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A组轮状病毒结构蛋白VP6在家蚕杆状病毒表达系统中的表达
被引量：
2
1
作者
李司
钟云平
+3 位作者
张海花
应慧慧
于威
张耀洲
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期1024-1028,共5页
A组轮状病毒(rotavirus,RV)是婴幼儿严重病毒性腹泻的主要病原,VP6为轮状病毒的主要结构蛋白之一,天然VP6具有很强的抗原性和免疫原性。通过基因重组技术将A组轮状病毒T114中国地方株VP6基因克隆入转移载体质粒pBacPAK8中,并将重组质粒p...
A组轮状病毒(rotavirus,RV)是婴幼儿严重病毒性腹泻的主要病原,VP6为轮状病毒的主要结构蛋白之一,天然VP6具有很强的抗原性和免疫原性。通过基因重组技术将A组轮状病毒T114中国地方株VP6基因克隆入转移载体质粒pBacPAK8中,并将重组质粒pBacPAK8-VP6与线性化家蚕杆状病毒Bm-BacPAK6DNA共转染BmN细胞,获得重组病毒BmNPV-VP6。用BmNPV-VP6感染BmN细胞和家蚕5龄幼虫,Western blotting检测表明在BmN细胞和家蚕5龄幼虫的血淋巴中均可检测到120 kD的特异性条带,提示重组VP6蛋白在家蚕中获得表达,与VP6三体形式的大小相符合。ELISA检测结果显示,重组VP6蛋白在BmN细胞和家蚕5龄幼虫血淋巴中的表达分别在感染后第4天和第6天达到最高水平。VP6在家蚕杆状病毒表达系统中的成功表达可为新型轮状病毒疫苗的研制提供新的途径。
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关键词
A组轮状病毒
VP6蛋白
家蚕杆状病毒表达系统
原文传递
应用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞和幼虫体内表达β-淀粉样蛋白
被引量：
1
2
作者
李司
张海花
+1 位作者
陆玲鸿
张文平
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期850-855,共6页
作为阿尔茨海默症(AD)重要神经病理学特征之一的脑内老年斑主要由β-淀粉样蛋白Aβ40和Aβ42聚集而成,Aβ42是其中的毒性成分。Aβ的特异性主动免疫对不同的转基因AD模型小鼠均有治疗作用,但临床试验中以注射方式给药容易诱发炎症反应...
作为阿尔茨海默症(AD)重要神经病理学特征之一的脑内老年斑主要由β-淀粉样蛋白Aβ40和Aβ42聚集而成,Aβ42是其中的毒性成分。Aβ的特异性主动免疫对不同的转基因AD模型小鼠均有治疗作用,但临床试验中以注射方式给药容易诱发炎症反应。为了能够更好、更安全地采用主动的Aβ免疫疗法达到预防和治疗AD的目的,尝试用家蚕杆状病毒表达系统表达Aβ42蛋白。将Aβ42基因克隆入转移载体质粒pB acP AK8中,并使该重组质粒和家蚕杆状病毒Bm-BacP AK6线性化的DNA共转染家蚕卵巢培养细胞BmN,经筛选、纯化获得的重组病毒命名为BmN PV-Aβ42。用BmN PV-Aβ42感染BmN细胞和家蚕5龄起蚕后,利用Western blotting在BmN细胞和5龄幼虫血淋巴中均可检测到5 kD左右的特异性条带,证明重组Aβ42蛋白表达成功。ELISA检测显示,重组Aβ42肽在感染后第4天的BmN细胞和感染后第6天的5龄幼虫血淋巴中的表达量分别达到1.1 pg/个、2μg/mL。进一步提高Aβ42在家蚕杆状病毒表达系统中的表达效率,有望为研发预防和治疗阿尔茨海默症的可食性疫苗提供新型原料。
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关键词
阿尔茨海默症
Β-淀粉样蛋白
免疫
家蚕杆状病毒表达系统
培养细胞
幼虫血淋巴
原文传递
题名
A组轮状病毒结构蛋白VP6在家蚕杆状病毒表达系统中的表达
被引量：
2
1
作者
李司
钟云平
张海花
应慧慧
于威
张耀洲
机构
浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所、浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期1024-1028,共5页
基金
浙江省教育厅科研项目(No.Y200909740)
浙江省自然科学基金面上项目(No.Y3110354,Y3090339)
国家高技术发展计划“863”项目(No.2011AA100603)
文摘
A组轮状病毒(rotavirus,RV)是婴幼儿严重病毒性腹泻的主要病原,VP6为轮状病毒的主要结构蛋白之一,天然VP6具有很强的抗原性和免疫原性。通过基因重组技术将A组轮状病毒T114中国地方株VP6基因克隆入转移载体质粒pBacPAK8中,并将重组质粒pBacPAK8-VP6与线性化家蚕杆状病毒Bm-BacPAK6DNA共转染BmN细胞,获得重组病毒BmNPV-VP6。用BmNPV-VP6感染BmN细胞和家蚕5龄幼虫,Western blotting检测表明在BmN细胞和家蚕5龄幼虫的血淋巴中均可检测到120 kD的特异性条带,提示重组VP6蛋白在家蚕中获得表达,与VP6三体形式的大小相符合。ELISA检测结果显示,重组VP6蛋白在BmN细胞和家蚕5龄幼虫血淋巴中的表达分别在感染后第4天和第6天达到最高水平。VP6在家蚕杆状病毒表达系统中的成功表达可为新型轮状病毒疫苗的研制提供新的途径。
关键词
A组轮状病毒
VP6蛋白
家蚕杆状病毒表达系统
Keywords
Group A rotavirus
Protein VP6
Bombyx mori baculovirus expression system
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
应用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞和幼虫体内表达β-淀粉样蛋白
被引量：
1
2
作者
李司
张海花
陆玲鸿
张文平
机构
浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所、浙江省家蚕生物反应器和生物医药重点实验室
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期850-855,共6页
基金
浙江省自然科学基金项目(No.Y3110354)
浙江省教育厅科研项目(No.Y201226220)
+1 种基金
国家高技术研究发展计划“863”项目(No.2012ZX09102301-009,2011AA100603)
浙江省高校生物学重中之重(一级)学科建设项目
文摘
作为阿尔茨海默症(AD)重要神经病理学特征之一的脑内老年斑主要由β-淀粉样蛋白Aβ40和Aβ42聚集而成,Aβ42是其中的毒性成分。Aβ的特异性主动免疫对不同的转基因AD模型小鼠均有治疗作用,但临床试验中以注射方式给药容易诱发炎症反应。为了能够更好、更安全地采用主动的Aβ免疫疗法达到预防和治疗AD的目的,尝试用家蚕杆状病毒表达系统表达Aβ42蛋白。将Aβ42基因克隆入转移载体质粒pB acP AK8中,并使该重组质粒和家蚕杆状病毒Bm-BacP AK6线性化的DNA共转染家蚕卵巢培养细胞BmN,经筛选、纯化获得的重组病毒命名为BmN PV-Aβ42。用BmN PV-Aβ42感染BmN细胞和家蚕5龄起蚕后,利用Western blotting在BmN细胞和5龄幼虫血淋巴中均可检测到5 kD左右的特异性条带,证明重组Aβ42蛋白表达成功。ELISA检测显示,重组Aβ42肽在感染后第4天的BmN细胞和感染后第6天的5龄幼虫血淋巴中的表达量分别达到1.1 pg/个、2μg/mL。进一步提高Aβ42在家蚕杆状病毒表达系统中的表达效率,有望为研发预防和治疗阿尔茨海默症的可食性疫苗提供新型原料。
关键词
阿尔茨海默症
Β-淀粉样蛋白
免疫
家蚕杆状病毒表达系统
培养细胞
幼虫血淋巴
Keywords
Alzheimer＇s disease
Amyloid β-protein
Immune
Bombyx mori baculovirus expression system
Culture cell
Larval hemolymph
分类号
R749.16 [医药卫生—神经病学与精神病学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
A组轮状病毒结构蛋白VP6在家蚕杆状病毒表达系统中的表达
李司
钟云平
张海花
应慧慧
于威
张耀洲
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
2
原文传递
2
应用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕培养细胞和幼虫体内表达β-淀粉样蛋白
李司
张海花
陆玲鸿
张文平
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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