、239例贲门腺癌患者和343名健康对照的CDH1+54C／T单核苷多态性的基因型。结果: CDH1 3’UTR+54C等位基因在食管鳞状细胞癌、贲门腺癌患者组和健康对照组中的分布有统计学差异(P＝0.046和0.000)。与T／T基因型相比,携带C等位基因(C／T+C／C基因型)可显著增加食管鳞状细胞癌和贲门腺癌的发病风险。根据个体吸烟状况和上消化道肿瘤家族史进行分层分析发现,与T／T基因型相比,携带C等位基因(C／T+C／C基因型)可使非吸烟个体食管鳞状细胞癌和贲门腺癌的发病风险增加约2～3倍以及家族史阴性个体食管鳞状细胞癌和贲门腺癌的发病风险增加约2倍。本研究未发现该单核苷多态性对食管鳞状细胞癌和贲门腺癌淋巴结转移的影响。结论:CDH1 3’UTR+54C／T多态性可能与食管鳞状细胞癌和贲门腺癌的易感性相关。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 贲门腺癌 多态性 肿瘤易感性
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E-钙黏蛋白基因多态性与上皮性卵巢癌发病风险关系的研究 被引量：3
7
作者 梁军 李琰 +4 位作者 王娜 邢慧敏 周荣秒 罗静涛 康山 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期183-186,共4页
目的探讨E-钙黏蛋白基因（E-cadherin gene，CDHl）单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）与上皮性卵巢癌发病风险的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析207例上皮性卵巢癌患者和256名健康对照的... 目的探讨E-钙黏蛋白基因（E-cadherin gene，CDHl）单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）与上皮性卵巢癌发病风险的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析207例上皮性卵巢癌患者和256名健康对照的CDHl基因启动子区-160C／A、-347G／GA和3’UTR＋54C／T3个SNP位点基因型频率分布；采用免疫组织化学方法检测携带3’UTR＋54C／T SNP位点不同基因型的卵巢癌患者癌组织CDHl基因的表达情况。结果CDHl基因-160C／A和-347G／GA 2个SNP位点的基因型和等位基因频率分布在患者组与健康对照组间差异无统计学意义（P〉0．05）。3’UTR＋54C／TSNP位点的基因型与等位基因频率分布在患者与健康对照组间差异有统计学意义，患者组中CC基因型和C等位基因频率（65．2％，89．1％）明显高于对照组（52．7％，64．5％）（P〈0．01）；CC基因型可能显著增加上皮性卵巢癌的发病风险（比值比为1．85，95％可信区间为1．27～2．69）；且免疫组化研究表明cc基因型患者癌组织CDHl基因的表达明显低于T等位基因（CT＋1Tr）携带者（P〈0．05）。采用2LD软件分析显示-160C／A、-347G／GA两位点间存在连锁不平衡（D’=0．999582），-160A／-347GA单倍型仅在患者组中检测到（5．1％），-160C／-347GA单倍型可能明显降低卵巢癌的发病风险（比值比为0．66，95％可信区间为0．45～0．96）。结论 CDHl基因-160C／A、-347G／GA SNP可能与上皮性卵巢癌的发病风险无关，但两位点的单倍型可能改变上皮性卵巢癌的发病风险。3’UTR＋54C／T多态CC基因型可能成为上皮性卵巢癌发病的潜在危险因素。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 E-钙黏蛋白基因 单核苷酸多态性 遗传易感性
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微粒体环氧化物水化酶基因多态性与卵巢上皮性癌易感性的关系 被引量：1
8
作者 康山 段丽红 +2 位作者 李琰 宋俊芬 张健慧 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期556-557,共2页
环境中的致癌物是恶性肿瘤发生的一个重要因素,致癌物进入人体后,经体内酶系统代谢活化,或者水解失活.微粒体环氧化物水化酶(microsomal epoxide hydrase,MEH)主要参与体内对致癌物的解毒过程,进入体内的致癌物经此酶作用形成高极性的... 环境中的致癌物是恶性肿瘤发生的一个重要因素,致癌物进入人体后,经体内酶系统代谢活化,或者水解失活.微粒体环氧化物水化酶(microsomal epoxide hydrase,MEH)主要参与体内对致癌物的解毒过程,进入体内的致癌物经此酶作用形成高极性的水溶性物质而被排出体外[1].研究显示,MEH第3外显子(MEH3)113T/C基因多态性影响MEH的活性,可能与某些肿瘤的易感性相关.本研究对中国北方籍汉族卵巢上皮性癌患者MEH3 113T/C基因多态性进行检测,以探讨此基因多态性与卵巢上皮性癌易感性的关系. 展开更多
关键词 体内 致癌物 易感性 微粒体 卵巢上皮性癌 多态性 肿瘤 酶基因 外显子 酶作用
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