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运用二代测序技术确认PCR-SSOP法检出的HLA罕见等位基因
1
作者 钟显信 巫望达 +1 位作者 全湛柔 高素青 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期203-208,共6页
目的:确认PCR-序列特异性寡核苷酸探针(SSOP)法检出的4例磁珠探针HLA基因分型结果格局异常和3例模棱两可结果样本的HLA真实基因型。方法:对HLA高分辨组织配型血样采用PCR-SSOP法检出的4例磁珠探针HLA基因分型结果格局异常和3例模棱两可... 目的:确认PCR-序列特异性寡核苷酸探针(SSOP)法检出的4例磁珠探针HLA基因分型结果格局异常和3例模棱两可结果样本的HLA真实基因型。方法:对HLA高分辨组织配型血样采用PCR-SSOP法检出的4例磁珠探针HLA基因分型结果格局异常和3例模棱两可结果进一步采用PCR-直接测序分型(SBT)技术和二代测序(NGS)技术复检确认。结果:采用PCR-SSOP方法检出4例磁珠探针HLA基因分型结果格局异常的样本,加做SBT及NGS两种方法复检后结果显示,样本1的HLA-A分型结果与已知基因型不完全匹配,NGS分析显示,该等位基因与同源性最接近的等位基因A*31:01:02:01在第2外显子154位G>A变异,导致28位编码氨基酸由缬氨酸变为蛋氨酸(p.Val28Met),样本2的HLA-C结果为C*03:119, 06:02,样本3的HLA-C结果为C*03:03, 07:137,样本4的HLA-B结果为B*55:02,55:12。采用PCR-SSOP方法检出3例模棱两可结果样本,加做SBT及NGS两种方法复检后结果显示,样本5的HLA-B结果为B*15:58, 38:02,样本6的HLA-DRB1结果为DRB1*04:05, 14:101,样本7的HLA-DQB1结果为DQB1*03:34,05:02。其中等位基因C*03:119、C*07:137和DRB1*14:101均未收录于中国造血干细胞捐献者资料库的常见及确认等位基因(CWD)表2.4版本。结论:PCR-SSOP法磁珠探针HLA基因分型结果格局异常提示可能为HLA罕见等位基因或新等位基因,需要测序验证。 展开更多
关键词 HLA 等位基因 PCR-序列特异性寡核苷酸探针 PCR-直接测序分型 二代测序
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网织红细胞血红蛋白含量诊断老年人铁缺乏的临床应用 被引量：15
2
作者 曾学辉 李忠新 +2 位作者 李秀玉 谢斯雅 宋林立 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第20期2842-2844,共3页
目的探讨网织红细胞血红蛋白含量(Ret-He)诊断老年人铁缺乏及评估铁剂治疗反应的临床价值。方法采用Sysmex-XE5000全自动血细胞分析仪检测缺铁性贫血(IDA)组、缺铁非贫血组、非小细胞低色素组、健康对照组Ret-He及其他血液学指标,同时... 目的探讨网织红细胞血红蛋白含量(Ret-He)诊断老年人铁缺乏及评估铁剂治疗反应的临床价值。方法采用Sysmex-XE5000全自动血细胞分析仪检测缺铁性贫血(IDA)组、缺铁非贫血组、非小细胞低色素组、健康对照组Ret-He及其他血液学指标,同时采用化学发光免疫法检测血清铁蛋白(SF),应用ROC曲线评价Ret-He诊断老年人铁缺乏的价值,同时观察铁剂治疗过程中Ret-He等血液学参数的变化。结果IDA组Ret-He低于缺铁非贫血组,两者Ret-He均低于健康对照组(P<0.05),IDA组血红蛋白(Hb)、平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、SF低于缺铁非贫血组(P<0.05);IDA组红细胞分布宽度(RDW)高于健康对照组(P<0.01)。通过ROC曲线分析显示,在诊断老年人铁缺乏时,Ret-He的ROC面积较其他血液学指标大,在临界值为31.8pg时,Ret-He诊断铁缺乏的灵敏度和特异度分别为84.3%和86.8%;Ret-He在铁剂治疗4d后就明显升高(P<0.01),Hb在第7天增高,MCV、MCH到第4周才明显增高,RDW到8周时还没有恢复到正常。结论 Ret-He是诊断老年人铁缺乏的早期、敏感指标,是评估老年人IDA患者铁剂治疗效果早期、快速、敏感的指标。 展开更多
关键词 网织红细胞血红蛋白含量 缺铁性贫血 铁缺乏
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泌尿系统疾病诊断和治疗操作对血清前列腺特异抗原检测的影响 被引量：6
3
作者 李惠贞 余文辉 +6 位作者 温志鹏 莫其农 宋林立 李春花 周丹 袁瑞 罗胜华 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第8期1041-1043,共3页
目的评估泌尿系统疾病诊断和治疗操作对血清前列腺特异抗原（PSA）检测的影响。方法将80例在深圳市中医院泌尿外科住院的男性患者纳入该研究,其中进行了直肠指检（DRE）的为13例,导尿术10例,硬式膀胱镜12例,前列腺活检术17例,经尿道前... 目的评估泌尿系统疾病诊断和治疗操作对血清前列腺特异抗原（PSA）检测的影响。方法将80例在深圳市中医院泌尿外科住院的男性患者纳入该研究,其中进行了直肠指检（DRE）的为13例,导尿术10例,硬式膀胱镜12例,前列腺活检术17例,经尿道前列腺切除术（TURP）28例。80例患者分别于泌尿系统疾病诊断和治疗操作前及操作后24h、3d、7d、14d采集血液标本进行血清总前列腺特异抗原（TPSA）和游离前列腺特异抗原（FPSA）测定。结果 DRE操作对TPSA和FPSA水平没影响,操作前后TPSA、FPSA水平差异均无统计学意义（P〉0.05）;导尿术和膀胱镜检查均能使血清TPSA和FPSA水平升高,操作前后比较差异有统计学意义（P〈0.05）,且持续时间较长（7~14d）。活检术和TURP术后24h血清TPSA和FPSA水平明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）,第3天开始降低,第14天血清TPSA和FPSA水平降至基线。结论 DRE对血清TPSA和FPSA检测没影响,而导尿术、膀胱镜、活检术和TURP等可使血清TPSA和FPSA水平不同程度地升高,但维持时间长短不同。 展开更多
关键词 泌尿系统 诊断 治疗 前列腺特异抗原
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抗双链DNA抗体不同检测方法的比对分析 被引量：3
4
作者 张春雷 周小梅 +3 位作者 张书楠 吕琪 陈桂冰 李庆宽 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第17期1718-1719,共2页
目的评价间接免疫荧光法(IIFA)、酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫印迹法(IBT)检测抗双链DNA(dsDNA)抗体的特点及应用价值。方法采用IIFA、ELISA和IBT法对实验组(系统性红斑狼疮患者,n=70)及健康对照组(健康人,n=650)血清标本进行抗dsDN... 目的评价间接免疫荧光法(IIFA)、酶联免疫吸附测定法(ELISA)和免疫印迹法(IBT)检测抗双链DNA(dsDNA)抗体的特点及应用价值。方法采用IIFA、ELISA和IBT法对实验组(系统性红斑狼疮患者,n=70)及健康对照组(健康人,n=650)血清标本进行抗dsDNA抗体的检测。结果经IIFA、ELISA法及IBT法检测,实验组抗dsDNA抗体的阳性率分别为34.29%,54.29%和44.29%;健康对照组抗dsDNA抗体的阳性率分别为0.15%,4.46%和1.54%,ELISA和IBT检出阳性率与IIFA方法比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在血清抗dsDNA抗体的检测上,IIFA法特异性高,敏感性较低;而ELISA和IBT法检测敏感性高,特异性较差。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定 荧光免疫测定 免疫印迹法 红斑狼疮 系统性 抗DSDNA抗体
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重症患者血培养最优采血量的初步探讨
5
作者 张惠媚 张春雷 +2 位作者 李瑜珍 曾学辉 蔡闯闯 《医学检验与临床》 2022年第12期44-47,共4页
目的:探讨血流感染患者血培养采血量与阳性率的关系,以及采血量对报阳时长的影响,为重症患者制定血培养个性化采血量提供依据。方法:回顾性分析2020年深圳市中医院4905例血培养,分析不同采血量区间阳性率的异同,以及不同病原菌的采血量... 目的:探讨血流感染患者血培养采血量与阳性率的关系,以及采血量对报阳时长的影响,为重症患者制定血培养个性化采血量提供依据。方法:回顾性分析2020年深圳市中医院4905例血培养,分析不同采血量区间阳性率的异同,以及不同病原菌的采血量和报阳时长之间的相关性。结果:采血量5~6ml区间(阳性率14.1%)与采血量8~9ml区间(阳性率9.8%)和11-12ml区间(阳性率7.5%)相比较,有统计学意义(P<0.05),采血量和报阳时长之间存在弱相关性,r分别为0263、0.219,P<0.05,病原菌为大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌的血培养采血量与报阳时长之间无明显相关性。结论:为减少检验性失血,可将重症患者血培养采血量定为5~6ml,采血量对报阳时长的影响不显著。 展开更多
关键词 血培养 最优采血量 报阳时长 检验性失血
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贝克曼库尔特UnicelDxl800检测系统新一代促甲状腺激素性能验证
6
作者 李春花 宋林立 +3 位作者 侯智辉 余文辉 袁瑞 张春雷 《医学检验与临床》 2022年第3期41-47,共7页
目的:为确保检验质量,对贝克曼库尔特UnicelDxI800免疫检测系统促甲状腺激素新一代试剂TSH3rd的测量精密度,准确度,线性,分析测量范围等进行验证。方法:使用两个水平质控品和低值血清池样本进行精密度验证。利用国家卫生健康委员会临床... 目的:为确保检验质量,对贝克曼库尔特UnicelDxI800免疫检测系统促甲状腺激素新一代试剂TSH3rd的测量精密度,准确度,线性,分析测量范围等进行验证。方法:使用两个水平质控品和低值血清池样本进行精密度验证。利用国家卫生健康委员会临床检验中心室间质量评价,结合回收实验进行准确度验证。配制5个低值(预期值0.016,0.010,0.008,0.006,0.005,0.001 mIU/L)混合血清样本,每天2批次,连续检测10天,读取相对发光单位(Relative Luminescence Unit,RLU),计算变异系数(CV),评估功能灵敏度。依据美国临床和实验室标准化协会EP06-A批准指南,选择接近线性上下限浓度样本,参照S=7Specimens稀释方案,配制高浓度与低浓度血清池样本,按预定比例进行稀释得到系列样本,每个浓度水平重复测量2次,取平均值。利用Abacus2.0和SPSS22.0软件包进行多项式线性回归分析和分析测量范围验证。结果:中值质控品(QC2)批内不精密度:变异系数(CV)5.140%;实验室内不精密度:CV 7.700%。高值质控品(QC3)批内不精密度:CV 3.570%;实验室内不精密度:CV 4.410%。低值血清池样本批内不精密度:CV 5.059%;实验室内不精密度:CV 5.318%。准确度评估显示TSH3rd平均偏差为4.66%;平均回收率为102.268%。功能灵敏度为0.005 mIU/L。线性回归方程为Y=0.989 X-0.101,线性相关良好。TSH3rd的分析测量范围约0.005~47.000mIU/L。结论:TSH测量精密度,准确度,线性,分析测量范围等性能指标优于厂商声明,完全满足临床的要求。 展开更多
关键词 检测系统 促甲状腺激素 精密度 线性 分析测量范围
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支气管扩张合并甜味诺卡菌、结核分枝杆菌和烟曲霉感染1例
7
作者 张惠媚 邓英 +3 位作者 卫清 蔡闯闯 黄志伟 李瑜珍 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1086-1089,共4页
患者女,61岁,因“反复咳嗽4年,加重伴发热6 d”于2023年5月4日收入深圳市中医院。胸部CT示支气管扩张伴肺部感染;痰涂片显微镜检查提示诺卡菌可能,痰真菌培养检出烟曲霉;抗诺卡菌及抗烟曲霉治疗数天后,炎症指标有所下降,但仍有低热。行... 患者女,61岁,因“反复咳嗽4年,加重伴发热6 d”于2023年5月4日收入深圳市中医院。胸部CT示支气管扩张伴肺部感染;痰涂片显微镜检查提示诺卡菌可能,痰真菌培养检出烟曲霉;抗诺卡菌及抗烟曲霉治疗数天后,炎症指标有所下降,但仍有低热。行支气管肺泡灌洗液培养和宏基因组测序,检出甜味诺卡菌、结核分枝杆菌及烟曲霉3种可疑致病菌,经抗感染治疗,病情好转。对于混合感染的诊断,多种检验方法相结合,可以提高病原菌的正确诊断率,从而更好地指导临床治疗。 展开更多
关键词 诺卡菌属 混合感染 诊断
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同一医疗机构不同检测系统检验结果可比性的验证与偏倚评估 被引量：1
8
作者 余文辉 吴惠璇 +5 位作者 莫其农 宋林立 周丹 李春花 袁瑞 罗胜华 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2017年第6期-,共7页
目的通过雅培(Abbott)Architect i2000SR(试验方法)与贝克曼库尔特(Beckman Coulter)Unicel Dx I?800(比较方法)化学发光免疫分析仪检验结果的比对,对两系统检验结果的可比性进行验证与偏倚评估。方法参照《医疗机构内定量检验结果的可... 目的通过雅培(Abbott)Architect i2000SR(试验方法)与贝克曼库尔特(Beckman Coulter)Unicel Dx I?800(比较方法)化学发光免疫分析仪检验结果的比对,对两系统检验结果的可比性进行验证与偏倚评估。方法参照《医疗机构内定量检验结果的可比性验证指南》和美国临床和实验室标准化研究院(CLSI)的EP9-A2、EP15-A2等文件,建立可比性验证方案。首先对Abbott系统和Beckman系统进行精密度评估,并对Beckman系统进行准确度评估。其次,从日常检测的患者中各采集40例样本,其中医学决定水平范围内的样本量占40%,分别在两系统上检测血清铁蛋白(FER)和叶酸(FOL)等项目,并进行线性回归分析和偏倚评估(Bland-altman分析)。结果两系统对FER和FOL检验结果的相关性良好,相关系数(r)分别为0.997和0.986。FER和FOL相对偏倚分别为10.1%和4.0%,而根据生物学变异设定的分析质量规范中适当的质量规范所确定的偏倚(BIAS)分别为5.2%和19.2%。结果提示FER的偏倚较大,FER的检验结果没有可比性。而两系统对FOL的检验结果具有可比性。结论两检测系统对FER和FOL测定结果直线相关性良好,但只有FOL的检验结果具有可比性。而FER的检验结果没有可比性,应整改后再验证。 展开更多
关键词 化学发光免疫分析 检测系统 可比性 验证
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