目的观察保肾冲剂对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾脏的保护作用及内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响,探讨其作用机制。方法将21只雄性SD大鼠随机分为造模组(14只)及空白对照组(7只)。造模组大鼠予尾静脉...目的观察保肾冲剂对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾脏的保护作用及内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响,探讨其作用机制。方法将21只雄性SD大鼠随机分为造模组(14只)及空白对照组(7只)。造模组大鼠予尾静脉注射抗大鼠胸腺细胞抗血清(ATS)建立Ms PGN模型,造模成功后再随机分为模型组及中药组,每组7只。中药组给予保肾冲剂药液灌胃,空白对照组和模型组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,连续14周。实验结束后,观察比较各组大鼠治疗前后24 h尿蛋白定量(24 h UTP)及血肌酐(Cr)水平变化,并检测大鼠肾组织内GRP78蛋白及基因表达水平情况。结果治疗前中药组及模型组大鼠24 h UTP及Cr水平均明显高于空白对照组(P<0.05),治疗后中药组大鼠24 h UTP及Cr水平较模型组均明显降低(P<0.05);模型组及中药组大鼠治疗后GRP78蛋白及基因表达水平IOD值均明显高于空白对照组(P<0.05),但中药组大鼠治疗后GRP78蛋白及基因表达水平IOD值均低于模型组(P<0.05)。结论 Ms PGN大鼠肾脏组织GRP78表达增高,提示ERS可能参与其肾脏损害过程,而中药保肾冲剂对Ms PGN模型大鼠肾脏具有一定的保护作用,可减轻大鼠肾功能损害,降低大鼠24 h UTP及Cr水平,降低GRP78蛋白及基因表达水平,从而起到治疗作用,且抑制ERS相关蛋白GRP78的过度表达可能是其减轻肾功能损害的重要作用机制靶点之一。展开更多
文摘目的探讨胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响。方法分离培养大鼠肾内巨噬细胞,构建巨噬细胞与肾小管上皮细胞共培养体系及缺糖缺氧(OGD)细胞模型,据处理不同将细胞分为OGD组、乙酰胆碱(ACh 100μmol/L)+OGD组和ACh+加兰他敏(Gal 10μmol/L)+OGD组。采用ELISA法检测各组上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10的表达;MTT法检测肾小管细胞活力;RT-qPCR及Western blotting检测胆碱酯酶(AChE)m RNA和蛋白表达;比色法检测AChE活性。结果 ACh+OGD组TNF-α和IL-1β水平均低于OGD组,加入Gal之后,TNF-α和IL-1β水平进一步下降;ACh+OGD组肾小管活力高于OGD组,加入Gal之后,肾小管活力进一步增强,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。3组之间巨噬细胞ACh E m RNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。与OGD组比较,ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组肾小管细胞活力减弱,但ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组间差异无统计学意义(P=0.368)。结论 ACh和Gal可抑制肾脏巨噬细胞分泌炎性介质并抑制胆碱酯酶活性,减轻急性缺氧性肾小管细胞损伤。调控巨噬细胞的胆碱能通路可能是未来急性缺氧性肾损伤的治疗方向。
文摘目的观察保肾冲剂对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾脏的保护作用及内质网应激(ERS)相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达的影响,探讨其作用机制。方法将21只雄性SD大鼠随机分为造模组(14只)及空白对照组(7只)。造模组大鼠予尾静脉注射抗大鼠胸腺细胞抗血清(ATS)建立Ms PGN模型,造模成功后再随机分为模型组及中药组,每组7只。中药组给予保肾冲剂药液灌胃,空白对照组和模型组予等容积0.9%氯化钠注射液灌胃,连续14周。实验结束后,观察比较各组大鼠治疗前后24 h尿蛋白定量(24 h UTP)及血肌酐(Cr)水平变化,并检测大鼠肾组织内GRP78蛋白及基因表达水平情况。结果治疗前中药组及模型组大鼠24 h UTP及Cr水平均明显高于空白对照组(P<0.05),治疗后中药组大鼠24 h UTP及Cr水平较模型组均明显降低(P<0.05);模型组及中药组大鼠治疗后GRP78蛋白及基因表达水平IOD值均明显高于空白对照组(P<0.05),但中药组大鼠治疗后GRP78蛋白及基因表达水平IOD值均低于模型组(P<0.05)。结论 Ms PGN大鼠肾脏组织GRP78表达增高,提示ERS可能参与其肾脏损害过程,而中药保肾冲剂对Ms PGN模型大鼠肾脏具有一定的保护作用,可减轻大鼠肾功能损害,降低大鼠24 h UTP及Cr水平,降低GRP78蛋白及基因表达水平,从而起到治疗作用,且抑制ERS相关蛋白GRP78的过度表达可能是其减轻肾功能损害的重要作用机制靶点之一。
