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高校大型仪器共享平台管理中的问题与对策——以湖北省南水北调水源区生物医药研发检测共享平台为例 被引量:1
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作者 张特 赵红艳 +4 位作者 李蓓 杜伯雨 刘雪文 司渊 刘莹 《科技资讯》 2021年第21期146-151,共6页
大型仪器共享平台是高校及科研院所科学研究的主要支撑,其建设与管理是推进高校科研仪器设备开放及高效共享的有效方式。该文以湖北省南水北调水源区生物医药研发检测共享平台——湖北医药学院大型仪器共享平台的建设和运行管理为例,分... 大型仪器共享平台是高校及科研院所科学研究的主要支撑,其建设与管理是推进高校科研仪器设备开放及高效共享的有效方式。该文以湖北省南水北调水源区生物医药研发检测共享平台——湖北医药学院大型仪器共享平台的建设和运行管理为例,分析总结了高校大型仪器共享平台管理中的实践经验与存在的问题,并深入探讨了其解决对策,为今后不断优化平台建设,促进大型仪器共享平台管理水平的阶梯式上升提供参考。 展开更多
关键词 大型仪器 共享平台 管理 高校 问题与对策
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湖北省十堰市恒牙龋病患者伤残权重现状研究
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作者 田苗 贾璐阳 +4 位作者 亢瑞琪 包洒 张国成 孔铸 李金超 《医学新知》 CAS 2024年第6期639-646,共8页
目的了解湖北省十堰市恒牙龋病患者伤残权重(disability weight,DW)现状。方法对湖北医药学院附属东风口腔医院及其两家分门诊的恒牙龋病患者进行问卷调查,并选择恒牙龋痛作为后遗症进行研究,通过患者EQ-5D VAS自评及调查者赋值、专家... 目的了解湖北省十堰市恒牙龋病患者伤残权重(disability weight,DW)现状。方法对湖北医药学院附属东风口腔医院及其两家分门诊的恒牙龋病患者进行问卷调查,并选择恒牙龋痛作为后遗症进行研究,通过患者EQ-5D VAS自评及调查者赋值、专家赋值三种方式获取DW。采用Mann-Whitney U检验及Kruskal-Wallis H检验进行单因素分析、多元线性回归进行多因素分析。结果共220名患者参与调查,年龄多为21~35岁,女性和学生群体居多。患者EQ-5D VAS自评DW[0.300(0.200,0.500)]、调查者赋值DW[0.220(0.096,0.400)]、专家赋值DW[0.220(0.096,0.400)]。单因素分析显示,不同年龄、月收入、学历的患者其自评DW、调查者赋值DW、专家赋值DW差异均具有统计学意义。多因素分析显示年龄越大,DW越大,患者失能状况越严重;学历越高,月收入越高,DW越小,患者失能状况越轻(P<0.05)。结论湖北省十堰市不同赋值方法测算的恒牙龋病患者DW存在差异,年龄大、学历低、月收入低是影响恒牙龋病患者DW的危险因素,当地公共卫生政策制定时应关注该类人群。 展开更多
关键词 恒牙龋痛 伤残权重 六级社会功能分级标准 国际龋病检测和评估系统
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鄂西北地区疏花蛇菰的生药学研究
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作者 刘丽 徐嘉丽 +5 位作者 曹文洁 钱永帅 桂利利 吴正坤 余惠凡 李飞 《湖北医药学院学报》 CAS 2024年第2期161-168,共8页
目的:对鄂西北地区疏花蛇菰进行系统的生药学鉴定研究,分析其潜在的活性成分。方法:采用基源鉴定、性状鉴定、显微鉴定、薄层色谱鉴定、紫外吸收光谱鉴定及DNA条形码鉴定方法,对本课题组采集的19份蛇菰样品进行鉴定,采用化学反应鉴别方... 目的:对鄂西北地区疏花蛇菰进行系统的生药学鉴定研究,分析其潜在的活性成分。方法:采用基源鉴定、性状鉴定、显微鉴定、薄层色谱鉴定、紫外吸收光谱鉴定及DNA条形码鉴定方法,对本课题组采集的19份蛇菰样品进行鉴定,采用化学反应鉴别方法对其含有的化学成分进行初步研究和分析。结果:经系统鉴定,19份蛇菰样品均为疏花蛇菰(Balanophora laxiflora Hemsl.),主要含有糖、多糖及苷类、氨基酸、多肽及蛋白质、鞣质、生物碱类、强心苷、蒽醌类、黄酮类、挥发油及油脂、植物甾醇及三萜类等化学成分。结论:本研究首次对鄂西北地区疏花蛇菰进行了系统的生药学鉴定,可为疏花蛇菰的质量标准制定提供参考依据,为疏花蛇菰的进一步开发利用提供基础。 展开更多
关键词 疏花蛇菰 基源鉴定 性状鉴定 显微鉴定 薄层色谱鉴定 紫外吸收光谱鉴定 DNA条形码鉴定
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医学院校仪器共享平台开设流式细胞术研究生选修课的探索与实践
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作者 张特 赵红艳 +2 位作者 刘雪文 司渊 刘莹 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2020年第9期00242-00243,共2页
流式细胞术是医学院校的基础研究和临床研究的重要方法,也是相应研究领域的研究生必须掌握的一种科研技术。医学院校利用大型仪器共享平台在研究生教学中开设流式细胞术选修课,不仅而且增强了学生相关知识技能,也锻炼了动手操作能力,为... 流式细胞术是医学院校的基础研究和临床研究的重要方法,也是相应研究领域的研究生必须掌握的一种科研技术。医学院校利用大型仪器共享平台在研究生教学中开设流式细胞术选修课,不仅而且增强了学生相关知识技能,也锻炼了动手操作能力,为其在今后的科研工作中独立完成流式细胞术的检测及数据分析工作奠定了基础,有助于科研能力的提升。 展开更多
关键词 流式细胞术 研究生选修课 仪器共享平台
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响应面法优化十堰地区黄药叶果胶提取工艺及其基本性质研究
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作者 吴正坤 桂利利 +1 位作者 余惠凡 李飞 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第4期40-47,共8页
通过单因素试验和响应面法优化低温碱提取法黄药叶果胶提取工艺,并分析黄药叶果胶单糖组成及基本性质。结果表明,黄药叶果胶的最优提取工艺参数是NaOH浓度1.85 g/L、提取时间32 min和液料比60∶1(mL/g),黄药叶果胶在此条件下的得率为(10... 通过单因素试验和响应面法优化低温碱提取法黄药叶果胶提取工艺,并分析黄药叶果胶单糖组成及基本性质。结果表明,黄药叶果胶的最优提取工艺参数是NaOH浓度1.85 g/L、提取时间32 min和液料比60∶1(mL/g),黄药叶果胶在此条件下的得率为(10.785±0.017)%。果胶样品水解后得到5种单糖,分别是半乳糖醛酸45.06 mol%、鼠李糖19.91 mol%、半乳糖14.55 mol%、阿拉伯糖13.01 mol%、岩藻糖7.48 mol%。分析黄药叶果胶单糖组成和酯化度,黄药叶果胶为低脂果胶,且结构线性度低,主要结构为含有较短中性糖侧链的RG-I型果胶。本研究可为十堰地区黄药叶果胶的开发、利用和结构研究提供理论依据。 展开更多
关键词 黄药叶 果胶 提取工艺 响应面 单糖组成
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重楼皂苷G通过CIP2A/PP2A信号通路抑制淋巴瘤细胞生长并促进凋亡及自噬的机制研究 被引量:5
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作者 刘雪文 向雨晨 +3 位作者 刘洋洋 司渊 刘莹 郭阳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1767-1772,共6页
为探究一种从延龄草(Trillium tschonoskii Maxim)中提取的活性化合物polyphyllin G(PPG)在人淋巴瘤细胞中的抑制作用及机制,采用CCK-8和细胞计数测定法检测增殖抑制作用,通过流式细胞术和蛋白印迹检测细胞凋亡、自噬及上游机制。结果显... 为探究一种从延龄草(Trillium tschonoskii Maxim)中提取的活性化合物polyphyllin G(PPG)在人淋巴瘤细胞中的抑制作用及机制,采用CCK-8和细胞计数测定法检测增殖抑制作用,通过流式细胞术和蛋白印迹检测细胞凋亡、自噬及上游机制。结果显示,PPG在Raji淋巴瘤细胞系中抑制生长并促进凋亡及自噬。PPG显著下调蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)的表达。PPG增加了CIP2A下游分子蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)的活性,并进而降低了Akt的磷酸化。进一步,PP2A抑制剂冈田酸能够拮抗PPG对细胞增殖的抑制作用及对凋亡、自噬的诱导作用,表明PP2A是PPG通过下调CIP2A诱导细胞凋亡及自噬的关键环节。总之,以上结果表明,PPG可能通过抑制CIP2A/PP2A/Akt信号通路抑制淋巴瘤细胞生长并促进凋亡及自噬。PPG有望成为治疗淋巴瘤的潜在抗癌药物。 展开更多
关键词 淋巴瘤 polyphyllin G CIP2A 凋亡 自噬
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性激素结合球蛋白在辅助生殖领域的研究进展 被引量:3
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作者 廖晖淇 刁红录 +1 位作者 徐鸿毅 张昌军 《医学综述》 CAS 2022年第5期882-887,共6页
性激素结合球蛋白(SHBG)又名睾酮-雌二醇结合球蛋白,与雌激素及睾酮结合的亲和力较高,可通过调节与性激素的结合力动态调控血液中的激素水平,进而作用于不同的靶器官产生不同的生物学效应。SHBG在性激素代谢障碍相关疾病、妇科肿瘤以及... 性激素结合球蛋白(SHBG)又名睾酮-雌二醇结合球蛋白,与雌激素及睾酮结合的亲和力较高,可通过调节与性激素的结合力动态调控血液中的激素水平,进而作用于不同的靶器官产生不同的生物学效应。SHBG在性激素代谢障碍相关疾病、妇科肿瘤以及围生期代谢性疾病的发生发展中具有重要作用。在辅助生殖技术领域,SHBG通过全身或局部激素调节、信号通路等参与促排卵反应性、卵泡的生长发育、精子的发生以及子宫内膜的容受性等。因此,SHBG在辅助生殖技术相关疾病的发生发展中发挥重要作用,但具体作用机制还有待未来进一步研究验证。 展开更多
关键词 辅助生殖技术 性激素结合球蛋白 促排卵 卵泡液 精子形成 胚胎着床
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辅助生殖技术子宫内膜容受性评估方法研究进展 被引量:4
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作者 韩逸凡 张颖 +1 位作者 刁红录 张昌军 《湖北医药学院学报》 CAS 2021年第5期548-553,共6页
在辅助生殖技术治疗的过程中,成功的妊娠需要优质的胚胎、处于接受状态的子宫内膜及二者之间合适的相互对话。失败的妊娠中,胚胎因素仅占1/3,约2/3是次优的子宫内膜及不佳的母胎互作对话导致的[1],即子宫内膜容受性差。子宫内膜呈现最... 在辅助生殖技术治疗的过程中,成功的妊娠需要优质的胚胎、处于接受状态的子宫内膜及二者之间合适的相互对话。失败的妊娠中,胚胎因素仅占1/3,约2/3是次优的子宫内膜及不佳的母胎互作对话导致的[1],即子宫内膜容受性差。子宫内膜呈现最大容受性的时期被称作种植窗(window of implan⁃tation,WOI),对于月经周期28天的妇女来说,一般是指月经周期的第19~21天,或排卵后7~9 d,约持续2~3 d,在这段短暂的时间内,子宫内膜允许胚胎的黏附和植入,预测子宫内膜容受性最大的时期可以帮助体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-em⁃bryo transfer,IVF-ET)患者寻找胚胎移植的最佳时机,因此临床亟需对子宫内膜容受性进行更加准确的评估,以便更好地指导个体化胚胎移植(personal⁃ized embryo transfer,pET),提升种植率及临床妊娠率。 展开更多
关键词 子宫内膜容受性 辅助生殖技术 体外受精-胚胎移植
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顺铂诱导肺腺癌H1650细胞线粒体氧化应激损伤的实验研究 被引量:5
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作者 王贤慧 刘敏 +5 位作者 邹汐洋 李芮 刘丹丹 伍一 戢福云 李锡花 《湖北医药学院学报》 CAS 2020年第1期22-25,29,F0003,共6页
目的:研究顺铂诱导肺腺癌H1650细胞氧化应激致线粒体功能损伤。方法:用不同剂量的顺铂(0、0.5、1.0、2.0μg/mL)处理肺腺癌H1650细胞后,分别采用荧光探针DCFH-DA和JC-1检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)及线粒体膜电位(mit... 目的:研究顺铂诱导肺腺癌H1650细胞氧化应激致线粒体功能损伤。方法:用不同剂量的顺铂(0、0.5、1.0、2.0μg/mL)处理肺腺癌H1650细胞后,分别采用荧光探针DCFH-DA和JC-1检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平,荧光素酶测定细胞内三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)浓度。结果:顺铂处理后,H1650细胞内的ROS含量在5 min时达到最高水平,之后逐渐下降,对照组(培养液不加顺铂)内的ROS含量没有变化。不同浓度顺铂处理细胞24 h后,随着顺铂浓度的增加,细胞的绿色荧光强度逐步增加,红色荧光强度逐步减弱,表明细胞内MMP水平随顺铂浓度的增加而降低。ATP含量测定显示,随着顺铂浓度增加,ATP含量逐步减少。结论:顺铂通过诱导肺腺癌H1650细胞产生ROS导致氧化应激,使MMP降低,ATP含量减少,线粒体功能受损,细胞能量供应受限而发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 肺腺癌 顺铂 H1650 线粒体 线粒体膜电位 活性氧 三磷酸腺苷
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温敏离子通道蛋白TRPV4受热激活参与相关疾病发生的机制研究进展 被引量:1
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作者 徐恋恋 吴兆猛 +4 位作者 王悦华 江陈梦 李征远 郑晓晖 高小康 《山东医药》 CAS 2022年第26期105-107,共3页
发热是机体应对感染和损伤的一种病理性防御反应。瞬时感受器电位离子通道香草素受体4(TRPV4)是瞬时感受器电位离子通道家族的成员,在机体中广泛表达,对体温具有负调节作用。当机体温度升高激活TRPV4或使其表达增多时,可引起脑水肿和癫... 发热是机体应对感染和损伤的一种病理性防御反应。瞬时感受器电位离子通道香草素受体4(TRPV4)是瞬时感受器电位离子通道家族的成员,在机体中广泛表达,对体温具有负调节作用。当机体温度升高激活TRPV4或使其表达增多时,可引起脑水肿和癫痫发作的加剧;TRPV4的活性及正常表达影响新生儿面部与心脏缺陷和精子活动趋热性。通过对TRPV4的多方面研究,有望揭示TRPV4受热激活下与疾病的具体机制,探索新的药物作用靶点和开发新的药物等。 展开更多
关键词 瞬时感受器电位离子通道香草素受体4 温敏离子通道蛋白 发热 激活
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动脉粥样硬化性脑梗死患者血清对氧磷酶1活性与颈动脉内-中膜厚度的相关性研究 被引量:2
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作者 刘睿 丁立 +4 位作者 贺细菊 刘幸卉 史丹丹 冯娜 刘欣 《湖北医药学院学报》 CAS 2022年第3期248-251,共4页
目的:探讨动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血对氧磷酶1(paraoxonase-1,PON1)活性与颈动脉内中膜厚度(carotid intima-media thickness,CIMT)的相关性。方法:纳入128名动脉粥样硬化性脑梗死患者,根据颈动脉彩超CIMT检测结果将患者分为非CIM... 目的:探讨动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血对氧磷酶1(paraoxonase-1,PON1)活性与颈动脉内中膜厚度(carotid intima-media thickness,CIMT)的相关性。方法:纳入128名动脉粥样硬化性脑梗死患者,根据颈动脉彩超CIMT检测结果将患者分为非CIMT增厚组(n=44)和CIMT增厚组(n=84),检测两组患者的血压、血糖、血脂和PON1活性等指标,并进行对比分析。结果:基线资料比较结果显示,两组患者仅吸烟史差异有统计学意义(P=0.047),其余指标差异均无统计学意义。与非CIMT增厚组相比,CIMT增厚组患者的PON1活性明显降低,差异具有统计学意义(P<0.001)。线性相关分析显示,CIMT严重程度与PON1活性呈负相关(r=-0.428,P<0.001)。结论:外周血PON1活性与颈动脉内-中膜厚度具有相关性,可以作为反映脑梗死患者颈动脉粥样硬化程度的一个潜在指标。 展开更多
关键词 对氧磷酶1 颈动脉内中膜厚度 脑梗死 颈动脉硬化
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黄药叶总黄酮提取工艺优化及其 抗氧化活性研究 被引量:19
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作者 桂利利 吴正坤 +1 位作者 余惠凡 李飞 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2021年第19期100-108,共9页
采用超声波辅助提取法提取黄药叶总黄酮,通过单因素试验和正交试验优化黄药叶总黄酮提取工艺,并探讨其体外抗氧化活性。结果表明,黄药叶总黄酮最佳提取工艺参数为乙醇体积分数70%,提取次数3次,提取时间40 min,料液比1∶30(g/mL),此条件... 采用超声波辅助提取法提取黄药叶总黄酮,通过单因素试验和正交试验优化黄药叶总黄酮提取工艺,并探讨其体外抗氧化活性。结果表明,黄药叶总黄酮最佳提取工艺参数为乙醇体积分数70%,提取次数3次,提取时间40 min,料液比1∶30(g/mL),此条件下黄药叶总黄酮得率为(6.18±0.13)%。体外抗氧化试验结果表明,黄药叶总黄酮提取物对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基均具有一定的清除能力,相应的半数清除浓度(inhibitory concentration,IC_(50))为484.12、18.27、46.88μg/mL,分别为L-抗坏血酸的1.50、4.50、2.51倍,黄药叶总黄酮提取物铁离子还原能力略低于L-抗坏血酸。 展开更多
关键词 黄药叶 总黄酮 提取工艺 正交试验 抗氧化活性
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木犀草素对高尿酸血症小鼠降尿酸作用及其机制研究 被引量:11
13
作者 余惠凡 黄林生 +4 位作者 韩俊祥 桂利利 吴正坤 刘佳玲 李飞 《时珍国医国药》 CSCD 北大核心 2021年第5期1071-1074,共4页
目的探究木犀草素降尿酸作用及其机制。方法建立高尿酸血症(HUA)小鼠模型,分别灌胃给予10,30,90 mg/kg木犀草素,试剂盒检测血生化指标UA、Cr、BUN、ALT、AST,肝脏匀浆及血清中XO活力;HE染色观察肝脏、肾脏病理改变;蛋白免疫印迹法检测... 目的探究木犀草素降尿酸作用及其机制。方法建立高尿酸血症(HUA)小鼠模型,分别灌胃给予10,30,90 mg/kg木犀草素,试剂盒检测血生化指标UA、Cr、BUN、ALT、AST,肝脏匀浆及血清中XO活力;HE染色观察肝脏、肾脏病理改变;蛋白免疫印迹法检测小鼠肾脏尿酸转运蛋白URAT1,GLUT9,ABCG2,OAT1,OAT3的表达水平。免疫组织化学和组织免疫荧光技术检测ABCG2的表达和定位。结果木犀草素能降低HUA小鼠UA、Cr、BUN水平,对ALT、AST无明显影响,能抑制肝脏及血清中XO活力、减少尿酸生成,能上调尿酸分泌蛋白ABCG2,OAT3,OAT1的表达,促进尿酸排泄,可改善高尿酸引起的肾脏损伤,对肝脏无明显毒性。结论木犀草素可通过减少尿酸生成、促进尿酸排泄两个途径发挥降尿酸作用,且能改善高尿酸血症所致肾脏损伤,对肝脏无明显毒性。该研究可为木犀草素进一步开发为高尿酸血症肾病防治药物提供科学依据。 展开更多
关键词 木犀草素 高尿酸血症 黄嘌呤氧化酶 尿酸转运蛋白 肾保护
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获卵数及可移植囊胚数与PGT-M/PGT-SR助孕周期累积活产率的相关性研究 被引量:6
14
作者 陈鑫 徐鸿毅 +2 位作者 张鑫 邓锴 张昌军 《生殖医学杂志》 CAS 2022年第4期468-475,共8页
目的分析在单基因疾病和染色体结构重排的植入前遗传学检测助孕周期中,累积活产率与获卵数、活检囊胚数和可移植囊胚数的相关性。方法回顾性分析2016年1月至2020年12月因单基因疾病或染色体结构重排在湖北医药学院附属人民医院生殖医学... 目的分析在单基因疾病和染色体结构重排的植入前遗传学检测助孕周期中,累积活产率与获卵数、活检囊胚数和可移植囊胚数的相关性。方法回顾性分析2016年1月至2020年12月因单基因疾病或染色体结构重排在湖北医药学院附属人民医院生殖医学中心接受胚胎植入前遗传学检测(PGT)助孕患者的一般情况、实验室指标及临床结局,通过曲线拟合及阈值效应分析获卵数、可活检囊胚数和可移植囊胚数对累积活产率的影响。结果本研究共纳入307(268对夫妇)个周期,其中54个周期(17.59%)为单基因病检测(PGT-M)周期,253个周期(82.41%)为染色体重排检测(PGT-SR)周期。39对夫妇由于初个取卵周期无可用胚胎或者未获得活产而接受了第2或第3个取卵周期。女方平均年龄为(30.14±4.16)岁。校正女方年龄、体质量指数(BMI)、抗苗勒管激素(AMH)及基础窦卵泡数(AFC)后对患者获卵数、可活检囊胚数分别与至少有1个可移植囊胚概率进行曲线拟合分析,结果显示:获卵数与至少有1个可移植囊胚的概率显著相关[RR=1.108,95%CI(0.976,1.227),P=0.000],随着获卵数的增多,可移植囊胚率逐渐增加;同样,每周期可活检囊胚数与至少有1个可移植囊胚的概率显著相关[RR=1.155,95%CI(0.994,1.242),P=0.000],随着可活检囊胚数的增加,有可移植囊胚率逐渐增加。获卵数[OR=1.041,95%CI(0.883,1.211),P=0.014]和可移植囊胚数[OR=1.276,95%CI(1.111,1.409),P=0.042]对累积活产率有显著影响,在获卵数<10个时,随着获卵数的增加,累积活产率逐渐增加,最高可达83.33%;当获卵数≥10个时,累积活产率趋于平稳。结论PGT-M/PGT-SR助孕周期中,累积活产率随着获卵数、可活检囊胚数和可移植囊胚数的增加而逐渐上升;当每周期获卵数≥10个时,患者的累积活产率趋于平稳,不再增加。 展开更多
关键词 获卵数 可移植囊胚数 植入前遗传学检测 累积活产率
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神农架中草药博落回提取物血根碱的抗肿瘤作用研究进展 被引量:7
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作者 张云飞 张特 +3 位作者 马文静 刘鹏飞 伍叶子 刘莹 《湖北医药学院学报》 CAS 2018年第5期476-483,共8页
博落回[Macleaye cordata(Willd.)R.Br.]为罂粟科(Papaveraceae)博落回属(Macleaya)植物,俗称勃逻回、落回、蒿筒杆等,是神农架地区分布较广泛的中草药植物[1]。目前,国内外博落回化学成分及其药理活性的研究表明,博落回属植物含有多种... 博落回[Macleaye cordata(Willd.)R.Br.]为罂粟科(Papaveraceae)博落回属(Macleaya)植物,俗称勃逻回、落回、蒿筒杆等,是神农架地区分布较广泛的中草药植物[1]。目前,国内外博落回化学成分及其药理活性的研究表明,博落回属植物含有多种化学成分,以苯并菲啶异喹啉类和托品类生物碱为主,其中包括血根碱(Sanguinarine,Sang)。 展开更多
关键词 博落回 神农架 血根碱 抗肿瘤
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TRPV4原核表达纯化系统的构建及生物信息学分析
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作者 李征远 徐恋恋 +2 位作者 孙建云 郑晓晖 高小康 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第3期137-144,共8页
目的:构建非选择性阳离子通道蛋白TRPV4的原核表达纯化系统,并对其进行生物信息学分析,为与该目标蛋白相关疾病的研究和药物活性成分筛选提供技术支持。方法:将人源TRPV4基因分别克隆至pET-28a(+)、pET-32a、pET-15b、pGEX-5X-1、pEX-4T... 目的:构建非选择性阳离子通道蛋白TRPV4的原核表达纯化系统,并对其进行生物信息学分析,为与该目标蛋白相关疾病的研究和药物活性成分筛选提供技术支持。方法:将人源TRPV4基因分别克隆至pET-28a(+)、pET-32a、pET-15b、pGEX-5X-1、pEX-4T和pGEX-6p-1等6种表达载体,并利用BL21和Rossetta两种大肠杆菌表达宿主构建TRPV4原核表达系统。采用谷胱甘肽亲和层析和镍柱亲和层析法分离纯化目标蛋白。通过生物信息学技术对目标蛋白进行分析,获得其相应的理化性质和结构参数。结果:利用pGEX-6p-1载体和Rossetta构建了GST-TRPV4和GST-TRPV4-6his融合蛋白原核表达系统。诱导表达目标蛋白的IPTG浓度为0.6 mmol/L时,GSTTRPV4融合蛋白有明显表达,IPTG浓度为0.4 mmol/L时,GST-TRPV4-6his融合蛋白有明显表达,表达温度均为18℃。纯化GST-TRPV4-6his融合蛋白时,咪唑溶液在100 mmol/L或200 mmol/L时可以得到完整的GSTTRPV4-6his融合蛋白。结论:本文首次在原核表达系统中成功构建和表达纯化了人源TRPV4离子通道蛋白,并利用生物信息学分析解析了该蛋白的理化性质,为后续高纯度大量表达和进一步研究奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 TRPV4 离子通道蛋白 原核表达 pGEX-6p-1载体 大肠杆菌 生物信息学
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肺炎克雷伯菌CRP蛋白表达与纯化及生物学特征分析 被引量:1
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作者 徐丽 邱雪梅 +3 位作者 骆海龙 杨靖 李蓓 汪静杰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2021年第4期98-102,127,共6页
目的:原核表达获得肺炎克雷伯菌KP1_RS23625基因(crp)编码的CRP蛋白,并解析CRP蛋白具体的生物学功能。方法:首先克隆肺炎克雷伯菌crp基因,并亚克隆至pET-28a(+)质粒构建重组蛋白表达载体;然后体外原核诱导表达、纯化目的蛋白并进行SDS-P... 目的:原核表达获得肺炎克雷伯菌KP1_RS23625基因(crp)编码的CRP蛋白,并解析CRP蛋白具体的生物学功能。方法:首先克隆肺炎克雷伯菌crp基因,并亚克隆至pET-28a(+)质粒构建重组蛋白表达载体;然后体外原核诱导表达、纯化目的蛋白并进行SDS-PAGE电泳分析。进一步通过生物学信息方法分析CRP蛋白的生物学功能:利用ProtParam、Protscale、SignalP4.1 Service、TMHMM Server v.2.0、SOPMA、SWISS-MODEL软件分别分析目的蛋白理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区域、二级与三级结构等一般生物学特征;并借助CDD数据库、Net Phos 3.1 Sever在线软件预测蛋白的功能结构域、磷酸化位点等功能特征;进一步利用ATRING 11.0交互式数据库进行蛋白质交联互作分析。结果:成功构建了重组目的蛋白表达载体pET-28a-crp,并通过原核诱导表达与镍柱亲和吸附法表达、纯化获得CRP目的蛋白;蛋白电泳结果显示CRP蛋白为水溶性蛋白,包括标签蛋白(约4 kDa)的重组目的蛋白分子质量约27 kDa。对CRP蛋白的生物信息学分析结果显示:CRP蛋白大小23.65 kDa、为亲水性蛋白;无跨膜结构域、无信号肽;蛋白二级结构主要由α螺旋与不规则卷曲构成,其中α-螺旋占比40%以上,结构较松散;同时成功构建了三级结构模型;CRP蛋白结构域分析表明含有1个功能结构域,属PRK11753超级家族;修饰位点及蛋白注释分析显示目的蛋白含20个磷酸化位点,与多个蛋白具有交互作用。结论:本研究利用基因工程方法成功获得了较高纯度肺炎克雷伯菌CRP蛋白,并通过生物信息学手段解析了其生物学特征,为肺炎克雷伯菌感染的临床治疗提供理论基础。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 CRP蛋白 转录因子 原核表达 生物信息学
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毛兰素通过活化JNK通路诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究 被引量:4
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作者 赵群 范伶林 +5 位作者 刘迎香 毕云 郭健 潘龙瑞 谭艳 余贤军 《湖北医药学院学报》 CAS 2020年第5期419-426,431,共9页
目的:探讨毛兰素(Erianin,Eri)通过活化JNK通路诱导乳腺癌细胞凋亡的作用及分子机制。方法:通过MTT及克隆形成方法检测Eri对乳腺癌细胞增殖能力的影响作用;通过Hoechst染色及流式细胞术检测Eri对细胞凋亡的影响;通过Western blot检测Er... 目的:探讨毛兰素(Erianin,Eri)通过活化JNK通路诱导乳腺癌细胞凋亡的作用及分子机制。方法:通过MTT及克隆形成方法检测Eri对乳腺癌细胞增殖能力的影响作用;通过Hoechst染色及流式细胞术检测Eri对细胞凋亡的影响;通过Western blot检测Eri诱导细胞凋亡的作用以及JNK通路参与其中的机制。结果:Eri可以抑制乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,且Eri通过活化JNK/c-Jun信号通路发挥作用,促进凋亡发生。结论:Eri通过活化JNK/c-Jun信号通路,促进乳腺癌细胞凋亡,从而抑制细胞增殖。Eri可能成为治疗乳腺癌的新型候选药物。 展开更多
关键词 毛兰素 乳腺癌 凋亡 JNK/c-Jun信号通路
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小细胞肺癌分子靶向治疗的研究进展 被引量:3
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作者 王贤慧 刘丹丹 《癌症进展》 2021年第16期1621-1624,共4页
小细胞肺癌(SCLC)是一种侵袭性恶性肿瘤,转移范围广,易对化疗药物产生耐药,导致预后不良。近年来,临床一线治疗方案仍未取得突破性进展,仍主要采用以化疗为主、放疗为辅的综合治疗,但患者易发生耐药和复发。随着科技进步、分子生物技术... 小细胞肺癌(SCLC)是一种侵袭性恶性肿瘤,转移范围广,易对化疗药物产生耐药,导致预后不良。近年来,临床一线治疗方案仍未取得突破性进展,仍主要采用以化疗为主、放疗为辅的综合治疗,但患者易发生耐药和复发。随着科技进步、分子生物技术和生物信息学的发展,SCLC病理机制的深入研究,推动了多种基于SCLC遗传变异的靶向治疗药物的研发。本文总结了SCLC的分子生物学机制和相应靶向药物的研究进展,以及在此基础上进行的相关临床研究,有助于为SCLC的治疗探索新的治疗途径,以改善患者的预后。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 分子生物学 靶向治疗
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不同手术方式来源精子对ICSI助孕结局影响的研究 被引量:2
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作者 陈鑫 徐鸿毅 +2 位作者 刁红录 张颖 张昌军 《湖北医药学院学报》 CAS 2021年第2期129-133,138,共6页
目的:探讨无精子症患者不同手术方式来源精子对卵胞浆内单精子注射技术(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)助孕结局的影响。方法:回顾分析因男方无精子症在本院生殖中心接受PESA、TESA和micro-TESE手术方式获取精子行ICSI助孕治... 目的:探讨无精子症患者不同手术方式来源精子对卵胞浆内单精子注射技术(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)助孕结局的影响。方法:回顾分析因男方无精子症在本院生殖中心接受PESA、TESA和micro-TESE手术方式获取精子行ICSI助孕治疗的248个鲜胚移植周期患者的基本情况。按精子来源分为:PESA精子组116个周期,TESA精子组69个周期,micro-TESE精子组43个周期,比较各组行ICSI助孕后的胚胎发育和妊娠结局情况。结果:PESA组、TESA组、micro-TESE组的女方年龄、不孕年限、女方体质指数、平均获卵数和优质胚胎率差异均无统计学意义(P>0.05)。PESA组正常受精率、2PN卵裂率、可用胚胎率高于TESA组和micro-TESE组(P<0.05),TESA组、micro-TESE组间胚胎发育情况各项指标差异均无统计学意义(P>0.05)。3组间新鲜移植周期胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率及异位妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:PESA、TESA和micro-TESE手术方式获取精子行ICSI助孕影响正常受精率和卵裂率,但对后期胚胎发育无显著影响,都能获得较好的妊娠结局。 展开更多
关键词 无精子症 经皮附睾穿刺取精 睾丸穿刺取精 显微切开睾丸取精 妊娠结局
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